C反應(yīng)蛋白及臨床應(yīng)用章節(jié)課堂

1、c-反應(yīng)蛋白及臨床應(yīng)用反應(yīng)蛋白及臨床應(yīng)用楊紅玲1教書育人protein structure crp結(jié)構(gòu)結(jié)構(gòu)2教書育人c反應(yīng)蛋白的生理和生化反應(yīng)蛋白的生理和生化 在細胞因子il-6家族誘導(dǎo)下，crp在肝中合 成迅速。 正常合成率為 l10 mgd，急性炎癥時每 天合成超過 lg/d。 在急性相反應(yīng)高峰時肝大量合成蛋白，其中 20是合成crp。 當(dāng)il-6刺激物缺乏時，在 24 h內(nèi)合成率降 至正常。 循環(huán)中crp半衰期約19h，但一旦它與配體結(jié) 合，可快速的被清除。 肝外合成對血清水平影響作用很小。3教書育人crp的生物學(xué)功能的生物學(xué)功能4教書育人crp的生物學(xué)功能的生物學(xué)功能-機理機理結(jié)合壞死

2、的內(nèi)源性物質(zhì) 在鈣離子存在的情況下，crp能結(jié)合壞死的內(nèi)源性物質(zhì)和效應(yīng)細胞, 當(dāng)正常的脂質(zhì)雙層結(jié)構(gòu)被破壞致使內(nèi)部磷脂暴露時，crp可發(fā)生與宿主細胞的結(jié)合。在系統(tǒng)性紅斑狼瘡的鼠模型中，注射crp可改善sle的狀況。 人crp基因的多態(tài)性導(dǎo)致的低基礎(chǔ)水平表達增加了發(fā)生系統(tǒng)性狼瘡的風(fēng)險。crp量的減少可能與sle發(fā)病機理有關(guān)。 crp量的減少使結(jié)合的細胞碎片減少。5教書育人crp的生物學(xué)功能的生物學(xué)功能-機理機理 結(jié)合外源性物質(zhì) 細菌、真菌、寄生蟲中的細胞壁磷酸膽堿。crp具有保護機體抗細菌感染的能力。 crp 保護機體抵抗致命性的細菌脂多糖和各種炎癥介子的能力。 6教書育人crp的生物學(xué)功能的生物

3、學(xué)功能-機理機理結(jié)合配體的crp激活下列生物系統(tǒng)，導(dǎo)致配體的消除：crp對補體系統(tǒng)的激活.crp結(jié)合iggfcr，增強自然殺傷細胞的活性。crp的調(diào)理性質(zhì)，調(diào)理即刺激細胞吞噬作用。crp和血小板激活因子(paf)結(jié)合抑制paf刺激的血小板聚集。7教書育人crp的生物學(xué)功能的生物學(xué)功能-機理機理crp具有多效性的作用。 當(dāng)抑制干擾素的合成時 ，crp可誘導(dǎo)il-1受體拮抗劑而增加抗炎細胞因子il-10的釋放 . crp也可誘導(dǎo)炎癥反應(yīng)。 crp向上-調(diào)節(jié)內(nèi)皮細胞粘附分子的表達，刺激許多細胞釋放il-8， 增加血漿纖維蛋白酶原催化劑抑制劑-1的表達和活性、增加il-1, il-6, il-18,

4、和腫瘤壞死因子的釋放. crp誘導(dǎo)或抑制炎癥反應(yīng)依賴于環(huán)境。 8教書育人crp功能 識別和啟動靶效應(yīng)細胞及其產(chǎn)物并將其從組織中清除。 吞噬溶解入侵微生物。9教書育人急性相蛋白急性相蛋白crp合成的生物調(diào)控合成的生物調(diào)控crp基因位于1號染色體短臂，只有一個內(nèi)含子，其分離編碼信號肽的區(qū)域。肝臟crp合成的調(diào)節(jié)主要發(fā)生在轉(zhuǎn)錄階段。由il-6誘導(dǎo)，il-1可增加此作用。 crp啟動子最近區(qū)為stat3 和 rel 蛋白的結(jié)合部位。這些因子的相互作用增加dna 結(jié)合c/ebp家屬成員的穩(wěn)定性，從而有效地誘導(dǎo)了crp基因的表達。神經(jīng)元細胞、動脈硬化斑塊、單核細胞和淋巴細胞也可以合成crp。在這些部位的調(diào)

5、節(jié)機制還不清楚。10教書育人修飾的crp(m-crp) -modified crp -modified crp目前認(rèn)為m-crp是原crp的單體。與天然crp不同,表現(xiàn)在分子大小,溶解度,抗原性,帶電荷數(shù)等方面的差別. m-crp具抗菌作用。m-crp具有強大地誘發(fā)炎癥的作用。11教書育人方法靈敏度參考獻試管內(nèi)沉淀試驗- jexpmed1930;52561毛細管內(nèi)沉淀試驗1020mg/lamjmed1950;8445改良平板雙擴散法1020mg/lintarchallergy1962改良瓊脂柱擴散法3.0mg/lprocsocexpbiol1955改良單擴散法1.0mg/l actapatho

6、lmicrobiolscand瓊脂糖凝膠電泳法1.0mg/lclinchimacta1969放射電免疫擴散法10g/ljclinlabinvest1973補體結(jié)合試驗0.6mg/lprocsocexpbiol1954膠乳凝集試驗1.0mg/lnature(london)1961高敏乳膠增強濁度 0.35mg/ml dade germany2000熒光抗體法 nature(london)1961放射免疫測定法 3g/l jlabclinmed1976檢測方法檢測方法 12教書育人crpcrp檢測方法檢測方法 - -免疫沉淀試驗檢測crp原始方法.將兔抗crp血清吸入毛細管內(nèi)。把它浸入被測血漿或血

7、清內(nèi),因毛細管虹吸作用被吸入,與抗crp血清形成接觸界面。這種方法較粗糙,取得結(jié)果時間較長,也不太正確可靠.13教書育人crpcrp檢測方法檢測方法 - -免疫濁度法 可溶性crp-ag與可溶性抗crp-ab反應(yīng),形成可見的網(wǎng)絡(luò)狀沉淀性ic復(fù)合物點.ic復(fù)合物對光具有散射作用,使溶液具有肉眼尚不可見的濁度。在被測樣品中加抗血清后一定時間,測定反應(yīng)系統(tǒng)散射光強度或濁度變化,可對被檢物及其濁度加以檢測。根據(jù)儀器的光學(xué)系統(tǒng),濁度法分為散射濁度法和透射濁度法兩類。許多自動化生化分析儀和自動化免疫測定儀都可crp測定項目。14教書育人crpcrp檢測方法檢測方法 - -膠乳凝集試驗(lat)將強化的兔抗

8、crp抗體固定于膠乳微粒上。加入被測樣品后與crp在3分鐘內(nèi)形成肉眼可見的凝集物。膠乳強化濁度法的靈敏度優(yōu)于傳統(tǒng)濁度法,試劑穩(wěn)定性佳。15教書育人檢測方法檢測方法 - - 標(biāo)記免疫測定elisa和免疫發(fā)光法和化學(xué)發(fā)光法等都可用于crp的測定。化學(xué)發(fā)光法的靈敏度和定量精確度可與ria媲美,而無同位素污染,試劑穩(wěn)定,分析速度快。crp-poct(床邊試驗)法 elisa干片法。把磷脂酰膽堿(pc)化學(xué)交聯(lián)固定于載體。被測crp與載體的pc結(jié)合。被酶標(biāo)記的抗crp單抗結(jié)合?？伸`敏、特異性檢測crp,約5分鐘可得結(jié)果.。16教書育人檢測方法檢測方法 - - 膠乳增強試驗（shcrp）：常規(guī)crp檢驗方

9、法可在感染或組織損傷時檢測出crp10mg/l。該檢測方法具有較高的靈敏度。這個水平（0.110mg/l）的c反應(yīng)蛋白又被稱為超敏c反應(yīng)蛋白（hscrp）。 17教書育人 crp檢測的評估1、半定量：膠乳凝集試驗等已棄用。2、定量：散射免疫比濁法、透射免疫比濁法：是目前常用方法。檢測限度為5150 mgl ，cv5% 。膠乳增強試驗-shcrp檢測：很大程度提高了敏感度。酶免疫分析和熒光免疫分析：有潛在的靈敏度優(yōu)勢。膠乳增強試驗-shcrp檢測方法很大程度提高了敏感度。crp檢測對標(biāo)本的采集也無特殊要求。高濃度的類風(fēng)濕因子可產(chǎn)生crp假性升高。crp篩查的費用遠小于其他心血管檢查的費用。18教

10、書育人臨床應(yīng)用臨床應(yīng)用_參考范圍crp參考范圍中值成人和兒童0.0688.2 mg/l0.58 mg/l新生兒，臍血0.6 mg/l出生后第4天至1個月的嬰兒1.6 mg/l分娩母親47 mg/l19教書育人臨床意義 器質(zhì)性疾病的篩選 急性或慢性炎癥如伴有細菌感染。 自身免疫或免疫復(fù)合物病。 組織壞死和惡性腫瘤。20教書育人臨床意義感染的診斷與鑒別crp在細菌感染發(fā)生后68h即開始升高，2448h達到高峰，在感染消除后其含量急驟下降，一周內(nèi)可恢復(fù)正常。crp在病毒感染時無顯著升高。革蘭陰性感染：可發(fā)生最高水平的crp，有時高達 500 mgl。革蘭陽性菌感染和寄生蟲感染：通常引起中等程度的反應(yīng)

11、，典型的是在100 mgl 左右。病毒感染：引起的反應(yīng)最輕，通常不超過50 mgl，極少超過 100 mgl。在細菌感染的急性期，crp顯著升高，寡聚腺苷合成酶正常；在病毒感染時crp水平正?；蜉p微升高，寡聚腺苷合酶水平升高。21教書育人臨床意義c反應(yīng)蛋白是心血管疾病最強的危險指標(biāo)，c反應(yīng)蛋白水平可預(yù)測將來心肌梗塞及中風(fēng)的危險性。c反應(yīng)蛋白含量2.1mg/l的人與 100 mgl表示嚴(yán)重的疾病過程并常表示細菌感染的存在。25教書育人臨床意義-抗生素的治療監(jiān)測抗生素的治療監(jiān)測 系列血漿crp的測定，可用來作為下列情況的治療監(jiān)測： 在許多感染時最有效使用抗生素治療。 根據(jù)crp水平的變化來決定抗炎

12、藥物的劑量。 在crp下降至正常時，中 斷抗菌素治療。 在高危人群缺少微生物學(xué)診斷時，為抗生素治療的指引。26教書育人臨床意義-抗生素的治療監(jiān)測抗生素的治療監(jiān)測 27教書育人臨床意義-外科 患者施行手術(shù)后2472h,血中crp水平明顯升 高,約在第57天恢復(fù)正常。 凡驟升后持續(xù)高水平多預(yù)示合并感染。 對中、大手術(shù)患者,在術(shù)前和術(shù)后37天各作 常規(guī)檢測一次。 凡術(shù)后57天crp仍持續(xù)高水平者,理應(yīng)懷疑 合并感染,并配合治療作隨訪監(jiān)測。28教書育人臨床意義-內(nèi)科 肺炎: crp100mg/l，強烈提示細菌感染，如化膿性支氣管炎或肺炎;典型的病毒性肺炎不會超過50mg/l。 心血管病，在痛疼開始后數(shù)

13、小時內(nèi)，crp升高， 3-4d達高峰，在ck-mb回到正常后7-10d也降至正常。 代謝綜合征 代謝綜合征分組，根據(jù)crp水平可將為 低危險組，3 mg/29教書育人臨床意義-婦產(chǎn)科 盆腔炎和子宮附件炎. crp值升高 盆腔腫塊和子宮肌瘤通常多為陰性。 診斷胎膜早破宮內(nèi)感染. 胎膜早破時，如母親crp在產(chǎn)前6-19h超過50mg/l可作為出現(xiàn)ais的標(biāo)準(zhǔn)；產(chǎn)后第一天出現(xiàn)的ais的crp將比正常分娩時高出2-3倍。 無并發(fā)癥的ct和ng感染不會引起crp升高。 但擴散到盆腔可引起急時相反應(yīng)。30教書育人臨床意義-兒科新生兒濃毒血癥:出生3天前crp10mg/l表示感染.如果crp在24h內(nèi)沒有超過10mg/l，多無新生兒感染.小兒發(fā)熱 : 患病超過12h，crp顯著40mg/l，esr顯著30mm/h應(yīng)關(guān)注為細菌性感染。腦膜炎 : crp20mg/l提示為細菌感染的可能；100mg/l時具有細菌感染診斷價值。結(jié)腦crp在20-60 mg/l。成功的治療可使crp在一周內(nèi)降至正常。 31教書育人小小 結(jié)結(jié)crp是一五球體結(jié)構(gòu)的高度保守的急時相蛋白。crp為一模式識別分子，與特殊的分子結(jié)構(gòu)結(jié)合而發(fā)揮作用。為宿主先天性免疫應(yīng)答的一部分，