內(nèi)鏡黏膜染色劑的使用方法

1、內(nèi)鏡黏膜染色劑的使用方法受阿俊仁院長的委托， 今天在基層內(nèi)鏡學(xué)習(xí)群里跟大家交流一 下內(nèi)鏡黏膜染色劑的使用方法， 請大家共同探討指正。 對黏膜染色 劑的基本要求： 1、本身具有顏色 2 、與被染組織間具有親和力 3 、 被染色的染色體或者包漿有被染色的特性目前的黏膜染色劑主要 有以下幾種： 1、靛胭脂靚胭脂是對比性的表面黏膜染色劑，而非 細(xì)胞內(nèi)染色劑，在胃和腸均可使用。 原理：利用重力沉積于上皮 表面的低凹處，勾勒出胃小溝、腸黏膜的無名溝以及 pit 形態(tài)，推 斷病變的范圍及大體性質(zhì)，最佳濃度為 ，須使用噴灑管，通常在 2-3 分鐘后觀察效果最佳。值得注意的是：噴灑時并不是濃度越高 越好， 而是

2、從低濃度開始噴灑 （絕大多數(shù)病變低濃度會顯示的更清 楚） 如果需要可進(jìn)行再次噴灑。 但反過來一開始高濃度噴灑，如 果再想低濃度就比較難處理。 AIM 三明治法 1：靛胭脂 10ml+ 10ml+清水30ml，用于判斷病變黏膜的側(cè)向進(jìn)展范圍。2、美蘭又稱亞甲藍(lán)，濃度為 %到%，作為一種吸收性的染料，它是吸收到細(xì)胞 內(nèi)部對細(xì)胞核進(jìn)行。 被染的對象一般是腸道的上皮細(xì)胞、 食管和胃 中腸化的上皮細(xì)胞，它只染色腸化的細(xì)胞。染色的原理：亞甲蘭吸 收進(jìn)入上皮細(xì)胞內(nèi)使細(xì)胞核著色， 染色陽性的意義： 正常的腸道上 皮、食管和胃的腸化上皮以及部分早期胃癌上皮， 其中值得注意的 是：十二指腸內(nèi)異位的胃化生細(xì)胞并不染

3、色。 同時因美蘭可以和細(xì) 胞內(nèi)的DNA吉合，在白光下可誘導(dǎo)氧化損傷甚至突變。 3、盧戈氏 碘 濃度須使用噴灑管均勻地進(jìn)行全食道染色， 建議從肛側(cè)到口側(cè)，邊噴灑邊吸引，床頭抬高避免嗆咳窒息。如果濃度大顏色過黑，濃 度小染不上色。 二個人配合噴灑會更均勻更細(xì)膩， 尤其是食管入口 部分的染色。 推薦對于可疑的早期食管鱗癌及癌前病變采用碘染 色借助“粉色征或銀色征”行進(jìn)一步診斷和靶向活檢。 20 世紀(jì) 70 年代即有應(yīng)用碘染色來診斷食管疾病的報道。 碘染色的原理是正常 成熟非角化食管鱗狀上皮細(xì)胞含有大量糖原， 遇碘后呈棕褐色， 當(dāng) 食管炎癥或癌變時細(xì)胞內(nèi)糖原含量減少甚至消失， 因此碘染后相應(yīng) 部位呈淡

4、染或不染區(qū)。碘染色模式分為4級：1級為濃染區(qū)，比正常食管黏膜染色深，多見于糖原棘皮癥；H級為正常表現(xiàn)，呈棕褐 色；川級為淡染區(qū)，多見于 LGIN或急慢性炎癥；W級為不染區(qū)， 多見于浸潤癌、原位癌和 HGIN內(nèi)鏡下對食管進(jìn)行碘染色可以清 晰顯示病變存在的部位和范圍， 使活檢取材部位更加明確， 從而提 高早期食管鱗癌及癌前病變的檢出率。 然而在食管黏膜炎癥、 LGIN、 HGIN以及癌變部位都可以出現(xiàn)碘溶液不染區(qū)，此時可借助于“粉 色征”進(jìn)行區(qū)分，即在噴灑碘溶液后病變部位呈不染或者淡黃色， 23 min后，HGIN和癌變部位可變?yōu)榉奂t色?！胺凵鳌痹?NBI下觀察可以被強(qiáng)化，呈閃亮的銀色，稱為“銀

5、色征” 。利用粉色征或 銀色征來判斷HGIN和癌變的敏感度和特異度可達(dá)88%和95%。常用碘溶液的濃度為， 噴灑碘溶液前宜應(yīng)用鏈霉蛋白酶沖洗 食管，去掉表面的黏液， 自賁門向口側(cè)噴灑至食管上段， 抬高床頭， 染色完畢后應(yīng)用%硫代硫酸鈉溶液噴灑脫碘或西甲硅油溶液沖洗 食管， 以將黏液和多余的碘洗去便于觀察， 觀察完畢后注意將胃腔內(nèi)碘液吸出以減輕患者的痛苦。 應(yīng)用食管碘染色時， 需要注意詢問患者有無應(yīng)用碘溶液后出現(xiàn)心慌不適、 血壓下降等過敏史， 有碘過 敏史者應(yīng)避免碘染色；甲狀腺功能亢進(jìn)患者及孕婦避免應(yīng)用碘染 色；部分患者在進(jìn)行食管碘染色后會出現(xiàn)明顯的胸骨后燒灼感以及 食管痙攣， 可予以硫代硫酸鈉

6、中和碘溶液緩解患者的不適感； 另外 還需注意的是， 食管黏膜損傷會影響碘染色效果， 故再次碘染色應(yīng) 在 7 天后進(jìn)行。 值得注意的是 :1 、盧戈氏碘作為判斷邊界使用而非 判斷病變性質(zhì)所用。2、診斷時盡量不要用碘，ESD當(dāng)時做，否則會導(dǎo)致病變范圍變小。 3 、如果外院做了碘染，收治時需要根據(jù)情 況判斷（高級內(nèi)瘤變的建議 2-3個月后再行ESD觀察Ipcl參照 原圖擴(kuò)大范圍行ESD碘染后二個副作用：1、食道粘膜痙攣-死死 的抱住內(nèi)鏡 影響 esd 操作。處理技巧為： 脫碘劑的使用及潤滑 油的使用。 2、上皮破壞。等正常細(xì)胞生長過來，否則影響病變范 圍的確定，一般 2-3 個月恢復(fù)。 4、結(jié)晶紫結(jié)

7、晶紫的濃度一般是， 原液可用 1的甲紫溶液（龍膽紫） ，被染兩個主要對象：術(shù)后胃 黏膜ESD標(biāo)本觀察腺體和術(shù)前腸道 ESD的觀察腺體的分型。被染的 對象一般是用于懷疑惡性侵襲性病變的染色， 原因是結(jié)晶紫百分之 百致癌。染色的機(jī)制，它是一種吸收型的染料，使上皮細(xì)胞的細(xì)胞 質(zhì)，而不是細(xì)胞核發(fā)生著色， 而腫瘤的表面上皮以及腺體破壞導(dǎo)致 固有層和黏膜下層的間質(zhì)（纖維蛋白 ?黏液）開始顯露，所以腫瘤 部分并不顯示。染色方法：在病變表面數(shù)滴進(jìn)行滴染，切勿噴灑， 然后用溫水或鏈霉蛋白酶沖洗。 結(jié)晶紫是致癌物， 雖然觀察腺體很好 但染色后 NBI 下無法觀察血管 ，因此胃黏膜手術(shù)前不能使用。 5、冰醋酸（食用

8、白醋）白醋最佳的濃度 %，就正常的食醋對再兌點 水。濃度多，腺體黏液分泌多影響 ESD的治療。食醋的被染對象一 般作為普通的內(nèi)鏡下微血管結(jié)構(gòu)不清或者無構(gòu)造的黏膜表面進(jìn)行 染色染色的原理， ph 值下降以后促使黏膜細(xì)胞內(nèi)的細(xì)胞角蛋白結(jié) 合，使表面變白，胃的柱狀上皮會顯示的更加清楚，持續(xù)時間約 2-5 分鐘不等，之后又開始恢復(fù)原樣，不過可以再次噴灑。染色的 方法：充分清洗黏膜充分清晰地暴露病變后噴灑觀察， 用 NBI 觀察 會顯得更加清楚。6、酚紅酚紅作為染色的對象是感染HP的胃上皮細(xì)胞，染色機(jī)理是 HP感染部位會產(chǎn)生氨，因而使酚紅變黃，提示 HP感染以及明確HP感染范圍和部位。7、剛果紅國內(nèi)使用

9、少，被 染對象是胃內(nèi)分泌胃酸的細(xì)胞，PH值V發(fā)生變色，呈深藍(lán)色或黑色，而胃癌上皮細(xì)胞不能分泌胃酸所以不變色， 利用這一原理提示 可能癌變的部位。 （異位的胃黏膜上皮不染色）補(bǔ)充資料：醋酸染 色法分為四種：醋酸輪廓法、醋酸動態(tài)化學(xué)法、 AI 三明治法和醋 酸 NBI 觀察法。 醋酸輪廓法： 噴灑醋酸后用放大內(nèi)鏡觀察黏膜構(gòu)造 的放大。噴灑 %的醋酸數(shù)秒后黏膜產(chǎn)生白色化，進(jìn)行放大觀察，會 看見立體的圖像， 像掃描電子顯微鏡的圖像一樣， 這對于觀察胃癌 的表面構(gòu)造非常有效。 需要先對血管圖像和白色帶進(jìn)行 NBI 放大觀 察，對微血管和表面結(jié)構(gòu)有初步印象后再噴灑%的醋酸，從側(cè)角進(jìn)行觀察，但 DL 會變得

10、不清楚。醋酸動態(tài)化學(xué)方法：噴灑醋酸后， 依據(jù)癌部位白色化會較早消失原理的方法。在噴灑%的醋酸后，癌部位和非癌部位都發(fā)生白色化， 但癌的部位較非癌的部位消失的更 早。一般經(jīng)過 10 秒左右癌部位的白色化消失，非癌部位白色化持 續(xù)約 1 分鐘左右消失， 癌部位呈現(xiàn)出有透明感的發(fā)紅改變， 根據(jù)這 個紅色和白色的對比來進(jìn)行范圍診斷和精準(zhǔn)活檢。高分化腺癌約 10 秒白色化消失，但中分化腺癌常常兩三秒就消失，異型度較低 的高分化腺癌或腫瘤白色化會持續(xù)數(shù)十秒， 范圍有時反而不清， 會 出現(xiàn)和非癌黏膜對比不明顯的情況。 注意： 未分化癌和一部分中分 化腺癌由于表面覆蓋非癌上皮，白色化會一直持續(xù)無變化。 AI

11、三 明治法 : 病變部位先噴灑 %醋酸，癌部位白色化開始消失后， 再追加 噴灑稀釋 2 倍的靛胭脂，幾秒到幾十秒后癌部位的靛胭脂會消失， 而非癌部位持續(xù)附著靛胭脂， 必要時用清水輕柔沖洗癌部位的靛胭 脂，此法對醋酸動態(tài)化學(xué)法顯示不清的病變往往有效。 但對未分化 癌和部分中分化腺癌效果欠佳。醋酸噴灑后NBI 染色法：噴灑 %醋酸后用 NBI 觀察病變的方法。癌部位呈茶色，非癌部位呈綠色，醋 酸噴灑后在白光下消失的不明顯病變在切換到NBI 后，通過茶色和綠色的對比來判斷，En為B8模式，色彩模式為1。通常用于側(cè)向 進(jìn)展范圍的判定。此外還有一種 AIM染色法：醋酸15毫升+%靛胭 脂 10 毫升 +15