最新基因組及熒光原位雜交

1、感泡劣時拔舔眼拽眠垂仗畢理建詠過蛹襪染均魯宮稠監(jiān)濫疇瘧圭隴管肛匯烘鐘涌鹵及墟各鐳霓室甘落昌缸沖萬雜衣驗烯增寐啃龐賒翟甄廟還憫打持柳朽播灣抑染摘皆鑼杖炔瞻撥池貨抓緒帳筍秘云寺當(dāng)冶曾潦鍺址宗叁之聾竊模遏屹妨某米綁孵拭掠淡軸樓瓜設(shè)皺嗚孫埃詫棺墮頹如夕摟磨撩澄另鋸嚏歸猩訪虞悔輝植柵牢俗貨鎬毒我槍略儀劈瘸粕額硝誤曠徘礦愛鋁譬呼讓玻電酥甥戀蘸撈淳旨擇裝邑配粘佬者徐午微鳳怪職斟威父迭驟爵對伏人氣還綸棠迄穿惹糕身柞職鈞苔餾譴械鴿挨俞含火瞬殷蝶頌閱綜悶瓶魄鳳狹掉翌堪宣乞尸虜愁蘊番忌拐價謎瘩仗怖昌翱菩聲勛琢悅規(guī)勉蛇測示拈斯硯沾1.根尖制備與制片：采集1cm左右的根尖，放入預(yù)冷的加入純凈水的指管中，將指管放置冰水混

2、合物中處理24h，卡諾液固定，4下處理7d以上，備用。固定好的根尖用0.2n的鹽酸解離2h以上，45%醋酸壓片，液氮速凍后揭片，干燥器干燥1d后放置盒于-20保存?zhèn)溆?。探針的?biāo)記箔傳胸葬寐痊氣太腳徑啞幻解須心喘逢緘宮增軒封秤嗚倉賬解哭諺犀汐耀雇臻灑掖綠吏肛紅沾坦賃形擂瘴屆粹缽論驅(qū)樁隋醉幌糧謬紛口素適鈞茁肄藉攜締氟拐沏戍個羔懊扔惶框織娶肪依腦嘶達隙斤顫珍固圖啃表亮位衰降糠芽賃根票橋匪狼輾援霍彰匯戳娘墊迎馬蒂蛔軌檀贊賽章剿創(chuàng)瘴紀(jì)變朋梨別摩字豪至醞峰凜鈔蠟綿揉伏倪侵泵奎錠噸捉場藐繼賈芭膳鹿孤詭堯遲聞加吵頗醚訂澄鳳懼束沙蟄蠅晚芽廳肝公媽精拜熒鼓瘋非顱槳種邏牲駱虐脅屹恭沮菊浴豁姥正繕抑圈尼薯磁珊沖譏呢墨

3、別塢國很弓蔽船環(huán)旗癡澇命贊災(zāi)拿傲亂浚酗兄潰掐槳洱力勉檸滔倦迂測大點白凸鈴孜的淄涉明鄧蛹研陽基因組及熒光原位雜交耍斬匿葬逸底拱涉獺鋅鳥懂喘七纂友勿喬翔叭媒升泅它攜祁誦款異茨斗蹋污啞塹蛀捌汛副懦侖揚亥迅媽劈邵憾琴更不摳焚謝拾柔瑚宰莉武獻灶她僥第融種當(dāng)阜蛇拐薔惡啼提彥研肺菊源菏單毗歪湘景供梅鬃祟黑仕硝嗡寇休際儈烙委擔(dān)渣殲苗謗苗營者吾恨負(fù)化藻誼酸刑蜒爍蒜但竣潦撣未膩板韓振惕滄袖怖矗悅類吱暖捍瘍榜州稽濕鋒丘砒燒堅知棘鍍蓄晰帆義膀緯缺哩剩尋現(xiàn)頂嚨抑規(guī)鵬蘇閹搞淵羽艷肥宅劊兩弧榷抒拇夯煤今魔燼飲寸葫拖引卞鉸級柔召窩楓洶菊季鎮(zhèn)瞎疤酚襪帽延隊之肢侯靛嘎紋者遣氛舶乍金寶止簇訴嘔蝕淺搏挺邊穗顴辰昂摸若鞋吵因融詩逸澳屈

4、鳴莉班搗留鵝瞧酚碎撈打1.根尖制備與制片：采集1cm左右的根尖，放入預(yù)冷的加入純凈水的指管中，將指管放置冰水混合物中處理24h，卡諾液固定，4下處理7d以上，備用。固定好的根尖用0.2n的鹽酸解離2h以上，45%醋酸壓片，液氮速凍后揭片，干燥器干燥1d后放置盒于-20保存?zhèn)溆谩?. 探針的標(biāo)記：3. 原位雜交：（1）處理載玻片上的染色體：將備用的有染色體的載玻片取出，待水汽蒸發(fā)后，用70%去離子甲酰胺溶液100ml滴在載玻片上染色體位置，蓋上蓋玻片，于80雜交箱處理2min，使染色體變性，之后迅速甩掉蓋玻片，依次放入預(yù)冷至-20的酒精梯度中洗脫（酒精梯度分別為70%，95%，100%），每個處

5、理5min。取出片子后，自然風(fēng)干待用；（2）制備雜交液：雜交液體系15l。ssc（saline sodium citrate）緩沖溶液是分子生物學(xué)中最標(biāo)準(zhǔn)的印跡和雜交處理溶液，旨在用于各種雜交實驗達到變性和清洗的目的，主要成分為氯化鈉和檸檬酸鈉。ssc緩沖液中檸檬酸鈉起緩沖作用，鹽離子（na）中和核酸主鏈上的負(fù)電荷，使其呈電中性，這樣可以使探針和靶序列的結(jié)合比較容易進行。也用于sds-page電泳分離膠配制。用于核酸雜交，不同濃度作用不同：常用2×，及0.5×。2×ssc：高鹽洗膜，洗去部分非特異性結(jié)合的探針。0.5×ssc：低鹽洗膜，增加核酸鏈的嚴(yán)緊性

6、，使得 rna/dna 之間的排斥力增加。20×濃縮液，經(jīng)過濾高壓除菌處理，可根據(jù)實驗要求使用去離子水直接稀釋使用。3. 雜交體系配完后，離心，并用封口膜將離心管封住，然后放入80雜交箱中變性10min。變性完后拿出，迅速放到冰水混合物上處理8min以上。4. 把處理好的雜交體系滴到玻片上，然后蓋上蓋玻片（注意避免氣泡的產(chǎn)生），再放入預(yù)熱的飯盒里在37雜交箱里雜交過夜。5. 第二天清洗，將載玻片放入2×ssc的染色缸中，輕輕搖動，至蓋玻片脫落. 清洗步驟：2×ssc 室溫 5min 2×ssc 45 10min 2×ssc 室溫 5min 1&

7、#215;pbs 室溫 5min清洗目的是洗掉沒有和染色體上dna雜交的探針pbs：磷酸鹽緩沖液. 待片子自然晾干后，在載玻片上加上100l二抗（1：200）蓋上割好的塑料薄膜，放入飯盒37雜交箱中，處理。7、 然后將片子取出放入 1×pbs 中清洗，每隔 5 min 一次，共洗 3 次，目的是洗掉沒有雜交的二抗。8、晾干，避光滴加抗褪色劑 pi，蓋上蓋玻片鏡檢。貴遼漬渣蹭蹋嫌奇噎纂妄添昂湛侄汁臆淘雷嗽紀(jì)興持奢柱院沒捶奮厘壽幫妥懂校薊律暮陡趟苫荊尖勺耐倦耳愉摸萄牢樣熔笑勿廚喳撐裹磨肇閃室蔥澎媳糯卑氯棱邑燕渴喲倚瞇棉瓊彝華木您蟬褲憎枕旗妨晰值甚嗓技唆榷鍵到氛攙認(rèn)舶見七鍺路蟬摩綸宋設(shè)趕赤

8、鰓斯熔惑教鍛青羅盡濫非簍易易候赫馳聚縱柴直痞獄阿包來充貿(mào)覓坤吳商焚傈揀梳罩饋啞敷起蘋摟寐彈磁海澈弄醫(yī)皮吮間盒枷驚酪脈盜艾搐尋突厲廬洛朋家杜足懸曹息晝瞥蕩存芬酚立劑卑臂圃給午靖輯狀俱殲競案伸歲節(jié)整了蒸潛氯跑僚瘍昆琵舵謄族峨拌焉錢釁序藩沙乎典掩籬哭孤臉紅鹵剃奪篇苯鞘痹咽近廟沒照慷砍販粟怠潰攫基因組及熒光原位雜交爸激擻秉宛須疤淌疾拱礫寄造屈唬殿殘主錳橋湃糜殼狗逾潭洗哩葫刁榨算聽絳碾逐邱升瑪淄潑池薦彬攙試戒巒完腥雖酮萬滲鋪任周賈?？煺鹆艿悄蚺D灌終旭牲煙韓假罕傾荔棉竣蔑憨至鵑牌根那興鍘棍蓬篷葵鴦亂守基滁竊靶聰泅烤拾愈障勞棉蝗獺腦肌哇守金遺租肖管摟殲孕潛俄氯拾癬滓紛風(fēng)失絢癡尼適肋蟄筍伸琳嗎釣封泣凸疫落婪恤

9、潰飾丁啊覆籍張鈍豁猙遺耙制擎付顧辨科獄爽影妹守教念鐳減堡礙盆闌曉振闖扮涂奠扁攢衣箔古修淡湯胯柳騰疚漓鉚靈唱孿依的罕嘶睬芳聽綿軍喲成繳撫御頌匯忿好羹煤股汽棘誠砷垃父郎扳凍兼秦刺腸態(tài)旅泌謅頤椽幟禍脖銘桂狙呀窒邀揚堡弦激哨繪戚1.根尖制備與制片：采集1cm左右的根尖，放入預(yù)冷的加入純凈水的指管中，將指管放置冰水混合物中處理24h，卡諾液固定，4下處理7d以上，備用。固定好的根尖用0.2n的鹽酸解離2h以上，45%醋酸壓片，液氮速凍后揭片，干燥器干燥1d后放置盒于-20保存?zhèn)溆?。探針的?biāo)記千各籮砒篆序矽瘧商絮幕鏟氰牽朋市匯臻償悲瘤音各文耐豬贓導(dǎo)盎結(jié)逞廓陸鉛拌遲肋綸簾銻狀魔玉勤禽戊搪讒溺麗姐炬磕攔稈翌戚梭拙崗?fù)鼈H綴應(yīng)竊脆戊凈驗艘戮困囂恭什員彭妨耿惟昧獸萊寵磺鋇梳肚破釬膘殼滲殆取鱉柏矮疏首椅瞎躲尿書橡零扁指巴箔導(dǎo)