最新熒光探針及其生物學(xué)研究中的應(yīng)用

1、logo有機(jī)熒光探針及其生物學(xué)研究中的應(yīng)用logologo金屬離子檢測(cè)、金屬離子檢測(cè)、ph值測(cè)定值測(cè)定免疫學(xué)應(yīng)用核酸檢測(cè)細(xì)胞學(xué)應(yīng)用細(xì)胞學(xué)應(yīng)用logologo1.1.金屬離子檢測(cè)、phph值測(cè)定金屬離子檢測(cè)金屬離子檢測(cè):以cd2+熒光探針為例。xiaojun peng研究組合成了一個(gè)能專(zhuān)識(shí)別cd2+離子的熒光探針，該探針具有較好的細(xì)胞穿透性，并且首次被應(yīng)用于活體細(xì)胞內(nèi)cd2+的檢測(cè)，其機(jī)理為分內(nèi)電荷轉(zhuǎn)移機(jī)理(ict)。探針的最大發(fā)射波長(zhǎng)為656nm與cd2+絡(luò)合后藍(lán)移至597nln，而zn2+及其它金屬離子沒(méi)有干擾 ph值測(cè)定值測(cè)定：xiaojun peng 研究組設(shè)計(jì)合成了一個(gè)bodipy類(lèi)p

2、h熒光探針，該探針具有很好的化學(xué)穩(wěn)定性，檢測(cè)范圍為ph7.6一9.4, 熒光強(qiáng)度隨ph變化15倍之多，而且有很好的水溶性， logologo 免疫熒光細(xì)胞化學(xué)是根據(jù)抗原抗體反應(yīng)的原理，將已知的抗原或者抗體標(biāo)記上熒光探針，再用這種帶有熒光探針的抗原或者抗體作為分子探針去檢測(cè)組織內(nèi)的抗體或者抗原，然后用相應(yīng)的熒光采集器檢測(cè)熒光，從而確定抗原或者抗體的位置，性質(zhì)，甚至可以輔以定量檢測(cè)技術(shù)，定量檢測(cè)抗原或者抗體。目前最為常用的有機(jī)熒光探針為異硫氰酸熒光素（fitc），橙黃色，性質(zhì)穩(wěn)定，可保存兩年以上，最大吸收光譜為490-495nm，最大發(fā)射光譜為520-530nm，2.2.免疫學(xué)應(yīng)用logologo

3、近年來(lái)，隨著分子生物學(xué)的飛速發(fā)展，有機(jī)熒光探針在核酸的檢測(cè)中發(fā)揮著重要的作用。3.3.核酸檢測(cè)一：熒光定量pcr:所謂實(shí)時(shí)熒光定量pcr技術(shù)，是指在pcr反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)pcr進(jìn)程，最后通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法常用的探針：taqman熒光探針 ，sybr熒光染料 二：熒光原位雜交 ：熒光原位雜交技術(shù)原理是將dna探針用生物素和毛地黃毒苷等熒光染料標(biāo)記，然后將標(biāo)記的探針直接原位雜交到染色體或dna纖維切片上，再用與熒光素分子偶聯(lián)的單克隆抗體與探針?lè)肿犹禺惤Y(jié)合，通過(guò)熒光雜交信號(hào)來(lái)檢測(cè)dna序列在染色體或dna纖維上的定位、定性、相對(duì)定量分析。 l

4、ogologo熒光探針是一種極好的生物分子傳感器,具備靈敏度高反應(yīng)時(shí)間迅速等特點(diǎn)，特別是在檢測(cè)小分子等方面，近年來(lái)在細(xì)胞學(xué)檢測(cè)中應(yīng)用十分廣泛。4.4.細(xì)胞學(xué)應(yīng)用細(xì)胞凋亡的檢測(cè) : 活化的caspase-3能夠特異切割d1e2v3d4-x底物，水解d4-x肽鍵。根據(jù)這一特點(diǎn)，設(shè)計(jì)出熒光物質(zhì)偶聯(lián)的短肽ac-devd-amc。在共價(jià)偶聯(lián)時(shí)，amc不能被激發(fā)熒光，短肽被水解后釋放出amc，自由的amc才能被激發(fā)發(fā)射熒光。根據(jù)釋放的amc熒光強(qiáng)度的大小，可以測(cè)定 caspase-3的活性，從而反映caspase-3被活化的程度 細(xì)胞表面特征的檢測(cè): 細(xì)胞表面通常表達(dá)大量的分子，如：cd分子，細(xì)胞因子受體等分子，這些分子在不同的細(xì)胞表達(dá)的種類(lèi)和數(shù)量是不同的，從而不同的細(xì)胞有著不同的表面分子表達(dá)譜，因此可以用相應(yīng)的有機(jī)熒光探針對(duì)細(xì)胞表面的分子進(jìn)行標(biāo)記，或者用細(xì)胞表面的分子的單克隆抗體的熒光探針進(jìn)行標(biāo)記，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)胞表面特征的檢測(cè)。如nk細(xì)胞表面的cd56分子，t細(xì)胞表面的cd3分子，cd40l分子等 logologo 以上概述了部分類(lèi)型的有機(jī)熒光探針及在生物學(xué)研究中的應(yīng)用情況，其實(shí)它的應(yīng)用遠(yuǎn)不止于此。隨著熒光探針技術(shù)的不斷發(fā)展和完善,必然會(huì)給目前較為熱門(mén)的基因組學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)、生物芯片以及等藥物作