血型系統(tǒng)疑難定型及配血不合分析PPT課件

1、前言前言 臨床輸血是現(xiàn)代醫(yī)學(xué)中診治疾病，挽救生命的重要醫(yī)療手段。同時(shí)，輸血可能引起多種不良反應(yīng)，直接危機(jī)到患者生命，稍有不慎將可能發(fā)生無(wú)法彌補(bǔ)的過(guò)失。所以，每個(gè)細(xì)小環(huán)節(jié)都必須做到安全、準(zhǔn)確、有效。血型鑒定、交叉配血、抗體篩選是輸血前的最后一道防線，要求輸血科從業(yè)人員必須有高度的責(zé)任感、嚴(yán)謹(jǐn)?shù)目茖W(xué)作風(fēng)，確保試驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確無(wú)誤。我們?cè)谂R床工作中經(jīng)常遇見(jiàn)血型鑒定、交叉配血、抗體篩查不符及各種干擾情況。下面把在血型血清學(xué)臨床實(shí)踐中的一點(diǎn)體會(huì)做如下匯報(bào)，供大家參考。第1頁(yè)/共49頁(yè)ABOABO正定型必備的試劑及意義正定型必備的試劑及意義疑難定型中正定血型所用抗血清 抗-A及抗-B 抗-AB: 確認(rèn)弱A和弱

2、B抗原, 與弱A及弱B抗原親和力強(qiáng),會(huì)產(chǎn)生強(qiáng)反應(yīng) 抗-H: 用于檢查亞型等, A亞型紅細(xì)胞上的H抗原多于正常A型 抗-A1: 用于A亞型(如A2, A3)檢測(cè)第2頁(yè)/共49頁(yè)ABOABO反定型中必備的試劑及意義反定型中必備的試劑及意義 A及B細(xì)胞: 確認(rèn)抗-A或抗-B抗體 O型紅細(xì)胞:檢查是否存在ABO系統(tǒng)以外抗體 自身對(duì)照: 用于確認(rèn)正反定型結(jié)果的有效性,排除自身抗體對(duì)定型的干擾(如冷凝集等) A2細(xì)胞: 用于亞型的鑒定, 尤其是在懷疑是A亞型且又存在抗-A1抗體的情況下第3頁(yè)/共49頁(yè)ABOABO疑難血型檢測(cè)項(xiàng)目疑難血型檢測(cè)項(xiàng)目正反定型： 正定型：-A, -B，-AB, -H, -A1 反

3、定型：Ac, Bc, Oc, 自身對(duì)照型物質(zhì)檢查（唾液）吸收抑制試驗(yàn)放散試驗(yàn) 家系調(diào)查第4頁(yè)/共49頁(yè)吸收抑制試驗(yàn)吸收抑制試驗(yàn) 原理：本試驗(yàn)用以間接證明紅細(xì)胞上的抗原。如全凝聚或多凝聚細(xì)胞無(wú)法用標(biāo)準(zhǔn)血清檢查血型，但紅細(xì)胞加入血清后，若有相應(yīng)抗原，便吸收血清中抗體。吸收后的血清再用相應(yīng)紅細(xì)胞測(cè)定效價(jià)并與吸收前血清效價(jià)比較。當(dāng)血清效價(jià)顯著下降或不凝聚相應(yīng)紅細(xì)胞時(shí)，便可證明受檢紅細(xì)胞含有這一抗原，間接推測(cè)受檢紅細(xì)胞的血型第5頁(yè)/共49頁(yè)放散試驗(yàn)放散試驗(yàn) 原理：抗體與相應(yīng)的抗原在適合條件下發(fā)生凝聚或致敏但這種結(jié)合是可逆的，如改變某些物理?xiàng)l件時(shí)抗體又可以從結(jié)合的紅細(xì)胞上解脫下來(lái)。通過(guò)檢測(cè)放通過(guò)檢測(cè)放散出

4、來(lái)的抗體，可以證明弱散出來(lái)的抗體，可以證明弱A A或弱或弱B B抗原的存在抗原的存在。 可根據(jù)需要決定方法第6頁(yè)/共49頁(yè)型型ABHABH物質(zhì)測(cè)定意義物質(zhì)測(cè)定意義 原理：某些血型抗原以可溶解形式存在于血清、血漿、唾液、尿液等體液中，稱為可溶性血型物質(zhì)；有分泌型和非分泌型之分. A型人唾液含A型物質(zhì)、B型含B物質(zhì)、AB型含A及B物質(zhì)。H型在A、B、O、AB四型均存在，但以O(shè)型人含量最多。 唾液中血型物質(zhì)為多糖類半抗原，能特異地與相應(yīng)抗體結(jié)合，從而抑制該抗體與相應(yīng)紅細(xì)胞發(fā)生凝聚。 意義：可作為判斷血型的輔助依據(jù)?？设b定抗體性質(zhì)。第7頁(yè)/共49頁(yè)OO型篩選紅細(xì)胞的應(yīng)用型篩選紅細(xì)胞的應(yīng)用 抗原組成:三

5、組合細(xì)胞,要求必須具備全部的Rh因子 I: O型(CDe/Cde); II:O型 (cDE/cDE); III: O型(cde/cde) 用途: 用于受血者、獻(xiàn)血員及孕產(chǎn)婦等的ABO系統(tǒng)以外不規(guī)則抗體的篩選 目的: 在配血之前,有針對(duì)性、病人相配合的血第8頁(yè)/共49頁(yè)自身冷凝集血樣的自身冷凝集血樣的ABOABO定型定型正定型用紅細(xì)胞的準(zhǔn)備: 血樣采集后,立即離心,獲得壓積紅細(xì)胞 用37溫鹽水洗滌紅細(xì)胞 45熱放散3分鐘 巰基試劑處理(或2-ME): 破壞IgM第9頁(yè)/共49頁(yè)獲得性獲得性B B及多凝集現(xiàn)象及多凝集現(xiàn)象獲得性B: 腸紊亂及感染病人, 細(xì)菌酶影響A抗原的受體 腸內(nèi)壁通透性增加,而后

6、細(xì)菌多糖吸附在紅細(xì)胞表面特點(diǎn)：1 、因紅細(xì)胞上的 類B抗原是獲得的，病情好轉(zhuǎn)，類B消失。2 、AB型人血清中一般沒(méi)有抗體，而類B一般是A型紅細(xì)胞獲得的，所以血清中沒(méi)有抗B抗體。 3、多凝聚現(xiàn)象:異?；蜃冃蔚腞BC被所有正常人的血清凝集(微生物酶作用暴露或激活膜隱蔽受體( 多凝集血樣中的血清不與自身反應(yīng))第10頁(yè)/共49頁(yè)獲得類獲得類B B解決辦法解決辦法 詢問(wèn)病史：是否有腸道感染 用自身血清檢查紅細(xì)胞，獲得性類B抗原其血清不凝聚自身紅細(xì)胞。唾液型物質(zhì)檢測(cè)：如是分泌型，其唾液只含有A物質(zhì)而不含B物質(zhì) 第11頁(yè)/共49頁(yè)ABOABO正反定型不符事例正反定型不符事例-A-B-ABAcBcOc自身 -

7、 - - - - - -可能血型: O新生兒或老年人,丙球蛋白缺乏或服用免疫抑制劑解決方案:檢查年齡及丙球水平,室溫30分鐘或4度15分鐘第12頁(yè)/共49頁(yè)ABOABO正反定型不符事例正反定型不符事例-A-B-ABAcBcOc自身4+ - 4+ 1+ 4+ - -可能血型: 亞型,可能是A2型有抗-A1解決方案: 使用抗-A1血清鑒定第13頁(yè)/共49頁(yè)ABOABO正反定型不符事例正反定型不符事例-A -B-ABAcBcOc自身4+ 4+ 4+ 2+ 2+ 2+ 2+ 可能血型: AB型，但有緡錢形成(多發(fā)骨髓瘤,白蛋白:球蛋白比例失調(diào),血漿蛋白紊亂), 冷自家抗體(AB型有抗-I), 解決方案

8、: 洗滌紅細(xì)胞(鹽水替代試驗(yàn)), 自家吸收第14頁(yè)/共49頁(yè)ABOABO正反定型不符事例正反定型不符事例-A -B-ABAcBcOc自身4+ - 4+ - 4+ 3+ -可能血型: A1可能有抗-H解決方案: 使用抗-A1確認(rèn)A抗原,抗-H驗(yàn)證H抗原第15頁(yè)/共49頁(yè)ABOABO正反定型不符事例正反定型不符事例-A -B-ABAcBcOc自身3+ 4+ 4+ 1+ - - -可能血型: AB亞型, 可能是A2B有抗-A1解決方案: 使用抗-A1第16頁(yè)/共49頁(yè)ABOABO正反定型不符事例正反定型不符事例可能血型: A型有獲得性B原解決方案: 詢問(wèn)病史, 用酸化的抗-B(pH 6.0)檢查 第

9、17頁(yè)/共49頁(yè)ABOABO正反定型不符事例正反定型不符事例可能血型: AB型有同種抗體解決方案: 進(jìn)行抗體篩選及抗體鑒定第18頁(yè)/共49頁(yè)ABOABO正反定型不符事例正反定型不符事例-A-B-ABAcBcOc自身 + + + 4+ 4+ + +可能血型: O型有問(wèn)題抗體或有輸血反應(yīng),引起RBC包被抗體解決方案: 直接抗球蛋白試驗(yàn)及抗體鑒定第19頁(yè)/共49頁(yè)定型不一致的原因分析（一）定型不一致的原因分析（一） 弱反應(yīng)或缺失抗體弱反應(yīng)或缺失抗體 、新生兒、新生兒 、老人、老人 、低球蛋白癥的白血病人、低球蛋白癥的白血病人 、低球蛋白的淋巴瘤病人（惡性）、低球蛋白的淋巴瘤病人（惡性） 、使用免疫抑

10、止藥物而導(dǎo)致低球蛋白的病人、使用免疫抑止藥物而導(dǎo)致低球蛋白的病人 、先天丙球缺乏的病人、先天丙球缺乏的病人 、免疫缺陷病人、免疫缺陷病人 、骨髓移植病人（由于治療導(dǎo)致球蛋白缺乏、骨髓移植病人（由于治療導(dǎo)致球蛋白缺乏 ，且移植入的骨，且移植入的骨髓制造另一群紅細(xì)胞髓制造另一群紅細(xì)胞 、雙胞胎嵌合體、雙胞胎嵌合體第20頁(yè)/共49頁(yè)弱或缺失抗體導(dǎo)致的正反定型不符弱或缺失抗體導(dǎo)致的正反定型不符 正定型 反定型 抗抗 抗 細(xì)胞細(xì)胞 ：可能血型：（老年人）第21頁(yè)/共49頁(yè)定型不一致的原因分析（二）定型不一致的原因分析（二） 弱反應(yīng)或缺弱反應(yīng)或缺失抗原失抗原、亞型、亞型或亞型、亞型、亞型或亞型、白血病導(dǎo)致

11、或抗原減弱、白血病導(dǎo)致或抗原減弱、何杰金病（、何杰金病（HodgkinHodgkins s）有時(shí)會(huì)抑制抗原表達(dá)，與白血病類）有時(shí)會(huì)抑制抗原表達(dá)，與白血病類似似、由于某種疾?。ㄈ绺骨话?、胰腺癌）導(dǎo)致血漿中存在大量的、由于某種疾?。ㄈ绺骨话?、胰腺癌）導(dǎo)致血漿中存在大量的型物質(zhì)，中和抗或抗抗體，引起正定型為假陰性或弱型物質(zhì)，中和抗或抗抗體，引起正定型為假陰性或弱陽(yáng)性。通過(guò)洗滌紅細(xì)胞可解決此問(wèn)題。陽(yáng)性。通過(guò)洗滌紅細(xì)胞可解決此問(wèn)題。、獲得性、獲得性 6 6、抗或抗試劑中存在低頻抗原的抗體、抗或抗試劑中存在低頻抗原的抗體第22頁(yè)/共49頁(yè)白血病人的血型血清定型的典型反應(yīng)白血病人的血型血清定型的典型反應(yīng) 正

12、定型 反定型 自身 病人血型抗，抗，抗 細(xì)胞，細(xì)胞，O細(xì)胞 + 2+ / 第23頁(yè)/共49頁(yè)ABO定型不一致的原因分析（三）定型不一致的原因分析（三） 蛋白或血漿不正常引起的正反定型不符蛋白或血漿不正常引起的正反定型不符1、某些疾病導(dǎo)致球蛋白水平增高（多發(fā)性骨髓瘤、巨球蛋白血癥、Hodgkins淋巴瘤）引起緡錢狀凝集，纖維蛋白原水平的增高也會(huì)引起緡錢狀凝集，導(dǎo)致假陽(yáng)性凝集。（洗滌紅細(xì)胞）、血漿增溶劑（葡聚糖、PVP）也會(huì)引起緡錢狀凝集。（洗滌紅細(xì)胞）第24頁(yè)/共49頁(yè)緡錢狀假凝集 特點(diǎn)： 在顯微鏡下紅細(xì)胞膜完整，細(xì)胞間界限清洗地成緡錢串聚集。 緡錢狀假凝集反應(yīng)不受溫度影響，室溫與37結(jié)果一樣。

13、 解決方法：被檢細(xì)胞先用鹽水洗滌后再作配血試驗(yàn) 第25頁(yè)/共49頁(yè)緡錢狀凝集引起的正反定型不符緡錢狀凝集引起的正反定型不符 正定型 反定型 自身 抗抗抗 細(xì)胞細(xì)胞O細(xì)胞 2+ 第26頁(yè)/共49頁(yè)ABO定型不一致的原因分析（四）定型不一致的原因分析（四）其他原因引起的正反定型不符其他原因引起的正反定型不符、多凝集：當(dāng)病人感染細(xì)菌或病毒后，病毒或細(xì)菌產(chǎn)生的酶使紅細(xì)胞上掩蔽的抗原暴露激活，由于正常人血清中都含有抗抗體，因此可與正常人血清產(chǎn)生凝集反應(yīng)，正定型試驗(yàn)假陽(yáng)性。（利用植物凝集素解決）、冷自身抗體引起的自家凝集反應(yīng)：正反定型均可出現(xiàn)假陽(yáng)性（自身吸收及巰基試劑處理）、存在ABO系統(tǒng)的意外抗體：如A

14、2或A2B個(gè)體血清中可能存在天然抗1，導(dǎo)致反定型試驗(yàn)多出抗體。第27頁(yè)/共49頁(yè)ABO定型不一致的原因分析（四）定型不一致的原因分析（四）其他原因引起的正反定型不符其他原因引起的正反定型不符、被檢者血清中存在ABO系統(tǒng)以外的同種抗體，反定型時(shí)出現(xiàn)假陽(yáng)性反應(yīng)。（譜細(xì)胞鑒定抗體特異性）、非抗及抗的抗體與相應(yīng)抗原形成復(fù)合體吸附在紅細(xì)胞表面，引起正定型非特異性凝集。第28頁(yè)/共49頁(yè)ABO定型不一致的原因分析（五）定型不一致的原因分析（五）技術(shù)方面的技術(shù)方面的原因引起的正反定型不符原因引起的正反定型不符 標(biāo)準(zhǔn)血清方面的原因：血清抗體效價(jià)過(guò)低、保存不當(dāng)細(xì)菌污染、試驗(yàn)器皿不干凈等。 操作方面的原因：紅細(xì)胞

15、濃度、血清與紅細(xì)胞的比例不當(dāng)、離心過(guò)度或離心不足。 錯(cuò)誤的記錄。第29頁(yè)/共49頁(yè)抗原活化引起正反定型不符抗原活化引起正反定型不符 正定型 反定型 自身抗抗抗細(xì)胞 細(xì)胞 O細(xì)胞 ：可能血型： 在人的紅細(xì)胞上有一種不活動(dòng)的T抗原，血清中又存在一種抗T抗體，正常時(shí)不會(huì)發(fā)生凝聚。但某些細(xì)菌或細(xì)菌酶污染紅細(xì)胞后，能激活原來(lái)不活動(dòng)的T抗原，使成為有活性的T抗原，此時(shí)遇到抗T抗體，便與任何人的血清都能凝聚，所有把被激活的T抗原細(xì)胞叫全凝集細(xì)胞。第30頁(yè)/共49頁(yè)自身冷抗體引起的正反定型不符自身冷抗體引起的正反定型不符 正定型反定型 自身抗抗抗細(xì)胞細(xì)胞O細(xì)胞 ：可能是型第31頁(yè)/共49頁(yè)自身溫抗體或輸血反應(yīng)

16、引起細(xì)胞自身溫抗體或輸血反應(yīng)引起細(xì)胞 包被抗體導(dǎo)致的正反定型不符包被抗體導(dǎo)致的正反定型不符 正定型反定型自身抗抗抗細(xì)胞細(xì)胞O細(xì)胞 ：可能血型第32頁(yè)/共49頁(yè)亞型抗體引起的正反定型不符亞型抗體引起的正反定型不符 正定型反定型自身抗抗抗細(xì)胞細(xì)胞O細(xì)胞 ：可能血型A2B 抗A1抗體第33頁(yè)/共49頁(yè)疑難配血及原因分析第34頁(yè)/共49頁(yè)常規(guī)配血技術(shù)常規(guī)配血技術(shù) 選擇的技術(shù)不僅要能檢查出不配合的IgM抗體，還必須能檢查出盡可能多的不配合的IgG抗體。最大限度的減少抗體的漏檢。 立即離心技術(shù)配血法：用于檢查ABO的不配合及室溫反應(yīng)活性抗體引起的不配合。 抗人球蛋白配血法：用于檢查不規(guī)則抗體(IgG)引起

17、的交叉配血不配合。第35頁(yè)/共49頁(yè)特殊配血技術(shù)特殊配血技術(shù) 預(yù)溫配血技術(shù)：主要用于解決室溫反應(yīng)活性的無(wú)臨床意義的抗體引起的交叉配血不配合。 冷型自家溶貧病人的配血試驗(yàn)，用于解決自身冷凝集引起的配血困難。 溫型自家溶貧病人的配血試驗(yàn)，用于解決自身溫抗體引起的配血困難。 纖原未完全析出的血樣，如腎透析、凝血功能差的病人，在配血時(shí)引起假陽(yáng)性。 第36頁(yè)/共49頁(yè)主側(cè)交叉配血不相合的原因主側(cè)交叉配血不相合的原因 病人或供血者ABO定型不正確，或二者的ABO血型不配合。 病人血清中存在同種抗體，與供血者紅細(xì)胞上的相應(yīng)抗原反應(yīng)。 病人血清中存在自身抗體，與供血者紅細(xì)胞上的相應(yīng)抗原反應(yīng)。第37頁(yè)/共49頁(yè)

18、主側(cè)交叉配血不相合的原因主側(cè)交叉配血不相合的原因 供血者紅細(xì)胞上已經(jīng)包被了抗體，導(dǎo)致抗球蛋白試驗(yàn)陽(yáng)性。 病人血清不正常，如白蛋白球蛋白比例不正常引起緡錢狀假凝集，血清中存在高分子聚合物的血漿擴(kuò)容劑引起假陽(yáng)性（用鹽水添加試驗(yàn)來(lái)解決）。 試驗(yàn)系統(tǒng)被污染。 第38頁(yè)/共49頁(yè)次測(cè)交叉配血不相合的原因（一）次測(cè)交叉配血不相合的原因（一） 供血者血漿中存在針對(duì)病人紅細(xì)胞抗原的抗體。 病人與供血者的ABO血型不相合。 病人的紅細(xì)胞已經(jīng)包被了抗體，直接抗人球蛋白試驗(yàn)陽(yáng)性。第39頁(yè)/共49頁(yè)主側(cè)配血不相符原因分析（一）主側(cè)配血不相符原因分析（一）現(xiàn)象 可能原因 解決方案主側(cè)：病人或供血者ABO錯(cuò)誤 重新定型

19、自身： 病人血清可能含ABO抗體 檢查病人亞型、輸血/移植史 抗體篩選： 病人血清中有抗體，但篩選對(duì)病人血清進(jìn)行抗體鑒定 細(xì)胞上無(wú)相應(yīng)抗原 供血者紅細(xì)胞直接抗球蛋白 檢查供血者直接抗球蛋白試驗(yàn)試驗(yàn)陽(yáng)性 第40頁(yè)/共49頁(yè)主側(cè)配血不相合原因的分析（二）主側(cè)配血不相合原因的分析（二）第41頁(yè)/共49頁(yè)溫型自家溶貧病人的配血溫型自家溶貧病人的配血 對(duì)WAIHA病人最好避免輸血，必須輸血時(shí)，應(yīng)給以維持足夠攜氧能力的最少量的紅細(xì)胞。由于找不到血清學(xué)配合的血液，確實(shí)存在著由伴隨的同種抗體引起嚴(yán)重的溶血性輸血反應(yīng)的危險(xiǎn)。因此除非病人的生命處在危險(xiǎn)中，否則應(yīng)該盡量避免輸血。在交叉配血時(shí)應(yīng)該遵循下列規(guī)程： 用單

20、特異性的抗IgG與抗C3抗人球蛋白確定WAIHA是補(bǔ)體還是IgG引起。 如果存在IgG引起的WAIHA，則應(yīng)該用試劑譜細(xì)胞鑒定抗體的特異性（包括自身抗體及同種抗體）。 如果能鑒定出同種抗體或自身抗體的特異性，則用缺少相應(yīng)抗原的獻(xiàn)血員紅細(xì)胞作交叉配血。 如果同種抗體被排除而所有交叉配血是不相合的，則選擇凝集反應(yīng)強(qiáng)度弱于自身對(duì)照的血液供輸血使用。 第42頁(yè)/共49頁(yè)冷型自家溶貧病人的配血冷型自家溶貧病人的配血 使用預(yù)溫間接抗人球蛋白方法配血 如果冷自身抗體效價(jià)很高，則需要對(duì)病人的血清進(jìn)行處理，用處理后血清配血： 自身抗體吸收法：用自身紅細(xì)胞吸收自身抗體 巰基試劑處理法第43頁(yè)/共49頁(yè)抗體篩選和交叉配血結(jié)果分析抗體篩選和交叉配血結(jié)果分析 抗體篩選陰性，抗人球蛋白交叉配血不合抗體篩選陰性，抗人球蛋白交叉配血不合獻(xiàn)血者紅細(xì)胞獻(xiàn)血者紅細(xì)胞DATDAT陽(yáng)性（約陽(yáng)性（約1/100001/10000）。）?；颊呖贵w弱，獻(xiàn)血者紅細(xì)胞抗原性很強(qiáng)，表現(xiàn)為抗人球蛋白試驗(yàn)陽(yáng)性。患者抗體弱，獻(xiàn)血者紅細(xì)胞抗原性很強(qiáng)，表現(xiàn)為抗人球蛋