腹瀉病培訓(xùn)與工作要求

1、霍亂等感染性腹瀉采送樣要求霍亂等感染性腹瀉采送樣要求濟(jì)陽縣疾病預(yù)防控制中心檢驗科檢驗科u標(biāo)本采集的重要性和原則標(biāo)本采集的重要性和原則u霍亂霍亂等腸道傳染病采樣要求等腸道傳染病采樣要求u感染性物質(zhì)的包裝運(yùn)送要求感染性物質(zhì)的包裝運(yùn)送要求u存在的問題和對策存在的問題和對策 主主 要要 內(nèi)內(nèi) 容容 標(biāo)本是進(jìn)行一切實驗室檢測的基礎(chǔ)；標(biāo)本是進(jìn)行一切實驗室檢測的基礎(chǔ)；所有實驗室檢測的結(jié)果都依賴于所得所有實驗室檢測的結(jié)果都依賴于所得到標(biāo)本的質(zhì)量；到標(biāo)本的質(zhì)量；直接關(guān)系到實驗室檢測的準(zhǔn)確性與效直接關(guān)系到實驗室檢測的準(zhǔn)確性與效率；率； 標(biāo)本采集和運(yùn)送的重要性標(biāo)本采集和運(yùn)送的重要性 影響到處置事件的評估與策略制定。

2、l疫情處理：疫情的判斷與防控策略的制定疫情處理：疫情的判斷與防控策略的制定l監(jiān)測與普查：流行狀況的評估監(jiān)測與普查：流行狀況的評估l病例診斷：治療方案制定、病人預(yù)后、疾病例診斷：治療方案制定、病人預(yù)后、疾病負(fù)擔(dān)病負(fù)擔(dān) 標(biāo)本采集和運(yùn)送的重要性標(biāo)本采集和運(yùn)送的重要性l 標(biāo)本采集的好壞，對整個檢驗工作的質(zhì)量影響很大；l糞便或嘔吐物等標(biāo)本的采集應(yīng)爭取在發(fā)病早期、服用抗菌藥物之前；l盡快送到檢驗室檢驗；l在全部采樣檢驗過程中，接觸樣本人員要嚴(yán)格執(zhí)行生物安全操作的有關(guān)規(guī)定。 標(biāo)本的采集、送檢的原則標(biāo)本的采集、送檢和保存注意項血液標(biāo)本處理：血液標(biāo)本處理：不同采血管要求：室溫孵育、及時動；不同采血管要求：室溫孵

3、育、及時動；不明原因疾病標(biāo)本不明原因疾病標(biāo)本 ：無菌、無抗生素保存管；：無菌、無抗生素保存管； 用于細(xì)菌檢測：避免盲目增菌、轉(zhuǎn)運(yùn)培養(yǎng)基用于細(xì)菌檢測：避免盲目增菌、轉(zhuǎn)運(yùn)培養(yǎng)基 （污染標(biāo)本：切忌無選擇性增菌）（污染標(biāo)本：切忌無選擇性增菌） 用于病毒檢測：病毒保存液用于病毒檢測：病毒保存液 保存運(yùn)輸溫度保存運(yùn)輸溫度 用于病毒檢測：低溫（用于病毒檢測：低溫（-20） 用于細(xì)菌檢測：用于細(xì)菌檢測：4或室溫（弧菌），禁零下。或室溫（弧菌），禁零下。腹瀉病人必須在腸道門診內(nèi)由醫(yī)護(hù)人員采集糞腹瀉病人必須在腸道門診內(nèi)由醫(yī)護(hù)人員采集糞便標(biāo)本，做好標(biāo)本登記，實行有瀉必采、有樣便標(biāo)本，做好標(biāo)本登記，實行有瀉必采、有樣

4、必送。必送。醫(yī)院微生物檢驗室設(shè)立霍亂弧菌檢測實驗室或醫(yī)院微生物檢驗室設(shè)立霍亂弧菌檢測實驗室或?qū)^(qū)，開展霍亂弧菌檢測。專區(qū)，開展霍亂弧菌檢測。分離的霍亂弧菌要速送到屬地疾控中心進(jìn)行復(fù)分離的霍亂弧菌要速送到屬地疾控中心進(jìn)行復(fù)核和鑒定。核和鑒定。分離的傷寒和副傷寒菌株、其它沙門氏菌、痢分離的傷寒和副傷寒菌株、其它沙門氏菌、痢疾桿菌和大腸疾桿菌和大腸o157o157等，要及時送到屬地疾控中等，要及時送到屬地疾控中心復(fù)核。心復(fù)核?；魜y等采樣及檢測要求霍亂等采樣及檢測要求 水樣便的腹瀉病人水樣便的腹瀉病人 集體聚餐引起的腹瀉病人集體聚餐引起的腹瀉病人 來自霍亂疫區(qū)的腹瀉病人來自霍亂疫區(qū)的腹瀉病人發(fā)現(xiàn)病人或

5、帶菌者的自然村、居委會和單位發(fā)現(xiàn)病人或帶菌者的自然村、居委會和單位范圍內(nèi)范圍內(nèi)要在使用抗生素以前，采集吐瀉物或其污染要在使用抗生素以前，采集吐瀉物或其污染的物品，按檢驗規(guī)程作霍亂弧菌快檢，再按的物品，按檢驗規(guī)程作霍亂弧菌快檢，再按檢驗規(guī)程作霍亂弧菌培養(yǎng)。檢驗規(guī)程作霍亂弧菌培養(yǎng)。 霍亂等采樣及檢測要求霍亂等采樣及檢測要求 在標(biāo)本采集過程中，注意使用一次性隔離服、手套、防在標(biāo)本采集過程中，注意使用一次性隔離服、手套、防護(hù)口罩（以免飛濺）等防護(hù)措施護(hù)口罩（以免飛濺）等防護(hù)措施 在標(biāo)本采集過程中在標(biāo)本采集過程中, ,嚴(yán)格采取預(yù)防措施，防止針頭等銳嚴(yán)格采取預(yù)防措施，防止針頭等銳器刺傷（尤其是已經(jīng)采集過病

6、人血液的針頭）器刺傷（尤其是已經(jīng)采集過病人血液的針頭） 采樣人員恰當(dāng)防護(hù)，防護(hù)過度可能造成人群的恐慌，出采樣人員恰當(dāng)防護(hù)，防護(hù)過度可能造成人群的恐慌，出現(xiàn)不必要的麻煩現(xiàn)不必要的麻煩 霍亂霍亂標(biāo)本的采集、送檢和保存依據(jù)為依據(jù)為霍亂防治手冊霍亂防治手冊u糞便：糞便：標(biāo)本的采集以病人糞便為主，水樣便采取13ml，成形便采取指甲大小的糞量。直腸棉拭或采便管由肛門插入直腸內(nèi)35cm處采取。急性期病人取水樣便標(biāo)本在增菌培養(yǎng)的同時可取其粘液絮片或用棉拭子直接接種于堿性瓊脂、tcbs瓊脂培養(yǎng)基。帶菌者糞便都應(yīng)接種堿性蛋白胨水增菌，放37增菌68h后，從菌膜下表層取一接種環(huán)培養(yǎng)物，劃線接種于堿性瓊脂、tcbs瓊

7、脂培養(yǎng)基。霍亂霍亂標(biāo)本的采集、送檢和保存采集的標(biāo)本不能立即檢查的，要放入堿性蛋白胨水或文臘二氏保存液或插入cary-blair二氏半固體保存培養(yǎng)基中；標(biāo)本與保存液比例約為1 5； 送檢標(biāo)本時應(yīng)填寫“標(biāo)本送檢單”寫明姓名、地址、發(fā)病時間、采集時間、臨床診斷、用藥信息等；運(yùn)送過程中雙層包裝，勿污染容器口外壁，專人運(yùn)送，送檢箱每次用后須做消毒處理霍亂弧菌外環(huán)境標(biāo)本檢索樣品的采集處理 （1） 水樣標(biāo)本：取水樣450ml1mol/lnaoh調(diào)ph至8.4-9.2。加濃10倍堿性蛋白胨水中，再加入1%亞碲酸鉀0.5-1ml ； （2）食品標(biāo)本：食品 50g樣品碾碎，加到ph9.2 ，250ml 堿性胨水中

8、； （3）水生動物標(biāo)本：貝殼類取可內(nèi)組織，魚類取腮部和腸內(nèi)容物。o157:h7大腸桿菌標(biāo)本的采集、送檢和保存l糞便標(biāo)本的采集應(yīng)爭取在發(fā)病早期，服用抗菌藥物之前并盡快送到檢驗室。采集腹瀉病人糞便以血性水樣便為主，也可以用直腸棉拭或采便管采取，肛拭標(biāo)本應(yīng)染有糞便。 腹瀉病人血性水樣便標(biāo)本從采集到送檢不得超過24h,采集的標(biāo)本應(yīng)插入卡里-布萊爾（cary-blair）半固體保存培養(yǎng)基中，立即送試驗室接種于培養(yǎng)基。培養(yǎng)基要定期調(diào)換，保持培養(yǎng)液新鮮。o157:h7大腸桿菌標(biāo)本的采集、送檢和保存水、食品、環(huán)境檢驗標(biāo)本：采集應(yīng)在24小時內(nèi)送至實驗室進(jìn)行增菌、培養(yǎng)、分離；特殊樣品的采集：應(yīng)遵循不重復(fù)的原則。如

9、采集蒼蠅標(biāo)本：可以選擇公廁、酒店、垃圾場、市場、定點(diǎn)屠宰市場及養(yǎng)殖場等。生熟肉制品：可以選擇市場、超市、加工廠等；特殊樣品的處理：畜、禽等的生、熟肉樣品盡快無菌將樣品剪碎、研磨并加入增菌液中；蒼蠅等樣本直接研磨后加入增菌液中。o157:h7大腸桿菌標(biāo)本的采集、送檢和保存p樣品檢驗單應(yīng)填寫完整，與樣品一起送實驗室。必須提供與分離菌株相對應(yīng)的患者的臨床資料和流行病學(xué)資料；p使用免疫磁珠富集技術(shù)和山梨醇麥康瓊脂或科瑪嘉瓊脂分離腸出血性大腸桿菌o157：h7；p按照山梨醇不發(fā)酵、 o157：h7特異性血清初篩、生化反應(yīng)、pcr進(jìn)行腸出血性大腸桿菌o157：h7的初篩和鑒定；p初篩陽性的菌落和可疑菌落應(yīng)

10、該保存下來，交上級進(jìn)行分子生物學(xué)等鑒定和分型。 志 賀 氏 菌標(biāo)本的采集、送檢和保存u以新鮮粘液新鮮粘液血便血便為主( 亦可采用肛拭子取 )。最好在服藥前采便 ,取便后應(yīng)及時送檢驗室接種培養(yǎng)，否則應(yīng)將糞便標(biāo)本或肛拭子放入帶有保存液的管內(nèi)，或置 cary-blair 運(yùn)送培養(yǎng)基內(nèi)；u送檢驗室培養(yǎng)或放置 4-8冰箱暫存，在收到送檢標(biāo)本后，應(yīng)即刻接種培養(yǎng)；u 慢性痢疾患者或帶菌者糞便、食品等標(biāo)本 ,可先置有保存液或運(yùn)送培養(yǎng)基內(nèi),取標(biāo)本接種于 gn 肉湯中，在室溫 25 時即有增菌作用,接種量不能超出1 :10。增菌時間不能超過 6 小時。傷寒、副傷寒標(biāo)本的采集、送檢和保存血培養(yǎng)血培養(yǎng)：確診依據(jù)，第一

11、周陽性率可達(dá)：確診依據(jù)，第一周陽性率可達(dá)90%，第三，第三周降為周降為3040%，第四周時常陰性。用含膽汁的培養(yǎng)，第四周時常陰性。用含膽汁的培養(yǎng)基，已用抗生素的患者可取血凝塊做培養(yǎng)；基，已用抗生素的患者可取血凝塊做培養(yǎng)；骨髓培養(yǎng)骨髓培養(yǎng)：陽性率高，用抗菌素后有效；：陽性率高，用抗菌素后有效；尿、糞便培養(yǎng)尿、糞便培養(yǎng)十二指腸引流液（膽汁）培養(yǎng)十二指腸引流液（膽汁）培養(yǎng)玫瑰疹的刮出物或活檢切片培養(yǎng)玫瑰疹的刮出物或活檢切片培養(yǎng)傷寒、副傷寒標(biāo)本的采集、送檢和保存標(biāo)本采集 按不同病期采集不同種類的標(biāo)本。l糞便：發(fā)病第2到3周；l尿：發(fā)病第2到3周；l血液、骨髓:發(fā)病第1到2周；l食品、水、其他標(biāo)本如玫瑰

12、疹刮取物,膽汁,媒介昆蟲蒼蠅類盡快采取。其它其它腸道傳染病樣本采集腸道傳染病樣本采集小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌；空空 腸腸 彎彎 曲菌曲菌致 腹 瀉 原 蟲腹瀉病毒亦為重要病原 輪狀病毒（5歲以下兒童嚴(yán)重腹瀉的最普遍病原，占腹瀉住院兒童的2060%） 杯狀病、星狀病毒（2%9%） 腸道腺病毒（2.8%8.7%） 菌株保存與移交每分離出一株細(xì)菌，即建立菌株保存檔案，詳細(xì)記錄菌株的來源、分離的時間和地點(diǎn)及取材病人的基本信息和流行病學(xué)特征；同時準(zhǔn)備2支半固體，每管加3.5ml半固體；用接種針挑取菌落接種半固體，37培養(yǎng)18小時。管內(nèi)加入石蠟使其隔絕空氣，室溫或4避光保存。一管保存在當(dāng)?shù)貙嶒炇遥硪还芫旮?/p>

13、檔案逐級上送疾病預(yù)防控制中心復(fù)核；上送菌株經(jīng)初步鑒定后，填寫菌株上送登記表及送檢單，按照感染性樣本運(yùn)送要求進(jìn)行，每次移交均填寫交接記錄。基層對首發(fā)病例分離的霍亂菌株需送上一級實驗室做進(jìn)一步鑒定或復(fù)查，建議常溫下保存送檢,不主張冷(凍)藏送檢霍亂菌種或樣品。感染性物質(zhì)的包裝運(yùn)送要求感染性物質(zhì)的包裝運(yùn)送要求高致病性病原微生物標(biāo)本運(yùn)輸流程感染性物質(zhì)包裝分類 國際民航組織危險物品航空安全運(yùn)輸技術(shù)細(xì)則中將 感染性物質(zhì)分為a、b兩類。 名錄要求：通過其他交通工 具運(yùn)輸?shù)目蓞⒄找陨蠘?biāo)準(zhǔn)包裝 禁止使用公共電/汽車和城市鐵路(地鐵/輕軌)運(yùn)輸病原微生物菌(毒)種或樣本！感染性物質(zhì)包裝分類感染性物質(zhì)包裝分類 a類

14、： 對健康人或動物造成永久性殘疾或致命疾病的感染性物質(zhì)。 包裝：最耐用的三層包裝，并附上完整的危險品申報單。 培訓(xùn)運(yùn)輸人員。感染性物質(zhì)包裝分類航空運(yùn)輸a類包裝（ un號2814）感染性物質(zhì)包裝分類 b類： 不符合列入a類標(biāo)準(zhǔn)的感染性物質(zhì) 運(yùn)輸專用名稱為診斷標(biāo)本或臨床標(biāo)本或生命物質(zhì)b類。 包裝：三層包裝,不需要危險品申報單。 。感染性物質(zhì)包裝分類航空運(yùn)輸b類包裝（ un號3373a類、 b類包裝的共同點(diǎn)三層包裝 第一層包裝要求用保存標(biāo)本的原始容器（外螺旋管），需將蓋口密封。 第二層包裝可以采用專用二級包裝桶或耐高壓塑料袋。 第三層包裝是將密封好的第二層包裝放入運(yùn)輸包裝盒，運(yùn)輸包裝盒要求有保持冷藏

15、低溫功能。主容器和輔助包裝，必須能承受在-40至+55溫度范圍內(nèi)95kpa的內(nèi)部壓力而無滲漏。完整的包裝必須能通過危險物品航空安全運(yùn)輸技術(shù)細(xì)則規(guī)定的跌落試驗，跌落高度不低于1.2m。外包裝標(biāo)識、聯(lián)系人、地址清楚a類、 b類包裝的區(qū)別a類包裝 b類包裝 定義 對人或動物致死或永久致殘 不符合列入a類標(biāo)準(zhǔn)的感染性物質(zhì) 運(yùn)輸專用名稱 感染性物質(zhì)，可感染人的 診斷標(biāo)本或臨床標(biāo)本或生命物質(zhì)b類 un編號 un2814 un3373 運(yùn)輸對象 名錄中規(guī)定的第一類、第二類病原微生物及其樣本；第三類中包裝分類為a類的病原微生物 名錄中規(guī)定的第三類、第四類病原微生物及其樣本 un專用標(biāo)記需要不需要主容器 防水，

16、防穿刺，防泄漏 防破損、防泄漏 次級容器 防水，防穿刺，防泄漏 防破損、防泄漏 外包裝 最小邊長100mm 至少有一個表面 100mm100mm 危險品申報單 需要 不需要 標(biāo)識 un3373客機(jī)單包裝主容器最大運(yùn)輸量 液體50ml，固體50g 液體1l，固體4kg 感染性物質(zhì)運(yùn)送時應(yīng)隨身攜帶生物危害物質(zhì)溢出緊急處理箱 標(biāo)本包裝系統(tǒng)要求 容器材料標(biāo)識密封無菌三防兩耐生物危險警告用語提示用語放置方向高/ /低溫-4055-4055（液氮-196-196）高壓（95kpa95kpa）水破損泄漏必須在符合生物安全規(guī)定的場所中進(jìn)行包裝！單位內(nèi)部感染性物質(zhì)運(yùn)送要求a類包單位內(nèi)部不同建筑物間感染性物質(zhì)運(yùn)送

17、應(yīng)使用兩層包裝系統(tǒng)。（如：病房與病房之間、采樣點(diǎn)到實驗室以及大樓內(nèi)部的樣品轉(zhuǎn)移11年工作中年工作中存在的主要問題存在的主要問題 和今后工作對策和今后工作對策11年工作中的主要問題年工作中的主要問題 腹瀉病檢測工作不平衡腹瀉病檢測工作不平衡缺少部分檢驗工作必備的診斷血清、培養(yǎng)基，瘧疾鏡檢缺少部分檢驗工作必備的診斷血清、培養(yǎng)基，瘧疾鏡檢設(shè)備不全，血片抽檢及保留記錄不完整；設(shè)備不全，血片抽檢及保留記錄不完整； 部分醫(yī)療衛(wèi)生單位實驗室腹瀉病檢測工作薄弱；部分醫(yī)療衛(wèi)生單位實驗室腹瀉病檢測工作薄弱； 痢疾菌株的分離、上送部分單位重視程度還要加強(qiáng)，有痢疾菌株的分離、上送部分單位重視程度還要加強(qiáng)，有一株多傳現(xiàn)

18、象；一株多傳現(xiàn)象； 轄區(qū)所抽檢醫(yī)療單位部分存在檢驗登記不全，轄區(qū)所抽檢醫(yī)療單位部分存在檢驗登記不全，霍亂快診霍亂快診率、培養(yǎng)率未達(dá)標(biāo)，率、培養(yǎng)率未達(dá)標(biāo)， 痢疾桿菌分離培養(yǎng)率低等；痢疾桿菌分離培養(yǎng)率低等； 食源性疾病樣本相關(guān)診治大夫缺乏及時留存意識；食源性疾病樣本相關(guān)診治大夫缺乏及時留存意識；部分鄉(xiāng)鎮(zhèn)醫(yī)院的腹瀉病檢測工作還須規(guī)范。部分鄉(xiāng)鎮(zhèn)醫(yī)院的腹瀉病檢測工作還須規(guī)范。2012年工作中的問題年工作中的問題- 對對策策 領(lǐng)導(dǎo)重視，增強(qiáng)責(zé)任心，進(jìn)一步加強(qiáng)實驗室自身能力建領(lǐng)導(dǎo)重視，增強(qiáng)責(zé)任心，進(jìn)一步加強(qiáng)實驗室自身能力建設(shè)：設(shè)： 人員培養(yǎng)管理、實驗室設(shè)備、實驗室耗材運(yùn)行人員培養(yǎng)管理、實驗室設(shè)備、實驗室耗材

19、運(yùn)行支持、項目建設(shè)等；支持、項目建設(shè)等； 對轄區(qū)進(jìn)行有效培訓(xùn)，按照工作意見要求跟蹤檢查督導(dǎo)，對轄區(qū)進(jìn)行有效培訓(xùn)，按照工作意見要求跟蹤檢查督導(dǎo)，實驗室應(yīng)全程參與；實驗室應(yīng)全程參與； 為轄區(qū)醫(yī)療單位作好技術(shù)支持，保持有效的溝通，建立為轄區(qū)醫(yī)療單位作好技術(shù)支持，保持有效的溝通，建立示范單位，促進(jìn)其他單位整體檢測工作的提升；示范單位，促進(jìn)其他單位整體檢測工作的提升； 規(guī)范培訓(xùn)、抽查、督導(dǎo)和檢測原始記錄。規(guī)范培訓(xùn)、抽查、督導(dǎo)和檢測原始記錄。2012年工作要求年工作要求 加強(qiáng)培訓(xùn)，認(rèn)真學(xué)習(xí)相關(guān)法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)：加強(qiáng)培訓(xùn)，認(rèn)真學(xué)習(xí)相關(guān)法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)：實驗室生物安全通用要求實驗室生物安全通用要求gb 19489-2004病原微生物實驗室生物安全管理條例病原微生物實驗室生物安全管理條例可感染人類的高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本運(yùn)輸可感染人類的高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本運(yùn)輸管理規(guī)定管理規(guī)定人間傳染的病原微生物名錄人間傳染的病原微生物名錄加強(qiáng)微生物實驗室規(guī)范化建設(shè)：加強(qiáng)微