微生物第六七章總結(jié)

1、微生物的生長和控制第一節(jié)：測定生長繁殖的方法一.測生長量(一)直接法：有粗放的測體積法和精確的稱干重法。(二)間接法：1. 比濁法2. 生理指標(biāo)法二.計繁殖數(shù)(一)直接法：指用計數(shù)板(例如血球計數(shù)板)在光學(xué)顯微鏡下直接觀察細(xì)胞并進(jìn)行計數(shù)的方法。此法十分常用,但得到的數(shù)目是包括死細(xì)胞在內(nèi)的總菌數(shù)。可以采用特殊的染色法計算活細(xì)胞。(二)間接法：1. 平板菌落計數(shù)法：可用澆注平板或涂布平板或滾管法等方法進(jìn)行。2. 厭氧菌的菌落計數(shù)法：亨蓋特滾管培養(yǎng)法。第二節(jié) 微生物的生長規(guī)律一.單細(xì)胞微生物的典型生長曲線它只適合單細(xì)胞微生物如細(xì)菌和酵母菌,非典型的絲狀菌生長曲線缺乏指數(shù)生長期, 與此期相當(dāng)?shù)闹皇桥囵B(yǎng)

2、時間與菌絲體干重的立方根成直線關(guān)系的一段快速生長時期。根據(jù)微生物的生長速率常數(shù), 即每小時分裂次數(shù)(的不同, 一般可把典型生長曲線粗分為延滯期、指數(shù)期、穩(wěn)定期和衰亡期等4個時期。(一)延滯期：延滯期又稱停滯期、調(diào)整期或適應(yīng)期。影響延滯期長短的因素：菌種類型，接種齡，接種量，培養(yǎng)基成分。(二)指數(shù)期：指數(shù)期又稱對數(shù)期在指數(shù)期中,有 3 個重要參數(shù),其相互關(guān)系及計算方法在書P155影響對數(shù)期的因素：菌種，營養(yǎng)成分，營養(yǎng)物質(zhì)濃度，培養(yǎng)溫度(三)穩(wěn)定期：細(xì)胞內(nèi)開始積聚糖原、異染顆粒和脂肪等內(nèi)含物; 芽孢桿菌一般在這時開始形成芽孢;在這時開始以初生代謝物作前體,合成抗生素等對人類有用的各種次生代謝物。穩(wěn)

3、定期到來的原因是:營養(yǎng)物尤其是生長限制因子的耗盡;營養(yǎng)物的比例失調(diào);有害代謝產(chǎn)物的累積;物理化學(xué)條件越來越不適宜等等。(四)衰亡期：有的微生物在這期會進(jìn)一步合成或釋放對人類有益的抗生素等次生代謝物;而在芽孢桿菌中, 往往在此期釋放芽孢;等等。第三節(jié) 影響微生物生長的主要因素其中最主要的溫度、pH和氧氣。一.溫度：生長溫度三基點:最低生長溫度、最適生長溫度和最高生長溫度。在不同溫度下，微生物的代謝產(chǎn)物可能會發(fā)生改變。二.PH：除不同種類微生物有其最適生長PH外, 即使同一種微生物在其不同的生長階段和不同的生理、生化過程, 也有不同的最適PH要求。三.氧氣：按照微生物與氧的關(guān)系,可把它們粗分成好氧

4、微生物和厭氧微生物兩大類。細(xì)分為專性好氧菌，兼性厭氧菌，微好氧菌，耐氧菌和厭氧菌。關(guān)于厭氧菌不能存活于氧氣環(huán)境中的解釋，現(xiàn)在普遍認(rèn)為是因為厭氧菌中不存在過氧化氫酶和SOD（超氧化物歧化酶）第四節(jié) 微生物培養(yǎng)法概論一.實驗室培養(yǎng)法(一)固體培養(yǎng)法1.好氧菌的固體培養(yǎng)：主要用試管斜面、培養(yǎng)皿瓊脂平板。2.厭氧菌的固體培養(yǎng)：高層瓊脂柱，厭氧培養(yǎng)皿，亨蓋特滾管技術(shù)(二)液體培養(yǎng)法1. 好氧菌的液體培養(yǎng)：(1)試管液體培養(yǎng); (2)三角瓶淺層液體培養(yǎng); (3)搖瓶培養(yǎng)第五節(jié) 有害微生物的控制滅菌:采用強(qiáng)烈的理化因素使任何物體內(nèi)外部的一切微生物永遠(yuǎn)喪失其生長繁殖能力的措 施,稱為滅菌.消毒: 是一種采用較

5、溫和的理化因素,僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分對人體或動、植物有害的病原菌, 而對被消毒的對象基本無害的措施。防腐: 防腐就是利用某種理化因素完全抑制霉腐微生物的生長繁殖, 即通過制菌作用防止食品、生物制品等對象發(fā)生霉腐的措施。例如：低溫，缺氧，干燥，高滲，高酸，高醇，防腐劑。一.物理滅菌因素的代表高溫1.干熱滅菌法把金屬器械或洗凈的玻璃器皿放入電熱烘箱內(nèi), 在150170下維持12 h后, 可達(dá)到徹底滅菌(包括細(xì)菌的芽孢)的目的。2.濕熱滅菌法(1)常壓法巴氏消毒法：此法可殺滅物料中的無芽孢病原菌(如牛奶中的結(jié)核分枝桿菌或沙門氏 菌) , 又不影響其原有風(fēng)味。具體方法可分兩類: 第一類是經(jīng)典的低

6、溫維持法(LTH) ,例如用于牛奶消毒只要在63下維持30 min即可; 第二類是較現(xiàn)代的高溫瞬時法（HTST）,用此法作牛奶消毒時只要在72下保持15 s。間歇滅菌法：適用于不耐熱培養(yǎng)基的滅菌，將待滅菌的培養(yǎng)基放在80100下蒸煮 1560min,以殺滅其中所有的微生物營養(yǎng)體, 然后放至室溫或 37下保溫過夜, 誘使其中殘存的芽孢發(fā)芽,第二天再以同法蒸煮和保溫過夜, 如此連續(xù)重復(fù) 3 天即可在較低的滅菌溫度下同樣達(dá)到徹底滅菌的良好效果。(2)加壓法常規(guī)加壓蒸氣滅菌法：一般稱作“高壓蒸氣滅菌法”，一般要求為121，時間維持15-20min連續(xù)加壓蒸氣滅菌法:在發(fā)酵行業(yè)里也稱“連消法”。此法僅用

7、于大型發(fā)酵廠的大批培養(yǎng)基滅菌。利用溫度殺菌時幾個關(guān)鍵的數(shù)值：D值是指在一定的致死溫度下，90的活菌被殺死所需的時間（min ),即為D值。Z值是指如果在加熱致時間曲線中，加熱時間縮短90，所需升高的溫度，這所需升高的溫度即為z值，或者說殺菌時間變化10倍，相應(yīng)的溫度變化值。影響加壓蒸氣滅菌效果的因素：1. 滅菌物體含菌量 2. 滅菌鍋內(nèi)空氣排除程度3. 滅菌對象的 pH4. 滅菌對象的體積5. 加熱與散熱速度 微生物的遺傳變異和育種第一節(jié) 遺傳變異的物質(zhì)基礎(chǔ)4 個基本概念:(1)遺傳型：又稱基因型, 指某一生物個體所含有的全部遺傳因子即基因的總和。(2)表型：指某一生物體所具有的一切外表特征和

8、內(nèi)在特性的總和,是其遺傳型在合適環(huán)境條件下通過代謝和發(fā)育而得到的具體體現(xiàn)。(3)變異：指生物體在某種外因或內(nèi)因的作用下所引起的遺傳物質(zhì)結(jié)構(gòu)或數(shù)量的改 變,亦即遺傳型的改變。(4)飾變：即一種不涉及遺傳 物質(zhì)結(jié)構(gòu)改變而只發(fā)生在轉(zhuǎn)錄、轉(zhuǎn)譯水平上的表型變化。一.三個證明遺傳物質(zhì)是核酸的經(jīng)典實驗：(一)經(jīng)典轉(zhuǎn)化實驗：肺炎雙球菌的轉(zhuǎn)化實驗(二)噬菌體感染實驗(三)植物病毒的重建實驗二.原核生物的質(zhì)粒簡介：(1)F質(zhì)粒：又稱F因子、致育因子或性因子,是E .coli等細(xì)菌決定性別并有轉(zhuǎn)移能力的質(zhì)粒。(2)R質(zhì)粒：又稱R因子，為細(xì)菌提供抗藥性。(3)Col質(zhì)粒：編碼細(xì)菌素的質(zhì)粒。(4)Ti質(zhì)粒：即誘癌質(zhì)?；?/p>

9、冠癭質(zhì)粒。Ri質(zhì)粒與Ti質(zhì)粒類似。(5)mega質(zhì)粒：即巨大質(zhì)粒,存在于根瘤菌屬中, 其上有一系列與共生固氮相關(guān)的基因。(6)降解性質(zhì)粒：只在 Pseudomonas(假單胞菌屬)中發(fā)現(xiàn)。這類質(zhì)?？蔀榻到庖幌盗?復(fù)雜有機(jī)物的酶編碼,從而使這類細(xì)菌在污水處理、環(huán)境保護(hù)等方面發(fā)揮特有的作用。(7)2m質(zhì)粒存在于酵母菌細(xì)胞中。第二節(jié) 基因突變和誘變育種一.基因突變（一）突變類型1. 營養(yǎng)缺陷型：某一野生型菌株因發(fā)生基因突變而喪失合成一種或幾種生長因子、堿基或氨基酸的能力,因而無法再在基本培養(yǎng)基(MM)上正常生長繁殖的變異類型。2. 抗性突變型：指野生型菌株因發(fā)生基因突變,而產(chǎn)生的對某化學(xué)藥物或致死物

10、理因子的抗性變異類型。6. 產(chǎn)量突變型：通過基因突變而產(chǎn)生的在代謝產(chǎn)物產(chǎn)量上明顯有別于原始菌株的突變株, 稱產(chǎn)量突變型。產(chǎn)量高則為正變株，產(chǎn)量低則為負(fù)變株。（二）基因突變的特點 自發(fā)性不對應(yīng)性稀有性可誘變性穩(wěn)定性可逆性（三）基因突變的機(jī)制1.誘發(fā)突變：誘發(fā)突變簡稱誘變,是指通過人為的方法, 利用物理、化學(xué)或生物因素顯著提高基因自發(fā)突變 頻率的手段。凡具有誘變效應(yīng)的任何因素, 都稱誘變劑。(1)堿基的置換：因它只涉及一對堿基被另一對堿基所置換。置換又可分兩個亞類: 一類稱轉(zhuǎn)換,即DNA鏈中一個嘌呤被另一個嘌呤或是一個嘧啶被另一個嘧啶所置換;另一類稱顛換,即一個嘌呤被另一個嘧啶或是一個嘧啶被另一個

11、嘌呤所置換。直接引起置換的誘變劑: 例如亞硝酸、羥胺和各種烷化劑等間接引起置換的誘變劑: 5-溴尿嘧啶等(2)移碼突變：指誘變劑會使 DNA 序列中的一個或少數(shù)幾個核苷酸發(fā)生增添(插入)或缺失,從而使該處后面的全部遺傳密碼的閱讀框架發(fā)生改變。能引起移碼突變的因素是一些吖啶類染料。(3)染色體畸變：包括染色體結(jié)構(gòu)上的缺失、重復(fù)、插入、易位和倒位,也包括染色體數(shù)目的變化。某些強(qiáng)烈理化因子, 如電離輻射(X射線等)和烷化劑、亞硝酸等會導(dǎo)致染色體畸變。2. 自發(fā)突變：指生物體在無人工干預(yù)下自然發(fā)生的低頻率突變。（四）紫外線對 DNA 的損傷及其修復(fù)嘧啶對UV的敏感性比嘌呤強(qiáng)得多, 其光化學(xué)反應(yīng)產(chǎn)物主要

12、是嘧啶二聚體(TT, TC, CC)和水合物,相鄰嘧啶形成二聚體后, 造成局部DNA分子無法配對。二.突變與育種(一)自發(fā)突變與育種1. 從生產(chǎn)中育種2. 定向培育優(yōu)良菌株(二)誘變育種1.誘變育種是指利用物理、化學(xué)等誘變劑處理均勻而分散的微生物細(xì)胞群, 在促進(jìn)其突變率顯著提高的基礎(chǔ)上,采用簡便、快速和高效的篩選方法, 從中挑選出少數(shù)符合目的的突變株,以供科學(xué)實驗或生產(chǎn)實踐使用。2.艾姆斯試驗艾姆氏試驗是一種利用細(xì)菌營養(yǎng)缺陷型的回復(fù)突變來檢測環(huán)境或食品中是否存在化學(xué)致癌劑的簡便有效方法。（三致作用：致癌致畸致突變）實驗菌種：鼠傷寒沙門氏菌的組氨酸營養(yǎng)缺陷型試驗方法：是在含待測可疑“三致” 物的

13、試樣中,加入鼠肝勻漿液, 經(jīng)一段時間保溫后,吸入濾紙片中, 然后將濾紙片放置于上述平板中央。經(jīng)培養(yǎng)后,出現(xiàn)結(jié)果。有三種結(jié)果在平板上無大量菌落產(chǎn)生, 說明試樣中不含誘變劑;在紙片周圍有一抑制圈, 其外周出現(xiàn)大量菌落, 說明試樣中有某種高濃度的誘變劑存在; 在紙片周圍長有大量菌落, 說明試樣中有濃度適當(dāng)?shù)恼T變劑存在。加入鼠肝勻漿的作用：因許多化學(xué)物質(zhì)原先并非誘變劑或致癌劑,只有在進(jìn)入機(jī)體并在肝臟的解毒過程中, 受到肝細(xì)胞中一些加氧酶的作用,才形成有害的環(huán)氧化物或其他激活態(tài)化合物, 故試驗中先要加入鼠肝勻漿液保溫;3. 營養(yǎng)缺陷型突變株的篩選方法與篩選營養(yǎng)缺陷型突變株有關(guān)的 3 類培養(yǎng)基:基本培養(yǎng)基

14、(MM,符號為 - ):僅能滿足某微生物的野生型菌株生長所需要的最低成分的組合培養(yǎng)基,稱基本培養(yǎng)基。完全培養(yǎng)基(CM,符號為 + ):凡可滿足一切營養(yǎng)缺陷型菌株營養(yǎng)需要的天然或半組合培養(yǎng)基, 稱完全培養(yǎng)基。補充培養(yǎng)基(SM,符號為 A或B等):凡只能滿足相應(yīng)的營養(yǎng)缺陷型突變株生長需要的組合或半組合培養(yǎng)基, 稱補充培養(yǎng)基。與營養(yǎng)缺陷型突變有關(guān)的 3 類遺傳型個體:野生型:指從自然界分離到的任何微生物在其發(fā)生人為營養(yǎng)缺陷突變前的原始菌株。營養(yǎng)缺陷型:野生型菌株經(jīng)誘變劑處理后, 由于發(fā)生了喪失某酶合成能力的突變,因而只能在加有該酶合成產(chǎn)物的培養(yǎng)基中才能生長, 這類突變菌株稱為營養(yǎng)缺陷型突變株。原養(yǎng)型

15、:一般指營養(yǎng)缺陷型突變株經(jīng)回復(fù)突變或重組后產(chǎn)生的菌株,其營養(yǎng)要求在表型上與野生型相同。(3)營養(yǎng)缺陷型的篩選方法誘變劑處理淘汰野生型：通過抗生素法或者菌絲過濾法即可檢出缺陷型：夾層培養(yǎng)法: 先在培養(yǎng)皿底部倒一薄層不含菌的基本培養(yǎng)基（MM）,待凝,添加一層混有經(jīng)誘變劑處理菌液的基本培養(yǎng)基（含菌MM）,其上再澆一薄層不含菌的基本培養(yǎng)基（MM）,遂成“三明治”狀。經(jīng)培養(yǎng)后,對首次出現(xiàn)的菌落用記號筆一一標(biāo)在皿底。然后, 再向皿內(nèi)倒上一薄層第四層培養(yǎng)基完全培養(yǎng)基（CM）。再經(jīng)培養(yǎng)后,全長出形態(tài)較小的新菌落, 它們多數(shù)都是營養(yǎng)缺陷型突變株。限量補充培養(yǎng)法逐個檢出法影印平板法鑒定缺陷型:可借生長譜法進(jìn)行。第

16、三節(jié) 基因重組與雜交育種真核微生物中的有性雜交、準(zhǔn)性雜交、原生質(zhì)體融合以及原核生物中的轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)導(dǎo)、接合和原生質(zhì)體融合等。一.原核生物的基因重組特點為: 片段性,僅一小段DNA序列參與重組;單向性,即從供體菌向受體菌(或從供體基因組向受體基因組)作單方向轉(zhuǎn)移;轉(zhuǎn)移機(jī)制獨特而多樣, 如接合、轉(zhuǎn)化和轉(zhuǎn)導(dǎo)等。(一)轉(zhuǎn)化1.定義：受體菌直接吸收供體菌的DNA片段而獲得后者部分遺傳性狀的現(xiàn)象,稱為轉(zhuǎn)化或轉(zhuǎn)化作用。通過轉(zhuǎn)化方式而形成的雜種后代,稱轉(zhuǎn)化子。2.感受態(tài)：凡能發(fā)生轉(zhuǎn)化, 其受體細(xì)胞必須處于感受態(tài)。感受態(tài)是指受體細(xì)胞最易接受外源 DNA 片段并能實現(xiàn)轉(zhuǎn)化的一種生理狀態(tài)。(二)轉(zhuǎn)導(dǎo)1.定義：通過缺陷噬

17、菌體的媒介,把供體細(xì)胞的小片段 DNA 攜帶到受體細(xì)胞中,通過交換與整合, 使后者獲得前者部分遺傳性狀的現(xiàn)象, 稱為轉(zhuǎn)導(dǎo)。2.普遍轉(zhuǎn)導(dǎo)：通過極少數(shù)完全缺陷噬菌體對供體菌基因組上任何小片段DNA進(jìn)行“誤包” , 而將其遺傳性狀傳遞給受體菌的現(xiàn)象,稱為普遍轉(zhuǎn)導(dǎo)。3.局限轉(zhuǎn)導(dǎo)：指通過部分缺陷的溫和噬菌體把供體菌的少數(shù)特定基因攜帶到受體菌中, 并與后者 的基因組整合、重組, 形成轉(zhuǎn)導(dǎo)子的現(xiàn)象。(三)接合1. 定義：供體菌 (“雄性”) 通過性菌毛與受體 菌(“雌性”)直接接觸, 把 F 質(zhì)粒或其攜帶的不同長度的核基因組片段傳遞給后者, 使后者獲得若干新遺傳性狀的現(xiàn)象, 稱為接合。2. E .coli的

18、4種接合型菌株根據(jù)F質(zhì)粒在細(xì)胞內(nèi)的存在方式, 可 把 E .coli 分成 4 種不同接合型菌株(1) F+ 菌株 即“雄性”菌株, 指細(xì)胞 內(nèi)存在一至幾個F質(zhì)粒, 并在細(xì)胞表面著 生一至幾條性菌毛的菌株。(2)F-菌株 即“雌性”菌株, 指細(xì)胞中無 F 質(zhì)粒、細(xì)胞表面也無性菌毛的菌株。它可 通過與F+菌株或F菌株的接合而接受供體菌的F質(zhì)?；騀質(zhì)粒, 從而使自己轉(zhuǎn)變成“雄性”菌株; 也可通過接合接受來自Hfr菌株的一部分或一整套核基因組 DNA(3)Hfr 菌株: 在Hfr菌株細(xì)胞中, 因F質(zhì)粒已從游離態(tài)轉(zhuǎn)變成在核染色體組特定位點上的整合態(tài), 故Hfr菌株與F -菌株相接合后, 發(fā)生基因重組的

19、頻率要比單純用F+與F-接合后的頻率高出數(shù)百倍。二.真核微生物的基因重組(一)有性雜交有性雜交, 一般指不同遺傳型的 兩性細(xì)胞間發(fā)生的接合和隨之進(jìn)行的染色體重組,進(jìn)而產(chǎn)生新遺傳型后代的一種育種技術(shù)。(二)準(zhǔn)性雜交1.定義：準(zhǔn)性生殖是一種類似于有性生殖,但比它更為原始的兩性生殖方式, 這是一種在同種而不同菌株的體細(xì)胞間發(fā)生的融合,它可不借減數(shù)分裂而導(dǎo)致低頻率基因重組并產(chǎn)生重組子。2.準(zhǔn)性生殖過程(1)菌絲聯(lián)結(jié)：它發(fā)生于一些形態(tài)上沒有區(qū)別、但在遺傳型上卻有差別的同種不同菌株的體細(xì)胞(單倍體)間。發(fā)生菌絲聯(lián)結(jié)的頻率是極低的。 (2)形成異核體：兩個遺傳型有差異的體細(xì)胞經(jīng)菌絲聯(lián)結(jié)后,先發(fā)生質(zhì)配,使兩個

20、單倍體核集中到同一細(xì)胞中, 于是形成了雙相的異核體。異核體能獨立生活。 (3)核融合：或稱核配, 指在異核體中的兩個細(xì)胞核在某 種條件下,低頻率地產(chǎn)生雙倍體雜合子核的現(xiàn)象。(4)體細(xì)胞交換和單倍體化：體細(xì)胞交換，即體細(xì)胞中染色體間的交換,也稱有絲分裂交換。3.準(zhǔn)性雜交育種(1)選擇親本：即選擇來自不同菌株的合適的營養(yǎng)缺陷型作為準(zhǔn)性雜交的親本。(2)強(qiáng)制異合：即用人為的方法強(qiáng)制兩個營養(yǎng)缺陷型的親本菌株形成互補的異核體。(3)移單菌落：將平板上長出的單菌落移種到基本培養(yǎng)基-的斜面上。(4)驗穩(wěn)定性：指設(shè)法檢驗獲得的菌株究竟是一種不穩(wěn)定的異核體,還是穩(wěn)定的雜合二倍體。(5)促進(jìn)變異：把上述穩(wěn)定菌株所

21、產(chǎn)生的分生孢子處理,以促使其發(fā)生染色體交換、染色體在子細(xì)胞中分配不均、染色體缺失或畸變以及發(fā)生點突變等變化,從而使分離后的雜交子代(單倍體雜合子)進(jìn)一步增加新性狀變異的可能性。第四節(jié) 菌種的衰退、復(fù)壯和保藏一.菌種的衰退與復(fù)壯衰退：是指由于自發(fā)突變的結(jié)果, 而使某物種原有一系列生物學(xué)性狀發(fā)生量變或質(zhì)變的現(xiàn)象。具體表現(xiàn)有: 原有形態(tài)性狀變得不典型了生長速度變慢,產(chǎn)生的孢子變少代謝產(chǎn)物生產(chǎn)能力下降,即出現(xiàn)負(fù)變致病菌對宿主侵染力的下降,對外界不良條件包括低溫、高溫或噬菌體侵染等抵抗能力的下降等等。 狹義的復(fù)壯僅是一種消極的措施，指的是在菌種已發(fā)生衰退的情況下, 通過純種分離和測定典型性狀、生產(chǎn)性能等

22、指標(biāo),從已衰退的群體中篩選出少數(shù)尚未退化的個體, 以達(dá)到恢復(fù)原菌株固有性狀的相應(yīng)措施。廣義的復(fù)壯則應(yīng)是一項積極的措施, 即在菌種的典型特征或生產(chǎn)性狀尚未衰退前,就經(jīng)常有意識地采取純種分離和生產(chǎn)性狀的測定工作, 以期從中選擇到自發(fā)的正變個體。(一)衰退的防止1.控制傳代次數(shù)2.創(chuàng)造良好的培養(yǎng)條件3.利用不易衰退的細(xì)胞傳代4.采用有效的菌種保藏方法(二)菌種的復(fù)壯1.純種分離法2.通過宿主體復(fù)壯3.淘汰已衰退的個體二.菌種的保藏1.定義：通過適當(dāng)?shù)姆椒ㄊ沟梦⑸锬軌蜷L期存活，并保持原種的微生物學(xué)性狀穩(wěn)定不變的一類措施。2.原理：首先應(yīng)挑選典型菌種或典型培養(yǎng)物的優(yōu)良純種, 最好保藏它們的分生孢子、芽

23、孢等體眠體;其次,還要創(chuàng)造一個有利于它們長期休眠的良好環(huán)境條件。3.七種常用的方法：冰箱保藏法（斜面）冰箱保藏法（半固體）石蠟油封保藏法甘油懸液保藏法砂土保藏法冷凍干燥保藏法：干燥，低溫，無氧，有保護(hù)劑液氮超低溫保藏法：超低溫（-196）各大菌種保藏單位普遍使用冷凍干燥保藏法和液氮超低溫保藏法微生物的生態(tài)1.土壤中微生物的數(shù)目：盡管土壤的類型眾多, 其中各種微生物的含量變化很大, 但一般來說, 在每克耕作層土壤中,各種微生物含量之比大體有一個 10 倍系列的遞減規(guī)律:細(xì)菌(108 ) > 放線菌(107 , 孢子) > 霉菌(106 , 孢子) > 酵母菌 (105 ) &g

24、t; 藻類 (104 ) > 原生動物(103)2.微生物與生物環(huán)境間的關(guān)系：互生：兩種可單獨生活的生物, 當(dāng)它們在一起時, 通過各自的代謝活動而有利于對方, 或偏利于一方的生活方式,稱為互生。共生：是指兩種生物共居在一起, 相互分工合作、相依為命, 甚至達(dá)到難分難解、合二為一的極其緊密的一種相互關(guān)系。寄生：一般指一種小型生物生活在另一種較大型生物的體內(nèi)(包括細(xì)胞內(nèi))或體表, 從中奪取營養(yǎng)并進(jìn)行生長繁殖,同時使后者蒙受損害甚至被殺死的一種相互關(guān)系。前者稱為寄生物,后者則稱作宿主或寄主。拮抗：指由某種生物所產(chǎn)生的特定代謝產(chǎn)物可抑制他種生物的生長發(fā)育甚至殺死它們的一種相互關(guān)系。捕食：一般指一

25、種大型的生物直接捕捉、吞食另一種小型生物以滿足其營養(yǎng)需要的相互關(guān)系。習(xí)題：一.填空題1.證明核酸是遺傳物質(zhì)基礎(chǔ)的是三個經(jīng)典實驗分別是：_、_和_。2.細(xì)菌的質(zhì)粒種類很多，其中接合性質(zhì)粒如_，抗藥性質(zhì)粒如_，產(chǎn)細(xì)菌素質(zhì)粒如_，誘癌質(zhì)粒如_等。3.常見的“三致”是指_、_和_，目前檢出某試樣是否含有三致作用的減簡便。高效的試驗是_。4.與營養(yǎng)缺陷突變有關(guān)的三類培養(yǎng)基是_、_和_。其符號分別是_，_和_。5.檢出營養(yǎng)缺陷型一般有四種方法：_，_，_和_。6.艾姆斯試驗中用的菌株是_的_缺陷型菌株，通過_突變可以測定待測樣品中“三致”物質(zhì)的存在。7.普遍轉(zhuǎn)導(dǎo)與局限轉(zhuǎn)導(dǎo)的區(qū)別在于：普遍轉(zhuǎn)導(dǎo)噬菌體是_噬菌

26、體，而局限轉(zhuǎn)導(dǎo)噬菌體是_噬菌體。普遍轉(zhuǎn)導(dǎo)噬菌體能夠轉(zhuǎn)移供體菌的_基因，而局限轉(zhuǎn)導(dǎo)噬菌體只能轉(zhuǎn)移供體菌的_基因。8.在大腸桿菌接合過程中，有四種獨特的菌株參與，他們是_、_、_和_。9.目前國際上代表性菌種保藏機(jī)構(gòu)如美國的ATCC僅使用兩種保藏方法，即_和_。二.判斷題1.原養(yǎng)型是野生型的別稱，兩者不僅表型相同，而且遺傳型也一致。2.受體細(xì)胞實現(xiàn)DNA轉(zhuǎn)化，必須先出現(xiàn)感受態(tài)。3.5-尿溴吡啶是以堿基是以堿基顛換的方式引起基因突變的。4.微生物菌種退化的問題在工業(yè)生產(chǎn)中有時會遇到，一旦菌種退化，生產(chǎn)效率下降，更重要的是：退化菌種群體中再也找不到生產(chǎn)能力正常的細(xì)胞。5.準(zhǔn)性雜交中能夠?qū)е碌皖l率的基因

27、重組是因為這些真菌的雜合二倍體細(xì)胞在進(jìn)行減數(shù)分裂時，同源染色體進(jìn)行配對而發(fā)生染色體之間交換的結(jié)果。6.在篩選營養(yǎng)缺陷型時，在完全培養(yǎng)基中加入青霉素，可以有效殺死大量生長繁殖的野生型菌株，從而達(dá)到濃縮營養(yǎng)缺陷型的作用。7.普遍轉(zhuǎn)導(dǎo)可將供體菌的任何基因轉(zhuǎn)導(dǎo)，故可使受體菌成為獲得全套供體菌基因組的轉(zhuǎn)導(dǎo)子。8.轉(zhuǎn)化和轉(zhuǎn)導(dǎo)都不需要供體菌和受體菌的完整細(xì)胞直接接觸而進(jìn)行的。9、當(dāng)大腸桿菌的F+和F-菌株發(fā)生結(jié)合時，F(xiàn)因子由供體菌進(jìn)入受體菌，從而使原F+變成了F-，而原F-變成了F+。10.粘質(zhì)沙雷氏菌在25下形成血紅色菌落，但置于37下則形成無色菌落，這說明該菌種發(fā)生了衰退。11.C+G%值差別越遠(yuǎn)的兩種生物，其親緣關(guān)系必然十分疏遠(yuǎn)。12.親緣關(guān)系越近的微生物，其堿基序列也越接近，故核酸分子雜交的同源性百分值就越高。13.微生物的