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1、微生物感染引起的細(xì)微生物感染引起的細(xì)胞形態(tài)學(xué)改變胞形態(tài)學(xué)改變北京康博眾醫(yī)療科技有限公司北京康博眾醫(yī)療科技有限公司 眾所周知,查找感染機(jī)體的病眾所周知,查找感染機(jī)體的病原微生物,向來是屬于醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)范原微生物,向來是屬于醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)范疇。泌尿生殖道的炎癥是臨床最為疇。泌尿生殖道的炎癥是臨床最為常見的感染,醫(yī)生們通常要采集病常見的感染,醫(yī)生們通常要采集病變部位的標(biāo)本,送交檢驗(yàn)科進(jìn)行鏡變部位的標(biāo)本,送交檢驗(yàn)科進(jìn)行鏡檢檢培養(yǎng)培養(yǎng)單克隆單克隆dnadna核酸等檢查,核酸等檢查,為臨床診斷尋求實(shí)驗(yàn)室佐證。但是,為臨床診斷尋求實(shí)驗(yàn)室佐證。但是,這樣便會帶來二個問題:這樣便會帶來二個問題:第一、醫(yī)生必須首先提出你所
2、懷疑第一、醫(yī)生必須首先提出你所懷疑的病原微生物是哪一種或哪幾種?的病原微生物是哪一種或哪幾種?否則實(shí)驗(yàn)室將要對婦科常見的否則實(shí)驗(yàn)室將要對婦科常見的1010多多種微生物全部進(jìn)行檢查,不但費(fèi)時、種微生物全部進(jìn)行檢查,不但費(fèi)時、費(fèi)事,給病人增加了高昂的費(fèi)用。費(fèi)事,給病人增加了高昂的費(fèi)用。同時,這種選擇還與醫(yī)生的經(jīng)驗(yàn)、同時,這種選擇還與醫(yī)生的經(jīng)驗(yàn)、水平密切相關(guān),隨機(jī)性很大,容易水平密切相關(guān),隨機(jī)性很大,容易出現(xiàn)漏檢、錯檢和誤診。出現(xiàn)漏檢、錯檢和誤診。第二、當(dāng)化驗(yàn)結(jié)果為陽性時,它只第二、當(dāng)化驗(yàn)結(jié)果為陽性時,它只是表明送檢標(biāo)本中含有這種或這些是表明送檢標(biāo)本中含有這種或這些微生物,但并不說明它們是否侵入微生
3、物,但并不說明它們是否侵入了局部細(xì)胞。也就是說,無論培養(yǎng)、了局部細(xì)胞。也就是說,無論培養(yǎng)、單克隆、單克隆、dnadna、還是核酸技術(shù)都不、還是核酸技術(shù)都不能證明所提示的病原微生物是存在能證明所提示的病原微生物是存在于細(xì)胞內(nèi)還是細(xì)胞外。然而,在很于細(xì)胞內(nèi)還是細(xì)胞外。然而,在很多情況下,婦科和泌尿生殖道感染多情況下,婦科和泌尿生殖道感染的診斷依據(jù)是:只有存在于細(xì)胞內(nèi)的診斷依據(jù)是:只有存在于細(xì)胞內(nèi)的微生物才能確定為病原微生物,的微生物才能確定為病原微生物,才需要給予治療。才需要給予治療。因?yàn)閶D科和泌尿生殖道常見的病原因?yàn)閶D科和泌尿生殖道常見的病原微生物廣泛存在于自然界和人體體微生物廣泛存在于自然界和
4、人體體表,如支原體、衣原體、加德納桿表,如支原體、衣原體、加德納桿菌、菌、hpv hpv 等。不良衛(wèi)生習(xí)慣,不清等。不良衛(wèi)生習(xí)慣,不清潔用水,共用衛(wèi)生潔具等,可以使?jié)嵱盟?,共用衛(wèi)生潔具等,可以使這些微生物進(jìn)入泌尿生殖道。醫(yī)生這些微生物進(jìn)入泌尿生殖道。醫(yī)生送檢的標(biāo)本中可能含有多種微生物,送檢的標(biāo)本中可能含有多種微生物,這些微生物都可以導(dǎo)致培養(yǎng)這些微生物都可以導(dǎo)致培養(yǎng)、 dnadna、單克隆單克隆、核酸反應(yīng)呈現(xiàn)陽性。核酸反應(yīng)呈現(xiàn)陽性。那么誰是真正的病原微生物?鑒別那么誰是真正的病原微生物?鑒別的標(biāo)準(zhǔn)是:誰進(jìn)入了細(xì)胞并導(dǎo)致了的標(biāo)準(zhǔn)是:誰進(jìn)入了細(xì)胞并導(dǎo)致了細(xì)胞的形態(tài)學(xué)改變。這是泌尿生殖細(xì)胞的形態(tài)學(xué)改變
5、。這是泌尿生殖道感染與其它部位感染診斷不同之道感染與其它部位感染診斷不同之處。這也正是培養(yǎng)和分子生物學(xué)技處。這也正是培養(yǎng)和分子生物學(xué)技術(shù)不能回答的問題。一項(xiàng)或多項(xiàng)檢術(shù)不能回答的問題。一項(xiàng)或多項(xiàng)檢查出現(xiàn)陽性,只表明標(biāo)本中有這種查出現(xiàn)陽性,只表明標(biāo)本中有這種或這幾種微生物存在,僅此而已?;蜻@幾種微生物存在,僅此而已。是否進(jìn)入了細(xì)胞?則不得而知。是否進(jìn)入了細(xì)胞?則不得而知。臨床醫(yī)師希望實(shí)驗(yàn)室提供確切臨床醫(yī)師希望實(shí)驗(yàn)室提供確切的信息:是哪種(或哪幾種)微生的信息:是哪種(或哪幾種)微生物侵入了細(xì)胞并引起了細(xì)胞的病理物侵入了細(xì)胞并引起了細(xì)胞的病理改變,從而導(dǎo)致臨床病征的產(chǎn)生。改變,從而導(dǎo)致臨床病征的產(chǎn)生
6、??墒?,這就超出了培養(yǎng)和分子生物可是,這就超出了培養(yǎng)和分子生物學(xué)的技術(shù)范圍。學(xué)的技術(shù)范圍。細(xì)胞病理學(xué)工作者通過回顧性研究細(xì)胞病理學(xué)工作者通過回顧性研究與前瞻性研究,已經(jīng)能夠從細(xì)胞核與前瞻性研究,已經(jīng)能夠從細(xì)胞核和細(xì)胞漿的形態(tài)變化,準(zhǔn)確地識別和細(xì)胞漿的形態(tài)變化,準(zhǔn)確地識別和鑒別眾多微生物對細(xì)胞的侵犯。和鑒別眾多微生物對細(xì)胞的侵犯。特別是宮頸細(xì)胞微生物感染的觀察特別是宮頸細(xì)胞微生物感染的觀察研究,進(jìn)展尤為顯著,幾種常見的、研究,進(jìn)展尤為顯著,幾種常見的、危害嚴(yán)重的泌尿生殖道病原微生物,危害嚴(yán)重的泌尿生殖道病原微生物,只要侵入細(xì)胞,造成了細(xì)胞損害,只要侵入細(xì)胞,造成了細(xì)胞損害,都能從細(xì)胞形態(tài)學(xué)上加以
7、辨認(rèn)和識都能從細(xì)胞形態(tài)學(xué)上加以辨認(rèn)和識別,為臨床醫(yī)師提供確切的病原微別,為臨床醫(yī)師提供確切的病原微生物診斷依據(jù)。生物診斷依據(jù)。這些成就被寫入全這些成就被寫入全球百余名著名病理專家、學(xué)者共同球百余名著名病理專家、學(xué)者共同制定的制定的 “ “tbstbs診斷系統(tǒng)(標(biāo)準(zhǔn))診斷系統(tǒng)(標(biāo)準(zhǔn))”中,為世界各國推廣應(yīng)用。中,為世界各國推廣應(yīng)用。 用觀察細(xì)胞形態(tài)學(xué)的方法來診用觀察細(xì)胞形態(tài)學(xué)的方法來診斷宮頸與泌尿生殖道微生物感染,斷宮頸與泌尿生殖道微生物感染,是是2020世紀(jì)細(xì)胞病理學(xué)的重大進(jìn)展,世紀(jì)細(xì)胞病理學(xué)的重大進(jìn)展,它是近代培養(yǎng)技術(shù)和分子生物學(xué)技它是近代培養(yǎng)技術(shù)和分子生物學(xué)技術(shù)的補(bǔ)充與完善,其臨床意義非同
8、術(shù)的補(bǔ)充與完善,其臨床意義非同一般,從此:一般,從此:當(dāng)病人出現(xiàn)宮頸或泌尿生殖道炎癥當(dāng)病人出現(xiàn)宮頸或泌尿生殖道炎癥時,醫(yī)生們無須再去考慮是何種病時,醫(yī)生們無須再去考慮是何種病原微生物引起?選擇哪種技術(shù)來尋原微生物引起?選擇哪種技術(shù)來尋找病原微生物?只需要將宮頸標(biāo)本找病原微生物?只需要將宮頸標(biāo)本送交細(xì)胞病理室,病理醫(yī)師會逐一送交細(xì)胞病理室,病理醫(yī)師會逐一地對細(xì)胞進(jìn)行觀察分析,為臨床提地對細(xì)胞進(jìn)行觀察分析,為臨床提供全面、準(zhǔn)確的診斷信息。按照供全面、準(zhǔn)確的診斷信息。按照tbstbs系統(tǒng)要求,送檢標(biāo)本還將同時系統(tǒng)要求,送檢標(biāo)本還將同時進(jìn)行宮頸癌和癌前病變的篩查,給進(jìn)行宮頸癌和癌前病變的篩查,給出規(guī)范
9、的診斷報(bào)告。出規(guī)范的診斷報(bào)告。在人們的傳統(tǒng)觀念中,細(xì)胞病理形在人們的傳統(tǒng)觀念中,細(xì)胞病理形態(tài)學(xué)用于查找癌細(xì)胞是無可置疑的,態(tài)學(xué)用于查找癌細(xì)胞是無可置疑的,而作為細(xì)胞感染微生物的診斷方法,而作為細(xì)胞感染微生物的診斷方法,還是逐漸被接受和認(rèn)可的。還是逐漸被接受和認(rèn)可的。其實(shí),細(xì)胞病理學(xué)者經(jīng)過長期觀察其實(shí),細(xì)胞病理學(xué)者經(jīng)過長期觀察研究,早就發(fā)現(xiàn)泌尿生殖道病原微研究,早就發(fā)現(xiàn)泌尿生殖道病原微生物在侵入粘膜細(xì)胞之后,造成細(xì)生物在侵入粘膜細(xì)胞之后,造成細(xì)胞的損害,往往使細(xì)胞核或細(xì)胞漿胞的損害,往往使細(xì)胞核或細(xì)胞漿發(fā)生形態(tài)變異。不同的病原微生物發(fā)生形態(tài)變異。不同的病原微生物只侵犯特定的細(xì)胞,所引起的細(xì)胞只侵
10、犯特定的細(xì)胞,所引起的細(xì)胞形變又各不相同且都有各自的形態(tài)形變又各不相同且都有各自的形態(tài)特征。病理醫(yī)師就可以根據(jù)這些獨(dú)特征。病理醫(yī)師就可以根據(jù)這些獨(dú)特的形態(tài)特征來發(fā)現(xiàn)和診斷造成感特的形態(tài)特征來發(fā)現(xiàn)和診斷造成感染的病原微生物。早些年,這種方染的病原微生物。早些年,這種方法應(yīng)用還不夠普遍,逐步形成系統(tǒng)法應(yīng)用還不夠普遍,逐步形成系統(tǒng)和規(guī)范則是近和規(guī)范則是近1010年左右的事情。實(shí)年左右的事情。實(shí)踐證明其敏感性和特異性極高,得踐證明其敏感性和特異性極高,得到了電鏡、分子生物學(xué)技術(shù)等的證到了電鏡、分子生物學(xué)技術(shù)等的證實(shí),并深受臨床的好評與歡迎。實(shí),并深受臨床的好評與歡迎。例如:衣原體感染,它侵犯柱狀上例如
11、:衣原體感染,它侵犯柱狀上皮細(xì)胞,在細(xì)胞漿內(nèi)形成包涵體,皮細(xì)胞,在細(xì)胞漿內(nèi)形成包涵體,形態(tài)特異;又如,加德納桿菌,它形態(tài)特異;又如,加德納桿菌,它只侵犯表層鱗狀上皮細(xì)胞,在其中只侵犯表層鱗狀上皮細(xì)胞,在其中大量密布,形如線索狀,通稱線索大量密布,形如線索狀,通稱線索細(xì)胞;再如,單純皰疹病毒在感染細(xì)胞;再如,單純皰疹病毒在感染細(xì)胞后,它促使細(xì)胞融合,造成細(xì)細(xì)胞后,它促使細(xì)胞融合,造成細(xì)胞核相互堆集在一起,形成多核細(xì)胞核相互堆集在一起,形成多核細(xì)胞;還有,乳突瘤狀病毒感染,侵胞;還有,乳突瘤狀病毒感染,侵入鱗狀上皮細(xì)胞核,除核發(fā)生形變?nèi)膑[狀上皮細(xì)胞核,除核發(fā)生形變外,核周胞漿空化,這就是頗具特外,
12、核周胞漿空化,這就是頗具特色的、能提示乳突瘤狀病毒感染的色的、能提示乳突瘤狀病毒感染的挖空細(xì)胞;還有,巨細(xì)胞病毒感染挖空細(xì)胞;還有,巨細(xì)胞病毒感染出現(xiàn)的核周包涵體,稱之為出現(xiàn)的核周包涵體,稱之為“貓頭貓頭鷹眼鷹眼”征,等等。這些形態(tài)特征與征,等等。這些形態(tài)特征與所感染的病原微生物一一對應(yīng),當(dāng)所感染的病原微生物一一對應(yīng),當(dāng)發(fā)生多重感染時,各自的形態(tài)學(xué)特發(fā)生多重感染時,各自的形態(tài)學(xué)特征仍然保持不變。在感染得到控制征仍然保持不變。在感染得到控制后,細(xì)胞的形態(tài)改變便會漸行消失后,細(xì)胞的形態(tài)改變便會漸行消失與恢復(fù)。這是繼宮頸癌之后,細(xì)胞與恢復(fù)。這是繼宮頸癌之后,細(xì)胞病理學(xué)取得的又一重大進(jìn)展。病理學(xué)取得的
13、又一重大進(jìn)展。正常鱗狀上皮細(xì)胞和柱狀上皮細(xì)胞正常鱗狀上皮細(xì)胞和柱狀上皮細(xì)胞巨核細(xì)胞病毒包涵體巨核細(xì)胞病毒包涵體皰疹病毒感染:出現(xiàn)多核巨細(xì)胞皰疹病毒感染:出現(xiàn)多核巨細(xì)胞皰疹病毒感染:單核細(xì)胞有核內(nèi)病毒包涵體皰疹病毒感染:單核細(xì)胞有核內(nèi)病毒包涵體加德納桿菌感染:大量球桿菌覆蓋鱗狀上皮細(xì)胞加德納桿菌感染:大量球桿菌覆蓋鱗狀上皮細(xì)胞正常鱗狀上皮細(xì)胞,這是細(xì)胞病理學(xué)圖正常鱗狀上皮細(xì)胞,這是細(xì)胞病理學(xué)圖像,前面幾張的是組織病理學(xué)圖像像,前面幾張的是組織病理學(xué)圖像 。正常柱狀上皮細(xì)胞正常柱狀上皮細(xì)胞( (分泌型分泌型) )纖毛型柱狀上皮細(xì)胞纖毛型柱狀上皮細(xì)胞挖空細(xì)胞(提示挖空細(xì)胞(提示hpvhpv感染)感染
14、)挖空細(xì)胞(提示挖空細(xì)胞(提示hpvhpv感染)感染)霉菌孢子及菌絲霉菌孢子及菌絲陰道毛滴蟲陰道毛滴蟲線索細(xì)胞(加德線索細(xì)胞(加德納桿菌感染)納桿菌感染)單純皰疹病毒感染(核融合)單純皰疹病毒感染(核融合)放絲菌感染放絲菌感染衣原體包涵體衣原體包涵體衣原體包涵體衣原體包涵體單純皰疹病毒感染(核融合)單純皰疹病毒感染(核融合)從以上的圖像可以看出,微生物感從以上的圖像可以看出,微生物感染細(xì)胞后,細(xì)胞都會發(fā)生形態(tài)學(xué)改染細(xì)胞后,細(xì)胞都會發(fā)生形態(tài)學(xué)改變,不同的微生物引起細(xì)胞形態(tài)改變,不同的微生物引起細(xì)胞形態(tài)改變又各不相同,這就有利于我們依變又各不相同,這就有利于我們依據(jù)細(xì)胞形態(tài)學(xué)特征來識別和診斷泌據(jù)細(xì)
15、胞形態(tài)學(xué)特征來識別和診斷泌尿生殖道病原微生物感染。尿生殖道病原微生物感染。然而,在實(shí)際工作中,病理醫(yī)師往然而,在實(shí)際工作中,病理醫(yī)師往往會發(fā)現(xiàn)這種方法檢出的陽性率并往會發(fā)現(xiàn)這種方法檢出的陽性率并不理想,常常低于不理想,常常低于50%50%,也就是說,也就是說可能會有可能會有 一半以上病人漏診,對一半以上病人漏診,對此,臨床醫(yī)師當(dāng)然不能接受。為什此,臨床醫(yī)師當(dāng)然不能接受。為什么出現(xiàn)這種情況呢?原因有兩條:么出現(xiàn)這種情況呢?原因有兩條: 1 1、制片和染色過程中,容易造成、制片和染色過程中,容易造成病變細(xì)胞脫落、丟失;病變細(xì)胞脫落、丟失;2 2、普通光學(xué)顯微鏡的放大倍率有、普通光學(xué)顯微鏡的放大倍率
16、有限,而病理醫(yī)師常規(guī)的觀察倍率是限,而病理醫(yī)師常規(guī)的觀察倍率是100100400400倍,這種大視場、低倍率倍,這種大視場、低倍率不利于識別細(xì)胞微細(xì)的形態(tài)變化。不利于識別細(xì)胞微細(xì)的形態(tài)變化。細(xì)胞觀察常用的細(xì)胞觀察常用的巴氏染色法巴氏染色法須須1212道工序,耗時道工序,耗時3030分鐘分鐘繁瑣的染色步驟易造成病變細(xì)胞脫落、丟失繁瑣的染色步驟易造成病變細(xì)胞脫落、丟失大視場,低倍率,不利于細(xì)胞形態(tài)細(xì)節(jié)觀察大視場,低倍率,不利于細(xì)胞形態(tài)細(xì)節(jié)觀察其實(shí),要解決不染色和提高顯微鏡其實(shí),要解決不染色和提高顯微鏡放大倍率這兩個問題,有一種成熟放大倍率這兩個問題,有一種成熟技術(shù)可以采用。技術(shù)可以采用。上世紀(jì)九十
17、年代初,美國斯坦上世紀(jì)九十年代初,美國斯坦褔褔大大學(xué)學(xué)m.r bradfordm.r bradford教授推出了他潛心教授推出了他潛心研制的一種高放大倍率、高清晰度研制的一種高放大倍率、高清晰度顯微鏡,人稱:布氏顯微鏡,放大顯微鏡,人稱:布氏顯微鏡,放大倍率可達(dá)倍率可達(dá)1500015000倍。主要用來觀察倍。主要用來觀察新鮮血滴中細(xì)胞形態(tài)和有形成份,新鮮血滴中細(xì)胞形態(tài)和有形成份,從而對受檢者進(jìn)行健康評估,即所從而對受檢者進(jìn)行健康評估,即所謂的謂的“亞健康檢查亞健康檢查”。這種顯微鏡這種顯微鏡另一個特點(diǎn)就是標(biāo)本無須染色,便另一個特點(diǎn)就是標(biāo)本無須染色,便能看清細(xì)胞的大體結(jié)構(gòu)和細(xì)胞內(nèi)受能看清細(xì)胞的大
18、體結(jié)構(gòu)和細(xì)胞內(nèi)受感染的微生物、寄生蟲等。由于沒感染的微生物、寄生蟲等。由于沒有染色,所以看到的細(xì)胞和微生物有染色,所以看到的細(xì)胞和微生物都是活的,在鏡下或熒屏上呈現(xiàn)活都是活的,在鏡下或熒屏上呈現(xiàn)活動物像。動物像。布氏顯微鏡布氏顯微鏡是在相差技術(shù)是在相差技術(shù)的基礎(chǔ)上,結(jié)合近代高新技術(shù)研的基礎(chǔ)上,結(jié)合近代高新技術(shù)研制制而而成,它成,它是相差的一大進(jìn)步。是相差的一大進(jìn)步。我國在我國在1010年前已經(jīng)開發(fā)出布氏顯微鏡的同年前已經(jīng)開發(fā)出布氏顯微鏡的同類產(chǎn)品類產(chǎn)品“高倍率顯微鏡高倍率顯微鏡”。我們。我們便將泌尿生殖道微生物檢查移植到便將泌尿生殖道微生物檢查移植到高倍率顯微鏡下進(jìn)行,在全國數(shù)十高倍率顯微鏡下進(jìn)行,在全國數(shù)十家醫(yī)療單位的推廣應(yīng)用中,受得充家醫(yī)療單位的推廣應(yīng)用中,受得充分肯定和普遍歡迎。近年,我們又分肯定和普遍歡迎。近年,我們又根據(jù)宮頸細(xì)胞病理學(xué)的進(jìn)展與要求,根據(jù)宮頸細(xì)胞病理學(xué)的進(jìn)展與要求,研制研制出活細(xì)胞制片機(jī),與高倍率顯出活細(xì)胞制片機(jī),與高倍率顯微鏡組合,成為一種有別于傳統(tǒng)方微鏡組合,成為一種有別于傳統(tǒng)方法的全新細(xì)胞病理
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