流感病毒臨床標(biāo)本的采集方法、運(yùn)輸、保存鄭

1、u流感病毒分離成功與否很大程度上取決于臨床標(biāo)本的質(zhì)量，及其保存運(yùn)輸?shù)拳h(huán)節(jié)u多數(shù)標(biāo)本取自患者上呼吸道鼻咽腔，其次為氣管和支氣管分泌物及尸檢組織 采樣對象：流感樣病例（沒有服用過抗病毒藥物 ）、人禽流感待查病例 流感樣病例流感樣病例: :發(fā)熱（體溫發(fā)熱（體溫3838），伴咳嗽或咽痛），伴咳嗽或咽痛之一者，而缺乏其它的實(shí)驗(yàn)室確定診斷依據(jù)之一者，而缺乏其它的實(shí)驗(yàn)室確定診斷依據(jù) 采集時(shí)間：病人發(fā)病后的頭三天 常用的采樣液有：普通肉湯（只用于雞胚，對細(xì)胞有毒性），ph 7.4-7.6的hanks液，eagels培養(yǎng)液或水解乳蛋白溶液 采樣液應(yīng)包含有一定量的蛋白質(zhì)和抗菌素 標(biāo)本采集后應(yīng)立即放入適當(dāng)?shù)牟蓸右褐?/p>

2、低溫保存 抗生素名稱終濃度慶大霉素0.1mg/ml抗真菌素2ug/ml 常用的標(biāo)本種類：常用的標(biāo)本種類： 咽拭子 鼻拭子 漱口液 鼻咽吸取物 鼻洗液1 1、咽拭子、咽拭子 用滅菌棉簽（最好用塑料柄、尼龍拭子，因?yàn)槟绢^柄棉拭子會(huì)抑制pcr實(shí)驗(yàn)）擦拭雙側(cè)咽扁桃體及咽后壁，將棉簽頭部浸入3-4ml采集液中，尾部棄去采咽拭子的器材和容器采咽拭子的器材和容器2 2、鼻拭子、鼻拭子 將滅過菌干凈的棉簽輕輕插入鼻道內(nèi)鼻腭處，停留片刻后緩慢轉(zhuǎn)動(dòng)退出，以同一拭子擦拭兩側(cè)鼻孔。將棉簽頭部浸入3-4ml采集液中，尾部棄去采鼻拭子的器材和容器采鼻拭子的器材和容器 3 3、鼻咽吸取物、鼻咽吸取物 用與負(fù)壓泵相連的收集器

3、從鼻咽部抽取粘液。先將收集器頭部插入鼻腔，接通負(fù)壓，旋轉(zhuǎn)收集器頭部并緩慢退出。收集抽取的粘液，并用采樣液5ml涮洗收集器3次 內(nèi)有hepa膜進(jìn)風(fēng)道鼻咽吸取裝置鼻咽吸取裝置出風(fēng)道正確錯(cuò)誤錯(cuò)誤不要觸摸病人的臉不要觸摸病人的臉!4 4、漱口液、漱口液 用10 ml生理鹽水漱喉。漱時(shí)讓患者頭部微后仰，發(fā)“噢”聲，讓生理鹽水在咽部轉(zhuǎn)動(dòng)。然后，用平皿或燒杯收集洗液5 5、鼻洗液、鼻洗液 患者取坐姿，頭微后仰，用移液管將5 ml生理鹽水注入一側(cè)鼻孔，囑患者同時(shí)發(fā)k音以關(guān)閉咽腔。然后讓患者低頭使生理鹽水流出，用平皿或燒杯收集洗液。重復(fù)此過程洗兩側(cè)鼻孔 操作要細(xì)心，嚴(yán)防標(biāo)本間交叉污染，要做好自我保護(hù) 采集標(biāo)本要

4、有一定力度 標(biāo)本采集后應(yīng)迅速至于冰上或者4 以下保存，因?yàn)榱鞲胁《緦岷苊舾?標(biāo)本管上寫明：醫(yī)院名稱，標(biāo)本號(hào)，患者姓名，性別， 采樣日期 標(biāo)本采集后盡量在24小時(shí)內(nèi)送到實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行病毒分離。24小時(shí)內(nèi)未能進(jìn)行病毒分離的標(biāo)本應(yīng)放-70 或以下 新鮮的臨床采集標(biāo)本 應(yīng)在4條件下，24小時(shí)內(nèi)運(yùn)送至全國流感監(jiān)測網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室；未能24小時(shí)內(nèi)送至實(shí)驗(yàn)室的，應(yīng)置-70或以下保存 凍存的臨床采集標(biāo)本 應(yīng)在凍存的條件下，低溫送至實(shí)驗(yàn)室 新鮮的標(biāo)本送至實(shí)驗(yàn)室后，病毒分離標(biāo)本應(yīng)盡快進(jìn)行接種分離，24小時(shí)內(nèi)能進(jìn)行接種的可置于4保存，如未能接種應(yīng)置-70或以下保存 凍存的標(biāo)本送到實(shí)驗(yàn)室后，24小時(shí)內(nèi)能進(jìn)行病毒分離的，可以放

5、置4保存。如未能分離的標(biāo)本應(yīng)置-70或以下保存 含聚丙烯纖維的拭子的采集標(biāo)本含聚丙烯纖維的拭子的采集標(biāo)本:先將含聚丙烯纖維的拭子在管壁反復(fù)擠壓后取出 鼻洗液標(biāo)本鼻洗液標(biāo)本: :充分振蕩標(biāo)本管，將粘液打碎。置4待其自然沉淀510分鐘，取上清5 ml。上清液可直接接種或低溫保存 鼻咽吸取液：鼻咽吸取液：用干凈滅菌過的毛細(xì)吸管，在無菌條件下反復(fù)吹打收集的溶液，以便打碎粘液，同樣置4待其自然沉淀510分鐘，取上清5 ml。上清液可直接接種或低溫保存 肺組織材料：肺組織材料：肺組織材料在無菌條件下，用高壓滅菌的乳缽研磨后，用生理鹽水配成20%懸液，2000rpm離心10min，取上清加入抗生素。接種細(xì)胞

6、或雞胚 臨床標(biāo)本處理后，將原始標(biāo)本分為三份:一份（40）用于雞胚接種，一份（30）用于mdck細(xì)胞接種，一份（30）保存待復(fù)核用。對于病毒分離陽性的標(biāo)本70保存6個(gè)月 寄送流感毒株標(biāo)本的包裝要求v病毒標(biāo)本必須放在大小適合的帶螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的塑料管里，擰緊。蓋上蓋子后不應(yīng)有泄漏，推薦使用螺口細(xì)胞保存管保存和運(yùn)輸流感病毒標(biāo)本v直接在塑料管上用油性記號(hào)筆寫明病毒的名稱，同時(shí)也將病毒標(biāo)本有關(guān)信息填在“流感/人禽流感毒株送檢單”內(nèi)，送檢單應(yīng)單獨(dú)放在防水的袋子里v將裝標(biāo)本的密封袋放入專用運(yùn)輸箱內(nèi)（或疫苗冷藏包），放入冰排，然后以柔軟物質(zhì)填充，內(nèi)襯具吸水和緩沖能力的材料v標(biāo)本運(yùn)輸：異地運(yùn)輸可以采用郵寄或快遞的方法1采集人禽流感臨床樣本時(shí)，采集人員需要做好個(gè)人防護(hù)，戴防護(hù)口罩、帽子、護(hù)目鏡、手套、防護(hù)衣、鞋套。2. 人禽流感標(biāo)本的運(yùn)送、接收和保藏應(yīng)當(dāng)符合我國病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例（國務(wù)院424號(hào)令）的有關(guān)要求。3人禽流感臨床標(biāo)本的處理、分裝在生物安全二級(jí)的實(shí)驗(yàn)室里進(jìn)行，采用生物安全三級(jí)防護(hù)。4人禽流感病毒分離、培養(yǎng)、純化，微量中和試驗(yàn)等實(shí)驗(yàn)必須在生物安全三級(jí)（bsl-3級(jí)）實(shí)驗(yàn)室里操作。5臨床標(biāo)本病