型別檢測PowerPoint972003幻燈片

1、hpv檢測在宮頸癌檢測在宮頸癌診治中的應(yīng)用診治中的應(yīng)用胡飛紅在2003年，香港天后級藝人，梅艷芳梅艷芳身患癌癥，在她剛剛過完40歲生日后離開人世宮頸癌與hpv關(guān)系豪森，德國人，2008年10月諾貝爾獎獲得者研究了人乳頭狀瘤病毒與宮頸癌的關(guān)系研究了人乳頭狀瘤病毒與宮頸癌的關(guān)系 hpv hpv型別與宮頸病變型別與宮頸病變hpv病毒通過皮膚病毒通過皮膚表面的微小創(chuàng)口侵表面的微小創(chuàng)口侵入入更多的更多的hpv病毒侵入到病毒侵入到創(chuàng)口周圍組織并進(jìn)入上創(chuàng)口周圍組織并進(jìn)入上皮細(xì)胞皮細(xì)胞病毒復(fù)制hpv檢測在宮頸癌診治中的臨床意義 常用hpv檢測方法的分析1.細(xì)胞學(xué)檢查傳統(tǒng)巴氏涂片（傳統(tǒng)巴氏涂片（cvcv）液基薄

2、層細(xì)胞學(xué)技術(shù)液基薄層細(xì)胞學(xué)技術(shù)(tct)(tct)2.2.組織學(xué)檢查（組織學(xué)檢查（肉眼觀察。陰道鏡觀察。組織檢查）3.3.感染組織中感染組織中hpvhpv蛋白的檢測蛋白的檢測4.4. hpv hpv感染的血清學(xué)檢查感染的血清學(xué)檢查檢測人體血清中是否存在有針對hpv產(chǎn)生的抗體，通過免疫學(xué)方法進(jìn)行檢測。檢測人體血清中是否存在有針對hpv產(chǎn)生的抗體，通過免疫學(xué)方法進(jìn)行檢測。hpv基因檢測5.5. hpv hpv基因組檢測基因組檢測 1. 1. 基于基于pcrpcr靶向擴(kuò)增靶向擴(kuò)增 2. 2. 基于基于pcrpcr產(chǎn)物分析產(chǎn)物分析, ,雜交分析雜交分析1?；趐cr靶向擴(kuò)增2.基于基于pcr產(chǎn)物產(chǎn)物分

3、析分析2.基于pcr產(chǎn)物雜交分析（4）基因芯片技術(shù)雜交捕獲法雜交捕獲一代（hc-)試驗(yàn)可檢測9 種高危型hpv ,包括16 、18 、31 、33 、35 、45 、51 、52 和56 。所用的反應(yīng)載體是試管；雜交捕獲二代試驗(yàn)(hc)原來的試管法改為96 孔平板法，能同時檢測13 種高危型hpv (16 、18 、31 、33 、35 、39 、 45 、51 、52 、56 、58 、59 和68) 。雜交捕獲法雜交捕獲法捕獲雜交法捕獲雜交法（通過對病毒dna解鏈,雜交捕獲,光信號放大獲取結(jié)果）基本實(shí)驗(yàn)步驟如下： 1. 樣本dna 雙鏈被釋放并分解為核苷酸單鏈; 2. dna 單鏈與rna

4、 探針結(jié)合為rnadna 雜交體; 3. 特異性抗體將rnadna 雜交體固定在試管壁或微孔壁上; 4. 結(jié)合有堿性磷酸酶的多個第二抗體與rnadna 雜交體結(jié)合,使信號放大; 5. 堿性磷酸酶使酶底物發(fā)光,判讀光的強(qiáng)弱可確定堿性磷酸酶的含量,從而確定rnadna 雜交體的含量。hcii唯一通過fda批準(zhǔn)可在臨床使用的hpv技術(shù)dna裂解 rna-dna雜交 抗體捕獲 化學(xué)發(fā)光 計算機(jī)判讀新發(fā)展的一項診斷技術(shù)，在hpv分型中用寡核苷酸原位合成法，原理是將疾病的特征性基因片段或致病病原體片段固定芯片上，制成診斷芯片，提取患者樣本中核酸行標(biāo)記作探針，利用探針與芯片雜交，掃描雜交結(jié)果，判斷基因型分型

5、是否被感染，可診斷hpv潛在感染，行早期預(yù)防基因芯片技術(shù)hpvhpv基因芯片檢測基因芯片檢測總結(jié)?？傊?，目前的hpv分型檢測技術(shù)主要基于聚合酶鏈反應(yīng)。hpv特定型別在宮頸疾病發(fā)展中的重要作用，考慮到hpv型譜的多樣性和多重性hpv聯(lián)合感染的高發(fā)率，準(zhǔn)確的hpv檢測顯得尤為重要。不斷尋求更準(zhǔn)確，快速有效的檢測技術(shù)。注：如何對待hpv感染？1.hpv 1.hpv 感染較為常見感染較為常見2.2.多數(shù)多數(shù) hpv hpv 可以被清除可以被清除,“,“一過性一過性”感染不致宮頸病感染不致宮頸病變變 3.3.少數(shù)持續(xù)性感染會引發(fā)宮頸病變少數(shù)持續(xù)性感染會引發(fā)宮頸病變 4.hpv4.hpv致致cinicini、ciniicinii、ciniiiciniii到浸潤癌需要相當(dāng)長的到浸潤癌需要相當(dāng)長的時間，一般是時間，一般是810810年年5.5.致宮頸癌的是高危型致宮頸癌的是高危型hpvhpv6.hpv(+)6.hpv(+)只說明是一種感染，并非是一種疾病只說明是一種感染，并非是一種疾病 7.7.沒有沒有hpvhpv感染可以不得宮頸癌感染可以不得宮頸癌 , , 因此避免因此避免hpvhpv感染感染可以避免發(fā)生宮頸癌可以避免發(fā)生宮頸癌 8.8.目前治療目前治療 hpv