斑腿泛樹蛙Polypedates megacephalus骨骼系統(tǒng)的研究斑腿泛樹蛙骨骼系統(tǒng)的研究

1、II斑腿泛樹蛙Polypedates megacephalus骨骼系統(tǒng)的研究斑腿泛樹蛙骨骼系統(tǒng)的研究復旦大學 王凱抄襲必糾 僅供參考摘要本文采用透明骨骼標本染色法，對斑腿泛樹蛙的骨骼系統(tǒng)進行了較全面的研究，對各部分的形態(tài)結構進行了詳盡的描述。研究發(fā)現(xiàn)舌骨前角無前突，舌骨體翼狀突形狀不規(guī)則，前端略膨大；劍胸骨末端稍有缺刻；指（趾）骨末端骨骼為“Y”字形。關鍵詞：透明骨骼標本染色法、斑腿泛樹蛙、骨骼系統(tǒng) Polypedates megacephalus system studySummary Using transparent skeleton staining, Polypedates mega

2、cephalus system for a more thorough research, detailed description of the structure of each part. Study finds processus anterior Horn of hyoid bone without prior to, wing-like body of hyoid bone an irregular shape, the front end slightly dilated; no obvious notched end of sternum; finger (toe) bone

3、ends for "y"-shaped bone. Keywords: transparent staining, Polypedates megacephalus, skeletal system第 14 頁 六盤水師范學院本科畢業(yè)論文（設計） 文獻綜述：斑腿泛樹蛙骨骼系統(tǒng)的研究概況斑腿泛樹蛙（Polypedates megacephalus）在分類上屬于兩棲綱（Amphibian）無尾目（Anura）樹蛙科(Rhacophoridae)泛樹蛙屬 (Polypedates)，體淡棕色，身體背部為淺棕色。背前部多有“X”形深色斑，股后有網狀花斑，指間無蹼，第四趾外側蹼達遠端

4、第二、第三關節(jié)下瘤之間，雄蛙有一對咽側下內聲囊1。常在水塘邊的灌叢中活動，南方各省分布較為廣泛。該蛙捕食多種無脊椎動物和害蟲，并具有一定的藥用價值。關于斑腿泛樹蛙的研究主要有早期胚胎發(fā)育2以及形態(tài)特征3等方面，近幾年國內雖然有少數(shù)骨骼系統(tǒng)45方面的報道，但并未出現(xiàn)較全面的獨立的研究報道。透明骨骼標本染色法6是近年來采用較多的，用于動物學骨骼研究 、比較解剖學研究 、生物動物學實驗等。關于兩棲類的骨骼系統(tǒng)研究現(xiàn)狀，已經報道的有粗皮蛙7、澤蛙8、中國林蛙9、太行隆肛蛙10、三種姬蛙11以及華西雨蛙景東亞種12的骨骼系統(tǒng)。骨骼的形態(tài)結構特征是兩棲動物分類的重要依據(jù)之一，本文通過對斑腿泛樹蛙骨骼系統(tǒng)的

5、研究，旨在為無尾兩棲類的形態(tài)學提供基礎資料。1材料與方法1.1材料1.1.1標本斑腿泛樹蛙成體5只（3只為，2只），于2012年6月采自貴州省六盤水市六枝特區(qū)牛場鄉(xiāng)，均為酒精浸制標本。標本號20126262011012012626201102201262620110320126262011042012626201105平均值體長43.8639.0547.5956.3758.0448.98頭長14.2113.6416.2618.6119.0616.36頭寬13.1814.1516.0319.0119.2316.32眼間距5.064.975.876.186.615.74鼓膜3.523.313.61

6、3.924.073.69前臂及手長26.9920.1333.0136.5838.1730.98前臂寬3.982.514.094.294.493.87后肢長70.9662.9677.8792.2594.8279.77脛長21.9418.1722.8627.0528.1323.63跗足長30.1427.5934.2835.5936.5532.83吻長6.115.216.427.277.486.50鼻間距3.883.444.194.965.174.33眼徑6.074.496.196.846.976.11足長18.3913.7919.1122.1123.7419.43雌雄注：以上數(shù)據(jù)單位均為mm并采用

7、四舍五入法保留到兩位小數(shù)。1.1.2其它材料（1）藥品梯度酒精（25%、50%、75%、100%）、碳酸鎂、0.3 mol/ L 氫氧化鉀、阿利辛藍、冰乙酸、90%酒精、梯度丙三醇（25%、50%、75%、100%）、茜素紅、無水乙醇、含0.1%石炭酸的丙三醇溶液等。（2）儀器設備游標卡尺、解剖刀、解剖針、燒杯、培養(yǎng)皿、鑷子、玻璃棒、解剖盤、量筒、廣口瓶、解剖鏡、照相機等。1.2方法選取斑腿泛樹蛙的成體標本，采用透明骨骼標本染色法制成完整骨骼標本和散片骨骼標本。相對于其它方法1315，本方法易于分辨軟、硬骨，成本相對較低，可避免解剖過程中對骨骼的人為損傷，骨骼不宜丟失，因此往往能得到完整的骨骼

8、，提供相對精確的數(shù)據(jù)。標本制作完成之后進行進行觀察、拍照。其中所使用的照相機型號：Canon EOS 550D，解剖鏡拍照系統(tǒng)型號：SMZ140-N2LED。1.2.1具體實驗步驟（1）收集標本：從標本室選取實驗所用標本5只斑腿泛樹蛙成體的酒精浸制標本，并進行編號。（2）解剖：記錄雌雄，測量。剝皮并去除內臟（保留胃前部）、眼睛以及有色素沉淀的結締組織。（3）固定：本次實驗所用標本為酒精浸制標本，故可直接進行下一步。（4）軟骨染色：標本用蒸餾水沖洗3次，置于軟骨染色液中，一般浸泡2至7天，本次試驗浸泡了7天，表層軟骨染成藍色。（5）脫色：將標本放入升序梯度脫色液中，1天換液一次，大約4天后肌肉變

9、成白色。（6）硬骨染色：先把標本晾干，然后放入硬骨染色液；10天后，肌肉變成了凍狀，硬骨也染成了紅色。（7）透明：將染好色的標本放入升序梯度透明液中，1天換液一次。（8）保存：將標本浸入保存液中，以便長期保存。（9）后期處理：對于完成的標本進行剝制，剔除多余的肌肉，使軟骨和硬骨清晰可見；之后對骨骼進行拍照，且每張照片都要做好比例尺；最后用Ps軟件對圖片進行處理。2結果與分析 斑腿泛樹蛙的骨骼系統(tǒng)主要由主軸骨骼和附肢骨骼兩部分組成。2.1主軸骨骼（圖2.17） 分為頭骨和脊柱。2.1.1頭骨（圖2.11） 分為顱骨和咽骨。（1）顱骨 亦稱腦顱。外枕骨（圖2.21）、（圖2.31） 一對，位于腦顱

10、的最后方。左右環(huán)接，中間有一大孔，稱枕骨大孔（圖2.21），里面為顱腔，腦髓經此大孔與脊髓相通。在大孔的外下方有兩個枕髁（圖2.23）、（圖2.32），與寰椎連接。額頂骨（圖2.24） 是由額、頂二骨合并成的一對扁骨，形如不規(guī)則長方形，位于外枕骨前方，介于兩眼眶之間，是構成顱腔頂壁的主要部分。前端兩側覆蓋至蝶篩骨的1/2處；后緣兩端向外側擴展，與前耳骨前緣相接。兩骨中央有一縫，稱矢狀縫。 蝶篩骨（圖2.25）、（圖2.33）、（圖2.43） 位于兩眼眶之間，介于鼻骨的后部和額頂骨的前方，構成顱腔前壁，組成眼眶的內側壁，副蝶骨的前端嵌入其后端。 副蝶骨（圖2.310）、（圖2.44） 大型中央扁

11、骨，位于額頂骨下方，承托著顱腔腹壁。形如倒“T”字，前端尖細如劍鋒。鼻骨（圖2.26） 一對，位于鼻腔頂端，額頂骨的前方，是構成鼻腔背壁的主要成分。略呈短棒狀，二骨彼此分離，呈“ ”形。 鼻間軟骨 位于兩鼻孔之間。為一大塊軟骨板，軟鼻囊底部與其兩側邊緣下方相連接。犁骨（圖2.34）、（圖2.41） 一對，位于上頜骨后方以及鼻骨的下方。骨片薄而扁平，為三出輻射狀。外側邊緣的3個突起呈銳角，依次指向前頜骨，上頜骨的中前部以及上頜骨后側方，并與腭骨相接。第二個突起上著生有犁骨齒（圖2.35）、（圖2.42），每側710枚，呈“”型或近似“ ”型。顱內軟骨 介于副蝶骨與額頂骨之間的內側面，為一軟骨板，

12、其中央兩側的大孔為視神經出口。 前耳骨（圖2.27）、（圖2.38） 一對，分別位于額頂骨基部兩側，外枕骨的側前方，構成耳囊前壁和眼眶后壁。（2）咽骨 又稱咽顱。上顎 a.前頜骨 一對，位于頭骨前端中央，外側與上頜骨相連接，亦稱為頜間骨。背面上方正中，各具一巨大突起，稱為面突，與鼻間軟骨相接，左右二鼻孔并以此為界。每骨內側中央有半圓形凹陷成。下緣生有細齒。b.上頜骨（圖2.210） 一對，前端較闊，與前頜骨相連，后端較為尖細，僅與方軛骨相接。中央部分則與腭骨和翼骨相連，是構成上顎外緣的主要骨架。腹面有溝，其下緣生有細齒。c.翼骨（圖2.36） 一對，位于鱗骨下方，呈“人”字形3分支結構，中間一

13、支附于前耳骨基部，前支與腭骨、上頜骨相接，后支與方軛骨相關節(jié)。d.腭骨（圖2.37） 一對，位于眼窩前緣，分別水平橫列于犁骨后方，形如棒狀，中間略微有一定弧度。內端與蝶篩骨的前端相鄰，外端與上頜骨的中段相連接。e.方軛骨（圖2.28）、（圖2.311） 一對，位于上頜骨后方兩側，且前端尖細，后端鈍圓，與下頜相關節(jié)，并與軟方骨、翼骨和鱗骨相連。無細齒。f.軟方骨（圖2.312） 一對，位于左右頜弓末端，為桿狀軟骨，用以懸掛下顎。其一端與翼骨和鱗骨相連，另一端與方軛骨相關節(jié)。g.鱗骨（圖2.212） 一對，位于眼眶后方外側，呈倒“人”字形，分為3支，前支較尖銳，指向眼眶后外緣，后支末端貼方軛骨，內

14、支延伸接前耳骨。下頜骨（圖2.5） 由對稱的下頜弓構成。 a.頤骨（圖2.53） 一對，橫列于下頜最前緣，位于上頜弓上頜骨的下方。短小，其前端略膨大，且中間有軟骨相連接。 b.隅骨（2.51） 亦稱隅夾板骨圖，一對。其外側被麥克爾氏軟骨包被?；窟_下頜關節(jié)，與方軛骨相關節(jié)；前端尖細，并延伸至齒骨內面1/2處。在靠近兩骨片基部的內壁上，各具有一個朝向內上方的突起，稱做喙狀突（圖2.55）。c.齒骨（圖2.52） 一對，長而薄，前端與頤骨相接，后端覆蓋隅骨。 d.麥克爾氏軟骨（圖2.54） 一對，是未經骨化的扁薄軟骨，一般終生存在。前段被齒骨所掩蓋，中段遮蓋在隅骨外側，末端與方軛骨相接。舌器（圖2

15、.6） 又稱舌骨，位于喉頭軟骨前方。 a.耳柱骨 一對，細棒狀。內端稍粗，與橢圓窗相貼；外端較細，止于鼓膜（圖2.29）中央。b.舌骨前角（圖2.62） 一對，軟骨，細長且彎曲。由舌骨體前緣伸出，之后轉向后方，再經過舌骨體的外側后，又轉向背前方，末端與橢圓窗相連接。在前角的曲轉處無前突。c.舌骨后角（圖2.65） 亦稱甲狀突，一對，呈“八”字形。位于舌骨體末端，為舌器中唯一硬骨，僅末端少許為軟骨。d.舌骨體（圖2.61） 為一塊透明軟骨，且近似矩形。前端兩側伸出兩個不規(guī)則突起，稱為翼狀突（圖2.63），其前端略膨大；后部外緣向后方伸出兩個細小而尖銳的突起，稱為后側突（圖2.64）。喉頭軟骨（圖

16、2.7） 位于舌器后方。a.環(huán)狀軟骨（圖2.72） 位于杓狀軟骨的下方，為一圈軟骨。左右兩側各伸出一小支，稱為肺突，左右小支末端不規(guī)則，牽系著左右肺囊。其下環(huán)中間向后伸出一突起，稱為棘突（圖2.73），以系膜緊貼于食道外腹壁。b.杓狀軟骨（圖2.71） 一對，軟骨略呈弧形，并組成中空的氣室，中間裂縫為喉門，每塊骨的頂端向內凹陷。2.1.2脊柱（圖2.12）、（圖2.8）位于軀干背部的體壁中，由10枚椎骨銜接而成。除第一、第十椎骨外，其余8枚椎骨都有橫突，橫突末梢均有軟骨。(1)頸椎（圖2.81） 又稱寰錐，即第一椎骨。椎體較薄，無前關節(jié)突和橫突。錐孔略呈圓形。前端兩側具關節(jié)窩，枕髁憑此與脊柱相

17、連接。（2）胸椎（圖2.811） 包括第二、三、四椎骨，前凹型椎體。第二椎骨（圖2.82）橫突較為平直。第三椎骨（圖2.83）橫突明顯長于其它椎體，且大而寬厚，兩側末端略向上傾斜，橫突末梢軟骨稍大，且向后伸長。第四椎骨（圖2.84）橫突向后傾斜。（3）腰椎（圖2.812） 第五至第八椎骨，橫突較窄。第五椎骨（圖2.85）的橫突向后，第六椎骨（圖2.86）的橫突稍向后，第七、八椎骨（圖2.87、8）橫突則平置。第八椎骨為雙凹型椎體。（4）薦錐（圖2.89） 即第九椎骨，前端凸起，以此連接第八椎骨，后端具兩個圓形小突起，和尾椎相接。橫突大而寬厚，為所有椎體中最大，稍向后方傾斜。無棘突。（5）尾椎（

18、圖2.810） 亦稱尾桿骨，第十椎骨，為一細長骨棒。前端有兩個凹面，與薦椎相接。前端略粗寬厚且有髓腔，向后逐漸變窄變細，末端具軟骨。中部有一直立的聳嵴，從前往后逐漸變低而消失?；績蓚扔幸粚π】?，稱為尾桿孔，第十對脊神經從其中穿出。2.2附肢骨骼（圖2.18）包括肩帶、腰帶、前肢骨、后肢骨。2.2.1肩帶（圖2.13）、（圖2.9）亦稱前肢帶，位于頭骨的后方。除胸骨外，其余骨骼皆為左右對稱結構。為典型固胸型肩帶。(1)胸骨 上胸骨（圖2.96） 位居胸骨的前端，為一軟骨薄板，船錨狀。下端與肩胸骨相連接。肩胸骨（圖2.97） 位于上胸骨的后方，呈倒“Y”字形，硬骨，其后端連接鎖骨。正胸骨（圖2.

19、99） 又稱中胸骨，為棒狀硬骨，兩端寬，往中央漸窄，后端不及前端寬，前端接烏喙骨后方正中央，末端接后胸骨。劍胸骨（圖2.910） 亦稱后胸骨，與正胸骨后端相接，呈倒傘形。比上胸骨略寬但短于上胸骨。末端稍有缺刻。(2)肩胛區(qū) 上肩胛骨（圖2.91） 位于肩帶的背面，遮蓋脊柱的前四塊椎骨，扁平而薄。內端和肩胛骨相連接，彎曲有一定角度，為硬骨。末端向上彎曲繞至胸椎橫突背面，為半透明軟骨。肩胛骨（圖2.92） 為扁而長的硬骨，兩端較寬，往中間漸窄。內端與烏喙骨、鎖骨共同構成肩臼（圖2.911），外端與上肩胛骨相連。(3)喙區(qū) 鎖骨（圖2.93） 左右平置，為棒狀膜骨，內端接上喙骨，外端與肩胛骨相接，參

20、與構成肩臼。前喙骨（圖2.94）介于胸骨和肩胛骨之間，與鎖骨內側緊貼，為一細長軟骨。上喙骨（圖2.98） 左右并列于鎖骨和烏喙骨之間，為細條形軟骨。且左右上喙骨愈合于中腹線上，因此為典型固胸型肩帶。烏喙骨（圖2.95） 位于鎖骨后方，為棒狀短骨。內端較窄接上喙骨，外端較寬與鎖骨、上喙骨構成喙孔，并與肩胛骨、鎖骨形成肩臼。2.2.2腰帶（圖2.15）、（圖2.10）、（圖2.11）又稱后肢帶，從背面看略呈“V”字形，三塊骨骼愈合處形成髖臼，連接后肢，形成髖關節(jié)。(1)髂骨（圖2.101） 又稱腸骨，一對，桿狀長形骨，向前伸出兩根狹長骨棒，基本平行與尾桿骨。其背面有嵴，稱為髂嵴。前端借結締組織與薦

21、椎橫突相連，左右髂骨向后延伸呈三角狀，最后于腹中線合并。前端具軟骨。構成髖臼（圖2.104）的上半區(qū)。(2)坐骨（圖2.102） 一對，位于腰帶腹部后方，左右坐骨合并，略呈橢圓形。前端與髂骨后緣相接，其內側構成髖臼。(3)恥骨（圖2.103） 位于腰帶腹面，由一對鈣化軟骨合并而成。參與構成髖臼。2.2.3前肢骨骼（圖2.14）、（圖2.12）多為長骨，腕部有細小骨塊。（1）肱骨（圖2.121） 又稱上臂，一對，略呈棒狀，是前肢骨骼中最長的一根。前端大而圓稱為肱骨頭（圖2.123），與肩臼相連接，形成肩關節(jié)。末端骨髁（圖2.122）為球形，并與橈尺骨前端形成肘關節(jié)。（2）橈尺骨（圖2.124）

22、一對，位于前臂，由橈尺二骨合并而成，在其骨干近末端1/2處縱淺溝區(qū)分出橈骨部和尺骨部，內側為橈骨部（圖2.125），外側為尺骨部（圖2.126）?；课⑽枷荩c肱骨末端球型骨髁形成肘關節(jié)。（3）腕骨（圖2.127）、（圖2.13） 一對，各有6塊，排成兩列，每列3枚，均為鈣化軟骨。前列由內向外依次為手舟骨（橈側腕骨）（圖2.131）、月骨（圖2.132）和錐狀骨（圖2.133）。遠端由內而外依次為大多角骨（圖2.136）、小多角骨（圖2.135）和頭溝骨（圖2.134）。頭溝骨由頭狀骨和溝骨合并而成，為腕骨最大。（4）掌骨（圖2.128） 一對，各有5根。第一根極短，無指骨，又稱原拇指，第二

23、至第五根長度大約相等。第1掌骨的形狀因性別而異，雌性的大多細小且為鈣化軟骨；而雄性的卻較大，且許多已骨化成硬骨，附著于第二掌骨內側，清晰可見。第四掌骨末端1/3處有一片狀突起。（5）指骨（圖2.129） 第一指缺指骨，第二指和第三指各有2枚指骨，第四指和第五指各有指骨3枚。其中以第四指骨為最長，第五指骨次之，往后依次為第三、第二指骨。指骨末兩節(jié)有介間軟骨。第二至第五指骨末端均有“Y”字形骨（圖2.1210），與肌肉、皮膚形成吸盤。2.2.4后肢骨骼（圖2.16）、（圖2.14）(1)股骨（圖2.141） 位于股部，為一對微微彎曲的棒狀長骨。前端具有球形股骨頭，與髖臼相關節(jié)，構成髖關節(jié)。遠端具骨

24、髁。在前段腹面，有一隆起。(2)脛腓骨（圖2.142） 一對，為脛骨、腓二骨合并而成，長棒狀，較股骨略長。脛骨和腓骨在骨干中愈合為一溝，內側為脛骨部（圖2.143），外側為腓骨部（圖2.144）。(3)跗骨（圖2.147） 位于跗部，一對，各4塊，排成兩列。近端一列，內側為距骨（即脛跗骨）（圖2.145）、（圖2.152），外側為跟骨（即腓跗骨）（圖2.146）、（圖2.151），二骨在中間分離，兩端合并，有稠密的軟骨骺覆蓋在其末端表面。遠端一列有兩塊骨，距骨末端與超長趾之間有一較大骨髁，叫足舟骨（圖2.153），足舟骨內側的一些小骨愈合為一塊骨稱為骰骨（圖2.154）。(4)蹠骨（圖2.14

25、8） 一對，每側各有5根細長的骨節(jié)。其中第四蹠骨最長，依次為第五蹠、第三蹠、第二至，第一蹠骨最短。(5)趾骨（圖2.149） 共五枚，其中第一趾骨最短，第四趾骨最長。第一趾和第二趾各有兩枚趾骨，第三趾和第五趾各有三枚趾骨，第四趾有四枚趾骨。每趾、蹠關節(jié)間都有軟骨骺。趾骨末節(jié)均有梯形介間軟骨。趾末端骨呈“Y”形（圖2.1410）。(6)距（圖2.155） 又稱超常數(shù)趾骨，位于第一趾的內側，為三小枚骨。由近端向遠端逐漸變小，第三枚極小，與皮膚、肌肉形成內蹠突。前兩枚硬骨化，第三枚為軟骨。 圖2.1整體背面觀 圖2.2頭骨背面圖 圖2.3頭骨腹面圖 圖2.4部分頭骨腹面觀 圖2.5 下頜骨 圖2.6

26、 舌器 圖2.7喉頭軟骨 圖2.8 脊柱背面圖 圖2.9 肩帶 圖2.10 腰帶側面圖 圖2.11 腰帶正面圖 圖2.12 右前肢 圖2.13 腕部 圖2.14 右后肢 圖2.15跗蹠部圖中所用標本編號均為2012626201102；“”代表1mm3討論與小結本文對斑腿泛樹蛙的骨骼系統(tǒng)進行了比較全面的研究。其骨骼系統(tǒng)與已報道的其他蛙類大體相同，但也存在某些差異，主要研究結果分析如下：斑腿泛樹蛙的腦顱屬平顱型，頭長與頭寬基本相等。外枕骨中央具枕骨大孔，腦髓經此大孔與脊髓相通。額頂骨中央有一矢狀縫。副蝶骨為大型中央扁骨，呈倒“T”形，前端尖細如劍鋒，于已發(fā)表的大樹蛙相同，而黑點樹蛙則前端鈍圓。鼻骨

27、呈“ ”形。犁骨齒呈“”型或近似“ ”型，而大樹蛙犁骨齒近似“ ”型，黑點樹蛙犁骨齒呈“”型。前耳骨參與構成耳囊前壁和眼眶后壁。前頜骨背面上方正中具面突，內側中央凹陷成半圓形，下緣生有細齒。上頜骨構成上顎外緣。翼骨呈“人”字形3分支結構。軟方骨用以懸掛下顎。鱗骨呈倒“人”字形。隅骨前端尖細，基部具喙狀突。斑腿泛樹蛙的舌器與粗皮蛙和中國林蛙相比較，舌骨前角無前突。舌骨體為一塊近似矩形的透明軟骨，與黑點樹蛙相比，后者舌骨體前端中央有半圓形凹陷；前端兩側伸出翼狀突，形狀不規(guī)則，前端略膨大，而黑點樹蛙翼狀突呈扇形。環(huán)狀軟骨為一圈軟骨，左右兩側各伸出一小支為肺突，肺突末端不規(guī)則；下環(huán)中間向后伸出一棘突，而黑點樹蛙則無棘突。 斑腿泛樹蛙的脊柱由一枚頸椎、三枚胸椎、四枚腰椎、一枚薦錐和一枚尾椎組成。椎骨多數(shù)由椎孔、椎體、椎弓、橫突、棘突和關節(jié)突六部分構成。其中頸椎無前關節(jié)突和橫突；薦錐無棘突，但橫突大而寬厚，且向后方傾斜；第八椎體為雙凹型，屬參差型椎體。尾椎呈細桿狀，末端具軟骨。斑腿泛樹蛙肩帶為固胸型；上胸骨呈