腸桿菌科細菌檢驗課件

1、目的要求 掌握常見腸桿菌科細菌的培養(yǎng)特性和形態(tài)染色特征掌握常見腸桿菌科細菌的培養(yǎng)特性和形態(tài)染色特征 掌握常見腸桿菌科細菌的鑒定技術(shù)掌握常見腸桿菌科細菌的鑒定技術(shù) 掌握腸桿菌科微量生化管編碼鑒定技術(shù)掌握腸桿菌科微量生化管編碼鑒定技術(shù) 掌握腸桿菌科臨床常見致病菌的血清學(xué)凝集技術(shù)掌握腸桿菌科臨床常見致病菌的血清學(xué)凝集技術(shù)實驗材料一、菌種：一、菌種：大腸埃希菌、沙門菌、普通變形桿菌、肺炎克雷伯菌（大腸埃希菌、沙門菌、普通變形桿菌、肺炎克雷伯菌（BAP、MAC、SS）二、生化管：二、生化管： KIAKIA、半固體、腸桿菌科微量生化管編碼鑒定管（、半固體、腸桿菌科微量生化管編碼鑒定管（1 1套套/2/2人

2、）人）三、診斷血清：三、診斷血清：沙門菌多價沙門菌多價四、其他：四、其他： 玻片、鹽水、接種環(huán)（針）、革蘭染液、玻片、鹽水、接種環(huán)（針）、革蘭染液、3%H2O23%H2O2、氧化酶試劑、氧化酶試劑、液體石蠟液體石蠟實驗內(nèi)容一、菌落觀察：一、菌落觀察：大腸埃希菌、沙門菌、普通變形桿菌、肺炎克雷伯菌大腸埃希菌、沙門菌、普通變形桿菌、肺炎克雷伯菌（BAPBAP、MACMAC、SSSS） 菌落形態(tài)、顏色、溶血現(xiàn)象、遷徙生長現(xiàn)象觀察與描述菌落形態(tài)、顏色、溶血現(xiàn)象、遷徙生長現(xiàn)象觀察與描述二、形態(tài)觀察：二、形態(tài)觀察： 所有細菌革蘭染色所有細菌革蘭染色 顯微鏡下細菌形態(tài)、染色性觀察與描述顯微鏡下細菌形態(tài)、染色

3、性觀察與描述三、生化實驗：三、生化實驗： 1. 觸酶試驗：觸酶試驗： 2. 氧化酶試驗：氧化酶試驗： 3. KIA試驗（試驗（1支）：支）： 4.半固體試驗（半固體試驗（1支）：支）： 5. 腸桿菌科微量生化編碼管腸桿菌科微量生化編碼管（1支）支） 6.沙門菌血清學(xué)玻片凝集試驗沙門菌血清學(xué)玻片凝集試驗 實驗內(nèi)容（2人/組）糞糞 便便腸道選擇培養(yǎng)基腸道選擇培養(yǎng)基可疑菌落可疑菌落生化反應(yīng)生化反應(yīng)血清學(xué)實驗血清學(xué)實驗結(jié)果報告結(jié)果報告藥敏試驗藥敏試驗?zāi)c道外標本腸道外標本血平板、弱選擇平板血平板、弱選擇平板苯丙氨酸（）苯丙氨酸（）VP（）（）苯丙氨酸（）苯丙氨酸（）VP（）（）苯丙氨酸（）苯丙氨酸（）V

4、P（）（）埃希菌屬埃希菌屬變形桿菌屬變形桿菌屬克雷伯菌屬克雷伯菌屬沙門菌屬沙門菌屬普羅威登斯菌屬普羅威登斯菌屬腸桿菌屬腸桿菌屬志賀菌屬志賀菌屬摩根菌屬摩根菌屬沙雷菌屬沙雷菌屬枸櫞酸菌屬枸櫞酸菌屬哈夫尼亞菌屬哈夫尼亞菌屬愛德華菌屬愛德華菌屬耶爾森菌屬耶爾森菌屬菌屬菌屬KIAMIU斜面斜面底層底層氣體氣體H2S動力動力吲吲哚哚脲酶脲酶埃希菌屬埃希菌屬AA+/-+-志賀菌屬志賀菌屬KA-+/-沙門菌屬沙門菌屬KA+D/+-變形桿菌屬變形桿菌屬KA+/+-/+克雷伯菌屬克雷伯菌屬AA+-d+ 蛋白胨蛋白胨 20g 20g 氯化鈉氯化鈉 5g5g瓊脂瓊脂 20-25g20-25g蒸餾水蒸餾水 1000m

5、l 1000ml 乳糖乳糖 10g 10g 1%1%中性紅水溶液中性紅水溶液 5ml 5ml 膽鹽膽鹽 5g5g 配方一配方一配方二配方二配方三配方三配方四配方四牛肉膏牛肉膏55牛心浸液牛心浸液1000肉膏液肉膏液850胨胨57.5（胨）5乳乳 糖糖10151010膽鹽膽鹽10（粗制）10（透析）150（ml）（牛膽汁）8.5（混合）硫代硫酸鈉硫代硫酸鈉125118.5枸櫞酸鈉枸櫞酸鈉1215118.5枸櫞酸鐵枸櫞酸鐵0.51枸櫞酸鐵銨枸櫞酸鐵銨14磷酸氫二鈉磷酸氫二鈉54瓊瓊 脂脂25182013.5煌煌 綠綠0.330.331.00.33中性紅中性紅22.5377025水水10001000

6、MACC SS 蛋白胨蛋白胨 10g 10g 葡葡 萄萄 糖糖 1g1g 氯化鈉氯化鈉 5 g 5 g 乳乳 糖糖 10g10g 牛肉膏牛肉膏 3 g 3 g 硫代硫酸鈉硫代硫酸鈉 0.2g0.2g 瓊瓊 脂脂 16g 16g 硫酸亞鐵硫酸亞鐵 0.2g0.2g 水水 1000ml 1000ml 0.4%0.4%酚紅酚紅 6ml6ml 觀察高層與斜面顏色變化情況以及培養(yǎng)基是否變觀察高層與斜面顏色變化情況以及培養(yǎng)基是否變黑黑上層固體斜面：乳糖+指示劑下層固體：葡萄糖+指示劑+FeSO4觀察指標：葡萄糖、乳糖發(fā)酵、H2S 觀察穿刺線邊緣是否清晰及培養(yǎng)基混濁度觀察穿刺線邊緣是否清晰及培養(yǎng)基混濁度 有鞭毛細菌：在培養(yǎng)基中沿穿刺線并向外擴散生長，穿刺有鞭毛細菌：在培養(yǎng)基中沿穿刺線并向外擴散生長，穿刺線邊緣模糊。培養(yǎng)基混濁。線