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文檔簡介
1、前言: 我國肝炎發(fā)病率不斷呈上升趨勢,臨床上對于治療肝炎的新藥物的研究也在不斷發(fā)展,腎上腺素(EPI)作對于肝炎癥性損傷的保護作用在臨床上尚處于研發(fā)階段,有很大的臨床應(yīng)用前景。本實驗利用內(nèi)毒素脂多糖(LPS)會造成小鼠肝臟炎癥性損傷,比較是否給予EPI的不同組小鼠間的肝臟是否形成炎癥性損傷及其損傷程度,不同劑量的EPI對肝臟的保護作用是否存在劑量關(guān)系。第1頁/共13頁實驗材料與試實驗材料與試劑劑第2頁/共13頁實驗對象:50只SPF級SD大鼠(由實驗室提供) 實驗動物介紹: SD大鼠:由美國的Sprague & Dawley農(nóng)場的R.W.Dawley用雜合的雄性大鼠和Wistar雌性大
2、鼠雜交后育成的一個白化封閉群大鼠。 SPF級動物:機體內(nèi)無特定的微生物和寄生蟲存在的動物,但非特定的微生物和寄生蟲是容許存在的。一般指無傳染病的健康動物,是目前國外使用最廣泛的實驗動物。篩選標準:體重為200g左右的雄性大鼠第3頁/共13頁實驗儀器與試劑 實驗儀器與器材:Beckman全自動生化分析儀CX-5型,靜脈注射器,剪刀,鑷子,自動分析天平,小試管,移液管實驗試劑:LPS(同一廠家生產(chǎn),同批號),EPI (同一廠家生產(chǎn),同批號),生理鹽水,標記染料(苦味酸,品紅) 第4頁/共13頁實驗動物分組及處理方式第5頁/共13頁分組方法:分為5組,每組10只。采用完全隨機分組法。 1、編號:按動
3、物體重從小到大編號并標記。 2、取隨機數(shù):給每個編號一個隨機數(shù)(查隨機數(shù)表或從計算機獲得)。 3、確定組別:根據(jù)受試對象獲得的隨機數(shù)決定受試對象的組別。第6頁/共13頁處理方式: 第一組:為空白對照組,先靜脈注射生理鹽水6mg/kg,再靜脈點滴生理鹽水2.4ml/kg/h,持續(xù)6小時。 第二組:為LPS組,先靜脈注射LPS 6mg/kg,再靜脈點滴生理鹽水2.4ml/kg/h,持續(xù)6小時。 第三組:為EPI低劑量組,先靜脈注射LPS 6mg/kg,再靜脈點滴腎上腺素0.12g/kg/min,持續(xù)6小時。 第四組:為EPI中劑量組,先靜脈注射LPS 6mg/kg,再靜脈點滴腎上腺素0.3g/kg
4、/min,持續(xù)6小時。 第五組:為EPI高劑量組,先靜脈注射LPS 6mg/kg,再靜脈點滴腎上腺素0.6g/kg/min,持續(xù)6小時。 備注:對照組所用生理鹽水及其劑量為參考文獻所得。 第7頁/共13頁實驗相關(guān)檢實驗相關(guān)檢測指標的取測指標的取樣及觀察樣及觀察第8頁/共13頁 1、于LPS注射前、注射后兩小時采用內(nèi)眥靜脈取血法分別取適量血,檢測血清ALT、AST、TNF、IL-1和IL-10水平。 2、于LPS注射后六小時斷頭處死并取血,檢測血清ALT、AST、TNF、IL-1和IL-10水平。 3、對實驗動物進行解剖,取肝臟,觀察其組織病理學(xué)改變。第9頁/共13頁結(jié)果的分析方結(jié)果的分析方法法
5、第10頁/共13頁 1、比較第一組與第二組的各項指標:LPS是否對大鼠肝臟造成炎癥性損傷及其損傷程度。 2、比較第二組與第三、四、五的各項指標:EPI對LPS造成的大鼠肝臟炎癥性損傷是否具有一定的保護作用。 3、對第三、四、五組的各項指標進行比較:不同劑量的EPI對大鼠肝臟炎癥性損傷的保護作用是否存在劑量關(guān)系。 統(tǒng)計分析:采用SPSS軟件作各組間的方差分析比較其差異性。第11頁/共13頁參考文獻: 1、楊文敏,曾其毅中國循證兒科雜志2007年2卷四期 2、Bozkurt S, Ersoy E, Tekyn HE. The cytoprotective effect of iloprost against carbon tetrachloride induced hecrosis in rat l
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