回收率加樣回收試驗

1、回收率回收率包括絕對回收率和相對回收率。絕對回收率考察的是經(jīng)過樣品處理后能用于分析的藥物的比例。 因為不論是生物基質(zhì)還是制劑輔料中的藥物， 經(jīng)過樣品處理都有一定的損失。 做為一個分析方法，絕對回收率一般要求大于 50%才行。它是在空白基質(zhì)中定量加入藥物，經(jīng)處理后與標(biāo)準(zhǔn)品的比值。 標(biāo)準(zhǔn)品為流動相直接稀釋而來， 而不是同樣品一樣處理。若一樣，只是不加基質(zhì)來處理， 可能會有很多影響因素被此屏蔽掉。 如全部轉(zhuǎn)移有機相時只轉(zhuǎn)移了 98%等。也就因此失去了絕對回收率的考察初衷。相對回收率嚴(yán)格來說有兩種。一種是回收試驗法，一種是加樣回收試驗法。前者是在空白基質(zhì)中加入藥品， 標(biāo)準(zhǔn)曲線也是同此， 這種測定用得較

2、多， 但有標(biāo)準(zhǔn)曲線重復(fù)測定的嫌疑。 第二種是在已知濃度樣品中加入藥物， 來和標(biāo)準(zhǔn)曲線比，標(biāo)準(zhǔn)曲線也是在基質(zhì)中加藥物。相對回收率主要考察準(zhǔn)確度?；厥章始訕踊厥赵囼灱訕踊厥站褪窃谝阎獫舛鹊臉悠防锛釉摌悠妨康?80%、100%、120%的對照品，然后測定結(jié)果各 3 次共 9 次，結(jié)果減去已知的量再除以加入量就是回收率， 一般都要求達(dá)到 95%以上，即于已知被測成分含量的成藥中再精密加入一定量的被測成分純品，依法測定。測定值應(yīng)在線性范圍內(nèi)， 用實測值與原樣品含被測成分量之差，除以加入純品量，計算回收率。C A 100% 回收率 %BA：樣品所含被測成分量B：加入純品量C：實測值回收率試驗至少需進(jìn)行3

3、次試驗（ n=3），或三組平行試驗（ n=6），加入欲測樣品或成分量相同或不同，后者則可進(jìn)一步驗證測定方法取樣量多少更為適合。 為了反映各次回收率的實驗波動情況，建議除寫出各次試驗的實測數(shù)據(jù)，并計算實測值的均數(shù)，標(biāo)準(zhǔn)差（S）及相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（ RSD）。相對標(biāo)準(zhǔn)偏差較小的實驗波動較小，重復(fù)性較好。計算方法如下：供參考均值：標(biāo)準(zhǔn)差：123nnn2Sn 1n 為每次實測數(shù)據(jù)的個數(shù)， x 為 n 次實測數(shù)據(jù)的總和， x2 為 n 次實測數(shù)據(jù)之平方值的總和。 回收率一般要求在 95-105，有些方法操作步驟繁復(fù)，可要求在 90110。 9 個回收率數(shù)據(jù)的相對標(biāo)準(zhǔn)差（ RSD）應(yīng)不大于 2.0%。值得指出

4、的是， 在一些回收率試驗中， 常見到所謂的加樣回收測定， 不是在樣品制備開始時即加入純品， 而是加到制備好的供試液中。 這樣并不能說明被測成分在提取、純化等步驟中是否損失。還有在薄層掃描測定時，將供試品溶液，對照品溶液分別點于薄層板上， 同時將供試品與對照品溶液再重疊點于薄層板的同一原點上，測定計算，這只能反映板上回收率，而不是全部含量測定方法的回收率，實驗設(shè)計不符合要求?；厥章视嬎鉖=(C2-C1)/C3×100%P：回收率C1：試樣測定值C1=m1/v1C2： :標(biāo)樣測定值C2=m2/v2C3：加標(biāo)量C3=C0× V0/v2m： 加標(biāo)體積中的物質(zhì)含量m=C0×

5、V0m1=試樣 中的物質(zhì)含量m2=加標(biāo)試樣中的物質(zhì)含量v1：試樣體積v2：加標(biāo)試樣體積v2= v1+ V0V0：加標(biāo)體積C0：加標(biāo)用標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度1、當(dāng)加標(biāo)體積不影響分析結(jié)果時，即v2= v1C3= C0×V0/v1 時P=(C2-C1)× v1/ (C0×V0) × 100%2、當(dāng)加標(biāo)體積影響分析結(jié)果時， 即 v2= v1+ C0C2= (C0× V0)/(v1+ C0) 時P=(C2-C1)× (v1+ C0)/ (C0× V0) ×100%供參考以用品中所含物質(zhì)的量值計算加標(biāo)回收率將理論公式中各項均理解為量值時

6、，則可以避開加標(biāo)體積帶來的麻煩，簡明易懂，計算方便：P=(m2-m1) / m×100%或P=(C2× v2)-(C1×v1)/ (C0 ×V0) ×100%吸光度值計算加標(biāo)回收率：由曲線公式Y(jié)=Bx+a導(dǎo)出X=Y-a/b當(dāng)以物質(zhì)量值計算加標(biāo)回收率時，可導(dǎo)出：P=Y2-Y1) /b ×C0× V0× 100%試中： Y2 ：加標(biāo)試樣吸光度Y1 ：試樣吸光度B：曲線斜率上式的前提是： Y2-Y1 aY0 ：空白管吸光度a：曲線截距當(dāng) Y2-Y1 a 時，加標(biāo)回收率職能用以下公式，否則回收率值增大。P=(C2×v2)-(C1×v1)/ (C0 × V0) ×100%結(jié)論：1、凡是可以用加標(biāo)回收率來評價分析方法和測量系統(tǒng)準(zhǔn)確度的分析項目，其加標(biāo)回收率的計算應(yīng)首先考慮采用以物質(zhì)的量值法計算；2、凡是可以用分光光度法分析的項目，當(dāng)試樣與空白的吸光度之差大于曲線