生物制藥題庫(kù)

1、第一章：生物藥物概述一、填空題1. 我國(guó)藥物的三大藥源指的是 化學(xué)藥物、 生物藥物 、 中草藥 。2. 現(xiàn)代生物藥物已形成四大類(lèi)型，包括 重組DNA藥物 、基因藥物 、天然生物藥物 、合成或半合成生物藥物 。3. 請(qǐng)寫(xiě)出下列藥物英文的中文全稱(chēng)：IFN（Interferon）干擾素、IL (Interleukin) 白細(xì)胞介素 、CSF（Colony Stimulating Factor） 集落刺激因子 、EPO（Erythropoietin） （促）紅細(xì)胞生成素 、EGF（Epidermal Growth Factor） 上皮、表皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子、NGF（Nerve Growth Factor）

2、 神經(jīng)生長(zhǎng)因子 、Ins（Insulin） 胰島素 、SOD 超氧化物歧化酶 、tPA 組織型纖溶酶原激活劑。抗凝血藥 、FDA 美國(guó)食品藥品監(jiān)督管理局GMP 藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范 二、選擇題：1、以下能用重組DNA技術(shù)生產(chǎn)的藥物為 （人生長(zhǎng)素、人胰島素、干擾素、表皮生長(zhǎng)因子） （ B ）A、維生素 B、生長(zhǎng)素 C、肝素 D、鏈霉素2、下面哪一種藥物屬于多糖類(lèi)生物藥物 （ C ）A、洛伐他汀 B、干擾素 C、肝素 D、細(xì)胞色素C3、能用于防治血栓的酶類(lèi)藥物有 （ D ）A、SOD B、胰島素 C、L-天冬酰胺酶 D、尿激酶4、下列屬于多肽激素類(lèi)生物藥物的是 （ D ）A、ATP B、四氫葉酸（

3、激素） C、透明質(zhì)酸（糖胺聚糖） D、降鈣素（三十二肽激素）5、蛋白質(zhì)工程技術(shù)改造的速效胰島素機(jī)理是 （ D ）A. 將豬胰島素B30位改造為丙氨酸，使之和人胰島素序列一致B. 將A21位替換成甘氨酸，B鏈末端增加兩個(gè)精氨酸，使之在pH4溶液中可溶（PH6.8，長(zhǎng)效）C. 將B29位賴(lài)氨酸用長(zhǎng)鏈脂肪酸修飾，改變其皮下擴(kuò)散和吸收速度D. 將人胰島素B28位與B29位氨基酸互換，使之不易形成六聚體三、名詞解釋1.生物藥物：是以生物體、生物組織或其成份為原料（包括組織、細(xì)胞、細(xì)胞器、細(xì)胞成分、代謝、排泄物）綜合應(yīng)用生物學(xué)、物理化學(xué)與現(xiàn)代藥學(xué)的原理與方法加工制成的藥物?！緩V義的生物藥物包括以動(dòng)物、植物

4、、微生物和海洋生物為原料制取的各種天然生物活性物質(zhì)及其人工合成或半合成的天然物質(zhì)類(lèi)似物，也包括應(yīng)用生物工程技術(shù)（基因工程、細(xì)胞工程、酶工程與發(fā)酵工程）制造生產(chǎn)的新生物技術(shù)藥物（new biotech drug）?！?.生物制品：生物制品（biological products / biologics ）是以微生物、細(xì)胞、動(dòng)物或人源組織和體液等為原料，應(yīng)用傳統(tǒng)技術(shù)或現(xiàn)代生物技術(shù)制成，用于人類(lèi)疾病的預(yù)防、治療和診斷。3.新藥: 新藥是指未曾在中國(guó)境內(nèi)上市銷(xiāo)售的藥品。已生產(chǎn)的藥品改變劑型、改變給藥途徑、增加新適應(yīng)癥或制成新的復(fù)方制劑，亦按新藥管理。4.基因藥物: 以遺傳物質(zhì)DNA、RNA為物質(zhì)基礎(chǔ)制

5、造的藥物，如核酸疫苗、反義藥物四、問(wèn)答題1.生物藥物有哪些特性？1. 藥理學(xué)特性（1）治療的針對(duì)性強(qiáng)（2）藥理活性高（3）毒副作用小，營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高（4）生理副作用常有發(fā)生：如免疫反應(yīng)、過(guò)敏反應(yīng)等。2. 理化特性（1）原料中有效物質(zhì)含量低，雜質(zhì)種類(lèi)多且含量高（2）穩(wěn)定性差（3）易腐敗（4）生物藥物制劑的特殊要求2.簡(jiǎn)述新藥（新生物藥物）的研發(fā)過(guò)程？新生物藥物的研制按其特點(diǎn)可分為5個(gè)階段，即：（1）實(shí)驗(yàn)室研究；（2）中試研究；（3）臨床前試驗(yàn)；（4）臨床試驗(yàn)；（5）生產(chǎn)。第二章：生物藥物制劑技術(shù)目前生物藥物給藥方式研究的熱點(diǎn)是 緩釋型注射劑 和 非注射途徑給藥。 蛋白質(zhì)和多肽類(lèi)藥物非注射途徑包括 鼻

6、腔、口服、直腸、口腔、透皮、眼內(nèi)和肺部給藥。 第三章 ：基因工程制藥1. CHO 中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢 細(xì)胞 2. 基因工程中原核表達(dá)常用的宿主有 大腸桿菌、枯草芽孢桿菌、鏈霉菌 等；常用的真核表達(dá)系統(tǒng)有 酵母、哺乳動(dòng)物細(xì)胞、絲狀真菌 等。3. 大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)的缺點(diǎn)是不能進(jìn)行 翻譯后修飾 ，因而像EPO等基因的表達(dá)需使用 真核 表達(dá)系統(tǒng)。4. 分泌表達(dá)是指將目的基因嵌合在 編碼原核蛋白信號(hào)肽序列 基因下游進(jìn)行表達(dá)，從而使目的基因分泌到細(xì)胞周質(zhì)或培養(yǎng)基中。 5. 中國(guó)藥典規(guī)定熱原檢查采用 家兔 法， 細(xì)菌內(nèi)毒素 檢查采用鱟試劑法。6. 用大腸桿菌作宿主表達(dá)重組DNA 藥物，缺點(diǎn)是 （ C ）A.蛋白質(zhì)

7、表達(dá)量低 B.生長(zhǎng)慢 C.產(chǎn)物無(wú)糖基修飾 D.難以獲得工程菌7. 下面表達(dá)系統(tǒng)為原核表達(dá)系統(tǒng)的是 （A ）A. E.coli B.畢赤酵母 C.昆蟲(chóng)細(xì)胞 D.動(dòng)物細(xì)胞8. 如果用大腸桿菌作為宿主細(xì)胞，蛋白表達(dá)部位為周質(zhì)，下面哪種細(xì)胞破碎的方法最佳？ （ C ）A.勻漿法 B.超聲波法 C. 滲透壓休克法 D. 凍融法1. 基因工程 ：基因工程（genetic engineering）是指在基因水平上采用與工程設(shè)計(jì)十分類(lèi)似的方法，按照人們的需要進(jìn)行設(shè)計(jì)，然后按設(shè)計(jì)方案創(chuàng)建出具有某種新的性狀的生物新品系，并使之穩(wěn)定地遺傳給后代?；蚬こ痰暮诵氖菢?gòu)建重組體DNA的技術(shù)，所以基因工程有時(shí)也稱(chēng)為基因操作

8、或重組DNA技術(shù)。 2. 蛋白質(zhì)工程 ：蛋白質(zhì)工程（Protein engineering）：根據(jù)對(duì)已知蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)和功能的了解，借助計(jì)算機(jī)輔助設(shè)計(jì)，利用基因定點(diǎn)突變等技術(shù)對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)基因進(jìn)行改造，或直接從頭設(shè)計(jì)全新的蛋白質(zhì)序列，從而獲得改良的蛋白質(zhì)或自然界沒(méi)有的全新蛋白質(zhì)的技術(shù)過(guò)程。有人將其稱(chēng)為“第二代基因工程”。3.基因工程制藥的基本過(guò)程？基因工程藥物制備的一般過(guò)程：第四章 發(fā)酵工程技術(shù)概論世界上一個(gè)抗生素產(chǎn)品是 青霉素 ，第二個(gè)抗生素是 鏈霉素 。發(fā)酵工業(yè)的生產(chǎn)水平取決于三個(gè)要素：生產(chǎn)菌種、發(fā)酵工藝 和 發(fā)酵設(shè)備。冷凍干燥過(guò)程中常用的冷凍保護(hù)劑有 脫脂乳 和 蔗糖 。微生物發(fā)酵主要的三

9、種方式 分批發(fā)酵 、 補(bǔ)料分批發(fā)酵、 連續(xù)發(fā)酵 。微生物菌種的分離和純化可以用的方法有平板劃線法 和稀釋平板法 。目前常用的誘變劑可分為物理誘變劑 、 化學(xué)誘變劑 和 生物誘變劑 三大類(lèi)。常用的菌種保藏方法有：斜面低溫保存、液體石蠟封藏法 、冷凍干燥法、 液氮超低溫保藏法 、 甘油冷凍法 、 其他干燥保藏法：沙土保藏法 等。 以下可用于菌種純化的方法有 （B ）A高溫滅菌 B 平板劃線 C 富集培養(yǎng) D 誘變處理菌種保藏的目的及方法？（一）保存目的：防止退化（二）菌種退化檢查方法（三）菌種退化防止方法 防止基因突變：如低溫保藏 少轉(zhuǎn)接傳代 分離單菌落，制作平行的菌種斜面 選擇培養(yǎng)條件（四）菌種

10、保藏方法理想的菌種保藏方法應(yīng)具備的條件：經(jīng)長(zhǎng)期保藏后菌種存活、不退化；保證高產(chǎn)突變株不改變表型和基因型，特別是不改變初級(jí)代謝產(chǎn)物和次級(jí)代謝產(chǎn)物生產(chǎn)的高產(chǎn)能力。先挑選優(yōu)良純種，然后創(chuàng)造一個(gè)有利于休眠的條件，如低溫、干燥、缺氧、避光等，以降低菌種代謝活動(dòng)的速度。菌種保藏方法：斜面低溫保存 液體石蠟封藏法 冷凍干燥法液氮超低溫保藏法甘油冷凍法 其他干燥保藏法：沙土保藏法第五章 酶工程制藥1. 固定化酶常采用的方法可分為 吸附法 、 共價(jià)結(jié)合法 、 交聯(lián)法 和 包埋法 四大類(lèi)。2. 為什么要對(duì)酶進(jìn)行化學(xué)修飾？人為地改變天然酶的一些性質(zhì)，創(chuàng)造天然酶所不具備的某些優(yōu)良特性甚至創(chuàng)造出新的活性，來(lái)擴(kuò)大酶的應(yīng)用

11、領(lǐng)域，促進(jìn)生物技術(shù)的發(fā)展。通過(guò)酶的分子改造可克服上述應(yīng)用中的缺點(diǎn)，使酶發(fā)揮更大的催化功效，以擴(kuò)大其在科研和生產(chǎn)中的應(yīng)用。 通常，酶經(jīng)過(guò)改造后會(huì)生各種各樣的變化，概括起來(lái)主要有： 提高生物活性（包括某些在修飾后對(duì)效應(yīng)物反應(yīng)性能的改變）； 增強(qiáng)在不良環(huán)境（非生理?xiàng)l件）中的穩(wěn)定性； 針對(duì)異體反應(yīng)，降低生物識(shí)別能力。 可以說(shuō)，酶的化學(xué)修飾在理論上為生物大分子結(jié)構(gòu)與功能關(guān)系的研究提供了有力的實(shí)驗(yàn)依據(jù)和證明，是改善酶學(xué)性質(zhì)和提高其應(yīng)用價(jià)值的一種非常有效的措施。3. 抗體酶催化抗體（catalytic body）：是利用酶反應(yīng)中底物過(guò)渡態(tài)類(lèi)似物作為半抗原刺激免疫系統(tǒng)所產(chǎn)生的一類(lèi)能夠?qū)Ｒ蛔R(shí)別和催化酶反應(yīng)中的底

12、物反應(yīng)過(guò)渡態(tài)的一類(lèi)單克隆抗體。催化抗體是抗體的高度選擇性和酶的高效催化能力巧妙結(jié)合的產(chǎn)物，本質(zhì)上是一類(lèi)具有催化活力的免疫球蛋白，在其可變區(qū)賦予了酶的屬性，因此催化抗體也叫抗體酶（abzyme）。第六章 動(dòng)物細(xì)胞工程制藥1. 細(xì)胞培養(yǎng)根據(jù)培養(yǎng)細(xì)胞的種類(lèi)可分為 原代培養(yǎng) 和 傳代培養(yǎng) 兩種方式。2. 生產(chǎn)用的動(dòng)物細(xì)胞類(lèi)型有 原代細(xì)胞 、 已建立的二倍體細(xì)胞系 、 可無(wú)限期傳代的轉(zhuǎn)化細(xì)胞系 、 融合細(xì)胞系 、 基因工程細(xì)胞系 。3. 實(shí)驗(yàn)室中常加的雙抗是 青霉素 和 鏈霉素 ，以防細(xì)胞污染。4. 用于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)主要有三種培養(yǎng)基： 天然 培養(yǎng)基、 合成 培養(yǎng)基和 無(wú)血清 培養(yǎng)基。6. 在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)

13、過(guò)程下列幾種試劑的作用：RPMI 1640 維持細(xì)胞的生存 ，Hanks液 維持細(xì)胞滲透壓、調(diào)控培養(yǎng)液酸、堿度平衡 ，NaHCO3 調(diào)節(jié)培養(yǎng)基PH ，青霉素 防止微生物污染 ，胰蛋白酶 水解細(xì)胞間的蛋白質(zhì) 。7. 屬于人源細(xì)胞系的是（   B     ）。A .CHO-K1 B. WI-38 C .BHK-21 D .Vero（CHO-K1（Chinese hamster ovary cell）：從中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢中分離的上皮樣細(xì)胞。WI-38：正常胚肺組織人二倍體細(xì)胞系BHK-21（Baby hamster kidney ce

14、ll）：從5只生長(zhǎng)1d的幼倉(cāng)鼠腎臟中分離的Vero：從正常成年非洲綠猴腎臟分離的。MRC-5：從正常男性肺組織人二倍體細(xì)胞系Namalwa：從肯尼亞患有Burkitt淋巴瘤病人獲取，建成的人的類(lèi)淋巴母細(xì)胞。)8. 在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，要用 胰蛋白 酶對(duì)取出的動(dòng)物組織進(jìn)行處理。9. 細(xì)胞株 通過(guò)選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志物的培養(yǎng)物稱(chēng)為細(xì)胞株（Cell Strain）。也就是說(shuō)，細(xì)胞株是用單細(xì)胞分離培養(yǎng)或通過(guò)篩選的方法，由單細(xì)胞增殖形成的細(xì)胞群。10. 二倍體細(xì)胞系的定義及特點(diǎn) 二倍體細(xì)胞系：原代細(xì)胞經(jīng)過(guò)傳代、篩選、克隆、純化后，獲得具一定特征的細(xì)胞系特點(diǎn)：細(xì)

15、胞分裂增值旺盛，具有二倍體核型，具有貼壁依賴(lài)和接觸抑制的特性，可傳代培養(yǎng)50代，無(wú)致癌性。11. 利用動(dòng)物細(xì)胞生產(chǎn)生物技術(shù)藥物的優(yōu)、缺點(diǎn)？ 優(yōu)點(diǎn)：細(xì)胞產(chǎn)品多半分泌于胞外，收集純化方便；能得到較為完善的翻譯后修飾，特別是糖基化，與天然產(chǎn)品更為一致，更適于臨床使用。 缺點(diǎn)：培養(yǎng)條件要求高，成本貴，產(chǎn)量低。 12. 思考：在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，為什么要用胰蛋白酶對(duì)取出的動(dòng)物組織進(jìn)行處理？ 胰蛋白酶處理動(dòng)物組織，可以使動(dòng)物組織細(xì)胞間的膠原纖維和細(xì)胞外的其他成分酶解，獲得單個(gè)細(xì)胞。 用胰蛋白酶分散細(xì)胞，說(shuō)明細(xì)胞間的物質(zhì)主要是蛋白質(zhì)。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)適 宜的pH為7.2-7.4，此環(huán)境下胃蛋白酶（2.0）沒(méi)有

16、活性，而胰蛋白酶（7.2-8.4）的活性較高。第七章 植物細(xì)胞工程制藥1. 植物細(xì)胞培養(yǎng)常用的滅菌劑有 次氯酸鈣 、 次氯酸鈉 和 氯化汞 。2. 植物細(xì)胞培養(yǎng)的培養(yǎng)基的主要成分包括無(wú)機(jī)鹽、碳源、有機(jī)氮源、 植物生長(zhǎng)激素 、維生素等化學(xué)成分。使用最廣泛的是MS培養(yǎng)基和LS培養(yǎng)基。3. 植物細(xì)胞培養(yǎng)兩步法中，第一步使用 生長(zhǎng) 培養(yǎng)基，第二步 生產(chǎn) 培養(yǎng)基。第八章 抗體制藥1. 對(duì)鼠源性單抗進(jìn)行改造的目的： 降低鼠源性單克隆抗體分子的免疫原性 、 降低相對(duì)分子量，增加組織通透性 。2. 單克隆抗體藥物經(jīng)歷了 鼠源性抗體 、 人鼠嵌合抗體 、 人源化抗體 和 全人源抗體 的發(fā)展，抗體藥物向 低抗原性

17、 、 高特異性 方向發(fā)展。3. 在制備單克隆抗體的過(guò)程中，進(jìn)行了兩次篩選，其目的不同，第一次是通過(guò)篩選獲得   雜交瘤細(xì)胞    ，第二次是通過(guò)篩選獲得  能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞  。      4. “生物導(dǎo)彈”是指 （A ）A. 單克隆抗體                  

18、60;          B. 雜交瘤細(xì)胞      C. 能產(chǎn)生特定抗體的B淋巴細(xì)胞  D. 在單抗上連接抗癌藥物5. 關(guān)于單克隆抗體，下列敘述不正確的是 （D ）A. 可以制成診斷盒，用于疾病的診斷    B. 可以與藥物結(jié)合，用于病變細(xì)胞的定向治療C. 可以利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)          D. 可以在生物

19、體內(nèi)生產(chǎn)，不能在體外生產(chǎn)6. 單克隆抗體是由下列哪種細(xì)胞產(chǎn)生的  （ D）A. B淋巴細(xì)胞      B. T淋巴細(xì)胞      C. 骨髓瘤細(xì)胞     D. 雜交瘤細(xì)胞7. 人-鼠嵌合抗體人-鼠嵌合抗體是將鼠源單抗的可變區(qū)與人抗體的恒定區(qū)融合而得到的抗體。特點(diǎn)：保持鼠源性單克隆抗體的抗原結(jié)合的特異性；與鼠單抗相比，對(duì)人的免疫原性大大降低，利于在人體內(nèi)應(yīng)用，所以目前已制備出上百種抗各種抗原（包括腫瘤相關(guān)抗原）的嵌合抗體。8. 與單克隆抗體相比，基因工程抗體有何優(yōu)點(diǎn)？ 1.

20、通過(guò)基因工程技術(shù)的改造，可以降低甚至消除人體對(duì)抗體的排斥反應(yīng)；2. 基因工程抗體的分子量較小，可以部分降低抗體的鼠源性，更有利于穿透血管壁，進(jìn)入病灶的核心部位；3. 根據(jù)治療的需要，制備新型抗體；4. 可以采用原核細(xì)胞、真核細(xì)胞和植物等多種表達(dá)方式，大量表達(dá)抗體分子，大大降低生產(chǎn)成本。 9. 抗血清制備過(guò)程中為何用胃酶消化？10. 噬菌體抗體庫(kù)技術(shù)的特點(diǎn)？1. 模擬天然全套抗體庫(kù)（1）抗體文庫(kù)可以達(dá)到³1011庫(kù)容，能包含B細(xì)胞全部克隆。（2）建庫(kù)的外源基因來(lái)自人外周血、骨髓或脾臟的淋巴細(xì)胞提取的mRNA反轉(zhuǎn)錄形成的cDNA擴(kuò)增，這是人體多克隆細(xì)胞的總mRNA 。（3）使用的通用引物

21、采自多個(gè)人體，具有人的種屬普遍性。（4）VH和VL隨機(jī)重組增加抗體的多樣性。2. 避開(kāi)了人工免疫和雜交瘤技術(shù)由于抗體庫(kù)的大容量和極高的篩選效率，使得可以調(diào)出任意抗體基因，用基因工程方法制備抗體，因而能免除使用人工免疫動(dòng)物和細(xì)胞融合技術(shù)。3. 可獲得高親和力的人源化抗體在噬菌體抗體庫(kù)中，VH和VL基因的隨機(jī)重組模擬了體內(nèi)抗體親和力成熟過(guò)程，所用抗體基因又都是來(lái)自人體，因此產(chǎn)生的抗體必然都是高親和力的。11. 多抗、單抗及基因工程抗體的比較1. 多克隆抗體：由多個(gè)B細(xì)胞克隆產(chǎn)生的，針對(duì)多種抗原決定簇的混合抗體。 獲得的主要途徑：動(dòng)物免疫血清；恢復(fù)期或預(yù)防接種人群。 優(yōu)點(diǎn)：作用全面中和抗原、免疫調(diào)理

22、、CDC、ADCC等作用；來(lái)源廣泛、制備容易。 缺點(diǎn)：特異性不高、易發(fā)生超敏反應(yīng)應(yīng)用受限2. 單克隆抗體：由一個(gè)識(shí)別一種抗原表位的B細(xì)胞克隆產(chǎn)生的同源抗體。 特點(diǎn)：理化性質(zhì)、分子結(jié)構(gòu)、遺傳標(biāo)志、生物學(xué)特性等完全相同的均一性抗體 優(yōu)點(diǎn)：結(jié)構(gòu)均一、純度高、特異性強(qiáng)、效價(jià)高、血清交叉反應(yīng)少/無(wú)，制備成本低。 缺點(diǎn)：鼠源性，對(duì)人具有較強(qiáng)的免疫原性。3. 基因工程抗體：采用基因工程方法制備的抗體。 特點(diǎn)：既保持單克隆抗體的均一性，特異性強(qiáng)的優(yōu)點(diǎn)，又能克服鼠源性的不足。 優(yōu)點(diǎn)：人源化或全人源抗體均一性強(qiáng)，可工業(yè)化生產(chǎn)。 缺點(diǎn)：親和力弱，效價(jià)不高。第九章 生化制藥工藝技術(shù)基礎(chǔ) 如果想要從生物材料中提取輔酶Q

23、10，應(yīng)該選取下面哪一種動(dòng)物臟器 （ D ） A胰臟 B肝臟 C小腸 D心臟 由于目的蛋白質(zhì)和雜蛋白分子量差別較大，擬根據(jù)分子量大小分離純化并獲得目的蛋白質(zhì)，可采用 （C ） ASDS凝膠電泳 B鹽析法 C凝膠過(guò)濾 D吸附層析 分離純化早期，由于提取液中成分復(fù)雜，目的物濃度稀，因而易采用 （ A ） A分離量大分辨率低的方法 B分離量小分辨率低的方法 C分離量小分辨率高的方法 D各種方法都試驗(yàn)一下，根據(jù)試驗(yàn)結(jié)果確定第十章 生化藥物制造工藝 氨基酸藥物分為 個(gè)別氨基酸制劑 和 復(fù)方氨基酸制劑 兩類(lèi)。 目前構(gòu)成天然蛋白質(zhì)的20種氨基酸的生產(chǎn)方法有 蛋白質(zhì)水解法 、 發(fā)酵法 、 酶轉(zhuǎn)化法 、 化學(xué)合

24、成法 。 酶轉(zhuǎn)化法與直接發(fā)酵法生產(chǎn)氨基酸的反應(yīng)本質(zhì)相同，均屬酶轉(zhuǎn)化反應(yīng)。但兩者相比，酶轉(zhuǎn)化法所需設(shè)備及工藝簡(jiǎn)單，產(chǎn)物濃度 高，轉(zhuǎn)化率及生產(chǎn)效率 高，生產(chǎn)周期 短 ， 副產(chǎn)物 少，酶的利用率也高。 目前國(guó)內(nèi)外生產(chǎn)氨基酸輸液組方中含5山梨醇或木糖醇，作用是 以補(bǔ)充能量、促進(jìn)氨基酸的吸收和利用 ；半胱氨酸作為 穩(wěn)定劑。 氨基酸有哪些生產(chǎn)方法？各有什么主要特點(diǎn)？ 答：氨基酸的生產(chǎn)方法有四種：蛋白質(zhì)水解法，發(fā)酵法，酶轉(zhuǎn)化法，化學(xué)合成法。 （1）蛋白質(zhì)水解法：以毛發(fā)、血粉及廢蠶絲等蛋白質(zhì)為原料，通過(guò)酸、堿或酶水解成多種氨基酸混合物，經(jīng)分離純化獲得各種藥用氨基酸的方法稱(chēng)為水解法。水解法生產(chǎn)氨基酸的主要過(guò)程為

25、水解、分離和結(jié)晶精制三個(gè)步驟。本法優(yōu)點(diǎn)是原料來(lái)源豐富，投產(chǎn)比較容易。 缺點(diǎn)是產(chǎn)量低，成本高。 目前用水解法生產(chǎn)的氨基酸有L-胱氨酸、L-半胱氨酸、L-亮氨酸、L-酪氨酸等。 （2）發(fā)酵法：發(fā)酵法是指以糖為碳源、以氨或尿素為氮源，通過(guò)微生物的發(fā)酵繁殖直接生產(chǎn)氨基酸；或是利用菌體的酶系，加入前體物質(zhì)合成氨基酸的方法。微生物利用碳源、氮源及鹽類(lèi)幾乎可合成所有氨基酸。目前絕大部分氨基酸皆可通過(guò)發(fā)酵法生產(chǎn)，優(yōu)點(diǎn)是直接生產(chǎn)L-型氨基酸；其缺點(diǎn)是產(chǎn)物濃度低，設(shè)備投資大，工藝管理要求嚴(yán)格，生產(chǎn)周期長(zhǎng)，成本高。 （3）酶轉(zhuǎn)化法：酶轉(zhuǎn)化法亦稱(chēng)為酶工程技術(shù)，實(shí)際上是在特定酶的作用下使某些化合物轉(zhuǎn)化成相應(yīng)氨基酸的技術(shù)

26、。基本過(guò)程是以化學(xué)合成的、生物合成的或天然存在的氨基酸前體為原料，將含特定酶的微生物、植物或動(dòng)物細(xì)胞進(jìn)行固定化處理，通過(guò)酶促反應(yīng)制備氨基酸。酶工程法與直接發(fā)酵法生產(chǎn)氨基酸的反應(yīng)本質(zhì)相同，皆屬酶轉(zhuǎn)化反應(yīng)，但前者為單酶或多酶的高密度轉(zhuǎn)化，而后者為多酶低密度轉(zhuǎn)化。酶工程技術(shù)工藝簡(jiǎn)單，產(chǎn)物濃度高，轉(zhuǎn)化率及生產(chǎn)效率較高，副產(chǎn)物少，固定化酶或細(xì)胞可進(jìn)行連續(xù)操作，節(jié)省能源和勞務(wù)，并可長(zhǎng)期反復(fù)使用。 （4）化學(xué)合成法：以-鹵代羧酸、醛類(lèi)、甘氨酸衍生物、異氰酸鹽、乙酰氨基丙二酸二乙酯、鹵代烴、-酮酸及某些氨基酸為原料，經(jīng)氨解、水解、縮合、取代及氫化還原等化學(xué)反應(yīng)合成-氨基酸的方法稱(chēng)為化學(xué)合成法。一般合成法包括鹵

27、代酸水解法、氰胺水解法、乙酰氨基丙二酸二乙酯法、異氰酸酯（鹽）合成法及醛縮合法等；產(chǎn)物皆為DL-型氨基酸混合物。不對(duì)稱(chēng)合成法包括直接合成、-酮酸反應(yīng)及不對(duì)稱(chēng)催化加氫等方法；產(chǎn)物為L(zhǎng)-型氨基酸。優(yōu)點(diǎn)：可采用多種原料和多種工藝路線，以石油化工產(chǎn)品為原料時(shí)，成本較低，生產(chǎn)規(guī)模大，適合工業(yè)化生產(chǎn)。缺點(diǎn)：生產(chǎn)工藝復(fù)雜。 簡(jiǎn)述氨基酸輸液的定義，氨基酸輸液的組方原理和原則，常用的氨基酸輸液有哪幾種類(lèi)型？（1）定義：多種結(jié)晶L-氨基酸依特定比例混合制成的靜脈內(nèi)輸注液稱(chēng)為氨基酸輸液。（氨基酸輸液可直接注入進(jìn)食不足者的血液中，促進(jìn)蛋白質(zhì)、酶及肽類(lèi)激素的合成，提高血漿蛋白濃度與組織蛋白含量，維持氮平衡，調(diào)節(jié)肌體正常

28、代謝。） （2）組方原理和原則：種優(yōu)良的氨基酸輸液注入人體后，各種氨基酸能得到最有效地利用，其組成平衡，使臨床癥狀得到改善，體重增加而無(wú)代謝并發(fā)癥，血漿游離的氨基酸譜無(wú)顯著變化。（目前國(guó)內(nèi)外生產(chǎn)氨基酸輸液組方中必須含八種必需氨基酸和兩種半必需氨基酸，所有氨基酸均為L(zhǎng)-型；另外，組方中尚需含5山梨醇或木糖醇，以補(bǔ)充能量、促進(jìn)氨基酸的吸收和利用；同時(shí)加半胱氨酸作為穩(wěn)定劑，由此方能構(gòu)成優(yōu)良的氨基酸輸液。） （3）類(lèi)型： 目前臨床使用的胰島素來(lái)源有 動(dòng)物胰臟來(lái)源 、半合成胰島素 、 重組DNA技術(shù)生產(chǎn)胰島素 。 下列屬于多肽藥物的是（A） A降鈣素 B干擾素  C白蛋白  D Ig

29、G 下列藥物分類(lèi)不屬于蛋白質(zhì)藥物的是（C） A 白細(xì)胞介素 B 腫瘤壞死因子 C 甲狀腺多肽激素 D 胰島素 酶促半合成人胰島素經(jīng)胰蛋白酶的轉(zhuǎn)酰胺作用，將豬胰島素轉(zhuǎn)化為人胰島素B30。再用離子交換層析純化，可得到高純度人胰島素。 酸醇提取法制備胰島素的生產(chǎn)工藝要點(diǎn)？離體后，蛋白水解酶類(lèi)能分解胰島素使之失活。因此，要立即深凍，先在-30以下急凍后轉(zhuǎn)入-20保存?zhèn)溆?。如用液氮或干冰速凍，效果更好。在胰臟中，胰尾部分胰島素含量較高，如單獨(dú)使用可提高收率10 %。結(jié)晶胰島素需進(jìn)一步純化。具有抗腫瘤作用的酶（C ） A溶菌酶 B 胰蛋白酶  C 天冬酰胺酶 D細(xì)胞色素C用豬心提取細(xì)胞

30、色素C的工藝要點(diǎn)？細(xì)胞色素C存在于自然界中一切生物細(xì)胞里，其含量與組織的活動(dòng)強(qiáng)度成正比。以哺乳動(dòng)物的心肌、鳥(niǎo)類(lèi)的胸肌和昆蟲(chóng)的翼肌含量最多，肝、腎次之，皮膚和肺中最少。以下為實(shí)驗(yàn)報(bào)告補(bǔ)充，僅供參考：盡量除去豬心非心肌組織，脂肪、血管、韌帶和積血。提取、中和步驟要注意調(diào)pH。吸附、洗脫步驟應(yīng)嚴(yán)格掌握流速。鹽析時(shí)，加入固體硫酸銨，要邊加邊攪拌，不要一次快速加入。逐滴加入三氯乙酸溶液，攪勻，加完后，盡快離心。透析袋使用前要檢漏。 下列屬于多糖藥物的是（ C ） A干擾素 B胰島素 C肝素 D膽固醇 大部分黏多糖與蛋白質(zhì)結(jié)合于細(xì)胞中，因此需用 酶解法 或 堿解法 使糖-蛋白質(zhì)間的結(jié)合鍵斷裂，促使多糖釋放

31、。 提取法制備輔酶Q10的要點(diǎn)？ 輔酶Q10又稱(chēng)為泛醌Q10，為黃色或淡橙黃色、無(wú)臭、無(wú)味結(jié)晶性粉末，易溶于氯仿、苯、四氯化碳，溶于丙酮、乙醚、石油醚；微溶于乙醇，不溶于水和甲醇。熔點(diǎn)49。以下為實(shí)驗(yàn)報(bào)告補(bǔ)充，僅供參考：在醇?jí)A皂化時(shí)，由于乙醇存在，長(zhǎng)時(shí)間的皂化，講導(dǎo)致CoQ10環(huán)上甲氧基與乙醇中的乙氧基換位，生成單或雙氧基衍生物，因此為了避免這些雜質(zhì)的產(chǎn)生，皂化限制在30min內(nèi)，皂化后，迅速冷卻。石油醚較易揮發(fā)，萃取過(guò)程要注意放氣。制備過(guò)程要注意閉光。洗脫過(guò)程中需嚴(yán)格控制流速。制備過(guò)程中，注意采集樣品，以備檢測(cè)。第十一章 微生物藥物制造工藝 青霉素屬于 -內(nèi)酰胺 類(lèi)抗生素，它的性質(zhì)很不穩(wěn)定，用溶劑萃取法分離時(shí)，整個(gè)提煉過(guò)程應(yīng)在 低溫 、 快速 、 嚴(yán)格控制pH值 進(jìn)行。 鏈霉素是 氨基糖苷 類(lèi)抗生素；紅霉素 大環(huán)內(nèi)酯 類(lèi)抗生素。 克拉維酸是微生物產(chǎn)生的 （B ） A. HMG-CoA