柳州地區(qū)成人血清和尿中淀粉酶生物參考區(qū)間的建立

1、柳州地區(qū)成人血清和尿中淀粉酶生物參考區(qū)間的建立摘要：目的以本實(shí)驗(yàn)室血清淀粉酶(amy)和尿淀粉酶生化項(xiàng)目為 例，探討建立適合本實(shí)驗(yàn)室的生物參考區(qū)間的方法。方法 應(yīng)用美國(guó)臨床 實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化研究院(clsi) c28-a2文件推薦方法，結(jié)合is015189： 2003 (e)醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室一質(zhì)量和能力的專(zhuān)用要求條款要求，同時(shí)參考試劑牛 產(chǎn)廠家的說(shuō)明書(shū)、權(quán)威書(shū)籍期刊或轉(zhuǎn)移其他醫(yī)院實(shí)驗(yàn)室的生物參考區(qū)間， 進(jìn)行驗(yàn)證，驗(yàn)證不通過(guò)的項(xiàng)目。收集本地區(qū)120例健康成人參考個(gè)體建立 適用于本實(shí)驗(yàn)室的生物參考區(qū)間，定期進(jìn)行臨床評(píng)審。結(jié)果血清以及尿 amy現(xiàn)用生物參考區(qū)間驗(yàn)證未通過(guò)驗(yàn)證，須口行建立生物參考區(qū)間。血清 am

2、y自建牛物參考區(qū)間為39-152u/l,尿amy自建參考區(qū)間：男性56-897 u/l,女性34758 u/lo結(jié)論 采用本研究方法建立實(shí)驗(yàn)室生物參考區(qū)間 能確保生物參考區(qū)間符合臨床要求，結(jié)果可靠、準(zhǔn)確。方法科學(xué)、實(shí)用。關(guān)鍵詞：血清淀粉酶；尿淀粉酶；成人；參考區(qū)間；建立abstract : objective to explore a suitable method for our laboratory to establish the biological reference interval, taking serum amylase (amy) and urine amylase as

3、examples methods according to the items of is015189： 2003(e) "the medical laboratory- the quality and the ability of special-purpose，zand the methods recommcnded by (clsi)c28-a2, a reference reagent maimfacturcrsinstructions , or transfer outhority books , other hospital laboratories biological

4、 reference interval , then experimental verification, when validation project is not passed, collected 120 healthy adult individuals in the region establish reference applicable to the biological laboratory referenee intervals , regular clinical assessment. results serum amy and urinary amy active b

5、iology reference interval validation does not pass, must establish a new biology referenee.the new serum amy interval was 39-152u / l, the urine amy interval was: male 56-897 u / l, female 34-758 u / l. conclusion the study established clinical laboratory met hods can effectively guarantee the biolo

6、gical refere nee interval test indicators of biological reference intervals reliable , accurate scientific， practical, biological reference intervals to ensure compliance with clinical requirementskey words： serum amylase； urine amylase； adult； biology referenee interval； establishement牛物？15 記？間是解釋檢

7、驗(yàn)結(jié)果分析檢驗(yàn)信息的一個(gè)基本尺度和依據(jù)1。實(shí)驗(yàn)室給臨床提供檢驗(yàn)項(xiàng)目可靠的生物參考區(qū)間，才能使臨床對(duì)患 者或健康體檢者的診斷治療有明確的指引2。我國(guó)目前所使用的參考區(qū) 間大多來(lái)自教科書(shū)和試劑盒說(shuō)明書(shū)，這些參考區(qū)間大多源自國(guó)外二三十年 前對(duì)白種人的研究。由于不同地區(qū)的人群在遺傳學(xué)、生活環(huán)境和飲食習(xí)慣 上都存在差異，所以這些建立在白種人體系上的參考區(qū)間在我國(guó)應(yīng)用時(shí)可 能在某些項(xiàng)目上存在一定的偏差。為此國(guó)際臨床化學(xué)和檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)聯(lián)合會(huì)(international fodcration of clinical chemistry, ifcc), 建議每 個(gè)臨床實(shí)驗(yàn)室都能建立符合木地人群特征的參考區(qū)間，或者至

8、少能夠驗(yàn)證 由其他途徑獲得的參考區(qū)間3o is015189中明確要求，應(yīng)定期評(píng)審生物 參考區(qū)間4 o美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化研究院(clinical and laboratory standards institute, clsi)亦指出每個(gè)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)該建立自己的參考區(qū) 間5如驗(yàn)證現(xiàn)有參考區(qū)間不再適用，應(yīng)采取糾正措施。在我科執(zhí)行 is015189認(rèn)可的過(guò)程中，我們結(jié)合is015189條款要求和美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室 標(biāo)準(zhǔn)協(xié)會(huì)clsi c28-a2文件6推薦方法，建立一個(gè)適合本實(shí)驗(yàn)室的生物 參考區(qū)間，保證生物參考區(qū)間的可靠、適用，為臨床提供準(zhǔn)確的診治依據(jù)。1資料與方法1.1-般資料1. 1. 1驗(yàn)證樣木以if

9、cc推薦方法收集2011年7月9月360例健康 參考個(gè)體樣本，均來(lái)源于我院體檢屮心健康體檢者。所有入選者均排除胰 腺炎、腮腺炎等引起淀粉酶異常的相關(guān)疾病，近期無(wú)手術(shù)，未服用藥物， 采樣前一天受檢者無(wú)飲酒及劇烈運(yùn)動(dòng)，空腹采樣。其屮男性180例，年齡 21歲63歲，平均年齡40歲，女性180例，年齡20-59歲，平均年齡 38歲。1.1.2檢測(cè)儀器試劑羅氏公司p800生化分析儀、羅氏診斷公司配套試劑、校準(zhǔn)品、質(zhì)控品。1. 1. 3質(zhì)量控制 儀器通過(guò)性能驗(yàn)證，檢測(cè)中應(yīng)用羅氏低值與高值質(zhì)控 品對(duì)樣本分析進(jìn)行質(zhì)量控制，檢測(cè)系統(tǒng)正常。12方法 1.2. 1檢測(cè)20例樣本，檢測(cè)結(jié)果95%在現(xiàn)用的參考區(qū)間之內(nèi)

10、，即20 例中有19例在范圍內(nèi)，只有5%,即1例結(jié)果在參考區(qū)間之外，則說(shuō)明現(xiàn) 用參考區(qū)間有效。如果有大于2例檢測(cè)數(shù)據(jù)在參考區(qū)間之外，則可進(jìn)一步 進(jìn)行建立生物參考區(qū)間實(shí)驗(yàn)。1. 2. 2繼續(xù)收集至120例健康參考個(gè)體，測(cè)得結(jié)果后進(jìn)行離群值的判 斷。可通過(guò)1/3規(guī)則進(jìn)行判斷。疑似離群值和其相鄰位置數(shù)值的差值(d) 和數(shù)據(jù)全距(r)相除，d與r的比值應(yīng)w1/3,如1/3則該點(diǎn)考慮為離群 點(diǎn)。如有2個(gè)或以上疑似離群值，若比值1/3,則所有結(jié)果都不應(yīng)保留； 如比值1/3,則可保留所有數(shù)據(jù)。當(dāng)有離群值去除后，可將其他數(shù)據(jù)補(bǔ)足。1. 2. 3繪制直方圖可直接觀察數(shù)據(jù)的分布特征。此時(shí)可運(yùn)用百分位數(shù) 法確定改組

11、數(shù)據(jù)2.5%和97.5%位數(shù)的參考限，從而建立參考區(qū)間。在獲取 與分析對(duì)象標(biāo)本前，需要考慮到為對(duì)象中亞組建立獨(dú)立區(qū)間的可能性。當(dāng) 有足夠的臨床證據(jù)證明以及具備生理學(xué)意義時(shí)，才需要為性別或者不同年 齡組分別建立獨(dú)立的參考區(qū)間。z檢驗(yàn)公式：式中nl和n2分別為各自亞組中參考值的數(shù)目，xl和x2是兩個(gè)亞組 觀測(cè)值的均值，si和s2為兩組的標(biāo)準(zhǔn)差。通過(guò)計(jì)算z值判斷是否需耍分 組：如標(biāo)準(zhǔn)差s2為較大s,應(yīng)檢查它是否15倍的si,即s2/ (s2-sl) 是否3。若計(jì)算z值超過(guò)z*值或較大s21.5 si,則都須考慮分組。1. 2. 4 is015189中要求臨床實(shí)驗(yàn)室建立參考區(qū)間后應(yīng)聯(lián)系臨床醫(yī)生提 供在

12、實(shí)際臨床工作中對(duì)于此項(xiàng)目的意見(jiàn)，至少一年定期進(jìn)行評(píng)審一次，便 于發(fā)現(xiàn)問(wèn)題，持續(xù)改進(jìn)。2結(jié)果 2. 1應(yīng)用clsi c28-a2文件推薦方法，對(duì)20例健康參考個(gè)體進(jìn)行驗(yàn)證, 檢測(cè)結(jié)果超出現(xiàn)用采用試劑說(shuō)明書(shū)的參考區(qū)間，顯示現(xiàn)用amy牛物參考區(qū) 間不適用，見(jiàn)表1。按clsi c28-a2文件要求，收集120健康參考個(gè)體。結(jié)果見(jiàn)表2,表 3,表4。結(jié)合觀察圖1、圖2、圖3,從圖1、圖2可看出血清amy、男性尿amy分布大致呈正態(tài)分布，而 圖3女性尿amy分布呈右偏態(tài)分布，對(duì)三組數(shù)據(jù)采用百分位數(shù)法確定2. 5% 和97. 5%位數(shù)的參考限，經(jīng)計(jì)算取第3和118位數(shù)值，得出血清amy參考 區(qū)間為：3915

13、2u/l,尿 amy：男 56852 u/l,女 38716 u/l。2. 2本例3組數(shù)據(jù)經(jīng)觀察計(jì)算未發(fā)現(xiàn)離群值。2. 3查詢(xún)?cè)噭┱f(shuō)明書(shū)和文獻(xiàn)資料顯示7,同時(shí)臨床證據(jù)顯示血清amy 不存在明顯的牛物差異。則該項(xiàng)目不無(wú)需作z檢驗(yàn)確定分組。而尿amy要 按性別分組計(jì)算參考區(qū)間。木例中每組參考個(gè)體數(shù)為120,則臨界值刁*二3, 將表3、表4數(shù)據(jù)帶入計(jì)算z二609>z*二3,所以尿aiy需按性別分組分別 統(tǒng)計(jì)。3討論近年來(lái)，隨著各種全自動(dòng)生化分析儀器的普及應(yīng)用，大大提高了檢驗(yàn) 速度與精確性，但對(duì)于各項(xiàng)目的參考區(qū)間我們卻還多是沿用？劑廠商提供 的或是全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程及教科書(shū)上的，未考慮到民族及

14、地域、 性別、年齡等差異，而在柳州地區(qū)，對(duì)本地區(qū)的生化項(xiàng)目的參考區(qū)間的研 究極少，亟需對(duì)本地區(qū)進(jìn)行多項(xiàng)冃的參考區(qū)間調(diào)查。本實(shí)驗(yàn)室對(duì)血清amy 和尿amy現(xiàn)用牛物參考區(qū)間進(jìn)行驗(yàn)證，驗(yàn)證不通過(guò)，需重新建立區(qū)間。原 用參考區(qū)間血清amy： 28-100 u/l,男性尿amy： 16-491 u/l,女性尿amy： 21447 l7l。其中對(duì)于尿amy通過(guò)參閱相關(guān)文獻(xiàn)和臨床效用需按性別分組，進(jìn)行z-檢驗(yàn)也支持分組。新建立參考區(qū)間血清：39-152 u/l男 性尿amy： 56897 u/l,女性尿amy： 34758 u/l,兩者差異明顯。造 成結(jié)果差異的因素是多方面的，方法學(xué)的不同，研究人群的地域、

15、民族、 生活習(xí)慣等不同可能導(dǎo)致了本研究結(jié)果的不同。血清和尿amy在臨床常用 于胰腺炎和急腹癥的診斷，其值對(duì)于胰腺炎的發(fā)病時(shí)間和其他急腹癥的鑒 別診斷有較大參考價(jià)值。這時(shí)為臨床提供準(zhǔn)確適用的參考區(qū)間則相當(dāng)重 要，如果參考區(qū)間不準(zhǔn)確，會(huì)給臨床醫(yī)生帶來(lái)困惑，導(dǎo)致漏診誤診，延誤 治療，甚至造成嚴(yán)重后果，由此可見(jiàn)實(shí)驗(yàn)室建立生物參考區(qū)間工作意義重 大。對(duì)于尿amy在一定程度上會(huì)受到采樣范圍和參考個(gè)體尿量的影響，如 有必要，應(yīng)建立使用相同檢測(cè)系統(tǒng)的多中心參考區(qū)間8,以期將干擾因 素減少。同時(shí)，依據(jù)ts015189要求我們也定期邀請(qǐng)臨床醫(yī)生進(jìn)行臨床評(píng) 市，綜合臨床資料獲取對(duì)相關(guān)疾病的最新診治訊息以彌補(bǔ)檢驗(yàn)科單

16、方建立 參考區(qū)間的不足。本研究調(diào)查了柳州地區(qū)健康成年人群血清和尿amy參考 值水平，并建立參考區(qū)間，至今臨床反映良好，該方法實(shí)用科學(xué)。當(dāng)然本 地區(qū)的自然環(huán)境和人們牛活飲食習(xí)慣也在不斷的變化當(dāng)中，建立參考區(qū)間 將是一項(xiàng)長(zhǎng)期工作，還需不斷的加大樣本量，累積數(shù)據(jù)，盡可能排除影響 因素，經(jīng)過(guò)一系列科學(xué)的評(píng)估才能更具地域代表性，更適用于當(dāng)?shù)厝巳骸⒖嘉墨I(xiàn)：1魏有仁參考值的幾個(gè)基本問(wèn)題j 中國(guó)實(shí)驗(yàn)診斷學(xué)，1997, 1 (1)： 44-46.2 馮仁豐臨床檢驗(yàn)質(zhì)量管理技術(shù)基礎(chǔ)m上海：上?？萍嘉墨I(xiàn)出版 社，2004： 136.3 曾潔，陳文祥，申子瑜參考區(qū)間研究現(xiàn)狀概述j中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué) 雜志，2010, 33 (6)： 570-5734jis015189： 2003 (e)醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室一質(zhì)量和能力的專(zhuān)用要求s5 insitiute cals .defining, establishing , and verifying reference intervals in the clinical laboratory ； approved guidelinem3 rd ed.wayne： clinecal and laboratory s tandards ins