USP方法與EP方法對比試驗

1、USP與EP檢測方法的對比實驗一 實驗?zāi)康模罕容^USP與EP檢測方法結(jié)果的區(qū)別二 實驗中需要注意的重要參數(shù)：儀器：高效液相色譜儀，紫外分光光度計， TLC ，傅里葉紅外變換光譜儀， *同種儀器使用同一臺試劑： 同種規(guī)格的試劑應(yīng)盡量使用同一生產(chǎn)批號或同一批配制的。 人員：同一指標(biāo)必須由同一人完成。三 執(zhí)行方法及標(biāo)準(zhǔn)：1 定性鑒別：1.1 EP方法：A 紅外吸收光譜在105oC下干燥樣品6小時，用4mg樣品錄制譜圖。將所得譜圖與化學(xué)參比物 譜圖。B:在0.4ml溶液S1中加入10ml水，5ml稀鹽酸，2ml重鉻酸鉀溶液。產(chǎn)生橘 黃色沉淀。C:在1ml的S1溶液中加入0.2ml的二甲氨基苯甲醛和0.

2、1ml的硫酸，生成粉 紅色溶液。D:在0.1ml的S1溶液中加入5ml的水和0.2ml0.05mol/l 的碘溶液，生成紅色溶液。E:取0.5g樣品溶解于10ml水中，搖動，全部樣品溶解。溶液外觀：溶液S澄清，顏色淺于Bs，BY6。1.2 USP 方法：A .取10ml20mg/ ml的樣品溶液加入20ml1當(dāng)量的鹽酸和5ml的重鉻酸鉀溶液， 生成黃色沉淀。B.用2ml純水溶解75mg的硝酸鉆和300mg的硫氰酸銨，加入5ml的20mg / ml 的樣品溶液，再加入 3當(dāng)量的鹽酸，生成藍(lán)色沉淀。C.取5 ml 5mg/ ml的樣品溶液加入數(shù)滴碘液，溶液變成深紅色。注：溶液S:取1.0g樣品，溶

3、解于無二氧化碳水中并稀釋至 20ml。取少量待測 樣品到水中，用磁力攪拌器攪拌。溶液S1 :取2.5g樣品，溶解于無二氧化碳水，并稀釋至25ml。取少量待測樣品到水中，用磁力攪拌器攪拌。參比液B6溶液的配：黃色溶液：用鹽酸溶液(HCl/H2O=25ml/975ml)溶解46g FeCh并定容至1000ml， 滴加相同的鹽酸溶液調(diào)整 FeCl3 6H2O的濃度為45.0 mg/ml，避光存放。滴定：加10.0ml上述溶液，15ml水，5ml HCl，4gKI于250ml帶塞磨口錐形燒瓶中，塞上瓶塞，加100ml水，避光存放15min。用0.1M NaSQ滴定游離的 碘，當(dāng)?shù)味ㄟ_(dá)終點時，加0.5m

4、l +淀粉溶液做指示劑。1ml 0.1M Na2SQ 等量于 27.03mg FeCl3 6H2O紅色溶液：用鹽酸溶液(HCl/H2O=25ml/975ml)溶解 60g CoCb( cobalt chlorideR)并定容至1000ml，滴加相同的鹽酸溶液調(diào)整 CoCl2 - 6H2O的濃度為59.5 mg/mlo滴定：加5.0ml 上述溶液，5ml H2Q的稀溶液，10ml 300g/l的NaOH§液，于 250ml帶塞磨口錐形燒瓶中，慢慢煮沸 10min,冷卻，加60ml稀"SO, 2g KI， 塞上瓶塞，輕輕搖動使沉淀物溶解。用 0.1M NaSQ滴定游離的碘，當(dāng)?shù)?/p>

5、定達(dá)終 點時，加0.5ml淀粉溶液做指示劑，粉紅色顯示為終點。1ml 0.1M Na2S2Q 等量于 23.79 mg CoCl2 6H2O藍(lán)色溶液：用鹽酸溶液(HCl/H2O=25ml/975ml)溶解63g CuSO并定容至1000ml， 滴加相同的鹽酸溶液調(diào)整CuSO4 5H2O的濃度為62.4 mg/ml。滴定：加10.0ml上述溶液，50ml水，12ml稀醋酸，3g KI于250ml帶塞磨口 錐形燒瓶中，塞上瓶塞，加100ml水，避光存放15min。用0.1M NaSO滴定游 離的碘，當(dāng)?shù)味ㄟ_(dá)終點時，加0.5ml淀粉溶液做指示劑。淺棕色顯示為終點。1ml 0.1M NazSQ 等量于

6、 24.97mg CuSO4 5HQ標(biāo)準(zhǔn)溶液B的配制見表1：表1標(biāo)準(zhǔn)溶液B的配制標(biāo)準(zhǔn)溶液體積/ml黃色溶液紅色溶液藍(lán)色溶液鹽酸(10g/l)B(褐色)3.03.02.41.6參比液B6的配制見表2:表2參比溶液B6的配制參比液體積/ml標(biāo)準(zhǔn)液B鹽酸(10g/l)Be5.095.02 K值：2.1 EP方法:2.1.1標(biāo)準(zhǔn)：理論K值w 15的聚維酮，其實際K值為理論值的85%-115%理論K值或平均理論 K值15的聚維酮，其實際 K值為理論值或平均理論 K值的90.0%-108.0%2.1.2試驗方法：取本品1.00 (g)按無水物計算精密稱定，置 50ml燒杯中,加水適量使之溶解， 置100m

7、l容量瓶中并加水稀釋至刻度,在25C恒溫水浴中放置1h,用最小流動 時間為100S的粘度計檢測。測得相對粘度n r，按下式計算K值。K=300Cog z+(C + 1.5Clog z)21/2+1.5Clog z-C/(0.15C+0.003C)式中C為供試品的濃度(g/100ml)2.2 USP 方法：2.2.1標(biāo)準(zhǔn)：理論K值w 15的聚維酮，其實際K值為理論值的85%-115%理論K值或平均理論 K值15的聚維酮，其實際 K值為理論值或平均理論 K值的90.0%-108.0%2.2.2檢測方法：稱取1g(按無水物計算)樣品，用50ml水溶解至100ml容量瓶中，用水稀釋至刻 度線。在25+

8、0.2oC下用毛細(xì)管粘度計測量其粘度。在同樣環(huán)境下測量水的年度。 用下面公式基數(shù)按K值：K=300Cog n r+(C +1.5Clog n J21/2+1.5Clog n lC/(0.15C+0.003© 式中：C: 100ml溶液中樣品無水物質(zhì)量Z:樣品溶液相對于水的相對粘度。3醛：3.1 EP方法：3.1.1標(biāo)準(zhǔn)：表證為乙醛，不超過500ppm3.1.2試驗方法：3.1.2.1測試液：精密稱取1.0g待測樣品，用PH=9.0的磷酸鹽緩沖液溶解并 稀釋至100.0ml。塞緊容量瓶，使其處于密封狀態(tài)，并在60C水浴中恒溫1h,再冷卻至室溫，備用。3.1.2.2參比液：精密稱取0.1

9、40g三水合三聚乙醛胺，用純水溶解并稀釋至 200.0ml。取1.0ml上述溶液置100ml容量瓶中，再用PH=9.0的磷酸 鹽緩沖液溶解至100.0ml。3.1.2.3操作步驟：取三個相同的石英比色皿(L=1cm)分別加入0.5ml的測試液，參比液，水(作 空白)。然后在每個比色器中加入 2.5ml的PH=9.0的磷酸鹽緩沖液和0.2ml的 煙酰胺腺嘌呤二核苷酸，搖勻，塞緊。將它們放在22_2C下，保持23mim后，以純水為空白，在波長為340nm的紫外分光光度計上測定每個溶液的吸收 度，并記錄。然后再在每個比色皿中，加入0.05ml乙醛脫氫酶，搖勻，塞緊，放在22 ± 2C下保持

10、5mim，以純水為空白，在340nm紫外分光光度計上測定每 個溶液的吸收度，記錄每個數(shù)據(jù)。計算公式醛的含量(ppm): AS” 一 Ab2-Abi10°°°0 c(A s2 - A S1 ) (A b2 - A b1 )m式中：At1：加入乙醛脫氫酶前待測液的吸光度At2：加入乙醛脫氫酶后待測液的吸光度As1：加入乙醛脫氫酶前參比液的吸光度As2：加入乙醛脫氫酶后參比液的吸光度Ab1加入乙醛脫氫酶前空白液的吸光度Ab2加入乙醛脫氫酶后空白液的吸光度m:不含水的聚維酮的質(zhì)量(g)C:參比液中乙醛的濃度，按三聚乙醛胺的重量計算(轉(zhuǎn)換系數(shù)：0.72mg/ml)3.2 U

11、SP 方法：3.2.1標(biāo)準(zhǔn)：小于0.05%3.2.2檢測方法：3.2.2.1溶液A :用500ml容量瓶中加入8.3g焦磷酸鉀，加入400ml水石其溶解， 如必要，以1當(dāng)量的鹽酸調(diào)節(jié)PH為9.0,用水稀釋至刻度線。3.22.2溶液B:在一小玻璃瓶中加入等同于 70單位的凍干乙醛脫氫酶，加入 10ml水時期溶解。3.2.2.3溶液C:向一小玻璃瓶中加入40mg煙酰胺腺嘌呤核苷酸，再加入10ml 溶液A使其溶解。3.2.2.4標(biāo)準(zhǔn)液：在玻璃稱量瓶中加入2ml水，再加入100mg新蒸的乙醛，將此 溶轉(zhuǎn)移至100ml容量瓶，用幾分水清洗稱量瓶，轉(zhuǎn)移每次的洗液至容量瓶中， 用水稀釋 至刻度線。在4

12、76;C下放置20小時。取此溶液1ml至100ml容量瓶用 水稀釋至刻度線。3.2.2.5樣品溶液：在100ml容量瓶用溶液A配制成20mg/ml的聚維酮溶液，在 60°C水浴加熱1小時，冷卻至室溫。3.2.2.6空白液：水3.2.2.7在三個比色皿中分別加入 0.5ml標(biāo)準(zhǔn)液，樣品溶液?？瞻滓?，在每個比 色皿中分別加入2.5mI溶液A和0.1ml溶液C。蓋上比色皿的蓋子，在 20+2oC 放置2到3分鐘。用水做殘壁測量吸光度。在每個比色皿中加入0.05ml溶液B， 蓋上蓋子，在20+2oC放置5分鐘。以水做參比測量吸光度。用下面公式計算醛的百分含量Result = 10 (QW)

13、(A U2- Au1)- (Ab2 -Ab1)/(A S2 -As1)-(Ab2- Ab1)C:標(biāo)準(zhǔn)液中乙醛的濃度(mg/ml)W：聚維酮的質(zhì)量(g)AU2 ：加入溶液 B 后樣品溶液的吸光度AU1 ：加入溶液 B 前樣品溶液的吸光度AB2 ：加入溶液 B 后空白液的吸光度AB1 ：加入溶液 B 前空白的吸光度As2：加入溶液B后標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度Asi:加入溶液B前標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度4 過氧化物：4.1 EP 方法：4.1.2 標(biāo)準(zhǔn)：4.1.3 實驗步驟：4.1.3.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制4.1.3.1.1 儀器校正將樣品池與參比池中加入25mL被測物溶液與2mL 13%硫酸的混合液，交換樣品 與參

14、比兩池在分光光度計中的位置，在 405nm處參比池的透光度為100%保持 樣品池的透光度w 100%并記為:C%。4.1.3.1.2 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制與標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制配制 H2Q含量分別為 6ppm,8ppm,9ppm,10ppm,11ppm,12ppm,14pp和 15ppm的一系列標(biāo)準(zhǔn)溶液,每一濃度取25mL滴加2mL硫酸化鈦試液，靜置30分鐘。以25mL 被測溶液加 2mL 13%硫酸作為參比液 ,分別測定并記錄該系列標(biāo)準(zhǔn)樣品在 405nm 處的透光率，T1,T2,T3,T , T8% Y以HO的濃度為橫坐標(biāo) 丄ogA為縱坐標(biāo)作圖, 即得到一條標(biāo)準(zhǔn)曲線 （ 應(yīng)為一條直線 ） 。4.1.3.

15、1.3 待測樣品的配制和測定4.1.3.1.3.1 待測樣品溶液稱取樣品 4.0克，用 100毫升純化水溶解并攪拌 30分鐘；取25ml樣品溶液，加入2ml硫酸氯化鈦溶液，靜置30分鐘后用分光光度計測定該樣品在405nm處的吸光度，記為：A%;計算logA,然后在標(biāo)準(zhǔn)曲線方程中計算處樣品溶液中的過氧化物的濃度，再除以樣品重量，從而計算處樣品的真實過氧化物的濃度。參比液吸取25mL待測樣品溶液，力卩2mL 13%( V/V)稀硫酸溶液,靜置30分。4.1.4 結(jié)果處理計算出LogA,然后在標(biāo)準(zhǔn)曲線的方程中計算出樣品溶液中的過氧化物的濃度，再除以樣品重量，從而計算出樣品的真實過氧化物的濃度。計算公

16、式C = (C 1 /M)*100式中： C ：樣品的真實過氧化物的濃度C:待測樣品溶液過氧化物的濃度M稱取樣品質(zhì)量5 甲酸：5.1 EP 方法：標(biāo)準(zhǔn)5.1.1 標(biāo)準(zhǔn)：小于 0.5%5.1.2 實驗驗方法：5.1.2.1 測試條件預(yù)柱：柱長為0.025m,內(nèi)徑為4mm固定相為色譜級強酸性離子交換樹脂(5-io 卩 m ；柱子：長度為 0.25-0.30m, 內(nèi)徑為 4-8mm； 固定相：強酸性離子交換樹脂(5-10卩m);流動相：用水稀釋 0.25ml 的高氯酸至 1000ml； 流速：調(diào)節(jié)流速，使得甲酸的出峰保留時間大約為 11 分鐘； 進(jìn)樣量：50 I l ;檢測波長： 210nm；柱溫：

17、30C；重現(xiàn)性：連續(xù) 6 次重復(fù)測參比液，最大相對標(biāo)準(zhǔn)差為 2.0%。5.1.2.2 樣品液準(zhǔn)備：精密稱取樣品2.0g，用純化水溶解并稀釋至100.0ml容量瓶中，并充分搖 勻，備用。將強酸性離子交換樹脂 R的懸浮水溶液轉(zhuǎn)移到內(nèi)徑0.8cm、長20mm勺玻璃管中，其間保持酸性離子交換樹脂一直浸沒在水中。傾倒5ml水，且調(diào)節(jié)流速至約 20d/min ，當(dāng)水平線接近強酸性離子交換樹脂的頂層 時，將測試儲備液倒入柱子上，當(dāng)?shù)沽?2ml 時，收集 1.5ml ，并將其作為 測試液。5.1.2.3 參比液制備：精密稱取甲酸100mg用純化水溶解并稀釋至100.0ml，取上述溶液1ml，并 用純化水稀釋至

18、 100.0ml。5.124計算：5.124.1 校正因子（F） =A/Ci式中： A 1：外標(biāo)物峰面積G:外標(biāo)物的重量，mg5.1.2.4.2 樣品中甲酸勺含量（外標(biāo)）甲酸=A/ （F*C 2）*100%式中 :A2: 樣品出峰峰面積， mvsC2:樣品的重量，mg6 肼6.1 EP方法：6.1.1 標(biāo)準(zhǔn)：小于 1ppm6.1.2 試驗方法：6.1.2.1 溶液的的配制待測液：精密稱取2.5g無水樣品，用25ml純水溶解至50ml容量瓶中，加0.5mL 50g/L水楊醛的甲醇液，混勻，60C水浴加熱15mim冷卻，加2.0mL甲 苯，搖勻2mim離心，取上層混合液作為待測液。參比液：精密稱取

19、90mg水楊醛吖嗪用甲苯溶解至100mL取1mL上述溶液用甲 苯稀釋至 100mL。展開劑：甲醇 /水（ 2： 1）。6.1.2.2 操作步驟薄板活化：將硅烷化硅膠板F254薄層板在105°C 110°C活化30分鐘，活化后放置干燥器中備用點樣：距底邊1.01.5cm劃基線，用微量進(jìn)樣器吸取10卩L待測液進(jìn)行點樣， 點樣斑點直徑控制在23mm自然風(fēng)干（除去原點殘留的溶劑，以免殘留 溶劑的展開，造成不良影響） 。展開：用展開劑將密封的層析罐飽和 1 5分鐘，將點樣后的薄層板置層析缸內(nèi)， （勿與展開劑接觸）預(yù)飽和 10 分鐘，然后將點樣后的薄層板浸入展開劑 中約0.5cm （注

20、意勿使展開劑浸到點樣斑點），展開，待上行遷移到規(guī)定高 度（距基線615cm）時取出，置通風(fēng)處自然風(fēng)干。檢視：在365nm紫外燈下觀察、標(biāo)記。測比移值（ Rf）： Rf = 原點至色譜斑點中心的距離 /原點至溶劑前沿的距離 （水楊醛吖嗪 Rf 為 0.3 ）。判斷：測試液中水楊醛吖嗪在薄板上顯示的任何斑點，不強于參比液（1ppm）的斑點。6.2 USP 方法：6.2.1 標(biāo)準(zhǔn)：小于 1ppm6.2.2 溶液的配制：標(biāo)準(zhǔn)液：9.38卩g/ml的水楊醛吖嗪甲苯溶液。樣品溶液：轉(zhuǎn)移2.5g樣品至50ml離心管，混合溶解，加入500卩L1： 20的水楊醛吖嗪甲醇溶液。搖動，在60C水浴下加熱15分鐘。冷

21、卻，加 入 2.0ml 甲苯，插上一個膠管搖動兩分鐘，離心。去甲苯溶液的上清液為 樣品溶液。6.2.3 色譜系統(tǒng)：吸附劑：0.25mmr甲基硅烷化層析硅膠敷用量：10卩L展開劑：甲醇：水 2： 1波長： 365nm6.2.4 操作步驟：在固定相上點上規(guī)定體積的溶液，以獲得直徑為2-5mm的斑點。將半放入試驗箱，保證斑點在展開劑的上方。關(guān)閉試驗箱，令展開劑沿著板上 爬，直到展開劑爬到板高度的 3/4，取出板用鉛筆標(biāo)記展開劑的邊緣位置， 放置 干燥。用365nm的紫外光觀察斑點，水楊醛 吖嗪斑點的層析遲緩因子為0.3 , 樣品溶液的任何斑點都千與標(biāo)準(zhǔn)液。7. 殘單：7.1 EP 方法:7.1.1

22、標(biāo)準(zhǔn)：小于 10ppm7.1.2 實驗方法：7.1.2.1 測試條件預(yù)柱：柱長為0.025m,內(nèi)徑為4mm固定相為色譜級十八烷基硅烷鍵合硅膠(5卩m ；色譜柱：柱長為0.25m,內(nèi)徑為4mm固定相為色譜級十八烷基硅烷鍵合硅膠 (5卩m ；流速：調(diào)節(jié)流速，使得NVP的出峰保留時間大約為10分鐘；流動相：乙腈：水=10: 90 (V:V);柱溫：40C；進(jìn)樣量：50卩L;檢測波長：235 nm；重現(xiàn)性：參比液 (a) 連續(xù)重復(fù)進(jìn)樣測定六次之后，其最大相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為2.0%；分辨率： 參比液( b )中殘單出峰時間與醋酸乙烯酯的出峰時間的間隔色譜峰最 小值 2.0。7.1.2.2 溶液的制備：樣品液

23、準(zhǔn)備：精密稱取0.25g無水樣品，用流動相溶解并稀釋至 10.0mL,充分搖勻備用。參比液制備：(a) :精密稱取50mg的乙烯基吡咯烷酮，用甲醇溶解并稀釋至100mL,用移液管吸取此溶液1.0mL用甲醇稀釋至100.0mL，再用移液管吸取上述稀釋液 5.0mL，用流動相稀釋至100.0mL。(b) :精密稱取10mg乙烯基吡咯烷酮和0.5g醋酸乙烯用甲醇溶解，并稀釋至 100.0mL，用移液管吸取上述溶液1.0mL，用流動相稀釋成100.0mL。7.1.2.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：精密稱取O.OIgN-乙烯基吡咯烷酮至100ml容量瓶，用水溶解，并稀釋至刻 度線，取 0.1ml，0.2ml，0.

24、5ml ,1ml，5ml，10ml 分別稀釋至 100ml，制成 O.lppm, 0.2ppm, 0.5ppm，1ppm, 5ppm， 10ppm的溶液。分別進(jìn)樣50卩L，以所得峰 面積對濃度做圖，的到一條直線 y=mx其中：y代表峰面積x代表濃度，m為 比例系數(shù)。7.1.2.4 計算方法： 根據(jù)樣品的峰面積由標(biāo)準(zhǔn)曲線得出樣品溶液的殘留單體外標(biāo)濃度。 按以下公式 計算：樣品的殘留單體濃度 (ppm)=C2/C1式中： C1 ：樣品濃度C2 :外標(biāo)物的濃度7.2 USP 方法：7.2.1 標(biāo)準(zhǔn)：小于 0.001%7.2.2 實驗方法：7.2.2.1 測試條件：流動相：甲醇：水 =1 ： 4色譜系

25、統(tǒng)：檢測器： UV235nm柱：保護(hù)柱：4.0mm*25m封尾L7柱分離柱：4.0mm*25mm 5卩m圭寸尾L7柱柱溫： 40oC進(jìn)樣量：50卩L7.2.2.2 溶液的配制：系統(tǒng)適應(yīng)性溶液：取10mgN-乙烯基吡咯烷酮和500mg醋酸乙烯酯至100ml容量瓶，擁擠春溶解 并稀釋至刻度線，取此溶液1ml至100ml容量瓶中，用流動相稀釋至刻度線。標(biāo)準(zhǔn)儲存液：5卩g/ml的N-乙烯基吡咯烷酮甲醇溶液。標(biāo)準(zhǔn)液：用流動相稀釋標(biāo)準(zhǔn)儲存液至0.25 5卩g/ml。 樣品溶液：25mg/ml 的聚維酮流動相溶液。722.3 錄制譜圖，并計算相應(yīng)的N-乙烯基吡咯烷酮的峰面積。7.2.2.4 結(jié)果的計算：用下

26、面公式計算N-乙烯基吡咯烷酮的百分含量：N- 乙烯基吡咯烷酮的百分含量 =(r U/r S)*(C S/CU) *100ru樣品溶液中的N-乙烯基吡咯烷酮的峰面積。rs標(biāo)準(zhǔn)液中N-乙烯基吡咯烷酮的峰面積。Cs標(biāo)準(zhǔn)液中N-乙烯基吡咯烷酮的濃Cu樣品溶液中N-乙烯基吡咯烷酮的濃度。8 2-P:8.1 EP 方法8.1.1 標(biāo)準(zhǔn)：小于 3%8.1.2 實驗方法：8.1.2.1 測試條件：預(yù)柱：長0.025m,內(nèi)徑為3mm勺封端十八烷基甲硅烷硅膠(5卩m； 色譜柱：長0.25m,內(nèi)徑為3mm勺封端十八烷基甲硅烷硅膠(5卩； 流速：調(diào)節(jié)流速，使得a -P的出峰保留時間大約為11分鐘； 流動相：純化水，用

27、磷酸調(diào)節(jié) PH至2.4 ;進(jìn)樣量：50卩L;檢測波長： 205 nm柱溫：30C重現(xiàn)性：重復(fù)六次測定參比液之后，其最大相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為 2.0%8.1.2.2 溶液的配制：待測液準(zhǔn)備：精密稱取待測樣品100mg用純水溶解并稀釋至50.0mL。參比液制備：精密稱取a -P100mg用純水溶解并稀釋至100.0mL。取上述溶液3.0mL至50.0mL容量瓶，用純水定容至刻度，搖勻備用。8.1.3 計算：8.1.3.1 校正因子 F=A1/C1式中： A 1：外標(biāo)物峰面積G:外標(biāo)物的重量，mg8.132 樣品中a -P的含量(外標(biāo))A2/ (F*C2)*100%式中： A 2：樣品出峰峰面積， mvs

28、C2:樣品的重量，mg8.1.3.3 判斷：樣品峰面積要小于等于參比液色譜圖的主要峰面積的3.0%。9 重金屬：9.1 EP 方法：9.1.1 標(biāo)準(zhǔn)：小于 10ppm9.1.2 實驗方法：9.1.2.1 待測液的配制：(1)將2.0g樣品與0.5g MgO混合均勻，并灼燒至均勻的白色或灰白色。如果灼 燒 30 分鐘后仍然有色，可以待降溫后用玻璃棒攪拌后再次灼燒。 將灼燒殘渣于800C下烘1小時。(3) 收集殘余物溶解于5ml鹽酸和5ml水的混和溶液中，并將溶液分成兩份。(4) 取一份， 在其中加入 0.1ml 酚酞試液， 再加入濃氨水， 直至顯示粉紅色， 冷 卻后再加入冰醋酸至無色，再加入 0

29、.5ml 冰醋酸。如需要過濾得到的液體， 并洗滌濾紙。(5) 將步驟( 4)得到的試液稀釋至 20ml。(6) 取此溶液 12ml 備用。9.1.2.2 空白液的配制 ：10ml 純化水加入 2ml 待測液配制步驟( 5)的試液。9.1.2.3 參比液的配制：(1)將2.0g樣品與0.5g MgO混合均勻，加入2ml 10ppm的鉛標(biāo)準(zhǔn)溶液，在100105C下烘干，并灼燒至均勻的灰白色。 將灼燒殘渣于800C下烘1小時。(3) 收集殘余物溶解于 5ml 鹽酸與 5ml 水的混和溶液中，并將溶液分成兩份。(4) 取一份， 在其中加入 0.1ml 酚酞試液， 再加入濃氨水， 直至顯示粉紅色， 冷

30、卻后再加入冰醋酸至無色，再加入 0.5ml 冰醋酸。如需要過濾得到的液體， 并洗滌濾紙。(5) 將步驟(4) 得到的試液稀釋至 20ml。(6) 取 10ml 所得溶液，并加入 2ml 的待測液。6.4分析：在上述各溶液中分別同時加入 2ml PH為3.5的緩沖溶液并搖勻，然 后加入 1.2ml 硫代乙酰胺混合液，并搖勻。 2分鐘后觀察各個比色管中的溶 液。9.1.2.4 結(jié)果判斷：6.6.1 前提條件： 若參比液與空白液相比， 不顯淺棕色； 或者監(jiān)測液與參比液不 匹配，那么實驗無效。6.6.2 判斷：若所有測試溶液的褐色都比參比液的淺，則說明被測物符合要求。 與空白液比較，鉛標(biāo)準(zhǔn)液應(yīng)為淺棕色

31、。備注：1硫代乙酰胺試液的配制：取硫代乙酰胺4g,加水使溶解至100ml，置冰箱中 保存，臨用前取混合液(由1mol/LNaoH溶液15ml,純化水5ml及甘油20ml 組成)5.0ml加上述硫代乙酰胺溶液1.0ml，置水浴上加熱20秒，冷卻，立 即使用。2標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液的配制：精密稱取在105C干燥至恒重的硝酸鉛0.1598g，置1000ml容量瓶中，加硝酸5ml與水50ml溶解后，用水稀釋至刻度，搖勻， 臨用前，精密量取貯備液10ml，置100量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻， 即得(每1ml相當(dāng)于10ug的pb)。3 PH 為 3.5 的醋酸鹽緩沖溶液的配制見其 SOP。9.2 USP 方法：9

32、.2.1 標(biāo)準(zhǔn)：小于 10ppm9.2.2 實驗方法：由于此方需使用劇毒的氰化物股本實驗不做此方法的比較。10 水分：10.1 EP 方法：10.1.1 標(biāo)準(zhǔn)：小于 5.0%10.1.2 實驗方法：10.1.2.1 滴定甲醇中的水分（確定終點）加無水甲醇（分析純） 于反應(yīng)瓶中，至淹沒電極裸露端即可。 開動電磁攪拌器， 用卡爾費休試劑滴定甲醇中的含水份，滴定主電流表指針偏轉(zhuǎn)40uA處，保持1分鐘不變，視為終點。（不記錄卡爾費休試劑消耗的體積。）10.122卡爾費休試劑的標(biāo)定（測定水當(dāng)量）用雙鏈球加壓使卡爾費休試劑到達(dá)滴定管的滿刻度，再用微型注射器（100微升）取30uL蒸餾水（標(biāo)準(zhǔn)水），從加料口

33、橡皮塞中注射于反應(yīng)瓶中，原有的 棕色即可變?yōu)榈S色，同時表頭指示應(yīng)從45向左偏轉(zhuǎn)到“ 0”附近。隨即用卡爾費休 試劑進(jìn)行滴定，指針逐步向右偏轉(zhuǎn)，到達(dá) 45uA后，保持1分鐘不變，記錄卡 爾費休試劑消耗體積。10.1.2.3 水當(dāng)量的計算 ：公式：T = W V1式中， W 標(biāo)定時注入標(biāo)準(zhǔn)水的重量（毫克）V 1 滴定消耗卡爾費休試劑的體積（毫升）10.1.2.4 樣品測定將滴定管中卡爾費休試劑加至滿刻度。（ 1 ）液體樣品的測定：用注射器（其大小應(yīng)根據(jù)樣品水分含量多少而選擇，消耗的卡爾費休 試劑應(yīng)不超過20ml，下同）取樣品，注入反應(yīng)瓶中然后進(jìn)行滴定，方法 同前。（2）固體樣品的測定：用稱量管精

34、密稱取0.500克試樣（準(zhǔn)確至0.0001g）打開加料口橡皮塞迅 速將稱量管試樣傾入反應(yīng)瓶中， 立即蓋緊橡皮塞， 攪拌溶液使試樣溶解， 用卡爾費休試劑如前滴定至指針偏轉(zhuǎn)到 45uA處，即為終點。10.1.2.5 結(jié)果計算水分=( TX V2)- GX 100式中：V2-滴定消耗卡爾費休試劑的體積（毫升）T 卡爾費休試劑的水當(dāng)量G樣品的重量（毫克）10.2 USP 方法：10.2.1 標(biāo)準(zhǔn)小于 5.0%1水當(dāng)量的的計算：用稱量管精確稱量 30mg水，加入反應(yīng)瓶中，滴定到終點。 用下面公式計算水當(dāng)量 F，F(xiàn)=W/VW水的質(zhì)量，mgV：消耗試劑的體積，ml。2水含量的檢測：加入35ml甲醇至反應(yīng)瓶，

35、滴定到終點，以消耗掉反應(yīng)瓶中可 能存在的水蒸氣，訊孫加入樣品，滴定至終點。用下面公式計算水的質(zhì)量： M ， mgM=SFM水的質(zhì)量，mgF:水當(dāng)量S： 消耗實際的體積， ml11 PH 值：11.1 EP 方法：11.1.1 標(biāo)準(zhǔn)： 3.0-5.011.1.2 測定方法：11.1.2.1 按說明書的規(guī)定，接通電源預(yù)熱儀器，調(diào)節(jié)零點和溫度補償。11.1.2.2 校準(zhǔn)pH電極11.1.2.3 一點校準(zhǔn)：根據(jù)樣品溶液的pH值選擇接近其pH值的標(biāo)準(zhǔn)緩沖液，將電極放入標(biāo)準(zhǔn)緩沖液中，調(diào)節(jié)定位旋鈕至規(guī)定的pH值。11.1.2.4 二點校準(zhǔn)：選擇二種pH值相差3個單位的標(biāo)準(zhǔn)緩沖液進(jìn)行校正。誤差不應(yīng)超過該儀器性

36、能指標(biāo)的相應(yīng)規(guī)定，否則應(yīng)重?fù)Q標(biāo)準(zhǔn)緩沖液重新校正儀器直至符合要求后再測樣品11.1.2.5 待測液的配制：精密稱取樣品 1.0g 置小燒杯中，加水 19g 后用玻璃 棒充分?jǐn)嚢?，形成均一溶液（若需過濾，則過濾后取濾液測定） 。11.126待測液的測定：校準(zhǔn)pH電極后，將電極沖洗干凈后放入待測液中并 讀數(shù)，顯示屏上終點數(shù)值即為該樣品 pH 值。11.2 USP 方法：11.2.1 標(biāo)準(zhǔn)： 3.0-7.011.2.2 實驗方法：11.2.2.1 按說明書的規(guī)定，接通電源預(yù)熱儀器，調(diào)節(jié)零點和溫度補償。11.2.2.2 校準(zhǔn)pH電極11.2.2.3 一點校準(zhǔn)：根據(jù)樣品溶液的pH值選擇接近其pH值的標(biāo)準(zhǔn)緩

37、沖液，將電極放入標(biāo)準(zhǔn)緩沖液中，調(diào)節(jié)定位旋鈕至規(guī)定的pH值。11.2.2.4 二點校準(zhǔn)：選擇二種pH值相差3個單位的標(biāo)準(zhǔn)緩沖液進(jìn)行校正。誤 差不應(yīng)超過該儀器性能指標(biāo)的相應(yīng)規(guī)定，否則應(yīng)重?fù)Q標(biāo)準(zhǔn)緩沖液重新 校正儀器直至符合要求后再測樣品。11.2.2.4 待測液的配制：精密稱取樣品1.0g置小燒杯中，加水19g后用玻璃 棒充分?jǐn)嚢?，形成均一溶液（若需過濾，則過濾后取濾液測定） 。11.2.2.5待測液的測定：校準(zhǔn)pH電極后，將電極沖洗干凈后放入待測液中并 讀數(shù)，顯示屏上終點數(shù)值即為該樣品 pH值。12 含氮量：12.1 EP 方法：12.1.1 標(biāo)準(zhǔn)： 11.5%-12.8%12.1.1.1稱樣：稱

38、0.1g待測樣品，置于干燥的50mL凱式燒瓶中。12.1.1.2 消化：在凱氏燒瓶中加入由1g硫酸銅、1g二氧化鈦、33g硫酸鉀組成 的混合物5g，用少量的水將你粘連在瓶壁的物質(zhì)清洗進(jìn)瓶底，沿?zé)科勘诘渭恿蛩?mL并加入3粒玻璃珠，在燒瓶口放一小漏斗，先用小火 緩慢加熱，然后逐步加大火力，直到溶液變成透明、淺黃綠色溶液，繼 續(xù)加熱 45min, 冷卻。小心加入 20ml 水。12.1.1.3蒸餾：取40g/l硼酸溶液30mL置于100mL吸收瓶中，加3滴溴甲酚 綠- 甲基紅混合指示劑，將定氮儀的冷凝管底端插入液面下，再將凱氏 燒瓶中內(nèi)容物經(jīng)漏斗轉(zhuǎn)入蒸餾瓶中，用水淋洗燒瓶及漏斗，再加入 40%

39、氫氧化鈉溶液30mL并用10ml水淋洗，關(guān)橡膠管夾子，用蒸氣蒸餾， 直到蒸餾液達(dá)到80-100mL,停止蒸餾，將冷凝管下端壓低，使殘留在 冷凝管中的餾分流入吸收瓶， 用少量水清洗冷凝管尾端， 最后移走吸收 瓶。12.1.1.4 滴定：餾出液用硫酸滴定液( 0.025mol/l )滴定至溶液顏色由綠色變 為淡灰藍(lán)色， 最后變?yōu)榛易仙?讀取硫酸滴定液消耗的體積， 并將滴定的結(jié)果用 空白試驗較正。每1mL硫酸滴定液(0.025 mol/l )相當(dāng)于0.7004mg的氮。12.1.1.5 計算公式：含氮量( %) =(V-V0) *0.014*N/M*100%式中： V ：樣品所消耗硫酸滴定液的體積 ,mLV0：空白所消耗硫酸滴定液的體積，mLN:硫酸滴定液的濃度，mol/LM樣品的質(zhì)量，g12.2 USP 方法：12.2.1 標(biāo)準(zhǔn)：11.5%-12.8%12.2.2 實驗方法：12.2.2.1稱樣：稱0.1g待測樣品，置于干燥的50mL凱式燒瓶中。12.2.2.2 消化:在凱氏燒瓶中加入由1g硫酸銅、1g二氧化鈦、33g硫酸鉀組成的混合物5g，用少量的水將你粘連在瓶壁的物質(zhì)清洗進(jìn)瓶底，沿?zé)科勘诘渭恿蛩?mL搖動凱式燒瓶，用小火緩慢加熱直到溶液變成藍(lán)色澄 清溶液，瓶壁上沒有碳化