高考生物大二輪總復(fù)習(xí) 增分策略 專題十二 必考點(diǎn)29基因工程和細(xì)胞工程試題

1、必考點(diǎn)29基因工程和細(xì)胞工程依綱排查1.基因工程的誕生()基因工程的理論基礎(chǔ)是什么？2基因工程的原理、技術(shù)及應(yīng)用()(1)基因工程的操作工具是什么？有哪些特點(diǎn)？(2)基因工程操作的“四步曲”分別是什么？(3)基因工程在農(nóng)業(yè)、醫(yī)學(xué)等方面有哪些應(yīng)用？3蛋白質(zhì)工程()(1)蛋白質(zhì)工程操作的基本原理和設(shè)計(jì)思路是什么？(2)蛋白質(zhì)工程和基因工程的關(guān)系是什么？4植物組織培養(yǎng)()(1)植物組織培養(yǎng)的基本原理和一般操作流程是怎樣的？(2)植物組織培養(yǎng)有哪些應(yīng)用？5動(dòng)物的細(xì)胞培養(yǎng)與體細(xì)胞克隆()(1)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的基本操作過(guò)程和條件分別是什么？(2)體細(xì)胞克隆的操作流程及應(yīng)用是什么？6細(xì)胞融合與單克隆抗體()(

2、1)單克隆抗體制備的操作流程是怎樣的？(2)單克隆抗體的特點(diǎn)是什么？有哪些應(yīng)用？1理清基因工程3種操作工具的作用與特點(diǎn)限制酶DNA連接酶載體作用切割目的基因和載體拼接DNA片段，形成重組DNA分子攜帶目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞作用部位兩核苷酸的脫氧核糖與磷酸間形成的磷酸二酯鍵作用特點(diǎn)(條件)(1)識(shí)別特定的核苷酸序列；(2)在特定位點(diǎn)上切割DNA分子(1)E·coliDNA連接酶只能連接黏性末端；(2)T4DNA連接酶能連接黏性末端和平末端(1)能在宿主細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)定存在并大量復(fù)制；(2)有一個(gè)至多個(gè)限制酶切割位點(diǎn)；(3)具有特殊的標(biāo)記基因2.掌握獲取目的基因的3種途徑(1)直接分離：從自然界

3、已有的物種中分離，如從_中獲取。(2)人工合成目的基因(常用方法如下)化學(xué)合成法：已知核苷酸序列的_基因，直接利用_用化學(xué)方法合成，不需要模板。人工合成法：以_為模板，在_作用下人工合成。利用_技術(shù)擴(kuò)增。3牢記基因表達(dá)載體的構(gòu)建(1)基因表達(dá)載體的組成：目的基因啟動(dòng)子終止子_復(fù)制原點(diǎn)。(2)啟動(dòng)子和終止子：?jiǎn)?dòng)子是_結(jié)合的位點(diǎn)，啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄；終止子是_的位點(diǎn)。(3)基因表達(dá)載體的構(gòu)建過(guò)程4將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞生物種類植物細(xì)胞動(dòng)物細(xì)胞微生物細(xì)胞常用方法_法、基因槍法、花粉管通道法等_技術(shù)_法(Ca2處理法)受體細(xì)胞體細(xì)胞受精卵原核細(xì)胞5.理清目的基因的檢測(cè)與鑒定(1)導(dǎo)入檢測(cè)：_雜交技術(shù)(使用DN

4、A探針)(2)表達(dá)檢測(cè)(3)個(gè)體生物學(xué)水平鑒定：如對(duì)轉(zhuǎn)基因作物進(jìn)行抗蟲(chóng)或抗病等的接種實(shí)驗(yàn)。6理清植物細(xì)胞工程兩大技術(shù)7理清動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的成分、過(guò)程及相關(guān)酶(1)培養(yǎng)基的特有成分：_。(2)培養(yǎng)過(guò)程：原代培養(yǎng)、傳代培養(yǎng)。(3)制備懸液的酶： _。8完善下面克隆動(dòng)物培育流程圖9把握動(dòng)物細(xì)胞融合的原理、方法及應(yīng)用(1)原理：_。(2)促融方法：滅活的病毒、物理法、化學(xué)法。(3)應(yīng)用：制備單克隆抗體。10理清單克隆抗體制備的過(guò)程題組一聚焦基因工程1基因工程的相關(guān)判斷(1)攜帶鏈霉素抗性基因受體菌的篩選必須通過(guò)分子檢測(cè)(2014·天津，4A)()(2)轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉植株抗蟲(chóng)效果的鑒定必須通過(guò)分子

5、檢測(cè)(2014·天津，4C)()(3)一種限制性核酸內(nèi)切酶只能識(shí)別一種特定的脫氧核苷酸序列(2007·全國(guó)，4A)()(4)用限制性核酸內(nèi)切酶切割煙草花葉病毒的核酸(2010·浙江，2A)()(5)每個(gè)重組質(zhì)粒至少含一個(gè)限制性核酸內(nèi)切酶識(shí)別位點(diǎn)(2011·浙江，6B)()(6)自然界中天然存在的噬菌體自行感染細(xì)菌后其DNA整合到細(xì)菌DNA上，屬于基因工程(2010·大綱全國(guó)，5D)()(7)轉(zhuǎn)抗蟲(chóng)基因的植物，不會(huì)導(dǎo)致昆蟲(chóng)群體抗性基因頻率增加(2010·江蘇，18B)()(8)重組質(zhì)粒與探針能進(jìn)行分子雜交是因?yàn)镈NA分子脫氧核糖和磷酸交

6、替連接(2013·安徽，6C)()(9)應(yīng)用DNA探針技術(shù)，可以檢測(cè)轉(zhuǎn)基因抗凍番茄植株中目的基因的存在及其完全表達(dá)(2011·四川，5D)()(10)動(dòng)物的生長(zhǎng)激素基因轉(zhuǎn)入植物后不能表達(dá)(2010·江蘇，18C)()2(2015·重慶，6)下列有關(guān)人胰島素基因表達(dá)載體的敘述，正確的是()A表達(dá)載體中的胰島素基因可通過(guò)人肝細(xì)胞mRNA反轉(zhuǎn)錄獲得B表達(dá)載體的復(fù)制和胰島素基因的表達(dá)均啟動(dòng)于復(fù)制原(起)點(diǎn)C借助抗生素抗性基因可將含胰島素基因的受體細(xì)胞篩選出來(lái)D啟動(dòng)子和終止密碼子均在胰島素基因的轉(zhuǎn)錄中起作用3(2015·全國(guó)，40)已知生物體內(nèi)有一種蛋白

7、質(zhì)(P)，該蛋白質(zhì)是一種轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，由305個(gè)氨基酸組成。如果將P分子中158位的絲氨酸變成亮氨酸，240位的谷氨酰胺變成苯丙氨酸，改變后的蛋白質(zhì)(P1)不但保留P的功能，而且具有了酶的催化活性?；卮鹣铝袉?wèn)題：(1)從上述資料可知，若要改變蛋白質(zhì)的功能，可以考慮對(duì)蛋白質(zhì)的_進(jìn)行改造。(2)以P基因序列為基礎(chǔ)，獲得P1基因的途徑有修飾_基因或合成_基因，所獲得的基因表達(dá)時(shí)是遵循中心法則的，中心法則的全部?jī)?nèi)容包括_的復(fù)制，以及遺傳信息在不同分子之間的流動(dòng)，即： _。(3)蛋白質(zhì)工程也被稱為第二代基因工程，其基本途徑是從預(yù)期蛋白質(zhì)功能出發(fā)，通過(guò)_和_，進(jìn)而確定相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列，據(jù)此獲得基因，再經(jīng)

8、表達(dá)、純化獲得蛋白質(zhì)，之后還需要對(duì)蛋白質(zhì)的生物_進(jìn)行鑒定。4(2013·新課標(biāo)，40節(jié)選)閱讀如下資料：材料甲科學(xué)家將牛生長(zhǎng)激素基因?qū)胄∈笫芫阎?，得到了體型巨大的“超級(jí)小鼠”；科學(xué)家采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法培育出轉(zhuǎn)基因煙草。材料乙T4溶菌酶在溫度較高時(shí)易失去活性，科學(xué)家對(duì)編碼T4溶菌酶的基因進(jìn)行改造，使其表達(dá)的T4溶菌酶的第3位的異亮氨酸變?yōu)榘腚装彼?，在該半胱氨酸與第97位的半胱氨酸之間形成了一個(gè)二硫鍵，提高了T4溶菌酶的耐熱性?；卮鹣铝袉?wèn)題：(1)材料甲屬于基因工程的范疇。將基因表達(dá)載體導(dǎo)入小鼠的受精卵中常用_法。構(gòu)建基因表達(dá)載體常用的工具酶有_和_。在培育有些轉(zhuǎn)基因植物時(shí)，常用農(nóng)桿菌

9、轉(zhuǎn)化法，農(nóng)桿菌的作用是_。(2)材料乙中的技術(shù)屬于_工程范疇。該工程是指以分子生物學(xué)相關(guān)理論為基礎(chǔ)，通過(guò)基因修飾或基因合成，對(duì)_進(jìn)行改造，或制造一種_的技術(shù)。在該實(shí)例中，引起T4溶菌酶空間結(jié)構(gòu)改變的原因是組成該酶肽鏈的_序列發(fā)生了改變。5為探究SHH基因與角化囊腫發(fā)生的相關(guān)性，科研人員利用SHH基因的非模板鏈轉(zhuǎn)錄合成的RNA作為探針，進(jìn)行分子雜交實(shí)驗(yàn)，以檢測(cè)SHH基因在角化囊腫中的表達(dá)情況。其基本流程如下圖：(Amp表示氨芐青霉素抗性基因；LacZ基因被SHH基因插入后不表達(dá))請(qǐng)回答問(wèn)題：(1)重組載體中SHH基因轉(zhuǎn)錄合成RNA探針時(shí)，_(填“需要”或“不需要”)啟動(dòng)子。(2)步驟中，用Ca2

10、處理大腸桿菌，使之成為_(kāi)細(xì)胞，然后導(dǎo)入重組載體。實(shí)驗(yàn)中，用添加氨芐青霉素的培養(yǎng)基培養(yǎng)大腸桿菌，未導(dǎo)入質(zhì)粒的細(xì)菌將會(huì)死亡，原因是這些細(xì)菌不含有_基因。(3)能表達(dá)LacZ基因的大腸桿菌在含有IPTG和Xgal的培養(yǎng)基上會(huì)形成藍(lán)色菌落，易于識(shí)別。根據(jù)上述原理可以初步判斷_(填“藍(lán)色”或“白色”)菌落中的大腸桿菌為重組菌。(4)將制備的探針加入角化囊腫切片中，探針將與_形成雜交帶，進(jìn)而判斷SHH基因的轉(zhuǎn)錄情況。1.使用限制酶的注意點(diǎn)(1)一般用同種限制酶切割載體和目的基因。(2)不同的限制酶也能切割出相同的黏性末端。2DNA連接酶DNA聚合酶DNA連接酶連接兩個(gè)DNA片段，而DNA聚合酶只能將單個(gè)脫

11、氧核苷酸添加到脫氧核苷酸鏈上。3限制酶DNA酶解旋酶限制酶是切割某種特定的脫氧核苷酸序列，并使兩條鏈在特定的位置斷開(kāi)；DNA酶是將DNA水解為組成單位；解旋酶是將DNA的兩條鏈間的氫鍵打開(kāi)形成兩條單鏈。4啟動(dòng)子、終止子(1)啟動(dòng)子(DNA片段)起始密碼子(RNA)。(1)終止子(DNA片段)終止密碼子(RNA)。題組二聚焦細(xì)胞工程6細(xì)胞工程的相關(guān)判斷(1)產(chǎn)生抗人白細(xì)胞介素­8抗體的雜交瘤細(xì)胞的篩選必須通過(guò)分子檢測(cè)(2014·天津，4B)()(2)21三體綜合征的診斷必須通過(guò)分子檢測(cè)(2014·天津，4D)()(3)培育草莓脫毒苗所采用的主要技術(shù)是組織培養(yǎng)(201

12、2·廣東，2A)()(4)去除植物細(xì)胞的細(xì)胞壁和將動(dòng)物組織分散成單個(gè)細(xì)胞均需酶處理(2008·全國(guó)，5B)()(5)乳腺細(xì)胞比乳腺癌細(xì)胞更容易進(jìn)行離體培養(yǎng)(2015·江蘇，3A)()(6)培養(yǎng)保留接觸抑制的細(xì)胞在培養(yǎng)瓶壁上可形成多層細(xì)胞(2010·浙江，4A)()(7)動(dòng)物雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生單克隆抗體體現(xiàn)了細(xì)胞的全能性(2012·江蘇，22C)()(8)體細(xì)胞雜交技術(shù)可用于克隆動(dòng)物和制備單克隆抗體(2011·江蘇，14B)()(9)單克隆抗體技術(shù)可以用于治療老年癡呆癥(2010·江蘇，17C)()(10)細(xì)胞核移植主要在同種動(dòng)物

13、、同種組織的細(xì)胞之間進(jìn)行(2015·江蘇，3B)()7植物葉肉細(xì)胞原生質(zhì)體的分離和培養(yǎng)的主要過(guò)程可用如圖所示圖解簡(jiǎn)單表示：d,e,(1)培育胚狀體利用了_這一項(xiàng)生物技術(shù)，胚狀體再繼續(xù)培養(yǎng)，則可培育出完整的植株，這體現(xiàn)了_。培養(yǎng)基中除了含有一定的營(yíng)養(yǎng)外，還必須含有_等植物激素，還需要對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行嚴(yán)格的_。(2)如果愈傷組織是三七葉肉細(xì)胞培養(yǎng)產(chǎn)生的，若為了獲得三七的細(xì)胞產(chǎn)物，則只需要培養(yǎng)到_；若為了獲得三七的人工種子，則需要培養(yǎng)到_。如果愈傷組織是棉花葉肉細(xì)胞培養(yǎng)產(chǎn)生的，通過(guò)基因工程要獲取抗蟲(chóng)棉，目的基因?qū)朊藁ㄓ鷤M織細(xì)胞常用的方法是_法。(3)從葉片的葉肉細(xì)胞到獲得胚狀體的過(guò)程中，必

14、須要經(jīng)過(guò)_。無(wú)絲分裂有絲分裂減數(shù)分裂原代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)植物體細(xì)胞雜交細(xì)胞融合脫分化再分化8甲、乙是染色體數(shù)目相同的兩種二倍體藥用植物，甲含有效成分A，乙含有效成分B。某研究小組擬培育同時(shí)含有A和B的新型藥用植物。回答下列問(wèn)題：(1)為了培育該新型藥用植物，可取甲和乙的葉片，先用_酶和_酶去除細(xì)胞壁，獲得具有活力的_，再用化學(xué)誘導(dǎo)劑誘導(dǎo)二者融合。形成的融合細(xì)胞進(jìn)一步培養(yǎng)形成_組織，然后經(jīng)過(guò)_形成完整的雜種植株。這種培育技術(shù)稱為_(kāi)。(2)上述雜種植株屬于多倍體，多倍體是指_。假設(shè)甲與乙有性雜交的后代是不育的，而上述雜種植株是可育的，造成這種差異的原因是_。(3)這種雜種植株可通過(guò)制作人工種子的方法來(lái)

15、大量繁殖。經(jīng)植物組織培養(yǎng)得到的_等材料用人工薄膜包裝后可得到人工種子。9美國(guó)科學(xué)家已經(jīng)在實(shí)驗(yàn)室中成功培育出膀胱，并順利移植到7名患者體內(nèi)。培育過(guò)程如下圖所示，據(jù)圖回答下列問(wèn)題：(1)a過(guò)程屬于細(xì)胞工程中的_，其培養(yǎng)基與植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基含有的營(yíng)養(yǎng)成分的主要不同點(diǎn)是前者含有_。(2)b過(guò)程由數(shù)萬(wàn)個(gè)細(xì)胞繁殖到15億個(gè)細(xì)胞是_的結(jié)果，上述過(guò)程中不但需要無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境，適宜的營(yíng)養(yǎng)，還需要適宜的_，_環(huán)境。(3)新器官與老器官的“重組”_(選填“是”或“不是”)基因重組，因?yàn)樾缕鞴倥c老器官的_相同。(4)“新膀胱”移植后，_(選填“會(huì)”或“不會(huì)”)成為抗原，因?yàn)樾吕掀鞴倬哂衉蛋白質(zhì)等物質(zhì)。(5)除上

16、述方法外，還可將患者的體細(xì)胞核移入去核的_中，這是利用體細(xì)胞_技術(shù)，形成相應(yīng)的組織、器官。10(2014·新課標(biāo)，40)某研究者用抗原(A)分別免疫3只同種小鼠(X、Y和Z)，每只小鼠免疫5次，每次免疫一周后測(cè)定各小鼠血清抗體的效價(jià)(能檢測(cè)出抗原抗體反應(yīng)的血清最大稀釋倍數(shù))，結(jié)果如下圖所示。若要制備雜交瘤細(xì)胞，需取免疫后小鼠的B淋巴細(xì)胞(染色體數(shù)目為40條)，并將該細(xì)胞與體外培養(yǎng)的小鼠骨髓瘤細(xì)胞(染色體數(shù)目為60條)按一定比例加入試管中，再加入聚乙二醇誘導(dǎo)細(xì)胞融合，經(jīng)篩選培養(yǎng)及抗體檢測(cè)，得到不斷分泌抗A抗體的雜交瘤細(xì)胞?；卮鹣铝袉?wèn)題：(1)制備融合所需的B淋巴細(xì)胞時(shí)，所用免疫小鼠的血

17、清抗體效價(jià)需達(dá)到16 000以上，則小鼠最少需要經(jīng)過(guò)_次免疫后才能有符合要求的。達(dá)到要求后的X、Y、Z這3只免疫小鼠中，最適合用于制備B淋巴細(xì)胞的是_小鼠，理由是_。(2)細(xì)胞融合實(shí)驗(yàn)完成后，融合體系中除含有未融合的細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞外，可能還有_，體系中出現(xiàn)多種類型細(xì)胞的原因是_。(3)雜交瘤細(xì)胞中有_個(gè)細(xì)胞核，染色體數(shù)目最多是_條。(4)未融合的B淋巴細(xì)胞經(jīng)多次傳代培養(yǎng)后都不能存活，原因是_。1.雜種細(xì)胞雜交細(xì)胞(1)雜種細(xì)胞：植物體細(xì)胞雜交過(guò)程中，融合的原生質(zhì)體出現(xiàn)細(xì)胞壁之后形成的細(xì)胞叫雜種細(xì)胞。(2)雜交細(xì)胞：動(dòng)物細(xì)胞融合形成的細(xì)胞常稱為雜交細(xì)胞。2動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的特殊的營(yíng)養(yǎng)條件(1)液體

18、培養(yǎng)基。(2)加入動(dòng)物血清、血漿等。(3)通入氧氣以滿足代謝的需要。(4)通入二氧化碳以維持培養(yǎng)液的pH。3單克隆抗體制備中2次篩選的目的不同(1)第1次：得到既能分泌抗體又能大量增殖的雜交瘤細(xì)胞。(2)第2次：篩選出能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞。提醒：完成作業(yè)考點(diǎn)過(guò)關(guān)練29二輪專題強(qiáng)化練姓名：_ 班級(jí)：_ 學(xué)號(hào)：_考點(diǎn)過(guò)關(guān)練29基因工程和細(xì)胞工程1(2015·四川，9)將蘇云金桿菌Bt蛋白的基因?qū)朊藁?xì)胞中，可獲得抗棉鈴蟲(chóng)的轉(zhuǎn)基因棉，其過(guò)程如下圖所示(注：農(nóng)桿菌中Ti質(zhì)粒上只有TDNA片段能轉(zhuǎn)移到植物細(xì)胞中)。(1)過(guò)程需用同種_酶對(duì)含Bt基因的DNA和Ti質(zhì)粒進(jìn)行酶切。為將過(guò)程

19、獲得的含重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌篩選出來(lái)，應(yīng)使用_培養(yǎng)基。(2)過(guò)程中將棉花細(xì)胞與農(nóng)桿菌混合后共同培養(yǎng)，旨在讓_進(jìn)入棉花細(xì)胞；除盡農(nóng)桿菌后，還須轉(zhuǎn)接到含卡那霉素的培養(yǎng)基上繼續(xù)培養(yǎng)，目的是_。(3)若過(guò)程僅獲得大量的根，則應(yīng)在培養(yǎng)基中增加_以獲得芽；部分接種在無(wú)激素培養(yǎng)基上的芽也能長(zhǎng)根，原因是_。(4)檢驗(yàn)轉(zhuǎn)基因棉的抗蟲(chóng)性狀，常用方法是_。種植轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉能減少_的使用，以減輕環(huán)境污染。2(2015·福建，33)GDNF是一種神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子，對(duì)損傷的神經(jīng)細(xì)胞具有營(yíng)養(yǎng)和保護(hù)作用。研究人員構(gòu)建了含GDNF基因的表達(dá)載體(如圖1所示)，并導(dǎo)入到大鼠神經(jīng)干細(xì)胞中，用于干細(xì)胞基因治療的研究。請(qǐng)回答：(1)

20、在分離和培養(yǎng)大鼠神經(jīng)干細(xì)胞的過(guò)程中，使用胰蛋白酶的目的是_。(2)構(gòu)建含GDNF基因的表達(dá)載體時(shí)，需選擇圖1中的_限制酶進(jìn)行酶切。(3)經(jīng)酶切后的載體和GDNF基因進(jìn)行連接，連接產(chǎn)物經(jīng)篩選得到的載體主要有3種：?jiǎn)蝹€(gè)載體自連、GDNF基因與載體正向連接、GDNF基因與載體反向連接(如圖1所示)。為鑒定這3種連接方式，選擇Hpa酶和BamH酶對(duì)篩選得到的載體進(jìn)行雙酶切，并對(duì)酶切后的DNA片段進(jìn)行電泳分析，結(jié)果如圖2所示。圖中第_泳道顯示所鑒定的載體是正向連接的。(4)將正向連接的表達(dá)載體導(dǎo)入神經(jīng)干細(xì)胞后，為了檢測(cè)GDNF基因是否成功表達(dá)，可用相應(yīng)的_與提取的蛋白質(zhì)雜交。當(dāng)培養(yǎng)的神經(jīng)干細(xì)胞達(dá)到一定密

21、度時(shí)，需進(jìn)行_培養(yǎng)以得到更多數(shù)量的細(xì)胞，用于神經(jīng)干細(xì)胞移植治療實(shí)驗(yàn)。3下圖是“萬(wàn)能細(xì)胞”的誕生過(guò)程(圖中來(lái)自胚胎干細(xì)胞的OCT4、SOX2、NANOG和LIN28等基因決定細(xì)胞“全能性”)。請(qǐng)據(jù)圖回答下列問(wèn)題：(1)該研究過(guò)程用到了_、_等現(xiàn)代生物技術(shù)手段。(2)圖中由皮膚細(xì)胞到“萬(wàn)能細(xì)胞”的“改造”類似于植物組織培養(yǎng)技術(shù)中的_過(guò)程。(3)圖中病毒的作用是_。為方便篩選，在重組病毒中除了插入的目的基因外，還應(yīng)有_基因。學(xué)生用書(shū)答案精析專題十二現(xiàn)代生物科技專題必考點(diǎn)29基因工程和細(xì)胞工程核心提煉2(1)基因文庫(kù)(2)較小DNA合成儀RNA逆轉(zhuǎn)錄酶PCR3(1)標(biāo)記基因(2)RNA聚合酶終止轉(zhuǎn)錄(

22、3)同一種限制酶切割DNA連接酶4農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化顯微注射感受態(tài)細(xì)胞5(1)DNA分子(2)分子雜交抗原抗體6全能性膜的流動(dòng)性和植物細(xì)胞全能性愈傷組織再分化雜種細(xì)胞7(1)動(dòng)物血清(3)胰蛋白酶或膠原蛋白酶8細(xì)胞質(zhì)細(xì)胞核核移植胚胎移植9(1)細(xì)胞膜的流動(dòng)性題組突破1(1)×(2)×(3)(4)×(5)(6)×(7)×(8)×(9)×(10)×2C人肝細(xì)胞不能合成胰島素，則人肝細(xì)胞中不含有胰島素的mRNA，不能通過(guò)反轉(zhuǎn)錄獲得人胰島素基因，A錯(cuò)誤；表達(dá)載體的復(fù)制啟動(dòng)于復(fù)制起點(diǎn)，胰島素基因的表達(dá)啟動(dòng)于啟動(dòng)子，B錯(cuò)誤；抗生素抗性

23、基因是標(biāo)記基因，可用于篩選含胰島素基因的受體細(xì)胞，C正確；啟動(dòng)子在轉(zhuǎn)錄過(guò)程中起作用，終止密碼子在翻譯過(guò)程中起作用，D錯(cuò)誤。3(1)氨基酸序列(或結(jié)構(gòu))(其他答案合理也可)(2)PP1DNA和RNA(或遺傳物質(zhì))DNARNA、RNADNA、RNA蛋白質(zhì)(或轉(zhuǎn)錄、逆轉(zhuǎn)錄、翻譯)(3)設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列功能解析(1)對(duì)蛋白質(zhì)的氨基酸序列(或結(jié)構(gòu))進(jìn)行改造，可達(dá)到改變蛋白質(zhì)功能的目的。(2)以P基因序列為基礎(chǔ)，獲得P1基因，可以對(duì)P基因進(jìn)行修飾改造，也可以用人工方法合成P1基因；中心法則的全部?jī)?nèi)容包括，即：DNA、RNA的復(fù)制、DNARNA、RNADNA、RNA蛋白質(zhì)(或轉(zhuǎn)錄、逆

24、轉(zhuǎn)錄、翻譯)。(3)蛋白質(zhì)工程的基本途徑是從預(yù)期蛋白質(zhì)功能出發(fā)，通過(guò)設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)和推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列，推測(cè)相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列，并獲取基因。經(jīng)表達(dá)的蛋白質(zhì)，要對(duì)其進(jìn)行生物功能鑒定。4(1)顯微注射限制酶DNA連接酶農(nóng)桿菌可感染植物，將目的基因轉(zhuǎn)移到受體細(xì)胞中(2)蛋白質(zhì)現(xiàn)有的蛋白質(zhì)新蛋白質(zhì)氨基酸解析(1)將基因表達(dá)載體導(dǎo)入動(dòng)物受精卵常用的方法是顯微注射法。構(gòu)建基因表達(dá)載體常用的工具酶是限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶。在培育轉(zhuǎn)基因植物時(shí)常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，因?yàn)檗r(nóng)桿菌能在自然條件下感染雙子葉植物和裸子植物。(2)蛋白質(zhì)工程是以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)，通過(guò)基因修飾

25、或基因合成，對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)的技術(shù)。該實(shí)例中，T4溶菌酶空間結(jié)構(gòu)改變的原因是組成該酶肽鏈的氨基酸序列發(fā)生了改變。5(1)需要(2)感受態(tài)Amp(或氨芐青霉素抗性或抗性)(3)白色(4)SHH基因轉(zhuǎn)錄的mRNA解析(1)重組載體中SHH基因表達(dá)需要啟動(dòng)子。(2)大腸桿菌細(xì)胞用Ca2處理后就成為感受態(tài)細(xì)胞；能在添加氨芐青霉素的培養(yǎng)基上生存的細(xì)菌含有氨芐青霉素抗性基因，沒(méi)有氨芐青霉素抗性基因的細(xì)菌將會(huì)死亡。(3)能表達(dá)LacZ基因的大腸桿菌在含有IPTG和Xgal的培養(yǎng)基上會(huì)形成藍(lán)色菌落，而重組菌中LacZ基因被SHH基因插入后不表達(dá)，故重組菌在含有IPTG和Xgal的培養(yǎng)

26、基上會(huì)形成白色菌落。(4)判斷SHH基因的轉(zhuǎn)錄情況，也就是判斷SHH基因是否轉(zhuǎn)錄出mRNA。6(1)(2)×(3)(4)(5)×(6)×(7)×(8)×(9)(10)×7(1)植物組織培養(yǎng)植物細(xì)胞的全能性細(xì)胞分裂素、生長(zhǎng)素滅菌(2)愈傷組織胚狀體農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化(3)解析(1)離體植物細(xì)胞通過(guò)脫分化形成愈傷組織，通過(guò)再分化形成具有根和芽的胚狀體，再通過(guò)細(xì)胞分裂、分化發(fā)育成一個(gè)完整的植株。該技術(shù)稱為植物組織培養(yǎng)，其原理為植物細(xì)胞的全能性。培養(yǎng)基的成分包括水、無(wú)機(jī)鹽、維生素、氨基酸、蔗糖、植物激素(生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素等)等；培養(yǎng)基要求進(jìn)行嚴(yán)格的

27、滅菌。(2)三七的細(xì)胞產(chǎn)物為細(xì)胞的代謝產(chǎn)物，將三七葉肉細(xì)胞培養(yǎng)到愈傷組織即可；獲得人工種子需培養(yǎng)至胚狀體；棉花為雙子葉植物，導(dǎo)入抗蟲(chóng)基因常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法。(3)離體葉肉細(xì)胞培養(yǎng)到胚狀體的過(guò)程中必須經(jīng)過(guò)脫分化和有絲分裂形成愈傷組織，再分化和有絲分裂形成具有根和芽的胚狀體。8(1)纖維素果膠原生質(zhì)體愈傷再分化(分化)植物體細(xì)胞雜交技術(shù)(2)體細(xì)胞中含有三個(gè)或三個(gè)以上染色體組的個(gè)體在減數(shù)分裂過(guò)程中，前者染色體聯(lián)會(huì)異常，而后者染色體聯(lián)會(huì)正常(3)胚狀體、不定芽、頂芽、腋芽解析(1)該新型藥用植物是通過(guò)植物體細(xì)胞雜交技術(shù)獲得的。要獲得有活力的原生質(zhì)體才能進(jìn)行體細(xì)胞雜交，因此首先用纖維素酶和果膠酶去掉植物

28、的細(xì)胞壁，然后用PEG化學(xué)誘導(dǎo)劑(物理方法：離心、振動(dòng)等)誘導(dǎo)二者的原生質(zhì)體融合。然后采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)獲得雜種植株，植物組織培養(yǎng)的主要過(guò)程是：先脫分化形成愈傷組織，然后再分化形成植物體，利用了植物細(xì)胞的全能性。(2)如果植物甲、乙是兩個(gè)物種，二者不能通過(guò)有性雜交產(chǎn)生可育后代，原因是甲、乙有性雜交所產(chǎn)生的后代在減數(shù)分裂過(guò)程中同源染色體聯(lián)會(huì)異常，也就是存在著生殖隔離。但植物甲、乙通過(guò)植物體細(xì)胞雜交技術(shù)產(chǎn)生的后代卻是可育的，因?yàn)樵跍p數(shù)分裂過(guò)程中同源染色體能完成正常的聯(lián)會(huì)，產(chǎn)生正常的配子。由于甲、乙都是二倍體，因此，植物體細(xì)胞雜交得到的后代是異源多倍體(四倍體)。(3)人工種子生產(chǎn)不受氣候、季節(jié)和

29、地域等因素限制，而且可以避免后代發(fā)生性狀分離等優(yōu)點(diǎn)，因此，植物細(xì)胞工程重要的應(yīng)用之一是制備人工種子，用到的核心技術(shù)是植物組織培養(yǎng)技術(shù)。將植物組織培養(yǎng)得到的胚狀體、不定芽、頂芽、腋芽等材料用人工薄膜包裝后可得到人工種子。9(1)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物血清(2)有絲分裂(細(xì)胞分裂)溫度和pH氣體(3)不是遺傳物質(zhì)(4)不會(huì)相同的(5)卵母細(xì)胞核移植解析(1)圖中a過(guò)程為動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基成分與植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基含有的營(yíng)養(yǎng)成分的主要不同點(diǎn)是前者含動(dòng)物血清。(2)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，不但需要無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境，適宜的營(yíng)養(yǎng)，還需要適宜的溫度、pH及氣體環(huán)境。(3)由于新器官與老器官的遺傳物質(zhì)相同，新

30、器官與老器官的“重組”不是基因重組。(4)因?yàn)樾吕掀鞴偌?xì)胞具有相同的表面抗原等物質(zhì)，“新膀胱”移植后不會(huì)成為抗原。(5)利用體細(xì)胞核移植技術(shù)將患者的體細(xì)胞核移入去核的卵母細(xì)胞中，重組細(xì)胞經(jīng)培養(yǎng)也可形成相應(yīng)的組織、器官。10(1)4YY小鼠的血清抗體效價(jià)最高(2)B淋巴細(xì)胞相互融合形成的細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞相互融合形成的細(xì)胞細(xì)胞融合是隨機(jī)的，且融合率達(dá)不到100%(3)1100(4)不能無(wú)限增殖解析(1)據(jù)圖分析可知，第四次注射后X、Y、Z小鼠的血清抗體效價(jià)幾乎都達(dá)到16 000以上，小鼠Y的血清抗體效價(jià)最高，最適合用于制備單克隆抗體。(2)融合體系中除了未融合的細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞之外，還有骨髓瘤細(xì)胞

31、的自身融合細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞的自身融合細(xì)胞。細(xì)胞的融合是隨機(jī)的，并且不可能所有細(xì)胞都融合，故體系中會(huì)出現(xiàn)多種類型的細(xì)胞。(3)動(dòng)物細(xì)胞融合后形成的是具有原來(lái)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞遺傳信息的單核細(xì)胞。雜交瘤細(xì)胞的細(xì)胞核中的染色體數(shù)目最多為4060100(條)。(4)正常細(xì)胞的分裂次數(shù)是有限的，且經(jīng)過(guò)免疫的B淋巴細(xì)胞高度分化，不能無(wú)限增殖，而是經(jīng)多次傳代培養(yǎng)后逐漸衰老死亡?？键c(diǎn)整合體系重建DNA連接酶基因表達(dá)載體的構(gòu)建基因細(xì)胞的全能性、細(xì)胞膜的流動(dòng)性細(xì)胞增殖動(dòng)物細(xì)胞核的全能性給小鼠注射抗原產(chǎn)生專一抗體的雜交瘤細(xì)胞二輪專題強(qiáng)化練答案精析專題十二現(xiàn)代生物科技專題考點(diǎn)過(guò)關(guān)練29基因工程和細(xì)胞工程1(1)限制性核酸內(nèi)切(限制)選擇(2)T­DNA篩選出獲得T­DNA片段的植物細(xì)