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文檔簡介
1、中文名稱:阪崎腸桿菌顯色培養(yǎng)基英文名稱:chromogenic enterbacter sakazakii agar用途:供嬰兒奶粉以及其它食詁屮阪崎腸桿菌的鑒定和計(jì)數(shù)。(gb4789. 40-2010和sn/t 1632-2005, iso 標(biāo)準(zhǔn))圖鑒:原理:蛋口月東和牛肉膏粉提供氮源、維生素、氨基酸和碳源;膽鹽抑制革蘭氏陽性 菌,氯化鈉可維持均衡的滲透壓;瓊脂是培養(yǎng)基的凝i占i劑;硫代硫酸鈉和檸檬酸鐵 錢用于檢測(cè)硫化氫的產(chǎn)生;顯色底物5-4-氯-3-卿味-a-d葡萄糖甘與阪崎腸 桿菌中的葡萄糖營酶發(fā)生反應(yīng),水解底物,釋放出5-4-氯-3-“引味基顯色 基團(tuán),在淡黃色平板上產(chǎn)生綠-藍(lán)綠色的菌
2、落。配方(每升):胰蛋白陳15g大豆蛋白豚5g氯化鈉5g檸檬酸鐵錢lg脫氧膽酸鈉lg硫代硫酸鈉lg5-渙-4-氯-3-眄|口朵-a-d葡萄糖昔0. lg瓊脂15g最終 ph 7. 3±0. 2包裝:使用方法:1. 取瓶內(nèi)干粉43. 1克,加入蒸憾水或去離子水1 l,攪拌加熱煮沸至完全 溶解,分裝三角瓶,121°c高壓滅菌15min;冷卻至50°c,搖勻倒平板。在室溫可 保存一天或在冰箱里貯存數(shù)天(避光,4°c)。2. 取樣品333克按mpn三管法分別取100克、10克和1克分裝在各三個(gè) 2000ml. 250ml和100ml的三角瓶屮,在三角瓶屮已裝右經(jīng)
3、45°c預(yù)熱的9/10(樣 品為1/10)的無菌蒸憾水或緩沖蛋白豚水,搖勻,在36°c培養(yǎng)18-22小時(shí)(sn和 fda方法)。3. 各取10ml上述懸浮液加到裝有90mlee肉湯(022160)/mlst-vm(022212) 的150ml的三角瓶中,在36°c/44°c增菌培養(yǎng)18-22小時(shí)。4. 用劃線或涂布法把混勻的肉湯接種到阪崎腸桿菌顯色瓊脂平板上, 35-37°c培養(yǎng) 18-24 小時(shí)。5. 可使用microgentmgntd或apt20e或生化管試驗(yàn),對(duì)疑似阪崎腸桿菌菌 落進(jìn)行生化鑒定。質(zhì)量控制:木品傾注平皿后呈淡黃色,下列菌株接種后36±tc培養(yǎng)18-24小時(shí)生長情 況如下表:質(zhì)量控制質(zhì)控菌株接種量(cfu/平板)生長情況菌落色1阪崎腸桿菌atcc5132930 - 300良好綠-藍(lán)綠色普通變型桿菌hk713230 - 300良好灰黑色粘質(zhì)沙雷們氏菌hk71215000不長糞腸球菌atcc29
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