葡萄酒生產(chǎn)分析檢驗(yàn)

1、葡萄酒中還原糖和總糖的檢測葡萄酒中的主要糖類是葡萄糖和果糖，成熟的葡萄果糖的含量較高，葡萄中只有極 少的蔗糖。生產(chǎn)過程中添加的蔗糖在酸和酵母轉(zhuǎn)化酶的作用下水解成葡萄糖和果糖后被酵母 利用，稱之為可發(fā)酵性糖，不能被酵母利用的稱之為非發(fā)酵性糖或殘?zhí)?。根?jù)還原斐林試劑 的能力，又可分為還原糖和非還原糖。在葡萄酒中殘?zhí)侵饕晌焯牵ㄈ绨⒗?、鼠李糖?木糖及少量的未發(fā)酵的葡萄糖和果糖，約0.10. 2g/l）組成。1.高效液相色譜法（1）原理利用氨柱，將樣品中的果糖、葡萄糖、蔗糖與其他組分分離。示差折光檢測器進(jìn)行鑒定, 外標(biāo)法定量。（2）試劑與儀器 超純水:經(jīng)純水機(jī)制出的電阻率達(dá)到18mq或經(jīng)0.45

2、 p m微濾膜過濾的新鮮的重蒸水。 乙膳一水（75+25）：將乙臘和水按75+25的比例混合（或根據(jù)儀器情況調(diào)整該比例至 分離效果最佳），用脫氣裝置充分脫氣后，再用0.45 p m的油系過濾膜過濾。該溶液用做流動 相。 糖標(biāo)準(zhǔn)溶液（含總糖45.000g/l）：分別稱取干燥的葡萄糖、果糖、蔗糖各1.500g （準(zhǔn) 確至o.oolg）,移入looml容量瓶屮，用超純水定容至刻度。該溶液含葡萄糖、果糖、蔗糖 分別為15.000g/l 高效液相色譜儀,示差折光檢側(cè)器:色譜柱為150mm x 5.0mm,shim-paek clc-nh2 柱。 微過濾膜：0.45 um,油系。 脫氣裝置（或超聲波裝置）

3、。（3）測定步驟 試樣的制備：將樣品用超純水稀釋至總糖量為45g/l左右，并用0.45 u m油系微過濾 膜過濾。 色譜條件如下。柱溫：室溫；流動相：乙月青十水（75+25）；流速：2ml/min；進(jìn)樣量：20ml 測定：在同樣的色譜條件下，將糖標(biāo)準(zhǔn)溶液和處理好的試樣分別注入色譜儀。測定各糖分峰面積，井計(jì)算其含量。（4）計(jì)算a.wx| =g+px2 = xj +1.05z式中x1樣品中還原糖含量（以葡萄糖計(jì)），g/l；x2樣品中總糖含量（以葡萄糖計(jì)），g/l；g樣品中的果糖含量，g il ；p樣品中的葡萄糖含量，g/l；z樣品中的蔗糖的含量，g/l；1.05一一由蔗糖換算為葡萄糖的系數(shù)；xj樣

4、品中。組分（i=g > p、z ）的含量，g丨l ；a一樣品譜圖中i組分峰面積；a,糖標(biāo)準(zhǔn)溶液中i組分的峰面積；cw.糖標(biāo)準(zhǔn)溶液中i組分的含量，g/厶n樣品的稀釋倍數(shù)。平行實(shí)驗(yàn)測定結(jié)果絕對值之差，干酒、半干酒不得超過0.5g/厶，甜酒、半甜酒不得超過2g/l二、直接滴定法（1）原理還原糖利用斐林法測定，總糖經(jīng)酸水解后用斐林法測定。（2）試劑斐林試劑a.斐林a液：稱取硫酸銅（cusq5h2。）69.27g,溶于水并稀釋至1 ooomlb.斐林b液：稱取酒石酸鉀鈉346g,氫氧化鈉100g,溶于水并稀釋至1 ooomlc標(biāo)定i預(yù)備試驗(yàn)：吸取斐林a液、b液各5ml于250ml三角瓶中，加50m

5、l水，搖勻, 在電爐上加熱至沸，在沸騰狀態(tài)下用制備好的葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定，當(dāng)溶液的藍(lán)色將消失呈 紅色時，加2滴亞甲基藍(lán)指示劑，繼續(xù)滴定至藍(lán)色消失，記錄消耗的葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積。ii正式試驗(yàn)：吸取斐林a液、b液各5ml于250ml三角瓶中，加50ml水和比預(yù) 備試驗(yàn)少iml的葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液，加熱至沸，并保持微沸2min,加2滴亞甲基藍(lán)指示劑，在 沸騰狀態(tài)下于lmin內(nèi)用葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液滴至藍(lán)色消失，記錄消耗的葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液的總體。d.計(jì)算mf=-xv1000式中f斐林a液、b液各5ml相當(dāng)于葡萄糖的克數(shù)，g；m稱取葡萄糖的質(zhì)量，g；v 一一消耗葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液的總體積，ml； （1 + 1） hc

6、/溶液。 200g/l naoh 溶液。 2.5g/厶葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液：準(zhǔn)確稱取2.5000g （準(zhǔn)確至0.0002g）在105110°c烘箱內(nèi)烘干3h并在干燥器中冷卻的無水葡萄糖，用水溶解定容至1 ooomlo 10g/l亞甲基藍(lán)指示劑：稱取l.og亞甲基藍(lán)，溶解于水屮，稀釋至loomlo（3）測定步驟試樣的制備a. 測總糖用試樣：吸取一定量的樣品（ ）于looml容量瓶中（使之所含總糖量為0. 2 0. 4g）,加5ml（l + l） hc!溶液,加水至20ml,搖勻。于68°c±1°c水浴上水解15min,取 出，冷卻。用200g/l naoh溶液中和至ph67,調(diào)溫至20°c,加水定容至刻度。b. 測還原糖用試樣：準(zhǔn)確吸取一定量的樣品（）于looml容量瓶中（使之所含還原 糖量為0.20. 4g）,加水定容至刻度?？偺且詼y還原糖試樣與測總糖試樣分別代替葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液，按標(biāo)定斐林a液、b液的方法 同樣操作，記錄消耗試樣的體積（嶺）。測定干型葡萄酒可直接以酒樣代替葡萄糖，按標(biāo)定斐林氏a液、b液的方法同樣操作, 結(jié)果按下列公式計(jì)算。(4) 計(jì)算x. =fx xv,x