食品中有害微生物的常規(guī)檢驗方法分析_1

1、    食品中有害微生物的常規(guī)檢驗方法分析    馬可佳摘要 食品中的有害物質不僅會危及人體健康，而且容易引發(fā)各種復雜的疫病，引起了社會各界的廣泛關注。為有效應對這一問題，檢驗檢測至關重要，采用有效的檢驗檢測方式和方法，明確食品成分指標，有利于提高食品安全度。該文從分子生物學、儀器檢驗檢測和抗原體免疫檢驗3個技術層面，就食品中的有害微生物常規(guī)檢驗方法進行分析，并提出個人的觀點與認識，以供參考。關鍵詞 食品安全；有害微生物；檢驗檢測 r446.5 a 1672-5654（2018）11（b）-0151-02長期以來，食品安全問題一直受到社會各界的關注，這對

2、食品有害微生物的檢驗檢測工作提出了更高的要求，比如pcr、免疫電泳和酶聯免疫技術的應用，大大提高了食品有害物質的檢驗檢測準確度。1 分子生物學檢驗檢測方法1.1 pcr檢驗技術所謂pcr檢驗技術，即聚合酶鏈式反應技術手段，其主要是基于酶促反應識別食品中的有害微生物，并利用該技術對食品中的大腸桿菌、沙門氏菌以及葡萄球菌等有害微生物予以識別。大腸桿菌?；诙嘀豴cr的應用，對引起腸出血的大腸桿菌以及腸毒素大腸桿菌進行檢測，前者可能會引起溶血性尿毒綜合征以及血栓形成血小板減小性紫癜。臨床上來看，二者并發(fā)時可能會導致人死亡，死亡率超過80%；其中，后者主要引起腹瀉，危及公共衛(wèi)生。實踐中我們可以看到，利

3、用pcr技術方法對致病菌進行檢測，操作非常簡便，而且用時也相對較短，而且更靈敏便捷。金黃色葡萄球菌。對于金黃色葡萄球菌而言，其很容易引發(fā)食物中毒，報道數據顯示該細菌造成的食物中毒高居第二（大腸埃希菌據首），細菌性食物中毒案例中，因其所引發(fā)的中毒事件占比33%，甚至部分國家和地區(qū)高達45%。沙門氏菌。這屬于典型的革蘭陰性腸道致病菌，不僅對人，而且對畜也有非常大的危害，通過家禽、肉類以及蛋類傳播。該菌對食品的污染含量水平遠遠不及有感染病人病灶中的含量，同時受食品加工和性質影響，以致于沙門氏菌檢驗難度較大。雖然血清學鑒定方法可靠性較高，但是也許47 d的時間才能完成，耗時、費力。pcr檢驗技術在沙門

4、氏菌檢測過程中發(fā)揮著非常重要的作用，應用前景非常的廣闊。其他致病菌的檢驗檢測。從分子生物學的視角來看，其他致病菌還有很多，比如李斯特菌、耶爾森氏菌以及空腸彎曲菌等，其中產單核李斯特菌多見于蔬菜、奶酪以及肉類等食品之中，以老年人、小孩以及免疫缺陷個體最容易感染。對于上述致病菌而言，檢測過程中可采用pcr技術從食物樣品中直接檢測到，而且肉類以及奶制品中也有很多成功檢測案例?？漳c彎曲菌容易引發(fā)腹瀉，而且可在病人的糞便中將致病菌分離出來，目前被認為是人類腹瀉病癥的一種主要致病菌，感染媒介為接觸畜各種禽類、食入受污染的牛奶以及水源和禽類產品等。近年來人們利用pcr技術手段，已經成功地檢測出來該類致病菌。

5、耶爾森氏菌對人類健康也會產生一定的危害，為保證日常食品安全，對其中假結核耶爾森氏菌以及小腸結腸炎耶爾森氏菌進行檢測和處理非常重要，通過建立pcr反應體系即可快速而又準確地在水、奶以及肉制品中對小腸結腸炎耶爾森氏菌進行準確檢測。1.2 核酸探針檢驗檢測方法該種類型的檢測技術手段，主要是基于細胞核的信息傳遞特性進行檢測檢驗，以核酸序列作為探針來檢測食品dna，并以此來鑒定食品中有無有害微生物。隨著科技水平的不斷提高，目前采用的核酸探針檢測技術已經得以完善和改進并成為高新技術方法，其在應用實踐中利用比色計標記與檢測。從應用效果來看，該種技術方法的應用可以有效提高食品檢測檢驗效率，提升檢測的靈敏度，而

6、且能夠有效降低食品檢測中的輻射問題發(fā)生概率。為了能夠準確而又快速地檢驗檢測出有害物質，可利用核酸探針法進行檢測，一方面可以有效彌補長期以來的傳統(tǒng)檢驗技術應用缺陷，另一方面還可快速判斷出食品中是有害物質的基本特性；采用核酸排列方式，對食品中有害物質是否含有超標進行檢測。采用該種先進的檢驗技術方法，可以快速提取食品中的物質，并根據所得數據實施常規(guī)性檢測；同時，利用比色計對已經檢測的物質進行標記，對物質詳細檢驗并借助顯微鏡觀察核酸細胞的序列，從而知食品食品中的有害物質成分，對有害物質是否超標或者超標數量進行判定，從而得出準確數據。1.3 基因芯片檢驗法所謂基因芯片檢驗方法，以依托玻片、硅片等作為載體

7、，建立微點陣列式基因芯片。該種檢驗檢測技術的利用，可基于引物擴增方式對樣品中的有害微生物予以區(qū)分。探針可有效檢驗出食品中的有害微生物及其堿基特性，檢驗過程較為復雜，特別是芯片微點陣列排布時對技術要求較高，處理不當會對檢測結果造成不利影響。 2 儀器檢驗檢測方法實踐中為了能夠有效提高食品檢測質量和效果，提高其標準化以及規(guī)范化水平，現代技術手段和檢測儀器設備時必不可少的。目前國內較為常用的自動檢測技術手段和系統(tǒng)主要有biolog、midd以及sensititre等，從應用效果來看上述檢測系統(tǒng)快捷、高效而又準確。以vitekams為例，該系統(tǒng)是目前世界上統(tǒng)一使用的微生物檢測設備和系統(tǒng)，該儀器設備在食

8、品有害微生物常規(guī)檢驗過程中，需先制備欲鑒定菌懸液，并將菌懸液接種至各細菌小卡上，然后將其置于讀數孵箱中，每隔一段時間儀器設備就會對培養(yǎng)基發(fā)酵情況進行自動檢測，然后再換算成生物編碼；由計算機對其進行判定以后，將鑒定結果打印出來。該食品檢測系統(tǒng)在實際應用過程中共包含了14種鑒定卡，其中各種鑒定卡片至少有25種生化反應指標。在常規(guī)檢驗檢測過程中，應當注意控制檢測時間，一般不超過20 h，以免影響檢測結果準確率。3 抗原體免疫檢驗法3.1 酶聯免疫技術食品有害物質檢測過程中，需提取抗體和抗原，并且要避免影響其免疫活性；選取固相載體作為檢驗檢測承載體，并將抗體和抗原置于其上。食品檢驗檢測過程中，將其與樣

9、品結合起來，反應結束時固相載體上的酶標抗原量與標本中的待檢抗體量成比例關系，然后洗滌干凈，以確保反應液中無其他雜質或者物質。加入一定的酶反應底物并被固相載體上放置的酶催化，變成有色物質，通過定量以及定性分析有色產物量，確定樣品中所含有的待測物質。食品常規(guī)性的檢驗檢測過程中，常見的方式方法是酶聯免疫法，通過提取樣品抗原體并在檢驗前對所用檢測儀器設備進行清潔，這有利于避免細菌與抗原體相融合，進而影響檢驗結果精準度。提取抗原體以及免疫活性體置于容器之中，標記好正常的免疫活性體以及抗原體，利用酶聯免疫法使二者結合起來。對酶聯催化反應進行觀察，若生成物是固體顆粒，而且伴隨著黑色沉積物生產，則說明樣品中有

10、害物質超標。基于此，利用酶聯免疫法可全面分析與觀察有害物質生成物，從而掌握樣品中的有害物質及其含量。準確判斷有害物質類型，方可采取針對性措施進行預防和處理，以此來確保食品安全。3.2 免疫電泳法食品安全檢驗檢測過程中，采用免疫電泳技術方法對環(huán)境條件有要求，比如需在直流電場條件下方可常規(guī)性檢驗樣品。直流電場下凝膠會擴散，在電流的作用下會導致抗原以及抗體擴散加速，而且運動方向不發(fā)生變化，這有利于提高抗體與抗原沉淀反應速率，從而縮短檢驗檢測時間，提高靈敏度。對于抗原體免疫檢測技術而言，還包含多種方法，比如斑點酶聯免疫吸附法以及單克隆抗體檢測法等，而且在食品安全以及有害微生物檢測過程中應用效果顯著。免

11、疫電泳技術方法的應用，對檢驗環(huán)境條件要求較高，比如需在直流電磁條件下對樣品檢驗檢測，可獲得非常準確的檢測結果。在直流電磁條件下，食品中所含有的物質會迅速擴散，而且含有有害成分的食品也會快速擴散，這說明pcr以及免疫電泳技術方法在現階段食品有害物質檢驗檢測過程中所起的作用不可小覷，同時也有效地保證了食品安全以及人類健康。4 結語綜上所述，從食品有害微生物的檢驗檢測方法來看，可采用的技術手段和方法有很多種，而且各種技術方法都有其自身的應用優(yōu)勢和特點。實踐中應當立足實際，根據食品樣品的特征以及檢測方向和重點，利用其中的一種或幾種技術手段進行檢驗檢測，然后準確判定食品樣品中的致病菌，進而采取有效的措施予以應對。值得肯定的是，現階段國內外應用的常規(guī)檢驗技術和方法在食品有害微生物檢測過程中的應用效果非常的顯著，不僅檢測準確度高，而且檢測耗時較少，值得推廣應用。參考文獻1 劉立新.食品中有害微生物的常規(guī)檢驗方法分析j.中國衛(wèi)生產業(yè)，2015，12（9）：38-39.2 湯旭，阮紅.淺析食品中沙門氏菌的幾種快速檢驗方法j.疾病預防控制通報，2013，28（2）：88-90.3 王小東，歐雁方.食品中常見有害微生物的常規(guī)檢驗方法分析j.中國保健營養(yǎng)旬刊，2014（1）：574.4 張新武，杜小波，徐素玲，等.食品中微生物危害