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文檔簡介

1、胡蘿卜中色素的分離及鑒定1一實(shí)驗(yàn)?zāi)康?.學(xué)習(xí)從胡蘿卜中提取分離胡蘿卜素的原理和方法2.使用色譜柱和紙色譜的實(shí)驗(yàn)操作2 胡蘿卜中含有豐富的天然色素,因其能在黃色到紅色的范圍內(nèi)為相關(guān)的食品飲料提供紅色素。胡蘿卜素是橘黃色結(jié)晶,化學(xué)性質(zhì)比較穩(wěn)定,不溶于水,微溶于乙醇,易溶于石油醚等有機(jī)溶劑。 胡蘿卜素有-胡蘿卜素,-胡蘿卜素,-胡蘿卜素,-胡蘿卜素,-胡蘿卜素,西紅柿紅素,黃體素等許多異構(gòu)體。 其中-胡蘿卜素在胡蘿卜素中分布最廣,含量最多。-胡蘿卜素在胡蘿卜的根里與-胡蘿卜素共同存在,含量一般較少。 -胡蘿卜素在生物體內(nèi)的分布則有限。二二實(shí)驗(yàn)原理實(shí)驗(yàn)原理-胡蘿卜素(C40H56)31. 溶溶劑浸提法

2、劑浸提法 根根據(jù)物質(zhì)的據(jù)物質(zhì)的相似相溶原理相似相溶原理,使色素物質(zhì)溶解而進(jìn)入溶液,這是一種,使色素物質(zhì)溶解而進(jìn)入溶液,這是一種固一液萃取固一液萃取過程過程,溶,溶劑滲透到原料顆粒內(nèi)部含有色素的細(xì)胞組織內(nèi),劑滲透到原料顆粒內(nèi)部含有色素的細(xì)胞組織內(nèi),色素被溶解色素被溶解,再向提,再向提取液主體擴(kuò)取液主體擴(kuò)散。散。胡蘿卜素這種脂溶性色素多用非胡蘿卜素這種脂溶性色素多用非極性溶劑如極性溶劑如氯仿、石油醚氯仿、石油醚等提等提取。取。2. 柱柱色色譜譜法法 在在柱柱色譜裝置色譜裝置中,柱內(nèi)裝有中,柱內(nèi)裝有“活性活性”固體(固定相)如固體(固定相)如氧化鋁或氧化鋁或硅膠硅膠等,液體樣品從柱頂加入,流經(jīng)吸附柱

3、時即被吸附在柱的上端,等,液體樣品從柱頂加入,流經(jīng)吸附柱時即被吸附在柱的上端,然后從柱頂加入洗脫溶劑沖洗,由于固定相對然后從柱頂加入洗脫溶劑沖洗,由于固定相對各組分吸附能力各組分吸附能力不同,不同,以不同速度沿柱下移,形成若干色帶。再用溶劑洗脫,吸附能力最弱以不同速度沿柱下移,形成若干色帶。再用溶劑洗脫,吸附能力最弱的部分隨溶劑首先流出,分別收的部分隨溶劑首先流出,分別收集組分集組分。3. 微微波提取法波提取法 微波萃取采用微波萃取采用高頻電磁波穿透被萃取物質(zhì)高頻電磁波穿透被萃取物質(zhì),從而使得細(xì)胞內(nèi)部溫度,從而使得細(xì)胞內(nèi)部溫度迅速上升,細(xì)胞內(nèi)部液態(tài)水份汽化產(chǎn)生的壓力將使細(xì)胞膜和細(xì)胞壁急迅速上升

4、,細(xì)胞內(nèi)部液態(tài)水份汽化產(chǎn)生的壓力將使細(xì)胞膜和細(xì)胞壁急劇破裂,形成微小的孔洞,使可溶性物質(zhì)快速溶出并分散于適當(dāng)?shù)娜軇∑屏眩纬晌⑿〉目锥?,使可溶性物質(zhì)快速溶出并分散于適當(dāng)?shù)娜軇┲?,從而增加被劑中,從而增加被萃取色素的提取率萃取色素的提取率。提取方法提取方?4. 超聲波提取法 超聲波提取法的原理是超聲波可在液體中產(chǎn)生空穴作用,而空穴作用產(chǎn)生的沖擊波和射流可以破壞植物細(xì)胞和細(xì)胞膜結(jié)構(gòu),從而增加細(xì)胞內(nèi)容物通過細(xì)胞膜的穿透能力,有助于天然色素的釋放與溶出。超聲波使提取液不斷震蕩,有助于溶質(zhì)擴(kuò)散,同時超聲波的熱效應(yīng)使水溫升溫,對原料有水浴作用。5. 超臨界流體萃取法 超臨界流體萃取是一種新型的萃取分離技

5、術(shù)。該技術(shù)是利用流體(溶劑)在臨界點(diǎn)附近某一區(qū)域(超臨界區(qū))內(nèi),它與待分離混合物中的溶質(zhì)具有異常相平衡行為和傳遞性能、且它對溶質(zhì)溶解能力隨壓力和溫度改變而在相當(dāng)寬的范圍內(nèi)變動這一特性而達(dá)到溶質(zhì)分離的一項(xiàng)技術(shù)。6. 酶解水提法 利用纖維素酶和果膠酶破壞植物細(xì)胞壁提取類胡蘿卜素,同時還可以以超聲波輔助提取。超聲波也能起到幫助破碎細(xì)胞壁的作用,以加快提取速度、節(jié)省成本。提取方法提取方法5胡蘿卜素的理化性質(zhì):胡蘿卜素的理化性質(zhì):(1)(1)橘黃色結(jié)晶;橘黃色結(jié)晶;化學(xué)性質(zhì)比較穩(wěn)定化學(xué)性質(zhì)比較穩(wěn)定(2)(2)不溶于水、不溶于水、微溶于酒精、微溶于酒精、易溶于石油醚等有機(jī)溶劑易溶于石油醚等有機(jī)溶劑3、實(shí)驗(yàn)

6、室提取方法:、實(shí)驗(yàn)室提取方法:萃取法萃取法6石油醚、乙酸乙酯、乙醚、苯、四氯化碳石油醚、乙酸乙酯、乙醚、苯、四氯化碳 幾種水不溶性有機(jī)溶劑的沸點(diǎn):幾種水不溶性有機(jī)溶劑的沸點(diǎn): 90-120 77 35 80 76 90-120 77 35 80 76 選擇石油醚。石油醚沸點(diǎn)最高,在加選擇石油醚。石油醚沸點(diǎn)最高,在加熱萃取是不易揮發(fā),且對胡蘿卜素有較熱萃取是不易揮發(fā),且對胡蘿卜素有較好的溶解性,最適合最溶劑。好的溶解性,最適合最溶劑。7主要因素:主要因素:萃取劑的性質(zhì)和使用量萃取劑的性質(zhì)和使用量原料:原料:顆粒的大小、緊密程度、含水量顆粒的大小、緊密程度、含水量環(huán)境:環(huán)境:溫度、時間等溫度、時間

7、等原料顆粒小、水分少、萃取溫度高、時間長原料顆粒小、水分少、萃取溫度高、時間長效果好效果好影響萃取的因素影響萃取的因素8胡蘿卜素提取過程胡蘿卜素提取過程胡胡蘿蘿卜卜粉粉碎碎干干燥燥萃萃取取過過濾濾濃濃縮縮胡胡蘿蘿卜卜素素原料顆粒小,水分原料顆粒小,水分少,萃取效果好。少,萃取效果好。除去萃取液中除去萃取液中的不溶物的不溶物1 1、萃取裝置、萃取裝置2 2、影響因素、影響因素鑒定:紙鑒定:紙層析法層析法9實(shí)驗(yàn)步驟:實(shí)驗(yàn)步驟:原料加工原料加工: 取取5050g g新鮮胡蘿卜,清水清洗,瀝干、粉碎、新鮮胡蘿卜,清水清洗,瀝干、粉碎、烘干烘干。原料裝填原料裝填: 將胡蘿卜粉與將胡蘿卜粉與20mL20m

8、L石油醚石油醚裝入蒸餾瓶。裝入蒸餾瓶。加熱萃取加熱萃取: 安裝安裝回流冷凝裝置回流冷凝裝置,沸水浴沸水浴加熱萃取加熱萃取30min30min。過濾過濾: 將萃取物過濾,除去固體物,得到萃取液。將萃取物過濾,除去固體物,得到萃取液。濃縮濃縮: 安裝安裝蒸餾裝置蒸餾裝置,加熱萃取液,萃取劑揮發(fā),得到胡蘿,加熱萃取液,萃取劑揮發(fā),得到胡蘿卜素。卜素。注意事項(xiàng):注意事項(xiàng):烘干胡蘿卜時,溫度過高、時間過長,胡蘿卜素會分解。烘干胡蘿卜時,溫度過高、時間過長,胡蘿卜素會分解。 101.紙層析鑒定 點(diǎn)樣層析后,若發(fā)現(xiàn)在濾紙上出現(xiàn)多個不同高度的色素點(diǎn)樣。如果則說明提取到的胡蘿卜素含雜質(zhì)。2. 分光光度法 在200-

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