色譜技術(shù)在中藥白芷探究中應(yīng)用進(jìn)展

1、色譜技術(shù)在中藥白芷探究中應(yīng)用進(jìn)展作者：孟蘭貞 聶紅 徐珍霞熊愛華劉建軍【關(guān)鍵詞】色譜畢業(yè)論文摘要：中藥白芷具有廣泛的藥理作用，其主要有效成 分香豆素類化合物的分離提取和結(jié)構(gòu)鑒定已有了長(zhǎng)足發(fā) 展。現(xiàn)代 色譜技術(shù)在中藥白芷 研究中的廣泛運(yùn)用，使 白芷的定量 分析 方法 體系、質(zhì)量指標(biāo)體系和提取工藝優(yōu) 化等研究有了新的進(jìn)展，文章對(duì)近5年的有關(guān) 文獻(xiàn) 作了綜 述。論文代寫關(guān)鍵詞：色譜法；白芷；化學(xué)成分；質(zhì)量；鑒定論文 代寫research development of angelica dahurica by chromatographyabstract: the angelica dahurica

2、has been claimed to be effective on many diseases , and also there are great development for the isolation and instrumental analyses of its main effective components. the application of chromatography tech no logy greatly adva need and accelerated the research of angelica dahurica.key words:chromato

3、graphy ; angelica dahurica ; development research白芷為傘形科植物白芷angelica dahurica ( fisch, ex hoffm. ) benth. et hook. f.或杭白芷 angelica dahurica (fisch. ex hoffm. ) benth et hook f. var. formosana (boiss. ) shan et yuan的干燥根。性溫，味辛。具有散 風(fēng)除濕、通竅止痛、消腫排膿的功效?？捎糜谥委煾忻邦^痛、眉棱骨痛、燒傷等癥。色譜法(chromatography)或稱 層析法，其原理是利用不同組

4、分在兩相中的吸附能力、分配 系數(shù)、離子交換能力或分子大小等性質(zhì)的微小差別，經(jīng)過(guò)連 續(xù)多次在兩相間的質(zhì)量交換，使不同的組分得到分離，是分 離分析多組混合物的分析方法，在各個(gè)學(xué)科領(lǐng)域中的 應(yīng)用 日益普遍1 o從經(jīng)典的平板色譜到柱色譜，氣相色譜技術(shù) (gc x高效液相色譜法(hplc x超臨界流體色譜法(sfc ) 到毛細(xì)管電泳法(ce x色譜-光譜連用等現(xiàn)代色譜技術(shù)已廣 泛運(yùn)用于中藥白芷的研究。1白芷中化學(xué)成分的提取分離畢業(yè)論文 1.1化學(xué)成分的分離結(jié)合現(xiàn)代光譜技術(shù)，近年陸續(xù)從白芷中發(fā)現(xiàn)了新結(jié)構(gòu)的香豆素類化合物，如從日本白芷中分 離得到七種新的bifuranocoumarins 2 ,從韓國(guó)白芷的

5、莖部首次發(fā)現(xiàn)6(1s),2(r)2,3二輕基1甲氧基3甲基丁酸7甲氧基香豆素3 ,從根部得到兩種新的咲喃香豆素化合物4 o國(guó)內(nèi)游小琳等5 首次發(fā)現(xiàn)白芷水溶性成分中丁二酸，葡萄糖，蔗糖等6個(gè)化學(xué)成分。聶紅等6 運(yùn)用氣質(zhì)聯(lián)用（gcms ）技術(shù)發(fā)現(xiàn)白芷的水蒸氣蒸憎所得的 油狀物的主要成分為甲基環(huán)癸烷（22.4% ）. 1十二烷醇（8.6% ）等。1.2有效成分的提取劉文等7 認(rèn)為采用超臨界流體c02萃取白芷中歐前胡素速度快，hplc法測(cè)定精度高。劉紅梅等運(yùn)用gcms技術(shù)對(duì)白芷中香豆素類成分的最佳超臨 界流體c02萃取工藝（萃取溫度50°c ,萃取壓力21 mpa、萃取時(shí)間3.0 h ,分離

6、壓力6.5 mpa ,粉碎度20目）的超臨界樣品進(jìn)行了分析鑒定，主要成分氧化前胡素、歐前胡素、 異歐前胡素的相對(duì)含量分別達(dá)到42.40 % , 22.14%和 12.12% 8 , 9 論文代寫高速逆流色譜法10 ( highspeed countercurrent|>z<chromatography燼一種可以在短時(shí)間內(nèi)實(shí)現(xiàn)高效分離和分析的方法，具有無(wú)固體載體，可以避免分離樣品與固體載體 表面產(chǎn)生化學(xué)反應(yīng)而變性和不可逆吸附等優(yōu)點(diǎn)，已廣泛應(yīng)用 于天然藥物研究。liu等“用該法成功分離測(cè)定了白芷 中的歐前胡素、異歐前胡素和氧化前胡內(nèi)酯，其上相固定相 為正己烷甲醇水（5:5:5 , v/

7、v ）,下相流動(dòng)相前150 min正己烷甲醇水（5:5:5 ,v/v ），后150 min正己烷甲醇水（5:7:3 ,v/v ）體積以線性遞增，鑒定各峰分離物，純度達(dá)到了 98%以上。運(yùn)用該技術(shù)還分離了丹參中的丹酚酸b 12 1川茸 中的川茸嗪13 ,天麻中的天麻素14 等多種化學(xué)成分。 論文代寫>z<1高效毛細(xì)管電泳法(high performance capillary electrophoresis )為近年來(lái)發(fā)展最快的一種分離分析技術(shù)， 具有分離效率高、分析速度快和樣品用量少等特點(diǎn)。毛細(xì)管>z<1膠束電動(dòng)色譜(micellar electrokinetic ca

8、pillary chromatography )為它的一個(gè)重要分支，具有分離效果好， 速度快，操作簡(jiǎn)單，費(fèi)用低等優(yōu)點(diǎn)，已迅速進(jìn)入藥物分析領(lǐng) 域。其原理是向載體中加入表面活性劑，活性劑濃度大于臨 界值時(shí)，則在毛細(xì)管內(nèi)形成膠束，被分析物受到電滲流和膠 束相與水相之間分配的雙重影響 而實(shí)現(xiàn)分離。wang 15 等成功的采用該法簡(jiǎn)單快速的從白芷中分離得到歐前胡素、 異歐前胡素和東葭君昔元(7輕6甲氧香豆素l該技術(shù)還應(yīng) 用于測(cè)定西洋參中人參皂昔rb1 , re的含量16 ,分離鑒 定槐屬植物苦豆子、苦參、山豆根中嚨嗪烷類生物堿17, 最近聯(lián)用電化學(xué)檢測(cè)器首次分離測(cè)定木犀科植物女貞葉和 果實(shí)中的d甘露糖、

9、蔗糖、葡萄糖和果糖18o2白芷的質(zhì)量控制及鑒定畢業(yè)論文hplc被廣泛應(yīng)用于白芷的質(zhì)量控制和鑒定：人工四 倍體白芷主要有效成分歐前胡素的含量較原二倍體白芷成倍提高19 ;不同產(chǎn)地白芷中2種香豆素總量存在較大差 異20 ;提取揮發(fā)油后歐前胡素?fù)p失較大21 ;建立了白 芷藥材質(zhì)量的控制方法，其色譜條件：流動(dòng)相甲醇水(70:30 )，檢測(cè)波長(zhǎng)254 nm，歐前胡素在0.9743.896 pg , 異歐前胡素在0.360 2.640 pg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好22 或同時(shí)檢定出歐前胡素、異歐前胡素、比克白芷素及水化氧 化前胡素，且其中的歐前胡素和異歐前胡素含量分別不得低 于0.1%和0.04% 23 王夢(mèng)月

10、等24 證實(shí)白芷果實(shí)中總 香豆素含量最高，莖中最低；以曬干法的含量最高。抽苔白 芷中香豆素的含量不及白芷含量的50% ,不能作白芷藥用。3體內(nèi)白芷有效成分的測(cè)定 畢業(yè)論文 白芷的活性成分白當(dāng)歸素，是一種醛糖還原酶抑制劑,可用于治療糖尿病性白內(nèi)障。kwon等25 研究分析它的 腎代謝產(chǎn)物。尿樣經(jīng)液液提取，gcms、hplcdad以及h1核磁共振波譜等分析，發(fā)現(xiàn)兩種主要代謝物分別是白當(dāng)歸素側(cè)鏈經(jīng)c脫甲基或o脫烷而產(chǎn)生，另一代謝物認(rèn)為可 能是由白當(dāng)歸素被軽基化而產(chǎn)生。論文代寫kazuhisa等26 利用柱切換hplc法快速檢測(cè)大鼠血漿中的白當(dāng)歸素和水化氧化前胡素。血漿樣品用過(guò)氯酸脫蛋白離心后上清液制

11、備成供試品流動(dòng)相為乙睛水(20:80 ),流速 1 ml/min ,檢測(cè)波長(zhǎng) 260 nm ,柱溫 40°co龔志南等27,28 用hplc測(cè)大鼠胃液、腸液、血液和腦組織中香豆素類化合物的含量，以考查其藥動(dòng)學(xué)參數(shù)，評(píng)價(jià) 提取工藝指標(biāo)和最佳劑型。畢業(yè)論文4結(jié)語(yǔ)綜上所述，現(xiàn)代色譜技術(shù)應(yīng)用于白芷的研究可以快速、高效地分離純化有效成分“ ,15,優(yōu)化提取 工藝7-9 ,建立準(zhǔn)確、重復(fù)性好的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)1924等，但在指紋圖譜方面的研究還未見報(bào)道?？梢娚V技術(shù)以其分離效能高.分析 速度快、定量結(jié)果準(zhǔn)、易于自動(dòng)化等優(yōu)點(diǎn)，成為中藥與天然藥物有效成分的確定、鑒定等定性與定量工作以及分離純化過(guò)程中最有效的

12、 方法。可以預(yù)見色 譜技術(shù)必然會(huì)更廣泛地應(yīng)用于中藥的制備和質(zhì)量控制過(guò)程 中，加速中藥生產(chǎn)工藝的現(xiàn)代化進(jìn)程。目前 色譜技術(shù)應(yīng)用于白芷等中藥研究存在的 問(wèn)題 有：一方面中藥成分復(fù)雜、質(zhì)量 影響因素多，單用一種色 譜技術(shù)研究中藥捉襟見肘，如gc不適用于分析熱不穩(wěn)定性 和不能氣化的成分；hplc則對(duì)強(qiáng)極性組分分離效果不好， 色譜柱容易受污染，儀器運(yùn)轉(zhuǎn)費(fèi)用高；新興的高速逆流色譜 法和高效毛細(xì)管電泳法，可以很好的為中藥藥效學(xué)評(píng)價(jià)及定 性定量分析等提供技術(shù)支持，但在國(guó)內(nèi)尚未普及和系統(tǒng)化。 因此要求色譜技術(shù)在自身不斷完善的基礎(chǔ)上，結(jié)合其他學(xué)科的高新技術(shù)，推陳出新，以便更好地為我國(guó)中藥現(xiàn)代化服務(wù)。 另一方面該技

13、術(shù)在中藥活性成分篩選與作用機(jī)理研究方面 期待突破性的進(jìn)展。生物色譜法是生命科學(xué)和色譜分離技 術(shù)結(jié)合形成的高新技術(shù)29 , 30 ,這種模型既具有很好的生物相關(guān)性又克服了成分分離與效應(yīng)脫節(jié)的弊端，已成功應(yīng) 用于藥物活性成分的篩選和作用機(jī)理的研究3132 ,如 果聯(lián)用二極管列陣和高分辨率質(zhì)譜等技術(shù)，將實(shí)現(xiàn)中藥中微 量活性成分的分離純化和結(jié)構(gòu)鑒定及活性測(cè)定的高度一體化。論文代寫參考文獻(xiàn)：論文代寫1 黃志兵，李來(lái)生色譜技術(shù)進(jìn)展及應(yīng)用j 江西化工,2002 ,( 3 ): 14.論文代寫2 nianhe wang , koichiro yoshizaki , kimiye baba. seven new

14、 bifuranocoumarins , dahuribirin ag , from japanese bai zhi j . chem. pharm. bull , 2001 , 49 ( 9 ): 10853 jkwon ys ,shin sj ,kim mj ,etc. a new coumarin from the stem of angelica dahurica j .archives of pharmacal research , 2002 , 25 ( 1 ): 53.4 seungho lee ,gao li ,hyojin kim,et al two new furanoc

15、oumarins from the roots of angelica dahurica ,bull. korean chem. soc , 2003 , 24 ( 11 ): 1699.論文代 寫5游小琳，李麗，肖永慶.白芷水溶性部分化學(xué)成 分研究j .中國(guó) 中藥雜志，2002 , 27 ( 4 ): 279.6 聶紅，沈映君 白芷揮發(fā)油的gcms分析j 貴陽(yáng)中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2002 , 24 ( 2 ): 58.論文代寫7 劉文，韓笑，王學(xué)勇.超臨界co2萃取白芷中 歐前胡素的研究j 中國(guó)藥學(xué)雜志，2003 , 38 ( 2 ): 99.8 劉紅梅，張明賢，劉楊平，等超臨界co2萃取 白芷中

16、香豆素類成分的工藝優(yōu)化研究j .中成藥，2004 , 26 ( 2 ): 90.論文代寫9 劉紅梅，張明賢白芷中香豆素類成分的超臨界流 體萃取和gcms分析j .中國(guó)中藥雜志，2004,29 ( 3 ): 241.論文代寫10 姜寧，陳執(zhí)中高速逆流色譜法及其在天然藥物 研究中的應(yīng)用進(jìn)展j .中國(guó)民族民間醫(yī)藥雜志,2004 , 12 (4 ): 188.畢業(yè)論文11 renmin liu , aifeng li , ailing sun.preparative isolation and purification of coumarins from angelica dahurica ( fis

17、ch, ex hoffm ) benth , et hook, f ( chinese traditional medicinal herb ) by highspeed countercurrent chromatography j . journal of chromatography a , 1052(2004 ): 223.12 li , huabin , lai , jiaping;jiang , yue. preparative isolation and purification of salvianolic acid b from the chinese medicinal p

18、lant salvia miltiorrhiza by highspeed countercurrent chromatography j journal of chromatography a , 2002 , 943 ( 2 ): 235.13 li , huabin ,chen ,feng preparative isolation and purification of chuanxiongzine from the medicinal plant ligusticum chua nxiong by highspeed coun tercurre nt chromatography j

19、 journal of chromatography a , 2004 , 1047 ( 2 ): 249.論文代寫14 li , huabin , chen , feng. preparative isolation and purification of gastrodin from the chinese medici nal plant gastrodia el ata by highspeed countercurrent chromatography j journal of chromatography a , 2004 , 1052 ( 12 ): 229.15 wang ke

20、tai , liu huitao , chen xingguo , et al.ide ntification and determi nation of active comp orients inangelica dahurica benth and its medicinal preparation by capillary electrophoresis j .taianta , 54 ( 2001 ): 753.16 楊偉峰，趙維良膠束電動(dòng)毛細(xì)管色譜法測(cè)定西洋參中人參皂昔rb1,re的含量j .中國(guó)中藥雜志,2003 ,28 ( 12 ): 1135.17 yu yunqiu , d

21、ing peilan , chen daofeng. determi nation of quinolizidine alkaloids in sophora medicinal plants by capillary electrophoresis j . analytica chimica acta , 2004 , 523 ( 1 ): 15.畢業(yè)論文18 chen gang , zhang luyan , wu xingliang.determination of mannitol and three sugars in ligustrum lucidum ait. by capill

22、ary electrophoresis with electrochemical detection j . analytica chimica acta , 2005 , 530 ( 1 ): 15.19 彭菲，張勝，劉塔斯，等.四倍體白芷藥材中歐前胡素的含量測(cè)定j 中國(guó)中藥雜志,2002 , 27 ( 6 ): 426.20 鄧捷圓，高廣慧，趙春杰，等.hplc法同時(shí)測(cè) 定不同產(chǎn)地白芷中2種香豆素的含量j .沈陽(yáng)藥科大學(xué)報(bào)， 2004,21 ( 5 ): 354.21 劉萍.hplc法測(cè)定白芷提取揮發(fā)油前后歐前胡 素含量j 實(shí)用中醫(yī)藥雜志，2004 , 20 ( 8 ): 470.22 賈

23、敏如，王夢(mèng)月，金曲摸.hplc測(cè)定13種白芷中歐前胡素和異歐前胡素的含量j 華西藥學(xué)雜志，2003 , 18 ( 5 ): 361.論文代寫23 肖永慶，李麗,游小琳，等.白芷質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研 究j 中國(guó)中藥雜志,2004 , 29 ( 7 ): 654.24 王夢(mèng)月，賈敏如，馬逾英.不同入藥部分及不 同加工方法對(duì)白芷香豆素類成分含量的影響j 中藥材，2004 , 27 ( 11 ): 826.25 kwon os , song ys , shin kh , et cl .den tificati on of new urinary metabolites of byakangelicin , a

24、component of angelicae dahuricae radix , in rats j . archives of pharmacal research ,2003 , 26 ( 8 ): 606.26 kazuhisa ishihara , shigeru ohmori , miwako fukutake , et cl, simulta neous determi nation of byakangelicin and oxypeucedaninhydrate in rat plasma by columnswitching highperformanee liquid chromatography with ultraviolet