肌紅蛋白測(cè)定SOP_MYO臨床意義

1、肌紅蛋白測(cè)定版本號(hào)：頁(yè)碼：第頁(yè)共頁(yè)1檢測(cè)原理myo方法是基于“夾心”原理的兩步法酶免疫測(cè)定。樣品與包被了肌紅蛋白特界性單克隆抗體的 二氧化輅顆粒孵育形成顆粒/myo復(fù)合物8。顆粒被磁化分離，去除上清液。在第二步，顆粒/myo復(fù)合 物與共轆試劑（卜半乳糖甘酶標(biāo)記的肌紅蛋白特異性單克隆抗體）孵育形成顆粒/ myo /共轆物夾心。 未結(jié)合的共轆物和分析物磁化分離和洗滌去除。夾心結(jié)合的卜半乳糖甘酶與生色團(tuán)底物氯酚紅-b-d毗 喃半乳糖昔（cprg）,催化底物水解為氯酚紅（cpr） o因?yàn)閏pr形成在577 nm光吸收改變與病人樣 品屮存在的myo濃度成正比。myo + cro2-ab cro2-ab-

2、 myo + cr02-abcr02-ab-my0 + cr02-ab +cr02-ab- myo- f（sb' ）2p -gal + cr02-abf（ab）2-bt比喃半乳糖苜+f（ab l-bt比喃半乳糖背cro2-ab- myo- f（ab, ）2-p-gal + 清洗cr02-ab- myo- f（ab' ） 2- 3 -gal + cro2-abacro2-ab + f（ab）2-卩-毗喃半乳糖苜（轉(zhuǎn)移到比色杯）cprg （在577nm處不吸收）cro2-ab- myo- f（abz ）2-pgal cpr （在577nm處吸收）a2標(biāo)本采集與處理2. 1采血方法空

3、腹不抗凝靜脈血23ml。2. 2標(biāo)木保存室溫保存，及時(shí)送檢和檢測(cè)。樣本在28°c下可存儲(chǔ)7天，在-20 °c下可保存28天。2. 3注意事項(xiàng)推薦選用血清。在含有草酸鹽的血液可能引起珞顆粒積聚，不應(yīng)該使用?？鼓齽┎蛔愕睦鋬鲅獫{ 樣品可能引起洛顆粒積聚，不應(yīng)該使用。標(biāo)本應(yīng)避免乳糜、溶血、黃疸。3試劑和設(shè)備3. 1試劑采用西門子醫(yī)學(xué)診斷產(chǎn)品（上海）有限公司提供的試劑盒。3. 1. 1試劑組成試劑船1孔為結(jié)合物0.09 mg/ml,液體；3孔為抗體croz1.8mg/ml,片劑;4 6孔為cprg103mm,朋紅蛋白測(cè)定版本號(hào)：頁(yè)碼：第頁(yè)共頁(yè)片劑；7孔為底物稀釋劑，緩沖液42 mg

4、/ml,液體；8孔為穩(wěn)定及，珞片劑，緩沖液，液體。3. 1.2試劑準(zhǔn)備直接使用。3. 1.3試劑保存試劑28°c保存，有效期內(nèi)穩(wěn)定。3.2質(zhì)控品美國(guó)biorad質(zhì)控液。3.3校準(zhǔn)品西門子校準(zhǔn)品。3. 4儀器siemens dimension xpand plus/rxl max 全自動(dòng)生化分析系統(tǒng)。4操作程序4.1檢測(cè)過程流程簽收樣品一離心一上機(jī)檢測(cè)一審核報(bào)告一簽發(fā)報(bào)告一標(biāo)本保存。4. 2樣品簽收嚴(yán)格按照標(biāo)本接收程序簽收標(biāo)本。4. 3標(biāo)本處理以25003000/min,離心6-10min,分離血清上機(jī)測(cè)定。若標(biāo)本不能及吋檢測(cè)，將分離的血清冷藏 與2-8 °c的冰箱內(nèi)。4.4

5、標(biāo)本檢測(cè)4. 4. 1手工編排測(cè)試項(xiàng)目：樣品按編號(hào)裝入樣品架，主屏幕按fkenter data,在position處輸入樣 品所在樣品架字母及所在位置號(hào)，按enter,在patient name處選擇性輸入病人名字，按enter,在sample no處輸入樣品號(hào)，按enter,在tests處使用檢驗(yàn)鍵或檢驗(yàn)組合鍵選擇相應(yīng)項(xiàng)目，根據(jù)需要選擇相應(yīng)的 按鍵改變mode （按f7:mext mode選擇樣品管類型）、priority （按f4:next priority選擇樣品的 處理模式）、fluid （按f8:next fluid選擇標(biāo)本類型）。4.4.2雙向條形碼標(biāo)本分離血清后直接運(yùn)行儀器。4.

6、 4.3運(yùn)行：輸入完畢后按f3:load list,確認(rèn)樣品已經(jīng)裝載在樣本盤上，按run鍵，儀器開始進(jìn)行 樣品檢測(cè)。4.4.4檢驗(yàn)后標(biāo)本保存標(biāo)本檢驗(yàn)完成后用采血管原蓋蓋緊，保存于標(biāo)本冷藏庫(kù)內(nèi)，按口期放好，保存期為7天。5校準(zhǔn)程序5. 1校準(zhǔn)品準(zhǔn)備和儲(chǔ)存朋紅蛋白測(cè)定版本號(hào)：頁(yè)碼：第頁(yè)共頁(yè)直接使用，28 °c保存。5. 2校準(zhǔn)條件在室內(nèi)質(zhì)控失控、更換試劑批號(hào)、更換儀器主要配件或進(jìn)行大保養(yǎng)后均需校準(zhǔn)。無(wú)特殊情況校準(zhǔn) 周期為3個(gè)月。5. 3校準(zhǔn)程序主屏幕按 f5: process ctrl-f1: calibration,按 enterf2: set-up & run,按項(xiàng)目鍵選擇所

7、需要 校準(zhǔn)的項(xiàng)目名稱method,選屮相應(yīng)試劑批號(hào)lot,輸入操作者姓名operator、校準(zhǔn)液貨號(hào)calibrator product和批號(hào)lot,以及最低值校準(zhǔn)液在樣品架上的位置start at position,最后把校準(zhǔn)液各個(gè)水 平的值按照市低到高的順序輸?shù)綄?duì)應(yīng)位置，按f4： assign cups指定樣品杯，校準(zhǔn)液按順序排列在樣 品架上，按f7： load/run-f4： run或“run”運(yùn)行鍵運(yùn)行校準(zhǔn)程序。6質(zhì)量控制程序6. 1質(zhì)控品準(zhǔn)備和儲(chǔ)存質(zhì)控品為液體，可以直接使用。6.2質(zhì)控水平和分析批長(zhǎng)度每24小至少進(jìn)行一批，每批2個(gè)濃度水平。6.3質(zhì)控操作程序與4.4標(biāo)本檢測(cè)步驟相同，只需要按f4:next priority將routine修改成qc狀態(tài)。7性能參數(shù)本法線性范圍為11000ng/ml,對(duì)于超過測(cè)定線性范圍的結(jié)果，用樣本稀釋液進(jìn)行稀釋，輸入稀釋 因子后再重新檢測(cè)。8生物參考區(qū)間10-92 ng/ml。9臨床意義血清肌紅蛋白檢測(cè)時(shí)ami早期診斷的最有用指標(biāo)之一。在ami發(fā)作后l3h血清肌紅蛋白開始升高，4 12h達(dá)峰值，72h恢復(fù)正常。肌紅蛋白尿常見于急性心肌梗死、肌肉創(chuàng)傷、多發(fā)性肌炎、行軍性肌紅蛋白尿癥、進(jìn)行性肌營(yíng)養(yǎng) 不良、