丙泊酚通過調(diào)控miR

1、丙泊酚通過調(diào)控miR-155/SOCS1通路抑制脂多糖誘導(dǎo)的小膠質(zhì)細(xì)胞炎癥反應(yīng)目的 : 探討丙泊酚對(duì)活化的小膠質(zhì)細(xì)胞分泌炎癥介質(zhì)的影響及其作用機(jī)制。方法 :1. 利用 10ng/ml 脂多糖（ LPS）激活 BV₂小膠質(zhì)細(xì)胞建立體外炎癥損傷模型 , 加入不同濃度（ 12.5-100 M）的丙泊酚處理24h, 用 Griess 法和ELISA 分別檢測(cè) NO、TNF- 和 IL-6 的表達(dá)量 , 觀察丙泊酚在 LPS誘導(dǎo)的炎癥反應(yīng)中發(fā)揮的作用。2. 用不同濃度的丙泊酚（ 12.5-100 M）及 LPS（10ng/ml ）處理 BV<sub&g

2、t;2</sub>小膠質(zhì)細(xì)胞 24h, 用熒光定量 PCR方法檢測(cè) miR-155 的表達(dá)量 ; 利用 miR-155 抑制劑轉(zhuǎn)染 BV₂小膠質(zhì)細(xì)胞 , 加入丙泊酚（ 50M）及 LPS（10ng/ml ）處理 24h 后檢測(cè) NO、TNF-和 IL-6 的表達(dá)量 , 探究 miR-155 在丙泊酚參與的抗炎反應(yīng)中發(fā)揮的作用 , 同時(shí)檢測(cè) miR-155 轉(zhuǎn)染效率。 3. 用丙泊酚（ 50M）及 LPS（ 10ng/ml ）處理經(jīng) miR-155 抑制劑轉(zhuǎn)染的細(xì)胞 ,24h 后用 Western Blot 方法檢測(cè) SOCS1的表達(dá)量

3、; 用 SOCS1 siRNA轉(zhuǎn)染 BV₂小膠質(zhì)細(xì)胞 , 加入丙泊酚（ 50 M）及 LPS（10ng/ml ）處理 24h 后檢測(cè) NO、TNF-和 IL-6 的表達(dá)量 ,進(jìn)一步驗(yàn)證丙泊酚是否通過miR-155/SOCS1通路發(fā)揮抗炎作用 , 同時(shí)檢測(cè) SOCS1轉(zhuǎn)染效率。結(jié)果 :1.12.5-100M丙泊酚可以有效地降低LPS（ 10ng/ml ）誘導(dǎo)的BV₂小膠質(zhì)細(xì)胞活化和促炎介質(zhì)（如NO、TNF- 和 IL-6 ）mRNA及蛋白表達(dá)。 2. 丙泊酚（ 12.5-100 M）抑制 LPS（10ng/ml ）介導(dǎo)的 BV₂小膠質(zhì)細(xì)胞 miR-155 的表達(dá)及炎癥介質(zhì)的釋放, 沉默 miR-155 減弱丙泊酚在 LPS誘導(dǎo)的炎癥反應(yīng)中發(fā)揮的抗炎作用。3. 丙泊酚（ 50M）通過促進(jìn)激活的小膠質(zhì)細(xì)胞表達(dá) SOCS1從而抑制 LPS（ 10ng/ml ）介導(dǎo)的炎癥反應(yīng) , 在 SOCS1敲減 BV₂小膠質(zhì)細(xì)胞中 , 丙泊酚預(yù)處理對(duì) LPS介