中醫(yī)藥大學(xué)開題報告模板

1、廣州中醫(yī)藥大學(xué)科學(xué)學(xué)位碩士研究生學(xué)位論文開題報告姓名其智先院、所研究生進(jìn)修班2010級學(xué)號201001018導(dǎo)師姓名專業(yè)中醫(yī)骨傷研究方1可中藥藥效研究擬定學(xué)位 論文題目麻杏石甘治療過敏性哮喘的藥效研究本研究題目是否屬導(dǎo)師課題的FS分？如果是的話， 屬哪FS分？并注明該課題名稱、編號、 經(jīng)費(fèi)來源國家計委，科委項(xiàng)目/國家經(jīng)貿(mào)委項(xiàng)目（）教育部人文、社會科學(xué)研究項(xiàng)目（）國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目（）?。ㄗ灾螀^(qū)、直轄市）項(xiàng)目（）學(xué)校級項(xiàng)目（）國際合作項(xiàng)目/與港、澳、臺合作項(xiàng)目（）導(dǎo)師課題（，）自選課題（）其它（）學(xué)位論文的類型（V）1 基礎(chǔ)研究（V ）2 應(yīng)用基礎(chǔ)（）3 應(yīng)用研究（）4 其 他（）一、選題依據(jù)

2、（包括研究目的、意義，國內(nèi)外研究現(xiàn)狀和發(fā)展趨勢評述，并附參考文獻(xiàn)）：（一） 研究目的和意義麻杏石甘湯記載于傷寒論.辨太陽病脈證并治，原文說”發(fā)汗后，不可更行桂枝湯， 汗出而喘，無大熱者，可與麻黃杏仁甘草石膏湯?！北緱l所指的發(fā)汗后，是指太陽病發(fā)汗不 得法，或發(fā)汗太過，或誤用下法，均可使邪熱內(nèi)傳，病情轉(zhuǎn)重。因其邪熱內(nèi)傳，則表示大熱， 汗出而喘是肺熱壅盛所致。因肺主氣，外合皮毛，熱壅于肺，津液外走毛竅，故汗出；肺司 呼吸，熱盛則氣逆，故喘，由此可見，汗出而喘，癥候已發(fā)生改變，不可再用桂枝湯，而應(yīng) 以麻杏石甘湯清熱宣肺止喘。其中的麻黃配石膏，清熱透邪，宣肺定喘，且石膏用量多于麻 黃，以制約麻黃辛溫之性

3、而為平?jīng)鲋茫屎钩霾患陕辄S，無大熱不忌石膏，正所謂治病必 求其本。杏仁宣降肺氣，配麻黃則增強(qiáng)治喘之力，甘草安胃和中，調(diào)和諸藥。后世用于風(fēng)寒 化熱，或風(fēng)熱犯肺，以及內(nèi)熱外寒，但是邪熱壅肺之身熱喘咳，口渴脈數(shù)，無論有汗、無汗， 皆可以本方加減而獲效。而風(fēng)寒咳喘，痰熱壅盛不可用此方。本課題所研究的麻杏石甘湯方由麻黃、杏仁、甘草、甘草、石膏，理研究表明，麻杏甘 石湯臨床上用于治療哮喘、尊麻疹等疾病，取得較好療效，從現(xiàn)代免疫學(xué)角度分析，哮喘和 尊麻疹均屬第一型變態(tài)反應(yīng)性疾病，防治第一型變態(tài)反應(yīng)性疾病，首先要控制其發(fā)生的幾個 主要環(huán)節(jié)，其中防止過敏原進(jìn)入機(jī)體外，在機(jī)體方面，可控制 IgE的產(chǎn)生；阻斷Ig

4、E與肥大 細(xì)胞的嗜酸性粒細(xì)胞結(jié)合，抑制肥大細(xì)胞釋放生物活性物質(zhì)； 阻止生物活性物質(zhì)作用于效應(yīng) 器官以及解除效應(yīng)器官反應(yīng)等。本文采用 Schwartz等法進(jìn)行大白鼠腹腔肥大細(xì)胞脫顆粒實(shí) 驗(yàn)，說明麻杏甘石湯有抑制肥大細(xì)胞脫顆粒作用，證明本方還有一定的抑制效應(yīng)器官反應(yīng)的 作用，可緩解由于抗原刺激而增強(qiáng)的腸管蠕動， 能保護(hù)腸管中肥大細(xì)胞免受抗原的攻擊。 上 述實(shí)驗(yàn)表明，麻杏甘石湯對肥大細(xì)胞脫顆粒、抗原刺激致敏腸管釋放組織胺以及對致敏腸管 蠕動的影響，可在一定程度上說明本方治療第一型變態(tài)反應(yīng)的機(jī)理。國內(nèi)外研究現(xiàn)狀1中醫(yī)對麻杏石甘湯的認(rèn)識1.1 麻杏石甘湯用法麻黃、杏仁、甘草、石膏四味，以水七開，煮麻黃，

5、減二升，去上沫，內(nèi)諸藥，煮取二開，去滓。溫服一升（現(xiàn)代用法：水煎溫服）。1.2 麻杏石甘湯功用辛涼宣泄，清肺平喘：用于外感風(fēng)熱，或風(fēng)寒郁而化熱，熱壅于肺，而見咳嗽、氣急、 鼻煽、口渴、高熱不退，舌紅苔白或黃，脈滑數(shù)者。常用本方配伍魚腥草、黃苓、瓜簍、貝 母等，治療急慢性支氣管炎、肺炎以及麻疹合并肺炎。1.3 麻杏石甘湯方解君藥：麻黃，辛甘溫，宣肺解表而平喘，石膏，辛甘大寒，清泄肺胃之熱以生津兩藥相 配，既能宣肺，又能泄熱。臣藥：杏仁，苦降肺氣，止咳平喘，既助石膏沉降下行，又助麻黃瀉肺熱。佐使：炙甘草，顧護(hù)胃氣，防石膏之大寒傷胃，調(diào)和麻黃、石膏之寒溫。1.4 配伍特點(diǎn)縱觀全方，藥僅四味，配伍嚴(yán)謹(jǐn)

6、，清宣降三法俱備，共奏辛涼宣泄，清肺平喘之功。1.5 注意事項(xiàng)本方出自傷寒論，原治太陽病，發(fā)汗未愈，風(fēng)寒入里化熱， 汗出而喘”者。后世用 于風(fēng)寒化熱，或風(fēng)熱犯肺，以及內(nèi)熱外寒，但見肺中熱盛，身熱喘咳，口渴脈數(shù)，無論有汗、 無汗，便以本方加減治療，都能獲效。對于麻疹已透或未透而出現(xiàn)身熱煩渴，咳嗽氣粗而喘，屬疹毒內(nèi)陷，肺熱熾盛者，亦可 加味用之。1.6 病癥分析風(fēng)熱襲表，表邪不解而入里，或風(fēng)寒之邪郁而化熱入里，邪熱充斥風(fēng)外，故身熱不解、 汗出、口渴、苔黃、脈數(shù)；熱壅于肺，肺失宣降，故咳逆氣急，甚則鼻煽。若表邪未盡，可 在衛(wèi)氣被郁，毛竅閉塞而無汗；苔薄白，脈浮亦是表證未盡之征。1.7 文獻(xiàn)摘要醫(yī)宗金

7、鑒 刪補(bǔ)名醫(yī)方論柯琴： 石膏為清火之重劑，青龍、白虎皆賴以建功，然用 之不當(dāng)，適足以招禍。故青龍以無汗煩躁，得姜桂以宣衛(wèi)外之陽也；白虎以有汗煩渴，須粳 米以存胃中津液也。此但熱無寒，故不用姜桂，喘不在胃而在肺，故于麻黃湯去桂枝之監(jiān)制， 取麻黃之開，杏仁之降，甘草之和，倍石膏之大寒，除內(nèi)外之實(shí)熱，斯漆漆汗出，而內(nèi)外之 煩熱與喘悉除矣。1.8 臨床應(yīng)用及研究1.8.1 辨證要點(diǎn)：本方為治療表邪未解，邪熱壅肺之喘咳的基礎(chǔ)方。因石膏倍麻黃，其 功用重清宣肺熱，不在發(fā)汗，所以臨床應(yīng)用以發(fā)熱、喘咳、苔薄黃、脈數(shù)為辨證要點(diǎn)。傷 寒論原用本方治療太陽病，發(fā)汗未愈，風(fēng)寒入里化熱，汗出而喘”者。后世用于風(fēng)寒化熱，

8、 或風(fēng)熱犯肺，以及內(nèi)熱外寒，但見邪熱壅肺之身熱喘咳、口渴脈數(shù)，無論有汗、無汗，皆可 以本方加減而獲效。對于麻疹已透或未透而出現(xiàn)身熱煩躁、咳嗽氣粗而喘屬疹毒內(nèi)陷，肺 熱熾盛者，亦可以本方加味。1.8.2 加減變化：如肺熱甚，壯熱汗出者，宜加重石膏用量，并酌加桑白皮、黃苓、知 母以清泄肺熱；表邪偏重，無汗而惡寒，石膏用量宜減輕，酌加薄荷、蘇葉、桑葉等以助解 表宣肺之力；痰多氣急，可加摹防子、枇杷葉以降氣化痰；痰黃稠而胸悶者，宜加瓜簍、貝 母、黃苓、桔梗以清熱化痰，寬胸利膈。1.8.3 現(xiàn)代運(yùn)用：本方常用于感冒、上呼吸道感染、急性支氣管炎、支氣管肺炎、大葉 性肺炎、支氣管哮喘、麻疹合并肺炎等屬表邪未

9、盡，熱邪壅肺者。1.8.5 使用注意：風(fēng)寒咳喘，痰熱壅盛者，非本方所宜。2、現(xiàn)代醫(yī)學(xué)對麻杏石甘湯的認(rèn)識2.1 對免疫功能的影響：中藥由267%麻杏石甘湯口服液加生理鹽水， 按5: 3稀釋而成。 觀察麻杏石甘湯對小鼠巨噬細(xì)胞吞噬功能的影響：取健康昆明種小鼠16只，體重18-22g,隨機(jī)分為兩組，每組8只，雌、雄各半，中藥組用上藥 0.4ml/日灌胃，對照組用等量生理鹽 水灌胃，均連續(xù)灌胃8日。對小鼠脾指數(shù)的影響：取健康NIH種小鼠20只，體重22-25g, 分組和給藥方法同上，每組均連續(xù)灌胃 10日。對小鼠血清溶血素含量的影響：取健康昆 明種小鼠20只，體重22-25g,分組及給藥方法同上，連續(xù)

10、灌胃11日。對小鼠皮膚遲發(fā)反 應(yīng)的影響；取健康NIH種小鼠12只，體重18-22g,分組和經(jīng)藥方法同上，每組可續(xù)灌胃 12日。結(jié)果：麻杏石甘湯可提高患兒細(xì)胞免疫功能，調(diào)整T淋巴細(xì)胞亞群間的比例關(guān)系，使小白鼠吞噬指數(shù)、脾指數(shù)、血清溶血素增高，使小白鼠皮膚遲發(fā)反應(yīng)增強(qiáng)。又有報道，采用水煎醇沉法制成 267%制劑，加生理鹽水按5:6稀釋后，置4c冰箱貯 存?zhèn)溆?。取健康小白?6只，體重18-22g,隨機(jī)分成中藥組和對照組。中藥組按 0.4ml/ 大劑量灌胃，每日1次，對照組用等量生理鹽水灌胃，各組連續(xù)灌胃 7日，第8日采血，分 離血清，用瓊脂平板打孔法測定溶菌酶含量， 進(jìn)行組間比較。分組給藥方法同連

11、續(xù)灌胃 7日，未次給藥后每只小白鼠腹腔注射 5%綿羊紅細(xì)胞1ml,并于3小時后腹腔注射生理鹽水2ml,然后處死動物，吸出腹腔液，以2000轉(zhuǎn)/分鐘離心沉淀10分鐘，棄上清液，涂片并 用瑞氏染液染色，鏡檢計算吞噬率及吞噬指數(shù)。取健康小白鼠20只，體重18-22g,分組及灌胃方法同，連續(xù)灌胃11日，各組均在給藥第4日，用10%新鮮羊紅細(xì)胞進(jìn)行小白鼠 腹腔免疫，0.5ml/只，于實(shí)驗(yàn)第11日摘眼球取血，分離血清，進(jìn)行血清凝集素試驗(yàn)，測定抗 體效價，采用RPMI“ 1640”培養(yǎng)液（1% “1640”、20%胎牛血清、青霉素100U,鏈霉素 100 g/ml） pH7.4,每瓶2.5ml,試驗(yàn)時每瓶加

12、入兔肝素 0.2ml抗凝血，并分別加入0.15ml, 0.1ml, 0.05ml三種劑量的麻杏石甘湯（藥物濃度調(diào)至 100%,每瓶1個劑量，同時設(shè)陽性對 照組（上海生物化學(xué)研究所產(chǎn)品 PHA10滴）和陰性對照組（即不加中藥也不加PHA）,經(jīng)37c 孵育70小時后離心沉淀，棄上清液，將沉淀物灌入毛細(xì)玻璃管，離心分離白細(xì)胞，涂片并 用瑞一姬混合染液染色，鏡檢計算淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率。實(shí)驗(yàn)結(jié)果：麻杏石甘湯能提高小白鼠巨 噬細(xì)胞的吞噬率和血清溶菌酶含量， 促進(jìn)淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化，從而使非特異性和特異性免疫功能 均有所提高。2.2 退熱作用：實(shí)驗(yàn)以家免為對象、造型、采用灌胃法給藥對麻杏石甘湯、生熟、 石膏的退熱作用

13、進(jìn)行了對比觀察。結(jié)果表明：3者都有不同程序的退熱作用。同時既為本方 為本方中的有機(jī)、無機(jī)兩類成分的協(xié)同”作用提供了佐證，也會它屬絡(luò)合物藥物的實(shí)際應(yīng)用 展示了前景。2.3 對尊麻疹的治療作用：選擇體重 2.5-3.0kg家兔10只，雌雄不拘，分給藥組和對照 組。用20%烏拉坦8ml/kg行腹腔麻醉后，用12號導(dǎo)尿管從口腔插入胃中，將家兔仰位固定。 在頸部正中線切口，插入氣管插管，氣管插管分叉一端與馬氏氣鼓相連，另一端自然呼吸。 在氣管右側(cè)的頸A做“V型切口，遠(yuǎn)心端結(jié)扎，近心端才S入與水銀檢壓計相連，含7%枸檬酸鈉溶液的動脈套管經(jīng)檢壓計連馬氏氣鼓。在腹部正中打開腹腔，找中段空腸一段，在腸壁切1.0

14、cm切口，將可充水小指套緩緩送入腸腔內(nèi)，荷包縫合腸壁，關(guān)閉腹腔，通過一段 橡皮管將腸內(nèi)指套連接在馬氏氣鼓上， 將腸內(nèi)指套充滿水，腸蠕動推動描記波型。而后開動 煙鼓，記錄一段正常血壓、呼吸、腸蠕動波，然后通過胃管灌藥（麻黃、杏仁、石膏、甘草， 各約成人量的1/2,按常規(guī)煎藥法，煎成50ml）,繼續(xù)觀察波型。結(jié)果發(fā)現(xiàn)：給藥組家兔血 壓有明顯升高趨勢，心率減慢，呼吸變淺減慢，腸蠕動增強(qiáng)。而對照組給與等量水50ml,結(jié)果對家兔血壓、呼吸、腸蠕動均無影響。證明麻杏石甘湯對尊麻疹之血管變態(tài)反應(yīng)之病理 有拮抗作用。參考文獻(xiàn)1李興，王廣生，張德清.中西醫(yī)結(jié)合治療小兒支氣管肺炎64例.河南中醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2006

15、,21(4): 5354.2袁壯.小兒支原體肺炎診斷治療中的幾個問題.中國實(shí)用兒科雜志，2002, 17(8): 449.3岱明，王曉紅，陸權(quán)，等.門冬氨酯阿奇霉素治療兒童肺炎的臨床療效及安全性fJ1_中國實(shí)用兒科雜志，2003, 18(12): 749.4Darko StefanovskiJoyce M.Richey,et al.Consistency of the Disposition index in the face of diet induced insulin resistancepotential role of FFA.Plos one,2011.6(3):1-8.5Magd

16、a,M.,M.Hennes,and E.Shrago,m Receptor and post receptor effects of free fatty acids(FFA)on hepatocyte insulin dynamicsJ.Int J Obes,1990.14(10):831-834.二、研究內(nèi)容（說明課題的具體研究內(nèi)容，重點(diǎn)解決的問題，預(yù)期的研究成果）：（一）具體研究內(nèi)容1、過敏性哮喘大鼠模型的建立；2、麻杏石甘湯組方對過敏性哮喘大鼠的哮喘治療的功效；3、麻杏石甘湯組方對過敏性哮喘大鼠免疫介質(zhì)分泌的影響；3、麻杏石甘湯組方對過敏性哮喘大鼠作用機(jī)制的探討。（二）重點(diǎn)解決的問題1

17、、過敏性哮喘大鼠模型的制備方法；2、采用Schwartz等法進(jìn)行大白鼠腹腔肥大細(xì)胞脫顆粒實(shí)驗(yàn);3、電鏡觀察肺泡內(nèi)免疫反應(yīng)敏感程度。（三）預(yù)期研究成果1、通過實(shí)驗(yàn)評價麻杏石甘湯治療過敏性哮喘的功效，為進(jìn)一步研究提供依據(jù)。2、將研究成果發(fā)表于核心期刊雜志。三、研究方案設(shè)計(包括研究方法，技術(shù)路線，理論分析、計算、實(shí)驗(yàn)方法和步驟及其可行性，可能出現(xiàn)的技術(shù)問題及解決辦法等)：(一)研究方法1實(shí)驗(yàn)材料1.1 實(shí)驗(yàn)動物 SD大鼠，SPF級，雄性，體重160-180g。1.2 飼料配方(1)高脂飼料：普通基礎(chǔ)飼料51.8%,蛋黃粉20%,豬油7%,奶粉5%,白糖5%,魚肝油 20d/kg,花生2%,黃豆5%

18、,食鹽1%,麻油0.5%。(2)普通飼料：大麥粉20%、脫水菜(去除水分的包心菜)10%、豆粉20%、酉孝母1%、骨 粉5%、玉米粉16%、萩皮16%、魚粉10%、食鹽2%。1.3 受試藥物 麻杏石甘湯組方，低劑量為臨床用量的10倍，中劑量為臨床用量的20倍, 高劑量為臨床用量的30倍。1.4 儀器 全自動生化分析儀；TD25 WS多管架自動平衡離心機(jī)；分析天平；電子天平； T1000恒溫水浴箱；高溫高壓滅菌器；酶標(biāo)儀；可調(diào)式移液槍；低溫高速離心機(jī)；低溫冰箱； 超凈工作臺；勻漿器；渦旋儀；實(shí)時熒光定量 RT-PCR;核算蛋白檢測儀；掃描電鏡。1.5 試齊I葡萄糖試劑盒；TG試劑盒；TC試劑盒；

19、HDL-C試劑盒；LDL-C試劑盒；逆轉(zhuǎn)錄 試劑盒；RT-PCR試劑盒；葡萄糖；生理鹽水；氯仿；異丙醇；乙醇；DEPC; TE buffer; Trizol。2.實(shí)驗(yàn)方法2.1 支氣管哮喘大鼠模型的制備SD大鼠，隨機(jī)分為正常組和支氣管哮喘組，每天定量給予飼料，正常組給予普通飼料，支氣管哮喘組給予麻杏石甘湯混合飼料，自由飲水，造模時間6周，每周稱重一次。2.2 動物分組及給藥方法 造模6周后，支氣管哮喘組大鼠體重顯著高于正常組大鼠體重提 示為造模成功，將高脂組大鼠隨機(jī)分成 4組，分別為模型組，支氣管哮喘組分為高、中、低劑 量組，每組10只。從第7周開始灌胃給藥，正常組、模型組給予蒸儲水，灌胃體積

20、為1ml/100g, 給藥組按高、中、低劑量給予受試藥物，每天給藥 1次，連續(xù)6周，每天記錄攝食量，每周稱 重一次，計算食物利用率。2.3 檢測指標(biāo)及方法(1)攝食量、食物利用率：每天定量給予飼料，稱取剩余飼料，計算攝食量；每周稱重一次， 計算一次食物利用率，食物利用率=(同期內(nèi)體重的增量/同期內(nèi)的攝食量)X100%。(2)體重、體長、Lee's指數(shù)：每周稱重一次，觀察各組體重變化；連續(xù)給予受試樣品 6周 后，禁食不禁水12h,稱取體重，乙醴麻醉后測定大鼠的體長(鼻尖至肛門的長度，cm),計算Lee'指數(shù)，Lee'指數(shù)=體重1/3(g) 1000/體長(cm)。(3)脂

21、肪重量、脂體比：連續(xù)給予受試樣品 6周后，禁食不禁水12h,稱取體重，解剖取腎 臟和生殖器周圍的脂肪稱取脂肪濕重，計算脂體比，脂體比二脂肪重量(g)/體重(100g)。(4)血清生化指標(biāo)：給予受試樣品6周后，禁食不禁水12h小時，乙醴麻醉后眼眶靜脈采血3ml, 分離血清，用全自動生化分析儀測定各組動物血清中 TC、TG、HDL-C、LDL-C的含量。(5)糖耐量測定：連續(xù)給予受試樣品6周后，禁食不禁水12h,乙醴麻醉，眼眶取血測定空腹 血糖值(0h),然后灌服葡萄糖溶液(2.5g/kg),分別于給糖后1 h、2 h取血測血糖值，血糖測定按 葡萄糖氧化酶-過氧化酶法，操作方法及步驟按試劑盒上要求

22、進(jìn)行。(6)血清瘦素、神經(jīng)肽Y、游離脂肪酸、肝酯酶、脂蛋白酯酶含量測定：乙醴麻醉，眼眶取 血，2000rpm離心10min,血清-20C保存，按各試劑盒要求測定。(7)肝系數(shù)、肝組織電鏡：給予受試樣品6周后，禁食不禁水12h小時，解剖取肝臟，稱重， 置于冰上剪取50mgi干組織，修剪成1mm*1mm大小，放入預(yù)冷的固定液中，經(jīng)預(yù)處理、切片后 掃描電鏡觀察。(8)下丘腦瘦素受體基因、神經(jīng)肽 Y mRNA表達(dá)水平測定：給予受試樣品6周后，禁食不禁 水12h小時，解剖取腎及睪丸周圍脂肪組織，稱重，剪取 50mg放入預(yù)冷的PCR管中，迅速放入 液氮中，速凍后放入-80C,用實(shí)時熒光定量RT-PCR僉測瘦素、脂聯(lián)素mRNA表達(dá)水平。2.4 統(tǒng)計方法 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用SPSS17.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析，各組測定值用均數(shù)土標(biāo)準(zhǔn)差 (X±s)表示，采用t檢驗(yàn)，多組間比較用方差分析。（二）技術(shù)路線調(diào)脂作用： 肝臟系數(shù) 肝組織電鏡“減肥作用：攝食量、 食物利用率、體重、 體長、李氏指數(shù)、脂 肪濕重、脂體比血糖調(diào)節(jié)作用:空腹血糖含量測定 糖耐量實(shí)驗(yàn)血清瘦素、神經(jīng)肽 Y含量測定； 下丘腦瘦素受體、 神經(jīng)肽Y基因表 達(dá)水平測定； 脂肪組織HE染色清游離脂肪酸 含量測定； 血清肝酯酶、脂蛋 白酯酶活性測定四、可行性分析1 .理論基礎(chǔ)：本課題實(shí)驗(yàn)方法在國內(nèi)外文獻(xiàn)中均有報道，