水質(zhì)檢測(cè)操作過(guò)程(最新修訂版)

1、水產(chǎn)養(yǎng)殖與水域生態(tài)實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)方法- 水化學(xué)AAE項(xiàng)目分析時(shí)間順序?qū)嶒?yàn)室觀測(cè)指標(biāo)（按時(shí)間順序） ：1 氨氮2 磷酸鹽3 硝酸鹽4 亞硝酸鹽5 高錳酸鹽指數(shù)6 生化耗氧量7 懸浮物8 總氮、總磷9 總硬度10 溶氧11 硅酸鹽另附： 12 磷含量測(cè)定現(xiàn)場(chǎng)測(cè)定水樣的溫度，透明度。測(cè)定過(guò)程：1 透明度 塞氏盤法參考文獻(xiàn)：魏復(fù)盛 . 水和廢水監(jiān)測(cè)分析方法 ( 第四版 )M. 北京 : 中國(guó)環(huán)境科學(xué)出版社 ,2002.101.A. 方法原理透明度反映水體澄清程度。潔凈的水是透明的，當(dāng)水中存在懸浮物和膠體物質(zhì)時(shí)透明度降低。地下水的透明度通常較高，但由于供水和環(huán)境條件不同，透明度可能不斷變化。與濁度相反，水中

2、懸浮物越多透明度越低。利用塞氏盤（Scheii disc）法測(cè)定透明度的定義是：將一個(gè)黑白圓盤沉入水中，剛剛觀察不到該圓盤的深度即為水體的透明度（Scheiidepth）。B. 儀器透明度盤（塞氏盤）：直徑為 200mm 的圓板（通常用較厚的白鐵片剪成） ，圓板的上面從中心平分為四部分，以黑漆和白漆相間涂布。圓板正中心開(kāi)小孔，下面加1 鉛錘，上面系小繩，繩上每10cm 處用有色絲線或漆做深度標(biāo)記。C. 步驟1水產(chǎn)養(yǎng)殖與水域生態(tài)實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)方法- 水化學(xué)在背光處將透明度盤平放入水中，逐漸下沉至恰恰不能看見(jiàn)盤面的白色時(shí)，測(cè)量盤面所在深度，即得透明度（ cm）。注意：（ 1）背光讀取透明度數(shù)值，需反復(fù)

3、觀察3 次，取平均值。（ 2）透明度盤長(zhǎng)期使用后盤面白漆顏色會(huì)變黃，必須重新涂漆。實(shí)驗(yàn)室內(nèi)分析項(xiàng)目（按分析時(shí)間順序排列）1 氨氮 納氏試劑法A. 方法原理氨氮（ NH 3-N）包括游離態(tài)氨（ NH 3）或銨鹽（ NH4+），兩者在水中的比例取決于水溫+和 pH。當(dāng) pH 高時(shí)， NH 3 的比例較高；反之NH 4 的比例較高。水溫對(duì)NH 3-N 組成的影響與 pH 相反。碘化汞和碘化鉀 （KI ）的堿性溶液與 NH 3-N 反應(yīng)生成淡紅棕色膠態(tài)化合物，此顏色在較寬的波長(zhǎng)內(nèi)（通常測(cè)量用波長(zhǎng)在410425nm）具有強(qiáng)烈吸收。方法精密度和準(zhǔn)確度：三個(gè)實(shí)驗(yàn)室分析含1.141.16mg/L NH 3-N

4、 的加標(biāo)水樣，單個(gè)實(shí)驗(yàn)室的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差不超過(guò)9.5%；加標(biāo)回收率范圍為95%104%。四個(gè)實(shí)驗(yàn)室分析含1.813.06mg/L 氨氮的加標(biāo)水樣，單個(gè)實(shí)驗(yàn)室的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差不超過(guò)4.4%；加標(biāo)回收率范圍為 94%96%。B. 儀器和試劑 722 分光光度計(jì)（波長(zhǎng) 460 nm -760 nm）無(wú)氨水：每升蒸餾水中加0.1ml H 2SO4，在玻璃蒸餾器中蒸餾，棄去50ml 初餾液，接取其余餾出液于具塞磨口玻璃瓶中，密塞保存。注：無(wú)氨水不能長(zhǎng)期保存。納氏試劑：稱取 20g KI ，溶于約 100ml 水中，邊攪拌邊分次少量加入二氯化汞（HgCl 2）結(jié)晶粉末（約 10g），至出現(xiàn)不易溶解朱紅色沉淀。

5、另外稱取 60g 氫氧化鉀（ KOH ），溶于水并稀釋至250ml，充分冷卻至室溫后，將上述氯化汞和碘化鉀（ KI ）溶液在攪拌狀態(tài)下，徐徐注入KOH 溶液中，用水稀釋至400ml，混勻。靜置過(guò)夜。2水產(chǎn)養(yǎng)殖與水域生態(tài)實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)方法- 水化學(xué)將上清液（納氏試劑）移入聚乙烯瓶中，密塞保存。酒石酸鉀鈉（ KNaC 4H4O6 ·4H2O）溶液：稱取酒石酸鉀鈉50g，溶于 100ml 水中，加熱煮沸以去除氨，冷卻后定容至100ml 。銨標(biāo)準(zhǔn)貯備溶液：稱取3.819g 在 100下干燥過(guò)的優(yōu)級(jí)純氯化銨（NH4Cl），溶于水中，移入 1000ml 容量瓶中，定容。此溶液每毫升含1.00mg N

6、H3-N。銨標(biāo)準(zhǔn)使用溶液： 移取 5.00ml 銨標(biāo)準(zhǔn)貯備液到500ml 容量瓶中，定容。此溶液每毫升含0.010mg NH3-N 。C. 測(cè)定步驟（ 1）NH 3-N 標(biāo)準(zhǔn)曲線移取 0、 0.50、1.00、3.00、5.00、7.00 和 10.00ml 銨標(biāo)準(zhǔn)使用液于50ml 比色管中，加無(wú)氨水定容至標(biāo)線。向比色管中加入 1.0ml 酒石酸鉀鈉溶液，混勻。加入 1.5ml 納氏試劑，混勻。放置 10min 后，在波長(zhǎng) 420nm 處，用光程 20mm 比色皿，以無(wú)氨水為參比，測(cè)量吸光度。根據(jù)吸光度（ x）和 NH 3-N 含量（y：mg/L ）繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線， 建立回歸方程： y=ax+b

7、，其中 a、b 為常數(shù)。注：（ 1）比色皿使用前需要進(jìn)行空白校正，樣品皿吸光度空白值 =樣品皿盛無(wú)氨水時(shí)的吸光度 -參比皿盛無(wú)氨水時(shí)的吸光度。測(cè)量時(shí)以吸光度最低的比色皿做參比皿，以吸光度較高的比色皿做樣品皿，樣品吸光度=樣品皿吸光度 -參比皿吸光度 -樣品皿吸光度空白值。（ 2）水樣 NH 3-N 濃度受空氣中 NH 3 影響很大，實(shí)驗(yàn)室內(nèi)不能存放氨水；另外，由于水樣 NH 3-N 濃度測(cè)定結(jié)果受環(huán)境影響較大，每次測(cè)定都應(yīng)做標(biāo)準(zhǔn)曲線。（ 2）水樣測(cè)定將水樣搖勻，經(jīng)0.45 m 濾膜過(guò)濾（過(guò)濾前先用水樣潤(rùn)洗過(guò)濾裝置，濾膜用前用無(wú)氨水浸泡）后，取 50ml 水樣于 50ml 比色管（用無(wú)氨水洗滌并

8、避免空氣中 NH 3 溶入）定容至標(biāo)線，加 1.0 ml 酒石酸鉀鈉溶液， 加入 1.5ml 納氏試劑，放置 10min 后，在波長(zhǎng) 420nm 處，用光程 20 mm 比色皿，以無(wú)氨水為參比，測(cè)量吸光度（步驟同標(biāo)準(zhǔn)曲線）（ 3）計(jì)算將水樣吸光值（ A ）代入標(biāo)準(zhǔn)曲線方程y=ax+b 計(jì)算出水樣的 NH 3 -N 濃度。NH 3-N（N： mg/L） =aA+b3水產(chǎn)養(yǎng)殖與水域生態(tài)實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)方法- 水化學(xué)2 磷酸鹽磷酸鹽的測(cè)定鉬銻抗分光光度法方法原理在酸性條件下，正磷酸鹽與鉬酸銨，酒石酸銻氧鉀反應(yīng)，生成磷鉬雜多酸，被還原劑抗壞血酸還原，則變成藍(lán)色絡(luò)合物，通常稱磷鉬藍(lán)。儀器和化學(xué)試劑1. 分光光

9、度計(jì)2. （1+1）硫酸3. 10%抗壞血酸溶液：溶解 13g 鉬酸銨（ NH4 ）6MoO24·4H2O）于 100ml 水中。溶解 0.35g 酒石酸銻氧鉀（ K（ SbO）C4H4O6·1/2H2O）于 100ml 水中。在不斷攪拌下，將鉬酸銨溶液徐徐加到300ml（ 1+1）硫酸中，加酒石酸銻氧鉀溶液并且混合均勻。貯存在棕色玻璃瓶中約4°C 保存。至少穩(wěn)定兩個(gè)月。4. 濁度 -色度補(bǔ)償液：混合兩份體積的（ 1+1）硫酸和一份體積的 10%抗壞血酸溶液。此溶液當(dāng)天配制。5. 磷酸鹽貯備液溶液：將優(yōu)級(jí)純磷酸二氫鉀（ KH2PO4）于 110°C 干燥

10、 2h，在干燥器中放冷。稱取 0.2197g 溶于水，移入 1000ml 容量瓶中。加（ 1+1）硫酸 5ml，用水稀釋至標(biāo)線。此溶液每毫升含 50.0ug 磷（以 P 計(jì)）。6. 磷酸鹽標(biāo)準(zhǔn)溶液：吸取 10.00ml 磷酸鹽貯備液于 250ml 容量瓶中，用水稀釋至標(biāo)線。此溶液每毫升含 2.00ug 磷。臨用時(shí)現(xiàn)配。C步驟1. 校準(zhǔn)曲線的繪制取數(shù)支 50ml 具賽比色管， 分別加入磷酸鹽標(biāo)準(zhǔn)使用液0，0.50，1.00，3.00，5.00，10.0，15.0ml，加水至 50ml。顯色：向比色管中加入1ml 10%抗壞血酸溶液，混勻。 30s 后加 2ml 鉬酸鹽溶液充分混勻，放置 15mi

11、n。測(cè)量：用 10mm 或 30mm 比色皿，于 700nm 波長(zhǎng)處，以零濃度溶液為參比，測(cè)量吸光度。2樣品測(cè)定：分取適量經(jīng)濾膜過(guò)濾或消解的水樣（使含磷量不超過(guò)30ug）加入 50ml 比色管中，用水稀釋至標(biāo)線。以下按繪制校準(zhǔn)曲線的步驟進(jìn)行顯色和測(cè)量。減去空白實(shí)驗(yàn)的吸光度，并從4水產(chǎn)養(yǎng)殖與水域生態(tài)實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)方法- 水化學(xué)校準(zhǔn)曲線上查出含磷量。計(jì)算磷酸鹽（ P，mg/L ） =m/V式中 m由校準(zhǔn)曲線查得的磷量（ug）；V 水樣體積（ ml）。D注意事項(xiàng)1. 如試樣中色度影響測(cè)量吸光度，需做補(bǔ)償校正。在50ml 比色管中，分取與樣品測(cè)定相同量的水樣，定容后加入3ml 濁度補(bǔ)償液，測(cè)量吸光度，然后

12、從水樣的吸光度中減去校正吸光度。2. 室溫低于 13°C 時(shí)，可在 20-30°C 水浴中顯色 15min。3. 操作所用的玻璃器皿，可用（ 1+5）鹽酸浸泡 2h，或用不含磷酸鹽的洗滌劑刷洗。4. 比色皿用后應(yīng)以稀硝酸或鉻酸洗液浸泡片刻，以除去吸附的鉬藍(lán)有色物。3 硝酸鹽銅鎘柱還原法A. 方法原理當(dāng)水樣通過(guò)一個(gè)鍍銅的鎘屑柱時(shí)，海水中的硝酸鹽定量地被還原成亞硝酸鹽。生成的亞硝酸鹽和對(duì)氨基苯磺酰胺重氮化并與 N（ 1萘基）乙二胺偶聯(lián)而形成一種深色能用分光光度法測(cè)量的偶氮染料。用該法測(cè)定硝酸鹽時(shí)必須校正樣品中的亞硝酸鹽含量。B. 儀器和化學(xué)試劑 722 分光光度計(jì) 50ml 具

13、塞比色管硝酸鹽還原柱： 鎘-銅屑：將純金屬鎘銼成細(xì)屑，鎘屑應(yīng)能通過(guò) 2mm 篩孔而不通過(guò) 0.5mm篩孔。將約 100g 銼屑（足夠兩個(gè)還原柱用）加入500ml 2% （重量 /體積）的硫酸銅（ CuSO4·5H2O ）溶液，攪拌至溶液的藍(lán)色消失。將一小團(tuán)細(xì)銅絲（旋屑）置于還原柱底部，將稀氯化銨溶液注入還原柱。注入漿糊狀鎘 -銅屑并緩慢地裝填至柱高約 30 厘米。裝柱時(shí)鎘 -銅屑應(yīng)一直浸泡在稀氯化銨溶液中，不應(yīng)干涸。裝柱后在柱的頂端塞一小團(tuán)細(xì)銅絲。用稀氯化銨溶液充分沖洗還原柱并輕敲柱壁來(lái)調(diào)節(jié)流速， 正常流速應(yīng) 100ml/8-12min，若流速低于該值則需重新裝柱。注：鎘 -銅屑使用

14、一段時(shí)間后需活化：從柱中取出鎘-銅屑，用 5%（體積 /體積）鹽酸清洗，5水產(chǎn)養(yǎng)殖與水域生態(tài)實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)方法- 水化學(xué)然后用蒸餾水沖洗直至傾出液 pH>5 。按上述方法用硫酸銅將鎘屑活化，裝柱。濃氯化銨溶液：將 125g 分析純氯化銨溶于 500ml 蒸餾水中。此溶液貯存在玻璃或塑料瓶中。稀氯化銨溶液：用蒸餾水將50ml 濃氯化銨溶液稀釋至2000ml。此溶液貯存在玻璃或塑料瓶中。顯色劑：在 500ml 燒杯中加入 250ml 水和 50ml 磷酸，加入 20.0g 對(duì) -氨基苯磺酰胺，將 1.00g N-（1-萘基） -乙二胺二鹽酸鹽（ C10H7NHC2H4NH2· 2HCl

15、 ）溶于上述溶液中，轉(zhuǎn)移至 500ml 容量瓶中，用水稀釋至標(biāo)線，混勻。此溶液貯于棕色瓶中，在25下保存，至少可穩(wěn)定一個(gè)月。注意：顯色劑有毒，避免與皮膚接觸或攝入體內(nèi)。硝酸鹽標(biāo)準(zhǔn)溶液：準(zhǔn)確稱取在 105110烘 4h 后的 KNO30.7218g，加水溶解后稀釋至1000ml（貯備液：氮濃度 100g/ml）。取 10ml 貯備液，準(zhǔn)確稀釋至 100ml（使用液：氮濃度 10g/ml）。 50ml 量筒等玻璃儀器。C. 步驟（1）標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：向 6 個(gè) 50ml 具塞比色管內(nèi)分別加入0、 0.25、 0.50、1.00、1.50、2.00ml 硝酸鹽標(biāo)準(zhǔn)使用液，加水至標(biāo)線，混勻（硝酸鹽標(biāo)準(zhǔn)

16、溶液系列的氮濃度分別為0、0.050、0.100、0.200、0.300、0.400mg/L）。分別向每個(gè)比色管中加入1.0ml 濃氯化銨溶液，搖勻。將比色管內(nèi)的溶液加入還原柱中，先加入約5ml，使其通過(guò)還原柱，然后將剩余的溶液加入柱中并用空比色管收集還原柱流出的液體，將最初收集的約10ml 液體棄去，再收集25ml。將還原柱內(nèi)多余液體排放盡后再加下一個(gè)樣品。注意：過(guò)還原柱時(shí)液面不能低于銅絲，且測(cè)定的空白和標(biāo)準(zhǔn)樣品應(yīng)用同一個(gè)還原柱，過(guò)柱流速應(yīng)一致。在收集的經(jīng)過(guò)還原柱的溶液中分別加入0.5ml 顯色劑，密塞，混勻。靜置20min 后，在2h 內(nèi)以水為參比，測(cè)量吸光度（波長(zhǎng) 543nm，比色皿光程

17、 10mm），繪制校準(zhǔn)曲線： y=ax+b，其中 a、b 為常數(shù)。注：測(cè)定前先對(duì)比色皿進(jìn)行校正。（ 2）水樣測(cè)定：將水樣搖勻后經(jīng)0.45 m 濾膜過(guò)濾（濾器使用前先用水樣潤(rùn)洗一遍），取 50ml 過(guò)濾水樣于6水產(chǎn)養(yǎng)殖與水域生態(tài)實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)方法- 水化學(xué)50ml 比色管中（水樣中硝酸鹽含量較高，則進(jìn)行適度稀釋），每個(gè)比色管中分別加1.0ml濃氯化銨溶液，搖勻。過(guò)還原柱，測(cè)定吸光度。（ 3）計(jì)算將水樣的吸光值代入標(biāo)準(zhǔn)曲線方程，求出總亞硝酸鹽氮含量，用總亞硝酸鹽含量減去水樣中的亞硝酸鹽氮含量即得硝酸鹽氮含量。計(jì)算方法如下：（ NO3-N+ NO2-N ）（ N：mg/L）=aA+bNO3-N （ N：

18、 mg/L）=（ NO3-N+ NO2-N ） - NO2-N4 亞硝酸鹽 N（ 1萘基）乙二胺光度法A. 方法原理在磷酸介質(zhì)中（ pH=1.8±0.3），亞硝酸鹽與對(duì)氨基苯磺酰胺反應(yīng)生成重氮鹽，再與N（ 1萘基）乙二胺偶聯(lián)生成紅色染料。在540nm 波長(zhǎng)處有最大吸收。方法的精密度和準(zhǔn)確度： 三個(gè)實(shí)驗(yàn)室分析含 0.02570.0816 mg/L 亞硝酸鹽氮加標(biāo)水樣，單個(gè)實(shí)驗(yàn)室的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差不超過(guò) 9.3%；加標(biāo)回收率為 90%114%。五個(gè)實(shí)驗(yàn)室分析含 0.0830.18mg/L 亞硝酸鹽氮加標(biāo)水樣， 單個(gè)實(shí)驗(yàn)室的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差不超過(guò) 2.8%；加標(biāo)回收率為 96%102%。B. 儀器

19、和化學(xué)試劑 722 分光光度計(jì)去亞硝酸鹽水： （ 1）在蒸餾水中加入少許高錳酸鉀晶體（呈紅色） ，再加氫氧化鋇（或氫氧化鈣）使呈堿性。在玻璃蒸餾器內(nèi)蒸餾，棄去 50ml 初蒸液，收集中間約 70%不含錳的餾出液?；颍?2）在每升蒸餾水中加 1ml 濃硫酸和 0.2ml 硫酸錳溶液（每 100ml 水中含36.4gMnSO4·H2O），加入 13ml0.04%高錳酸鉀溶液至呈紅色，重蒸餾。磷酸(1.70g/ml)顯色劑：在 500ml 燒杯中加入 250ml 水和 50ml 磷酸，加入 20.0g 對(duì)-氨基苯磺酰胺，將1.00g N-（1-萘基） -乙二胺二鹽酸鹽（ C10H7NHC

20、2H4NH 2·2HCl ）溶于上述溶液中，轉(zhuǎn)移至500ml 容量瓶中，用水稀釋至標(biāo)線，混勻。此溶液貯于棕色瓶中，在25下保存 ，至少可穩(wěn)定一個(gè)月。注意：顯色劑有毒，避免與皮膚接觸或攝入體內(nèi)。7水產(chǎn)養(yǎng)殖與水域生態(tài)實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)方法- 水化學(xué)高錳酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液 （1/5KMnO 4）=0.050mol/L：溶解 1.6g 高錳酸鉀于 1200ml 水中，煮沸0.51h，使體積減少到 1000ml 左右，放置過(guò)夜。用 G-3 號(hào)玻璃砂芯濾器過(guò)濾后，濾液貯存于棕色試劑瓶中避光保存，并進(jìn)行標(biāo)定。草酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液（ 1/2Na2C2O4） =0.0500mol/L：溶解經(jīng) 105烘干 2h 的優(yōu)級(jí)純無(wú)

21、水草酸鈉 3.350g 于 750ml 水中，移入 1000ml 容量瓶定容。亞硝酸鹽氮標(biāo)準(zhǔn)貯備液： 稱取 1.232g 亞硝酸鈉（NaNO2），溶于 150ml 水中，轉(zhuǎn)移至 1000ml 容量瓶中，定容至標(biāo)線（貯備液） 。每毫升貯備液約含 0.25mg 亞硝酸鹽氮。貯備液亞硝酸鹽氮濃度需要標(biāo)定。標(biāo)定方法如下：在 300ml 具塞錐形瓶中加入 50.00ml 0.050mol/L 的高錳酸鉀溶液， 5ml 濃硫酸，用 50ml移液管加入 50.00ml 亞硝酸鈉標(biāo)準(zhǔn)貯備液（移液時(shí)移液管下端插入高錳酸鉀溶液液面下），輕輕搖勻。在水浴中加熱至 7080，用移液管加入草酸鈉標(biāo)準(zhǔn)液（每次加入 10.

22、00ml，直至紅色褪去），記錄草酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的用量（ V2）。用高錳酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定過(guò)量草酸鈉至溶液呈微紅色，記錄高錳酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液總用量（V1）。用 50ml 水代替亞硝酸鹽氮標(biāo)準(zhǔn)貯備液，重復(fù)上述操作。高錳酸鉀的濃度（ C1）用草酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液標(biāo)定：C1（ 1/5KMnO 4） =0.0500×V4/V3標(biāo)準(zhǔn)貯備液中亞硝酸鹽氮濃度按下式計(jì)算：NO2-N （N：mg/L ）=（ V1C1-0.0500 ×V2）×7.00 ×1000/50.00=140 V1C1-7.00 ×V2式中： C1 高錳酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度（mol/L ）；V1 滴定亞硝酸鹽

23、氮標(biāo)準(zhǔn)貯備液時(shí)加入高錳酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液總量（ml）；V2 滴定亞硝酸鹽氮標(biāo)準(zhǔn)貯備液時(shí)加入草酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液總量（ml ）；V3 滴定水時(shí)加入高錳酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液總量（ml）；V4 滴定空白時(shí)加入草酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液總量（ml）；7.00 亞硝酸鹽氮（ 1/2N）的摩爾質(zhì)量（ g/mol ）；50.00亞硝酸鹽氮標(biāo)準(zhǔn)貯備液取用量（ml ）；0.0500 草酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度（ 1/2Na2C2O4，mol/L ）。亞硝酸鹽氮標(biāo)準(zhǔn)中間液：取 50.00ml 亞硝酸鹽氮標(biāo)準(zhǔn)貯備液（含 12.5ml 亞硝酸鹽氮），準(zhǔn)確稀釋至 250ml 容量瓶中。每毫升中間液中含 50.0 g 亞硝酸鹽氮。8水產(chǎn)養(yǎng)殖與水域生態(tài)實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)

24、方法- 水化學(xué)注：中間液貯于棕色瓶?jī)?nèi)，在25保存，可穩(wěn)定一周。亞硝酸鹽氮標(biāo)準(zhǔn)使用液：取10.00ml 亞硝酸鹽氮標(biāo)準(zhǔn)中間液 , 置于 500ml 容量瓶中定容。每毫升使用液含1.00 g 亞硝酸鹽氮。使用液使用當(dāng)天配置。C. 步驟（ 1）繪制曲線：在 6 支 50ml 比色管中，分別加入 0、 1.00、3.00、5.00、 7.00 和 10.00ml亞硝酸鹽氮標(biāo)準(zhǔn)使用液，用不含亞硝酸鹽的水稀釋至標(biāo)線。加入1.0ml 顯色劑，加塞，混勻。靜置 20min。在 2h 內(nèi)以水為參比，測(cè)量吸光度（波長(zhǎng)540nm，比色皿光程10mm），繪制校準(zhǔn)曲線： y=ax+b，其中 a、 b 為常數(shù)。注：測(cè)定前

25、先對(duì)比色皿進(jìn)行校正。（ 2）水樣測(cè)定：將水樣搖勻后經(jīng)0.45 m 濾膜過(guò)濾（濾器使用前先用水樣潤(rùn)洗一遍），取50ml 過(guò)濾水樣于 50ml 比色管中（水樣中硝酸鹽含量較高，則進(jìn)行適度稀釋），每個(gè)比色管中分別加 1.0ml 顯色劑，搖勻。靜置20min。在 2h 內(nèi)以水為參比，測(cè)量吸光度。（ 3）計(jì)算將水樣的吸光值代入標(biāo)準(zhǔn)曲線方程，求出亞硝酸鹽氮含量。計(jì)算方法如下：NO2-N（N：mg/L ） =aA+b5 高錳酸鹽指數(shù) 酸性高錳酸鉀法A. 方法原理加入硫酸使水樣呈酸性后加入一定量的高錳酸鉀溶液，在沸水浴中加熱反應(yīng)一定的時(shí)間，利用高錳酸鉀氧化水樣中有機(jī)物。加入過(guò)量草酸鈉溶液還原剩余的高錳酸鉀，用

26、高錳酸鉀溶液回滴過(guò)量的草酸鈉，計(jì)算求出高錳酸鹽指數(shù)。高錳酸鉀指數(shù)是一個(gè)相對(duì)的條件性指標(biāo)，其測(cè)定結(jié)果與溶液的酸度、高錳酸鹽濃度、加熱溫度和時(shí)間有關(guān)。因此測(cè)定時(shí)必須嚴(yán)格控制條件以使結(jié)果具有可比性。方法的適用范圍：適用于氯離子含量不超過(guò)300mg/L 的水樣。當(dāng)水樣的高錳酸鹽指數(shù)值超過(guò) 10mg/L 時(shí)則酌情分取少量試樣，并用水稀釋后再進(jìn)行測(cè)定。方法的精密度和準(zhǔn)確度： 五個(gè)實(shí)驗(yàn)室分析高錳酸鹽指數(shù)為 4.0mg/L 的葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液，實(shí)驗(yàn)室內(nèi)相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為 4.2%；實(shí)驗(yàn)室間相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為 5.2%。B. 儀器與化學(xué)試劑 50ml 酸式滴定管 250ml 錐形瓶9水產(chǎn)養(yǎng)殖與水域生態(tài)實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)方法- 水

27、化學(xué)沸水浴、調(diào)溫電爐定時(shí)鐘高錳酸鉀貯備液（1/5KMnO 4=0.1mol/L ）：溶解 3.2g 高錳酸鉀于 1200ml 水中，煮沸 0.51h，使體積減少到 1000ml 左右，放置過(guò)夜。用 G-3 號(hào)玻璃砂芯濾器過(guò)濾，濾液貯存于棕色試劑瓶中避光保存（貯備液） 。貯備液使用前用 0.1000mol/L 的草酸鈉標(biāo)準(zhǔn)液標(biāo)定濃度。高錳酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液（ 1/5KMnO 4=0.01mol/L）：吸取 100ml 的高錳酸鉀貯備液，用水稀釋至 1000ml（標(biāo)準(zhǔn)溶液），標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為 0.01mol/L，貯于棕色瓶中，使用當(dāng)天標(biāo)定。草酸鈉標(biāo)準(zhǔn)貯備液 （ 1/2Na2C2O4=0.1000mol/L

28、）：在 105110烘優(yōu)級(jí)純無(wú)水草酸鈉 1h 后冷卻，準(zhǔn)確稱取 0.6705g，溶于水中，在 100ml 容量瓶中定容（貯備液） 。草酸鈉標(biāo)準(zhǔn)使用液（ 1/2Na2C2O4=0.0100mol/L）：吸取 10.00ml 草酸鈉貯備液于 100ml 容量瓶中，用水稀釋至標(biāo)線。（ 1+3）硫酸：按體積比配制，趁熱滴加高錳酸鉀溶液至呈微紅色。C.步驟（ 1）將水樣搖勻， 取 100ml 水樣（如高錳酸鉀指數(shù)高于10mg/L，則應(yīng)進(jìn)行稀釋） 于 250ml的錐形瓶中。注：水樣有機(jī)質(zhì)較多時(shí)，如稀釋倍數(shù)太小，加熱后溶液可能失去淡紅色（高錳酸鉀被消耗完），這時(shí)無(wú)法繼續(xù)測(cè)定。（ 2）加入 5ml（ 1 3）

29、硫酸，混勻。（ 3）加入 10.00ml 0.01mol/L 高錳酸鉀溶液，搖勻，立即放入沸水浴中加熱30min（沸水浴液面要高于反應(yīng)溶液的液面，從水樣沸騰起計(jì)時(shí)）。注：在水浴中加熱完畢后水樣應(yīng)保持淡紅色，如顏色變淺或全部褪去說(shuō)明高錳酸鉀用量不夠。此時(shí)，應(yīng)將水樣稀釋倍數(shù)加大后再測(cè)定，使加熱氧化后殘留的高錳酸鉀應(yīng)為其加入量的 1/21/3。（ 4）取下錐形瓶，趁熱加入 10.00ml 0.0100mol/L 草酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液， 搖勻。立即用 0.01mol/L高錳酸鉀溶液滴定水樣至微紅色，記錄高錳酸鉀溶液消耗量。注：（1）在酸性條件下，草酸鈉和高錳酸鉀的反應(yīng)溫度應(yīng)保持在 6080，所以滴定操作必須

30、趁熱進(jìn)行，若溶液溫度過(guò)低，需適當(dāng)加熱。（ 2）用 0.01mol/L 高錳酸鉀溶液滴定水樣時(shí)顏色突變不很明顯，因此要特別注意顏色變化。（ 5）高錳酸鉀溶液濃度標(biāo)定：將已滴完的水樣溶液加熱至約70，準(zhǔn)確加入10.00ml 草10水產(chǎn)養(yǎng)殖與水域生態(tài)實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)方法- 水化學(xué)酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液 （0.0100mol/L ），再用 0.01mol/L 高錳酸鉀溶液滴定至顯微紅色，記錄高錳酸鉀溶液的消耗量，按下式求得高錳酸鉀溶液的校正系數(shù)（K）K 10.00/V式中： V 高錳酸鉀溶液消耗量（ ml）若水樣需要稀釋時(shí)，應(yīng)取 100ml 水作為空白，空白測(cè)定步驟與水樣測(cè)定步驟相同。注：高錳酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液視水樣有機(jī)物

31、含量而定，高錳酸鉀溶液的濃度不能太高或太低。（ 6）計(jì)算水樣不經(jīng)過(guò)稀釋時(shí)：高錳酸鹽指數(shù)（ O2，mg/L ）=(10+V1)K-10 M××8×1000/100 式中： V1 滴定水樣時(shí)，高錳酸鉀溶液的消耗量 (ml) ；K校正系數(shù)；M 草酸鈉溶液濃度（ mol/L ）；8氧（ 1/2O）摩爾質(zhì)量。水 樣 經(jīng) 過(guò) 稀 釋 時(shí) ： 高 錳 酸 鹽 指 數(shù) （ O2 ， mg/L ） = (10+V1)K-100(10+V ) K-10 ×C ×M×8×1000/ V2式中： V0 空白試驗(yàn)中高錳酸鉀溶液的消耗量(ml) ；2

32、分取水樣量 (ml) ；VC 稀釋的水樣中含水的比值，例如，10.0ml 水樣，加 90ml 水稀釋至 100ml，則C= 0.90。6 生化耗氧量 稀釋接種法A. 方法原理生化需氧量（ BOD）指在規(guī)定條件下（ 20±1培養(yǎng) 5d），微生物分解水中的某些可氧化物質(zhì)，特別是有機(jī)物所進(jìn)行的生物化學(xué)過(guò)程中消耗溶解氧的量。此生物氧化全過(guò)程進(jìn)行的時(shí)間很長(zhǎng)，如在20下培養(yǎng)時(shí)完成此過(guò)程需100 多天。目前國(guó)內(nèi)外普遍規(guī)定是在20±1下培養(yǎng) 5d，分別測(cè)定樣品培養(yǎng)前后的溶解氧，二者之差即為 BOD5 （毫克氧 /升）。B. 儀器和試劑恒溫培養(yǎng)箱（ 20±1） 520L 細(xì)口玻璃瓶

33、 10002000ml 量筒玻璃攪棒：棒底端固定一個(gè)直徑比量筒底小，并帶有幾個(gè)小孔的硬橡膠板，棒長(zhǎng)度應(yīng)比11水產(chǎn)養(yǎng)殖與水域生態(tài)實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)方法- 水化學(xué)所用量筒高度長(zhǎng)200mm。 250300ml 溶氧瓶：帶有磨口玻璃塞并具有供水封用的鐘形口。虹吸管，供分取水樣和添加稀釋水用。稀釋水： 向 520L 玻璃瓶?jī)?nèi)加入一定量的稀釋水， 控制水溫 20左右， 用無(wú)油空氣壓縮機(jī)或薄膜泵將吸入的空氣先后經(jīng)活性碳吸附管及水洗滌管后， 導(dǎo)入稀釋水內(nèi)曝氣 28h（曝氣亦可導(dǎo)入適量純氧），使稀釋水中溶氧近飽和。稀釋水的 pH 值應(yīng)為 7.2，BOD 5 應(yīng)小于0.2mg/L。將瓶口蓋兩層洗滌晾干的紗布，置于 20培

34、養(yǎng)箱中放置數(shù)小時(shí)，使水中溶氧含量達(dá) 8mg/L 左右。C. 步驟（ 1）水樣預(yù)處理水樣 pH 若超出 6.57.5 時(shí)，可用稀鹽酸或氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH 近 7，但鹽酸或氫氧化鈉溶液用量不要超過(guò)水樣體積的0.5%。若水樣的酸度或堿度很高， 可改用高濃度的堿或酸液進(jìn)行中和。從水溫較低的水域或富營(yíng)養(yǎng)化湖泊中采集的水樣，可能含過(guò)飽和溶氧，此時(shí)應(yīng)將水樣迅速升溫至 20左右，在不滿瓶的情況下充分振搖，并時(shí)時(shí)開(kāi)塞放氣，以趕出過(guò)飽和的溶氧。從水溫較高的水域或廢水排放口取得的水樣， 應(yīng)迅速使其冷卻至 20左右并充分振搖，使與空氣中氧分壓接近平衡。（ 2）水樣不需稀釋時(shí)測(cè)定BOD：溶解氧較高、 有機(jī)物含量較少的

35、地表水， 可不經(jīng)稀釋而直接以虹吸法將約 20的混勻水樣轉(zhuǎn)入兩個(gè)溶氧瓶?jī)?nèi)，轉(zhuǎn)移過(guò)程中應(yīng)注意不產(chǎn)生氣泡。以同樣的操作使兩個(gè)溶氧瓶充滿水樣后溢出少許，加塞。瓶?jī)?nèi)不應(yīng)產(chǎn)生氣泡。其中 1 瓶隨即測(cè)定溶氧，另 2 瓶的瓶口水封后放入培養(yǎng)箱中， 在 20±1培養(yǎng) 5 天。培養(yǎng)過(guò)程中注意添加封口水。從開(kāi)始放入培養(yǎng)箱起算，經(jīng)過(guò)5 晝夜后，棄去封口水，測(cè)定溶氧瓶?jī)?nèi)的溶氧。（ 3）水樣需稀釋時(shí)測(cè)定 BOD ：稀釋倍數(shù)的確定：根據(jù)實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)提出下述計(jì)算方法，供稀釋時(shí)參考。稀釋操作：直接稀釋法：直接稀釋法是在溶解氧瓶?jī)?nèi)直接稀釋。 在已知兩個(gè)容積相同 （其差 <1ml）的溶解氧瓶?jī)?nèi)，用虹吸法加入部分稀釋水（

36、或接種稀釋水）使剛好充滿，加塞，勿留氣泡于瓶?jī)?nèi)。其余操作與上述一般稀釋法相同。12水產(chǎn)養(yǎng)殖與水域生態(tài)實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)方法- 水化學(xué)（ 4）計(jì)算不經(jīng)稀釋直接培養(yǎng)的水樣：BOD5(mg/L) =C1 -C2式中：C1 水樣在培養(yǎng)前的溶解氧濃度（mg/L ）；C2 水樣經(jīng) 5d 培養(yǎng)后，剩余溶解氧濃度（mg/L ）。經(jīng)稀釋后培養(yǎng)的水樣：BOD512121 /f2(mg/L) =( C-C )-(B -B )f式中：B1 稀釋水（或接種稀釋水）在培養(yǎng)前的溶解氧濃度（mg/L ）；B2 稀釋水（或接種稀釋水）經(jīng)培養(yǎng)后的溶解氧濃度（mg/L ）；f1 稀釋水（或接種稀釋水）在培養(yǎng)液中所占比例；f2 水樣在培養(yǎng)液

37、中所占比例。注： f1， f2 的計(jì)算：例如培養(yǎng)液的稀釋比為3%，即 3 份水樣， 97 份稀釋水，則 f1 =0.97，f2=0.03。注意事項(xiàng)：玻璃器皿應(yīng)徹底洗凈：先用洗滌劑浸泡，然后用稀鹽酸浸泡，最后依次用自來(lái)水、蒸餾水洗凈。在兩個(gè)或三個(gè)稀釋比的樣品中，凡消耗溶氧大于 2mg/L 和剩余溶氧大于 1mg/L，計(jì)算結(jié)果時(shí)，應(yīng)取平均值。若剩余溶氧小于 1mg/L，甚至為零時(shí)，應(yīng)加大稀釋比。溶氧消耗量小于 2mg/L，有兩種可能，一是稀釋倍數(shù)過(guò)大；另一種可能是微生物菌種不適應(yīng)，活性差，或含毒物質(zhì)濃度過(guò)大。這時(shí)可能出現(xiàn)在幾個(gè)稀釋比中稀釋倍數(shù)較大的消耗溶氧反而較多的現(xiàn)象。水樣稀釋倍數(shù)超過(guò) 100

38、倍時(shí)，應(yīng)預(yù)先在容量瓶中用水初步稀釋后，再取適量進(jìn)行最后稀釋培養(yǎng)。7 懸浮物 濾膜法A. 方法原理懸浮物即不可濾殘?jiān)?，指水樣中不能通過(guò)濾器的物質(zhì)。測(cè)定懸浮物的方法是將水樣用0.45 m 濾膜過(guò)濾，將截留在濾器上的殘?jiān)?03105下烘干 2h 至恒重時(shí)的含量。B. 儀器 0.45 m 孔徑的濾膜及相應(yīng)的濾器。13水產(chǎn)養(yǎng)殖與水域生態(tài)實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)方法- 水化學(xué)稱量瓶。C. 步驟（ 1）將 0.45 m 濾膜置稱量瓶中，開(kāi)蓋在 103105下烘 2h，蓋上蓋子放冷稱重，按以下操作再烘干、稱重，直至恒重（兩次稱出的重量相差不超過(guò)0.005mg）。（ 2）將水樣除去樹(shù)枝、草、葉及其它明顯的漂浮異物，搖勻。分

39、取適量水樣（使不可過(guò)濾殘?jiān)笥?2.5mg），用已恒重的濾膜過(guò)濾，用純水沖洗 3 次，如果殘?jiān)嫌杏椭?，用石油醚沖洗 23 次。（ 3）將濾有殘?jiān)臑V膜小心取下，放入原稱量瓶中，按（1）烘干、稱重，直至恒重。（ 4）計(jì)算：懸浮物（ mg/L ） =(A-B) ×106/V式中：A殘?jiān)V膜及稱量瓶總重量（g）；B濾膜及稱量瓶重（ g）；V取樣體積（ ml）。8 總氮、總磷 過(guò)硫酸鹽氧化法總氮總磷測(cè)定（操作簡(jiǎn)易版本實(shí)驗(yàn)操作按照此步驟）該法 1983 年日本公布為測(cè) TN， TP 的測(cè)定方法， Junko 等人又做了改進(jìn)。參考文獻(xiàn)： Junko Etina et al.，Water Re

40、s，.17(21),1721,1983.1） 原理：60° C2K2S2O8+2H2O 4KHSO4+02?1mol K2S2O8 與 1mol NaOH 混合，初 pH=12.57，反應(yīng)后 pH=2.12，該法較凱氏法提高效率 27 倍。2） 試劑：a20g K2S2O8+3g NaOH，1L 蒸餾水溶解。b硝酸鹽標(biāo)準(zhǔn)貯液： 0.7218g KNO3 1L 容量瓶中定容，濃度： 100 mg/L NO3 N。使用液： 10ml 貯液 100ml 容量瓶，濃度 10mg/L ，現(xiàn)用現(xiàn)配。c磷酸鹽標(biāo)準(zhǔn)貯液： 0.4394g KH2PO4 1L 容量瓶，加 1：1H2SO4 后定容。濃度

41、：100mg/L PO4P。使用液： 10ml 貯液 100ml 容量瓶，濃度： 10mg/L，現(xiàn)用現(xiàn)配。14水產(chǎn)養(yǎng)殖與水域生態(tài)實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)方法- 水化學(xué)d混合試劑： 12.5g（NH4 ）6Mo7O24?4H2O 溶于 125ml 蒸餾水。0.5gK（ SbO）C4H4O6（常 1/2 H2O 或無(wú)水） 20ml 蒸餾水將鉬酸鹽溶液溶于350ml H2SO4 中（ 4.5M ），不斷攪拌，再加入酒石酸溶液混勻，貯于玻璃瓶中，可穩(wěn)定數(shù)月。e4.5M H2SO4： 250ml 濃 H2SO4 750ml 蒸餾水中，冷卻后定容至1L。f 酸性抗壞血酸： 10g 抗壞血酸（ C6H8O6）50ml 蒸

42、餾水中，加 4.5M H2SO4 50ml，貯于冰箱中，穩(wěn)定一周，試劑無(wú)需重配。3） 測(cè)定步驟：a按下步驟依次取N，P 標(biāo)準(zhǔn)液，加入 50ml 比色管中，用蒸餾水稀釋至25ml，再加25ml 氧化劑，加蓋搖勻，放入高壓鍋中與水樣一同消化。1234567氮使用0124681液.0.0.0.0.00.0濃 度0000112（mgN/L ）.2.4.8.2.6.0磷使用0001234液.25.50.00.00.00.00濃 度0000000（mgN/L ）.05.1.2.4.6.8b吸取搖勻水樣 25ml加 25ml 氧化劑 高壓鍋中消化 （115° C 消化 30 分鐘），冷卻后取出測(cè)定

43、。c總 N：以 1cm 石英比色皿，在200-220nm（取入 =210nm）處測(cè)吸光度。d總 P：取消化后樣品 25ml，加 1ml 抗壞血酸，搖勻。 1 分鐘后，加混合試劑 1ml 搖勻， 20-40CF 顯色 30 分鐘，在 721（710nm）處測(cè)吸光度。（下述詳細(xì)步驟僅供參考）B. 儀器與化學(xué)試劑15水產(chǎn)養(yǎng)殖與水域生態(tài)實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)方法- 水化學(xué) 751 型紫外 -可見(jiàn)光分光光度計(jì) 50ml 具塞比色管高壓蒸汽滅菌器（可控溫 120， 9.814.7 N/cm2 壓力 ）或一般民用壓力鍋氧化劑：稱取 20gK2S2O8 和 3gNaOH，溶于水中并稀釋至 1000ml。氮標(biāo)準(zhǔn)溶液： 稱取

44、 0.7218g KNO3（1051104h），加水溶解后稀釋至 1000ml（貯備液），貯備液中含 100g/ml 的氮。取貯備液 10ml 稀釋至 100ml（氮標(biāo)準(zhǔn)使用溶液），使用液中含10g/ml 的氮。磷標(biāo)準(zhǔn)溶液：準(zhǔn)確稱取0.4394g 經(jīng) 105110干燥的磷酸二氫鉀，溶于水后，加入1ml（ 1+1）H2SO4溶液，再用水稀釋定容至 1000ml（磷貯備液），磷貯備液含 100g/ml 的磷。用時(shí)取此磷磷貯備液 10ml 準(zhǔn)確稀釋至 100ml（磷標(biāo)準(zhǔn)溶液），磷標(biāo)準(zhǔn)溶液中含 10g/ml 的磷。硫酸鉬酸銨氧銻鉀貯備液：量取194.6ml 濃硫酸，在連續(xù)攪拌下緩緩加到405ml 蒸餾

45、水中，冷卻。稱取鉬酸銨 (NH 4724· 2溶于300ml蒸餾水中。將上述硫酸溶液Mo O4H O)20g在 連 續(xù) 攪 拌 條 件 下 緩 緩 加 入 鉬 酸 銨 溶 液 中 ， 加 入 100ml 0.5% 的 酒 石 酸銻 鉀 K(SbO)C 4H4O6·1/2H2O 溶液，搖勻（硫酸鉬酸銨氧銻鉀貯備液） ，保存于棕色瓶中。顯色劑：量取 100ml 硫酸鉬酸銨氧銻鉀貯備液，加入 1.5g 抗壞血酸，溶解（顯色劑） 。顯色劑穩(wěn)定 4h 左右，使用前配制。C. 步驟（ 1）氮、磷標(biāo)準(zhǔn)溶液：在 7 個(gè) 50ml 具塞比色管中，分別加入磷標(biāo)準(zhǔn)溶液 （10g/ml）0、 1.

46、0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0ml 和氮標(biāo)準(zhǔn)溶液（ 10g/ml ）0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0、12.0ml，加水至標(biāo)線，搖勻，此標(biāo)準(zhǔn)系列中磷含量分別為 1、4、8、12、 16、20、24g；氮含量為1、8、16、 24、32、40、 48g。從上述每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)溶液中分別吸取20ml 加入另外準(zhǔn)備7 個(gè)50ml 具塞比色管，然后每個(gè)比色管中加入20ml 氧化劑溶液，立即加蓋、搖勻。注：消化用玻璃器皿要洗凈（不含氮、磷），新比色管應(yīng)先用氧化劑溶液清洗一次，不要用含磷洗衣粉及洗滌劑洗滌玻璃儀器。（ 2）吸取搖勻后的水樣 20ml 于 50ml 比色管中，加入 20ml

47、氧化劑溶液，立即加蓋搖勻。注：氧化劑中 K 2S2O8 和 NaOH 濃度分別為 0.074mol/L 和 0.075mol/L，這是根據(jù)氧化原理并經(jīng)過(guò)反應(yīng)動(dòng)力學(xué)計(jì)算和反復(fù)試驗(yàn)得出的最佳濃度。 如果氧化劑中 NaOH 濃度增加，磷的氧化不完全；反之，如果 NaOH 濃度減少，則氮的氧化不完全。（ 3）將上述盛有標(biāo)準(zhǔn)系列和水樣的比色管加塞，管口包一小塊紗布并用線扎緊（以免加16水產(chǎn)養(yǎng)殖與水域生態(tài)實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)方法- 水化學(xué)熱時(shí)玻璃塞沖出） ，放入高壓滅菌器中，加熱，放氣幾分鐘后關(guān)上氣閥，在120和10.78N/cm2 下氧化 30min（達(dá)到指定溫度和壓力時(shí)開(kāi)始計(jì)時(shí)） ，停止加熱，待壓力表指針降至零

48、后取出比色管，冷卻至室溫。注：（1）一般民用壓力鍋在加熱至頂壓閥出氣孔冒氣時(shí)鍋內(nèi)溫度為120（ 1.1kg/ cm2）。水樣與標(biāo)準(zhǔn)系列在 120下高壓氧化時(shí)，應(yīng)在達(dá)到預(yù)定溫度、壓力時(shí)開(kāi)始計(jì)時(shí)，以保證氧化完全。一定要待高壓滅菌器冷卻至室溫后再慢慢開(kāi)蓋取出比色管，以免溶液沖開(kāi)瓶塞濺出。（ 2）所有用水均為無(wú)氨蒸餾水。（ 3）必要時(shí)所用過(guò)硫酸鉀需精制（否則空白值高） ；精制過(guò)硫酸鉀時(shí)，往往需要溶解再結(jié)晶兩次才能達(dá)到純度要求。（ 4）每次測(cè)定水樣時(shí)要做標(biāo)準(zhǔn)曲線。（ 4）總磷測(cè)定：分別取氧化過(guò)的標(biāo)準(zhǔn)系列和水樣上清液10ml 于 50ml 的具塞比色管中，加入 1 滴二硝基酚指示劑， 用飽和碳酸鈉溶液和

49、1mol/L 硫酸調(diào)至溶液呈淺黃色， 準(zhǔn)確加入顯色劑 2.5ml，加水至 25ml 刻度后搖勻，置于 2040溫度下還原顯色 30min，在 700nm 波長(zhǎng)處用 3cm 比色皿在分光光度計(jì)上以無(wú)氨水為參比測(cè)定吸光度（用空白作對(duì)照） 。（ 5）總氮測(cè)定：由于氧化后水樣及標(biāo)準(zhǔn)系列的 pH 值均在 2 左右，所以可直接取出上清液（少數(shù)不清潔水樣氧化后有少許沉淀產(chǎn)生） ，用在波長(zhǎng) 200210nm處用 1cm 的石英比色皿進(jìn)行總氮的測(cè)定（用空白作對(duì)照） 。（ 6）分別根據(jù)氮、磷（ g）標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度繪制氮、磷標(biāo)準(zhǔn)曲線。注：本方法如用 751、721 型光度計(jì)分別測(cè)定氮、 磷，在氮含量達(dá) 3.5mg

50、/L ，磷含量達(dá) 15mg/L 時(shí)，均在儀器測(cè)定范圍內(nèi)且回收率很好，一般湖泊水很少超過(guò)此測(cè)定范圍，如氮含量超過(guò)3.5mg/L 而小于 20mg/L，磷含量超過(guò)3.5mg/L 時(shí)，可以用空白適當(dāng)稀釋氧化液后再進(jìn)行測(cè)定，先稀釋后氧化與先氧化后稀釋測(cè)定的結(jié)果一致。（ 7）計(jì)算：用水樣的吸光值代入所得的校準(zhǔn)曲線方程直接求水樣的磷營(yíng)養(yǎng)鹽濃度?；虬匆韵鹿接?jì)算：總氮（ N，mg/L ）=m1/20總磷（ P，mg/L ）=m2/20式中：m1從氮校準(zhǔn)曲線上查得的總氮量（g）；m2從磷校準(zhǔn)曲線上查得的總磷量（g）；20取樣體積（ ml）。17水產(chǎn)養(yǎng)殖與水域生態(tài)實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)方法- 水化學(xué)9 總硬度 EDTA 滴

51、定法A. 方法原理在 pH=10 條件下，用 EDTA 溶液絡(luò)合 Ca2+和 Mg 2+。以鉻黑 T 為指示劑，鉻黑 T 與 Ca2+和 Mg 2+形成紫紅色或紫色溶液。滴定中，游離Ca2+和 Mg 2+首先與 EDTA 反應(yīng)，然后與鉻黑 T 結(jié)合的 Ca2+和 Mg 2+與 EDTA 反應(yīng)，達(dá)到滴定終點(diǎn)時(shí)溶液顏色由紫色變?yōu)樘焖{(lán)色。本方法適用于測(cè)定地下水和地表水中 Ca2+和 Mg 2+總量，但不適用海水等含鹽量高的水。測(cè)定 Ca2+和 Mg 2+最低濃度為 0.05mmol/L 。本方法的重復(fù)性偏差為 ±0.04mmol/L，約相當(dāng)于 ±2 滴 EDTA 二鈉溶液。B. 儀器和化學(xué)試劑 50ml 酸式滴定管，分刻度至 0.10ml 250ml 錐形瓶氨性緩沖液：先稱取 16.9g 氯化銨，溶于 143ml 氨水，再稱取 0.78g 硫酸鎂（MgSO4·7H2O）和 1.179gEDTA 二鈉二水合物 （ C10H14N2O8Na2·2H2O）溶于 50ml 水，加入 2ml 配好的氯化銨