植物多倍體的誘發(fā)和鑒定

1、植物多倍體的誘發(fā)和鑒定一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康耐ㄟ^(guò)實(shí)驗(yàn)，進(jìn)一步了解人工誘導(dǎo)多倍體的原理，并初步掌握用秋水仙素誘發(fā)多倍體的一 般方法及細(xì)胞學(xué)鑒定。二、實(shí)驗(yàn)原理染色體是遺傳物質(zhì)的主耍載體。每一個(gè)物種都具有特定的形態(tài)特征。各個(gè)物種細(xì)胞內(nèi)染 色體的數(shù)目都是相對(duì)恒定的，這是一個(gè)重要的牛物學(xué)特征。染色體數(shù)目和結(jié)構(gòu)的改變，將會(huì) 導(dǎo)致生物性狀的改變。遺傳學(xué)中把二倍體生物配了中所具冇的染色體成為一個(gè)染色體組，通 常用n來(lái)表示。而一個(gè)染色體組屮包含的染色體數(shù)目成為染色體基數(shù)，用x表示。同一個(gè)染 色體組的各個(gè)染色體的形態(tài)、結(jié)構(gòu)和連鎖基因群都彼此不同，但它們構(gòu)成一個(gè)完整而協(xié)調(diào)的 體系。細(xì)胞屮染色體數(shù)目的變異類型有兩類：整倍體變異

2、和非整倍體變異。整倍體變異指體細(xì) 胞中染色體數(shù)冃按染色體組的基數(shù)（x）成倍數(shù)增加或減少的現(xiàn)象。具冇兩套染色體組的生 物體成為二倍體，體細(xì)胞中含有三個(gè)或三個(gè)以上染色體組的整倍體為多倍體。多倍體按其來(lái) 源可以分為：同源多倍體和界源多倍體，同源多倍體是指貝-有三個(gè)或三個(gè)以上和同染色體組 的細(xì)胞或個(gè)休；異源多倍休是體細(xì)胞中含有兩個(gè)以上不同類型染色休組的多倍體。自然界屮的多倍體主要存在于植物屮，動(dòng)物屮的多倍體很少。多倍體可以在自然條件下 產(chǎn)生，也可以人工誘導(dǎo)形成。人工誘導(dǎo)多倍體通常采用物理方法和化學(xué)方法。物理方法有高 溫、低溫、超聲波、嫁接和切斷等，化學(xué)方法是使用秋水仙素、界生長(zhǎng)素、蔡駢乙烷來(lái)誘導(dǎo) 多倍

3、體。在誘導(dǎo)多倍體的方法中，以應(yīng)用化學(xué)約劑更為冇效，其中以秋水仙素效果最好，使 川廣泛。秋水仙索阻礙有絲分裂屮細(xì)胞紡錘體的形成，這樣細(xì)胞不能分離，產(chǎn)牛染色體加倍 的核。木實(shí)驗(yàn)用適當(dāng)濃度的秋水仙索處理洋蔥或大蒜根尖，待根尖膨大后制片觀察，可誘發(fā)多 倍體。三、實(shí)驗(yàn)材料人蒜根尖四、實(shí)驗(yàn)方法與步驟（一）根尖多倍體的誘發(fā)將大蒜去掉老根，置于盛水的培養(yǎng)皿上，25°c條件f培養(yǎng)發(fā)根，待不定根長(zhǎng)出1cm時(shí) 取出洗凈，把水晾干后移到（）.1%秋水仙素溶液屮，根尖朝下，使根部浸沒(méi)在藥液屮，于1（）°c 培養(yǎng)箱小低溫培養(yǎng)，直到根尖膨大為止。（二）固定用清水洗凈根尖上的秋水仙素，剪取約lcm長(zhǎng)的膨大根尖，以卡諾固定液固定224h, 清水洗凈固定液，再移入70%酒精保存。（三）解離將根尖放入小指管中，力n 1 mol/l鹽酸，量以沒(méi)過(guò)根尖0.5cm即可，60°c恒溫水浴鍋中 進(jìn)行水解約6min<>（四）染色倒掉解離液，用清水反復(fù)沖洗根尖，用解剖針切去lnmi左右的根尖，遇于載玻片上，用解剖針撥碎成4、5塊，滴加一滴改良的石炭酸品紅染液進(jìn)行染色l-2mino（五）壓片蓋上蓋玻片，用左手的食指和中指按住蓋玻片的邊緣，用右手握住帶膠頭的玻璃棒，用 膠頭端垂胃均勻敲打材料部分，宜到呈薄霧狀。（