2017-2018學(xué)年高中生物第1章微生物技術(shù)第1課時(shí)培養(yǎng)基的配制和滅菌同步備課教學(xué)案北師

1、 第1課時(shí)培養(yǎng)基的配制和滅菌 學(xué)習(xí)導(dǎo)航1 閱讀教材 P4、P7內(nèi)容，掌握培養(yǎng)基的作用、營(yíng)養(yǎng)成分、種類及制備。 2閱讀 教材 F5、F9內(nèi)容，區(qū)分消毒和滅菌，掌握不同物品的滅菌方法。 重難點(diǎn)擊1.掌握制備培養(yǎng)基的原理。 2.區(qū)分消毒和滅菌。 一、培養(yǎng)基 B BI I 基礎(chǔ)梳理 夯實(shí)基礎(chǔ)突破要直夯實(shí)基礎(chǔ)突破要直 在實(shí)驗(yàn)室條件下進(jìn)行科學(xué)研究或在工業(yè)生產(chǎn)上大規(guī)模制造微生物產(chǎn)品都需要用到培養(yǎng)基。 1. 概念：是人工配制的適合微生物生長(zhǎng)繁殖或積累代謝產(chǎn)物的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)，用以培養(yǎng)、分離、 _ 鑒定和保存各種微生物。 2. 成分 (1) 培養(yǎng)基一般都含有水、 碳源、氮源、微量元素和無(wú)機(jī)鹽等， 有時(shí)候還需要加入特殊

2、的營(yíng)養(yǎng) 物質(zhì)。 (2) 判斷下面培養(yǎng)基的各種成分能提供的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)類別 成分 FeSQ 蔗糖 (NH)2SQ 提供的營(yíng)養(yǎng) 無(wú)機(jī)鹽 碳源 氮源 3. 分類：不同種類微生物的生長(zhǎng)繁殖對(duì)營(yíng)養(yǎng)的要求不同，通過(guò)選擇不同的培養(yǎng)基，人為控制 培養(yǎng)基的 pH、碳源、氮源、滲透壓等條件，使選擇的培養(yǎng)基利于某類或某種微生物的生長(zhǎng), 而不利于其他微生物的生存，可以達(dá)到分離、培養(yǎng)不同微生物的目的。 (1) 根據(jù)物理狀態(tài)分為液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基，主要區(qū)別是后者加入了凝固劑瓊脂。 (2) 用途 液體培養(yǎng)基：用于各種生理、代謝研究和獲得大量菌體；用于發(fā)酵工業(yè)生產(chǎn)。 固體培養(yǎng)基：應(yīng)用于微生物的分離、純化丄養(yǎng)、保存和鑒定等。另

3、外，一些由天然固體 基質(zhì)制成的培養(yǎng)基也屬于固體培養(yǎng)基。 問(wèn)題探究 理解升華重難誘析理解升華重難誘析 1. 培養(yǎng)基的成分與作用 (1) 試根據(jù)微生物的同化作用類型將微生物進(jìn)行分類。 答案 分為自養(yǎng)型微生物和異養(yǎng)型微生物。 (2) 試從碳源和氮源的角度分析不同類型的微生物所需的培養(yǎng)基成分的特點(diǎn)。 項(xiàng)目 自養(yǎng)型微生物 異養(yǎng)型微生物 2 碳源 CO、NaHCC等無(wú)機(jī)物 糖類等有機(jī)物 氮源 NH、硝酸鹽等無(wú)機(jī)物 尿素、蛋白質(zhì)等有機(jī)物 2. 牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基 (1) 牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中提供碳源和氮源的物質(zhì)各是什么？ 答案牛肉膏和蛋白胨都可以為微生物提供碳源和氮源。 (2) 牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中主要提供

4、碳源和主要提供氮源的物質(zhì)各是什么? 答案 主要提供碳源的是牛肉膏，主要提供氮源的是蛋白胨。 1. 下列關(guān)于培養(yǎng)基的說(shuō)法正確的是 ( ) A. 培養(yǎng)基是為微生物的生長(zhǎng)繁殖提供營(yíng)養(yǎng)的基質(zhì) B. 培養(yǎng)基只有兩類：液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基 C. 除水以外的無(wú)機(jī)物只能提供無(wú)機(jī)鹽 D. 無(wú)機(jī)氮源不可能提供能量 答案 A 解析 根據(jù)培養(yǎng)基的物理性質(zhì)，可分為液體培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基，在液體培 養(yǎng)基中加入不同量的凝固劑如瓊脂可形成半固體或固體培養(yǎng)基；除水以外的無(wú)機(jī)物如 NH4HCG),既可以是碳源，也可以是氮源，不僅僅提供無(wú)機(jī)鹽；無(wú)機(jī)氮源有時(shí)也能提供能量， 如 NH3可以為硝化細(xì)菌提供能量。 方法鏈接

5、】培養(yǎng)基的種類 分類標(biāo)準(zhǔn) 培養(yǎng)基種類 培養(yǎng)基特點(diǎn) 作用 物理性質(zhì) 固體培養(yǎng)基 外觀固態(tài) 微生物的分離、計(jì)數(shù)等 半固體培養(yǎng)基 容器放倒不致流出，劇 烈振動(dòng)則破散 觀察微生物的運(yùn)動(dòng)、鑒定 菌種等 液體培養(yǎng)基 呈液態(tài) 常用于工業(yè)生產(chǎn) 功能 選擇培養(yǎng)基 允許特定種類的微生 物生長(zhǎng)，同時(shí)抑制或阻 止其他微生物生長(zhǎng) 選擇、分離 鑒別培養(yǎng)基 根據(jù)微生物的代謝特 點(diǎn)，在培養(yǎng)基中加入某 種指示劑或化學(xué)藥品 鑒定 成分 天然培養(yǎng)基 化學(xué)成分還不清楚 工業(yè)上大規(guī)模的微生物 來(lái)源 發(fā)酵生產(chǎn) 拓展應(yīng)用 剖析題型提煉方法剖析題型提煉方法 3 合成培養(yǎng)基 化學(xué)成分完全了解 在實(shí)驗(yàn)室用來(lái)對(duì)微生物 分析 2. 下列培養(yǎng)基配方中

6、能作為選擇培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基的依次是 ( ) 原料 蛋白胨/g 10 10 10 10 乳糖/g 5 5 5 5 蔗糖/g 5 5 5 5 KHPQ/g 2 2 2 2 伊紅/g 0.4 美藍(lán)/g 0.065 瓊脂/g 10 20 NaCI/g 20 蒸餾水/mL 1 000 1 000 1 000 1 000 A. B. C. D. 答案 D 解析 在培養(yǎng)基中加入伊紅和美藍(lán)，可以用來(lái)鑒別是否存在大腸桿菌，有伊紅和美藍(lán)的培養(yǎng) 基為鑒別培養(yǎng)基。高濃度的食鹽可以抑制多種細(xì)菌的生長(zhǎng)， 但不影響金黃色葡萄球菌的生長(zhǎng), 從而可以將金黃色葡萄球菌分離出來(lái)，有高濃度食鹽的培養(yǎng)基為選擇培養(yǎng)基。 一題多變】 (

7、1) 表格中的蛋白胨主要為微生物提供何種營(yíng)養(yǎng)成分？ 答案主要為微生物提供碳源、氮源和維生素。 (2) 乳糖和蔗糖在培養(yǎng)基中的作用是什么？ 答案可以為微生物提供碳源和能源。 (3) 如果用培養(yǎng)基培養(yǎng)某種自養(yǎng)微生物，則該配方中的哪種物質(zhì)可以去除？ 答案乳糖和蔗糖。 【題后總結(jié)】有關(guān)培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的四點(diǎn)提醒 (1) 培養(yǎng)不同的微生物所需要的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)可能不同 自養(yǎng)型微生物的培養(yǎng)基主要以無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng)為主。 異養(yǎng)型微生物的培養(yǎng)基主要以有機(jī)營(yíng)養(yǎng)為主。 (2) 對(duì)異養(yǎng)微生物來(lái)說(shuō)，含 C H、O N 的化合物既是碳源，又是氮源、能源。4 （3） 微生物需要補(bǔ)充生長(zhǎng)因子，是由于缺乏合成這些物質(zhì)所需要的酶或合成能力有限

8、。 （4） 微生物需要量最大的是碳源。能合成含碳有機(jī)物的是自養(yǎng)型，反之則為異養(yǎng)型。 二、滅菌 H H 基礎(chǔ)梳理 夯實(shí)基礎(chǔ)突破要點(diǎn)夯實(shí)基礎(chǔ)突破要點(diǎn) 由于配制培養(yǎng)基的各類營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和容器等含有多種不同的微生物。配制好的培養(yǎng)基必須立即 滅菌，及時(shí)殺滅培養(yǎng)基中的微生物，同時(shí)防止微生物大量繁殖造成的培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)成分的改變。 常用的培養(yǎng)基滅菌方法是高壓蒸汽滅菌，其原理是高壓蒸汽屬于濕熱蒸汽，穿透力大，蒸汽 由氣態(tài)變?yōu)橐簯B(tài)時(shí)能放出大量的熱，可以迅速提高溫度；滅菌時(shí)還需要一定的壓力來(lái)達(dá)到高 溫的要求。 i“無(wú)菌操作”與人們的生活休戚相關(guān)，無(wú)時(shí)無(wú)處不在。在日常生活、生產(chǎn)實(shí)踐、自身健康 防護(hù)中，有哪些“無(wú)菌操作”的例

9、子？ 答案 日常生活、生產(chǎn)實(shí)踐、自身健康防護(hù)中“無(wú)菌操作”的例子分別有： （1）被褥、鞋襪要 常曬；肉制品儲(chǔ)存時(shí)用鹽腌等。（2）家畜閹割后，要在其傷口處涂抹一些酒精或白酒； 初冬楊 樹(shù)樹(shù)干涂刷生石灰水等。（3）打針時(shí)，注射部位要用酒精棉球擦洗， 一般要在其傷口處涂抹一 些碘酒。 2. 消毒和滅菌的原理是什么？消毒和滅菌都能殺死所有的微生物嗎？是否適用于所有的生物 和物品？ 答案（1）都是使微生物的蛋白質(zhì)變性，借此殺死微生物。 （2）滅菌可殺死處理材料中的全部 微生物（包括芽孢和孢子），而消毒僅能殺死物體表面或內(nèi)部的部分微生物 （一般不包括芽孢和 孢子）。（3）不是，無(wú)菌技術(shù)既要考慮效果，又要考

10、慮操作對(duì)象的承受能力。例如，活體生物 材料、操作者的雙手等只能消毒，而不能滅菌。 3. 無(wú)菌技術(shù)除了用來(lái)防止實(shí)驗(yàn)室的培養(yǎng)物被其他外來(lái)微生物污染外，還有什么目的？ 答案還能有效避免污染環(huán)境以及操作者自身被微生物感染。 4. 無(wú)論是接種微生物還是制備培養(yǎng)基中的倒平板， 都要在酒精燈火焰附近進(jìn)行， 請(qǐng)簡(jiǎn)述理由。 答案在酒精燈火焰附近進(jìn)行接種或倒平板，目的是造成一個(gè)無(wú)菌環(huán)境，避免操作過(guò)程中受 到雜菌的污染。 歸納總結(jié)消毒和滅菌的比較 1 消毒是指使用較為溫和的物理或化學(xué)方法僅殺死物體表面或內(nèi)部的部分對(duì)人體有害的微 生物不包括芽孢和孢子。常用的方法有紫外線消毒法、巴氏消毒法、化學(xué)藥物消毒法。 2 滅菌是

11、指使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽孢和孢子。常用的方法 有火焰滅菌、干熱滅菌、間歇滅菌法、蒸汽持續(xù)滅菌法、高壓蒸汽滅菌法。問(wèn)題探究 理解升華更難透析理解升華更難透析 5 剖析題型提煉方法剖析題型提煉方法 3. 高溫滅菌的原理是( ) A. 每種微生物生長(zhǎng)的最適溫度是一定的 B. 微生物對(duì)于高溫環(huán)境不適應(yīng) C. 高溫破壞了微生物細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)、核酸，影響其生命活動(dòng) D. 高溫降低了環(huán)境中氧的濃度 答案 C 解析 高溫的致死作用主要是使微生物的蛋白質(zhì)和核酸等重要生物大分子物質(zhì)發(fā)生不可逆轉(zhuǎn) 的變性。 4. 培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿、接種環(huán)、實(shí)驗(yàn)操作者的雙手、空氣、牛奶所采用的滅菌或消毒方法依

12、次 是() 化學(xué)消毒 灼燒滅菌干熱滅菌 紫外線消毒 高壓蒸汽滅菌 巴氏消毒法 A. B. C. D. 答案 A 解析 培養(yǎng)基用高壓蒸汽滅菌；培養(yǎng)皿能耐高溫，常用干熱滅菌；接種環(huán)可用灼燒滅菌達(dá)到 迅速?gòu)氐椎臏缇Ч?；?shí)驗(yàn)操作者的雙手可用化學(xué)藥劑進(jìn)行消毒，如用酒精擦拭雙手；對(duì)空 氣可用紫外線消毒；為了不破壞牛奶的營(yíng)養(yǎng)成分，可采用巴氏消毒法對(duì)其進(jìn)行消毒。 一題多變】 (1) 接種環(huán)灼燒滅菌后為什么不能立即接觸菌液？ 答案因?yàn)閯倓傋茻蟮慕臃N環(huán)溫度較高，馬上接觸菌液會(huì)將菌種殺死。 (2) 選擇無(wú)菌操作方法的依據(jù)除了無(wú)菌操作的目的外還有什么？ 答案還要依據(jù)無(wú)菌操作的對(duì)象。 【特別提醒丨(1)酒精消毒液中

13、酒精濃度對(duì)效果的影響： 70%勺酒精殺菌效果最好。 原因是濃度 過(guò)高，菌體表面蛋白質(zhì)變性過(guò)快而凝固成一層保護(hù)膜，酒精不能滲入其中；濃度過(guò)低，殺菌 能力減弱。 (2)無(wú)菌技術(shù)措施的選擇原則 考慮效果：滅菌的效果比消毒要好。 考慮操作對(duì)象的承受能力：活體生物材料、操作者的手等只能采用消毒的方法，而不能采 用滅菌的方法。 三、培養(yǎng)基配制的實(shí)驗(yàn)操作 不同種類微生物需要的培養(yǎng)基不同， 但各種培養(yǎng)基配制的步驟是基本相同的， 配制完成后還 要嚴(yán)格滅菌。 拓展應(yīng)用 H H 基礎(chǔ)梳理 夯實(shí)基礎(chǔ)姿破要點(diǎn)夯實(shí)基礎(chǔ)姿破要點(diǎn) 6 1. 實(shí)驗(yàn)原理 不同種類微生物生長(zhǎng)繁殖對(duì)營(yíng)養(yǎng)的要求不同，要根據(jù)微生物的需求來(lái)配制合適的培養(yǎng)

14、基，并 控制好培養(yǎng)基的 pH、碳源、氮源、滲透壓等條件。 2. 實(shí)驗(yàn)步驟一一以牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的配制為例 (1) 配制 計(jì)算 稱量：3 g 牛肉膏、10 g 蛋白胨、5 gNaCI、20 g 瓊脂 溶化 調(diào)節(jié) pH (2) 分裝、加塞和包扎 分裝：趁熱分裝到潔凈試管內(nèi)或錐形瓶中。 加棉塞：用棉花不用脫脂棉，脫脂棉吸水。 包扎：外包牛皮紙，且掛標(biāo)簽。 (3) 高壓蒸汽滅菌 注入開(kāi)水：與底架平齊 放待滅菌物品：豎放于滅菌桶中，不能太滿 加蓋密封：排氣軟管插入排氣槽，同時(shí)旋緊相對(duì)的兩個(gè)螺栓 排冷空氣：打開(kāi)排氣閥，排除鍋內(nèi)冷空氣 高壓滅菌：關(guān)上排氣閥，壓力升至 100 kPa，溫度為 121 C,維

15、持 1530 min 取出滅菌物品：斷電后，壓力降至 0 時(shí)，打開(kāi)排氣閥，旋松螺栓，取出滅菌物品 (4) 擺斜面或倒平板 取出培養(yǎng)基，待培養(yǎng)基冷卻至 50 C60 C,制成斜面(圖 1)或平板(圖 2)后備用。7 1. 培養(yǎng)基滅菌后，需要冷卻至 50 C60 C 左右時(shí)，才能倒平板的原因是什么？你用什么辦 法來(lái)估計(jì)培養(yǎng)基的溫度？ 答案 瓊脂是一種多糖，在 98 C 以上熔化，在 44 C 以下凝固，倒平板時(shí)高于 50 C60 C 則會(huì)燙手，低于 50 C60 C 時(shí)若不及時(shí)操作，瓊脂會(huì)凝固?？梢杂檬钟|摸盛有培養(yǎng)基的錐 形瓶，感覺(jué)錐形瓶的溫度下降到剛剛不燙手時(shí)，就可以進(jìn)行倒平板了。 2. 分析下

16、圖，回答 、(2)問(wèn)題： (1) 為什么需要使錐形瓶的瓶口通過(guò)火焰？ 答案 通過(guò)灼燒滅菌，防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基。 (2) 從防止雜菌污染的角度思考，平板冷凝后將平板倒置的原因是什么？ 答案平板冷凝后，皿蓋上會(huì)凝結(jié)水珠，凝固后的培養(yǎng)基表面的濕度也比較高， 將平板倒置, 既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā)，又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基造成污染。 3. 怎樣判斷制備的培養(yǎng)基是否合格、成功，是否受到污染？ 答案 未接種的培養(yǎng)基在恒溫箱中保溫一段時(shí)間后， 如果無(wú)菌落生長(zhǎng)，說(shuō)明培養(yǎng)基制備成功、 合格，未受到污染。 歸納總結(jié) 1 培養(yǎng)基的配制原則 目的要明確根據(jù)微生物的種類、培養(yǎng)目的等 ，如培養(yǎng)基

17、可由簡(jiǎn)單的無(wú)機(jī)物組成；生產(chǎn)用 問(wèn)題探究 理解升華重難透析理解升華重難透析 圖I擺斜面示惡圖 九輕血法 B-持皿詵 圖2倒平板示總圖 圖一 圖二 8 培養(yǎng)基內(nèi)可加入化學(xué)成分不明確的天然物質(zhì)，而分類鑒定用培養(yǎng)基內(nèi)必須加入已知化學(xué)成分 的物質(zhì)。 營(yíng)養(yǎng)要協(xié)調(diào)，注意各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的濃度和比例：營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)濃度過(guò)低不能滿足微生物的營(yíng)養(yǎng)9 需要，過(guò)高對(duì)微生物的生長(zhǎng)有抑制作用，另外，培養(yǎng)基中各營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)濃度比直接影響微生物 的生長(zhǎng)繁殖和代謝產(chǎn)物的形成和積累， 其中碳氮比 C/N 的影響較大。例如，在谷氨酸生產(chǎn)中， 當(dāng)培養(yǎng)基中的碳源與氮源的比為 4：1 時(shí)，菌體大量繁殖，而產(chǎn)生的谷氨酸少；當(dāng)碳源與氮源 的比為 3：1

18、時(shí)，菌體繁殖受到抑制，但谷氨酸合成量大增。 pH 要適宜，各種微生物適宜生長(zhǎng)的 pH 范圍不同，細(xì)菌 7.27.6、放線菌 7.58.5、真菌 5.0 6.0。 2 微生物的無(wú)菌操作技術(shù) 在微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)中，無(wú)菌技術(shù)的核心是防止雜菌污染，保證培養(yǎng)的純度。 無(wú)菌技術(shù)的具體內(nèi)容 a. 對(duì)實(shí)驗(yàn)操作的空間、操作者的衣著和手進(jìn)行清潔和消毒。 b. 將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等進(jìn)行滅菌。 c. 為避免周圍環(huán)境中微生物的污染，實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在酒精燈火焰附近進(jìn)行。 d. 實(shí)驗(yàn)操作時(shí)應(yīng)避免已滅菌處理的材料用具與周圍的物品相接觸。 5. 某學(xué)校開(kāi)展大腸桿菌培養(yǎng)活動(dòng)，首先對(duì)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行清掃和消毒處理，然

19、后準(zhǔn)備各種原料和 用具。請(qǐng)回答下列問(wèn)題： (1) 對(duì)買回來(lái)的菌種進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)， 首先制備試管培養(yǎng)基， 寫出制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基 所需的原料： _ 。 (2) 微生物在生長(zhǎng)過(guò)程中對(duì)各種成分需求量不同，配制培養(yǎng)基時(shí)各成分要有合適的 _ 在燒杯中加入瓊脂后要不停 _ ，防止 _ 。 (3) 將配制好的培養(yǎng)基分裝到試管中， 加棉塞后若干支試管一捆，包上牛皮紙并用皮筋勒緊放 入 _ 中滅菌。滅菌完畢后拔掉電源， 待壓力表的壓力自然降到 0 時(shí)，將試管取出。 如果棉塞上沾有培養(yǎng)基，此試管應(yīng) _ 。 答案牛肉膏、蛋白胨、蒸餾水、 NaCl、瓊脂 比例攪拌瓊脂糊底引起燒杯破裂 (3)高壓蒸汽滅菌鍋 廢棄

20、 6. 制備各種牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基時(shí)，關(guān)于倒平板的具體描述正確的是 ( ) 待培養(yǎng)基冷卻至 40 C 左右時(shí)，在酒精燈火焰附近倒平板 將滅過(guò)菌的培養(yǎng)皿放在桌面 上，左手拔出棉塞 右手拿錐形瓶，使瓶口迅速通過(guò)火焰 用左手的拇指和食指完全打 拓展應(yīng)用 剖析題型提煉方法剖析題型提煉方法 10 開(kāi)皿蓋右手將錐形瓶中培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿，左手立即蓋上培養(yǎng)皿的皿蓋 等待平板冷 卻 510 s，將平板倒過(guò)來(lái)放置，使皿蓋在下，皿底在上 A. B. C. D.11 問(wèn)題導(dǎo)析】（1）培養(yǎng)基滅菌后，需冷卻至 50 C60 C 左右時(shí)才能倒平板,原因是瓊脂在 44 C 以下凝固。 （2）倒平板的過(guò)程要在酒精燈火焰附近

21、進(jìn)行。 答案 C 解析 瓊脂是一種多糖，在 98 C 以上可熔化，在 44 C 以下凝固，倒平板時(shí)高于 50 C60 C 則會(huì)燙手，低于 50 C60 C 時(shí)若不能及時(shí)操作，瓊脂會(huì)凝固。無(wú)菌操作應(yīng)貫穿于操作的全 過(guò)程，皿蓋全打開(kāi)則空氣中的微生物會(huì)進(jìn)入培養(yǎng)基。等待平板冷卻凝固 （大約需 510 min） 后，將平板倒過(guò)來(lái)放置，使皿蓋在下，皿底在上。 【一題多變丨 倒平板的過(guò)程需要進(jìn)行無(wú)菌操作， 在培養(yǎng)基的制備過(guò)程中，還有哪些環(huán)節(jié)需要進(jìn)行無(wú)菌操作？ 答案 要對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行高壓蒸汽滅菌， 對(duì)培養(yǎng)皿進(jìn)行干熱滅菌， 酒精燈火焰旁屬于灼燒滅菌。 （固休培養(yǎng)基 培養(yǎng)草 1 1 液休培養(yǎng)基 丨成分毯源邁源、水、

22、無(wú)機(jī)鹽等 和滅菌 培養(yǎng)草的配計(jì)算一稱 iftift- -溶化一週旦一分裝 ，制和滅菌加棉塞一包扎滅菌倒平板 1. 不同的微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的需求各不相同。下列對(duì)一種以 CQ 為唯一碳源的自養(yǎng)型微生物 營(yíng)養(yǎng)的描述中，不正確的是 （ ） A. 氮源物質(zhì)為該微生物提供必要的氮元素 B. 碳源物質(zhì)也是該微生物的能源物質(zhì) C. 無(wú)機(jī)鹽是該微生物不可缺少的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì) D. 水是該微生物的營(yíng)養(yǎng)要素之一 答案 B 解析 該微生物以 CQ 為唯一碳源，但 CQ 不能為微生物提供能量，不屬于能源物質(zhì)。 2. 自養(yǎng)微生物與異養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基的主要差別是 （ ） A. 碳源 B.氮源 C.無(wú)機(jī)鹽 D生長(zhǎng)因子 培養(yǎng)甚 的配

23、制 Y 12 答案 A 解析 自養(yǎng)微生物能夠利用二氧化碳和水合成有機(jī)物，不利用現(xiàn)成的含碳有機(jī)物；而異養(yǎng)微 生物只能利用現(xiàn)成的含碳有機(jī)物，所以它們的主要區(qū)別是碳源不同。 3. 下列關(guān)于滅菌和消毒的理解，不正確的是 （ ） A. 滅菌是指殺滅環(huán)境中的一切微生物的細(xì)胞、芽孢和孢子 B. 消毒和滅菌實(shí)質(zhì)是相同的 C. 接種環(huán)用灼燒法滅菌 D. 常用的滅菌方法有加熱法、過(guò)濾法、紫外線法、化學(xué)藥品法 答案 B 解析 滅菌與消毒是兩個(gè)概念。滅菌的原理是使蛋白質(zhì)凝固變性，含水分較多者，其凝固所 需溫度較低。滅菌時(shí)要根據(jù)不同的材料選用不同的滅菌方法，如接種環(huán)用火焰灼燒法，培養(yǎng) 基用高壓蒸汽滅菌法，還有加熱法、過(guò)

24、濾法、紫外線法、化學(xué)藥品法等。消毒是指使用較為 溫和的物理或化學(xué)方法殺死物體表面或內(nèi)部的部分微生物 （不包括芽孢和孢子）。 4. 不同的微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的需求各不相同，但一般都需要水、碳源、氮源和無(wú)機(jī)鹽。下列 有關(guān)微生物所需營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的描述，正確的是 （ ） A. 氮源物質(zhì)只能為該微生物提供必要的氮元素 B. 有些碳源也可以給微生物的生長(zhǎng)提供能源 C. 無(wú)機(jī)鹽是微生物不可缺少的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，所以無(wú)機(jī)鹽越多越好 D. 固體培養(yǎng)基中不含水分 答案 B 解析含氮的有機(jī)物既可給微生物提供氮元素，也可給微生物提供能源。含碳的有機(jī)物既可 給微生物提供碳元素，也可給微生物提供能源。微生物生長(zhǎng)需要無(wú)機(jī)鹽，但不是越多

25、越好， 過(guò)多會(huì)導(dǎo)致培養(yǎng)基滲透壓過(guò)高，使微生物因失水過(guò)多而不能生存。 固體培養(yǎng)基中也含有水分， 因?yàn)楹心虅┉傊?，所以呈固態(tài)。 5. 制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的步驟是 （ ） A. 計(jì)算、稱量、倒平板、溶化、滅菌 B. 計(jì)算、稱量、溶化、倒平板、滅菌 C. 計(jì)算、稱量、溶化、滅菌、倒平板 D. 計(jì)算、稱量、滅菌、溶化、倒平板 答案 C 解析 制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基，應(yīng)先根據(jù)需要計(jì)算各成分用量，然后稱量、溶化、滅 菌、倒平板。 13 6. 下列實(shí)驗(yàn)材料和用具的無(wú)菌操作中，適合使用消毒方法的是 _ ，適合使用滅菌方法 的是 _ 。 培養(yǎng)基外植體操作者雙手 錐形瓶接種環(huán)牛奶工作臺(tái)培養(yǎng)皿 答案

26、課時(shí)作業(yè) 基礎(chǔ)過(guò)關(guān) 1. 關(guān)于微生物的營(yíng)養(yǎng)，下列說(shuō)法正確的是 （ ） A同一種物質(zhì)不可能既作碳源又作氮源 B. 凡是碳源都能提供能量 C. 除水以外的無(wú)機(jī)物僅提供無(wú)機(jī)鹽 D. 無(wú)機(jī)氮源也可能提供能量 答案 D 解析 對(duì)一些微生物來(lái)說(shuō)，含 C、H、O N 的化合物既是碳源，又是氮源； CO 是光能自養(yǎng)細(xì) 菌的碳源，但不能提供能量； CQ 和 N2是無(wú)機(jī)物，也是微生物的碳源和氮源；硝化細(xì)菌所利 用的氮源是無(wú)機(jī)氮源氨，同時(shí)氨也為硝化細(xì)菌提供用以化能合成作用的能源。 2. 能作為自養(yǎng)微生物的碳源的是 （ ） A. 糖類 B.石油 C. 二氧化碳 D.花生粉餅 答案 C 3. 下表是微生物培養(yǎng)基的成分。

27、下列有關(guān)說(shuō)法錯(cuò)誤的是 （ ） 編號(hào) 成分 (NH4)2SQ4 KHPQ FeSQ CaCl2 HbO 含量/g 0.4 4.0 0.5 0.5 100 mL A. 此培養(yǎng)基可用來(lái)培養(yǎng)自養(yǎng)型微生物 B. 此表中的營(yíng)養(yǎng)成分共有三類，即水、無(wú)機(jī)鹽、氮源 C. 若除去，此培養(yǎng)基可培養(yǎng)圓褐固氮菌 D. 培養(yǎng)基中若加入氨基酸，則它可充當(dāng)碳源、氮源和生長(zhǎng)因子 答案 C 解析 由題知，該培養(yǎng)基成分中含有水、無(wú)機(jī)鹽、氮源，但不含含碳有機(jī)物，可用來(lái)培養(yǎng)自 養(yǎng)型微生物，選項(xiàng) A、B 均對(duì)；圓褐固氮菌同化類型為異養(yǎng)型， 培養(yǎng)基中必須存在含碳有機(jī)物, 所以該培養(yǎng)基不能用來(lái)培養(yǎng)圓褐固氮菌， C 錯(cuò)。 4. 下列選項(xiàng)中不含

28、有微生物的是 （ ） A. 洗干凈的臉上 B.洗完澡后的皮膚 14 C.刷完牙后的口腔 D.灼燒之后的接種環(huán) 答案 D 解析 用清水洗臉、洗澡、刷牙只是起清潔作用，達(dá)不到滅菌效果，只有灼燒過(guò)的接種環(huán)才 是真正無(wú)菌的。 5將配制好的培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌，應(yīng)用的是 （ ） A. 灼燒滅菌 B.高壓蒸汽滅菌 C.干熱滅菌 D.煮沸滅菌 答案 B 6. 細(xì)菌培養(yǎng)過(guò)程中分別采用了高壓蒸汽滅菌、酒精擦拭、火焰灼燒等幾種不同的處理方法， 這些方法依次用于殺死哪些部位的雜菌 （ ） A. 接種環(huán)、手、培養(yǎng)基 B. 高壓鍋、手、接種環(huán) C. 培養(yǎng)基、手、接種環(huán) D. 接種環(huán)、手、高壓鍋 答案 C 解析 高壓蒸汽滅菌鍋

29、是滅菌的一個(gè)設(shè)備，通常用于培養(yǎng)基的滅菌；用酒精擦拭雙手是消毒 的一種方法；火焰灼燒，可以迅速?gòu)氐椎販缇?，適用于微生物的接種工具，如接種環(huán)。 7. 下列關(guān)于倒平板敘述，錯(cuò)誤的是 （ ） A. 右手拿裝有培養(yǎng)基的錐形瓶，左手拔出棉塞，為避免污染需放在酒精燈火焰附近 B. 倒平板整個(gè)過(guò)程應(yīng)在火焰旁進(jìn)行 C. 完全打開(kāi)培養(yǎng)皿皿蓋，右手將錐形瓶中的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿，左手立即蓋上培養(yǎng)皿的皿蓋 D. 為避免水滴滴入培養(yǎng)基，平板應(yīng)倒過(guò)來(lái)放置 答案 C 解析 C 項(xiàng)應(yīng)是用左手的拇指和食指將培養(yǎng)皿打開(kāi)一條稍大于瓶口的縫隙， 而不是完全打開(kāi), 以防雜菌污染。 能力提升 8. 在微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)中，下列各項(xiàng)操作不需

30、要在無(wú)菌條件下進(jìn)行的是 （ ） A.配制培養(yǎng)基 B.倒平板 C.接種 D.培養(yǎng) 答案 A 解析配制培養(yǎng)基時(shí)不需要無(wú)菌操作，因?yàn)榕渲坪玫呐囵B(yǎng)基需要進(jìn)行高壓蒸汽滅菌。 9. 甲、乙、丙為二種微生物，下表中 I、n、川是用來(lái)培養(yǎng)微生物的二種培養(yǎng)基。甲、乙、 丙都能在川中正常生長(zhǎng)繁殖；甲能在 I中正常生長(zhǎng)繁殖，而乙和丙都不能；乙能在 n 中正常 生長(zhǎng)繁殖，甲、丙都不能。下列說(shuō)法正確的是 （ ） 15 培 養(yǎng) 基 粉狀硫 10 g K2HPO 4 g FeSOO .5 g 蔗糖 10 g (NH4)2SQ 0.4 g H2Q 100 mL MgSQ 9.25 g CaCl2 0.5 g I + + +

31、+ + + + n + + + + + + + 出 + + + + + + + + 注：“+”表示培養(yǎng)基中加入了這種物質(zhì)，“”表示培養(yǎng)基中沒(méi)有加入這種物質(zhì)。 A. 甲、乙、丙都是異養(yǎng)微生物 B. 甲、乙都是自養(yǎng)微生物，丙是異養(yǎng)微生物 C. 甲是異養(yǎng)微生物，乙是固氮微生物，丙是自養(yǎng)微生物 D. 甲是固氮微生物，乙是自養(yǎng)微生物，丙是異養(yǎng)微生物 答案 D 解析 I是無(wú)氮培養(yǎng)基，只有能固氮的微生物才能在其上繁殖； n 是不含有機(jī)碳源的培養(yǎng)基, 只有自養(yǎng)微生物才能在其上繁殖。 10. 牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中加入瓊脂這一理想的凝固劑，下列關(guān)于瓊脂的說(shuō)法不正確的是 ( ) A. 不被所培養(yǎng)的微生物分解利用，對(duì)

32、所培養(yǎng)的微生物無(wú)毒害作用 B. 在微生物生長(zhǎng)溫度范圍內(nèi)保持固體狀態(tài) C. 瓊脂凝固點(diǎn)低，利于微生物的生長(zhǎng) D. 瓊脂在滅菌過(guò)程中不會(huì)被破壞，透明度好，凝固力強(qiáng) 答案 C 解析 瓊脂作為一種理想的凝固劑，是由其性質(zhì)決定的，瓊脂不會(huì)被微生物利用且對(duì)微生物 無(wú)毒害作用，在滅菌過(guò)程中不會(huì)被破壞，透明度好，凝固力強(qiáng)。瓊脂在 98 C 以上可熔化, 在 45 C 以下凝固，所以在微生物生長(zhǎng)溫度范圍內(nèi)保持固體狀態(tài)。 11. 下列關(guān)于無(wú)菌操作的敘述，錯(cuò)誤的是 ( ) A. 對(duì)實(shí)驗(yàn)操作的空間、操作者的衣著和手進(jìn)行滅菌 B. 將用于微生物培養(yǎng)的培養(yǎng)器皿、接種用具和培養(yǎng)基等進(jìn)行滅菌 C. 為避免周圍環(huán)境中微生物的污

33、染，實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在酒精燈火焰附近進(jìn)行 D. 實(shí)驗(yàn)操作時(shí)應(yīng)避免已經(jīng)滅菌處理的材料用具與周圍物品相接觸 答案 A 解析 對(duì)實(shí)驗(yàn)操作的空間、操作者的衣著和手進(jìn)行清潔和消毒而不是滅菌。 12. 請(qǐng)你判斷以下材料或用具是否需要消毒或滅菌。如果需要，請(qǐng)選擇合適的方法： 判斷： 16 (1) 培養(yǎng)細(xì)菌用的培養(yǎng)基； (2) 玻璃棒、試管、燒瓶和吸管； (3) 實(shí)驗(yàn)操作者的雙手。 ; 17 _ ; _ 。 答案(1)需要滅菌；用高壓蒸汽滅菌鍋滅菌 (2)需要滅菌；干熱滅菌箱滅菌 (3)需要消毒; 用 75%酉精擦拭雙手 13. 為了檢測(cè)飲用水中是否含有某種細(xì)菌，配制的培養(yǎng)基的配方如下，請(qǐng)分析回答下列問(wèn)題： 蛋白胨

34、 乳糖 蔗糖 K2HPO 伊紅 美藍(lán) 蒸餾水 10 g 5 g 5 g 2 g 0.4 g 0.065 g 1 000 mL 將培養(yǎng)基 pH 調(diào)至 7.2 (1) 該培養(yǎng)基所含碳源有 _ ，其功能是 _ (2) 該培養(yǎng)基所含氮源有 _ ，其功能是 _ (3) 該培養(yǎng)基除含碳源、氮源外，還有微生物需要的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)是 _ 。 (4) 該細(xì)菌在同化作用上的代謝類型是 _ 型。 (5) 該培養(yǎng)基可用來(lái)鑒別哪種細(xì)菌 ( ) A.霉菌 B.酵母菌 C.大腸桿菌 D.乳酸菌 答案(1)乳糖、蔗糖、蛋白胨 主要用于構(gòu)成微生物的細(xì)胞物質(zhì)和一些代謝產(chǎn)物 (2)蛋白胨 主要用于合成蛋白質(zhì)、核酸以及含氮的代謝產(chǎn)物 水、無(wú)機(jī)鹽(或 K2HPG) 異養(yǎng) (5)C 解析 根據(jù)培養(yǎng)基的配方，該培養(yǎng)基培養(yǎng)異養(yǎng)微生物，含 C H O N 的蛋白胨既是碳源，又 是氮源。培養(yǎng)微生物需碳源、氮源、水、無(wú)機(jī)鹽、生長(zhǎng)因子等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基可 用來(lái)鑒定是否含有大腸桿菌。 14. 生物技術(shù)上常利用大腸桿菌制成“工程菌”。 某生物小組的同學(xué)，利用實(shí)驗(yàn)室提供的大