(完整word版)血常規(guī)(血細(xì)胞分析儀、直方圖)概況

1、第四篇實(shí)驗(yàn)診斷 血液檢查 海醫(yī)附院檢驗(yàn)科 潘婉 血常規(guī)檢查 即全血細(xì)胞分析，可以對感染、炎癥、手術(shù)后、 血液系統(tǒng)疾病.肝脾病等進(jìn)行輔助診斷.監(jiān)測 治療效果等。標(biāo)本采集與要求 -抗凝劑：EDTA-K2 -靜脈釆血方法:4小時內(nèi)測定 -毛細(xì)血管采血方法：半小時內(nèi)測定 盡可能同一體位（血紅蛋白、血細(xì)胞比容、 紅細(xì)胞計數(shù)于站位時增加）、一定時間和近 似生理?xiàng)l件下釆血 血細(xì)胞分析儀檢測指標(biāo)與臨床應(yīng)用 -手指血脈采血 III 血細(xì)胞分析儀 血細(xì)胞分析儀實(shí)質(zhì)上是指 對一定體積內(nèi)血細(xì)胞數(shù)量及異 質(zhì)性進(jìn)行分析的儀器，包括血 細(xì)胞計數(shù)與分類、血紅蛋白測 定及網(wǎng)織紅細(xì)胞計數(shù)等眾多分 析項(xiàng)目，是臨床檢驗(yàn)工作中最 常用

2、的儀器。 4040 年代末,美國的庫爾特(W.H.Coulter)(W.H.Coulter)發(fā)明了電阻抗法 粒子計數(shù)技術(shù)的設(shè)計專利。 5050 年代初,第一臺血細(xì)胞分析 R(Coulter AR(Coulter A 型)應(yīng)用于臨 床檢驗(yàn)。當(dāng)時這種儀器為一個通道，僅能進(jìn)行紅細(xì)胞、 白細(xì)胞計數(shù)，故稱為血細(xì)胞計數(shù)儀或血球計數(shù)儀。 6060 年代,在原基礎(chǔ)上增加一個比色系統(tǒng)，可同時測定白 細(xì)胞數(shù)、紅細(xì)胞數(shù)、血紅蛋白濃度、平均紅細(xì)胞體積 和血細(xì)胞比容。 7070 年代,開發(fā)了血小板計數(shù)，此時可做全血細(xì)胞計數(shù)。 7070 年代末 8080 年代中,根據(jù)白細(xì)胞大小不同而產(chǎn)生的阻抗值 或散射量的不同，已能對細(xì)

3、胞進(jìn)行分類（兩分群、三分群 或五分類），且一次可報告 13131414 個分析參數(shù)及紅細(xì)胞 計數(shù)、白細(xì)胞計數(shù)、血小板計數(shù)三個直方圖。 8080 年代末,應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)，開發(fā)了網(wǎng)織紅細(xì)胞計數(shù)儀。 9090 年代初,網(wǎng)織紅細(xì)胞檢測技術(shù)應(yīng)用到血細(xì)胞計數(shù)儀上。 9090 年代中期研制出的多功能、多參數(shù)、多分類全自動血細(xì) 胞分析儀及檢測的全自動化，把臨床血液學(xué)檢驗(yàn)提高到 了一個全新的水平。 I 血細(xì)胞分析儀分型 按自動化程度可分為主自動血細(xì)胞仝析儀程全自動血細(xì)胞仝 析儀。 半自動血細(xì)胞分析儀需在主機(jī)外匹配稀釋器，采集的血標(biāo) 本經(jīng)稀釋器預(yù)稀釋后再上機(jī)檢測。這類儀器工作效率低，吸樣 準(zhǔn)確性差，多為手工加溶血

4、素、混勻等，其加入量及放置時間、 因人為因素，隨機(jī)誤差較大，不利于質(zhì)控，并且易發(fā)生“半堵 孔或“堵孔”現(xiàn)象。90年代以來， 在發(fā)達(dá)國家已被逐步淘汰, 國內(nèi)用戶也為數(shù)不多， 趨于淘汰。全自動血細(xì)胞分析儀運(yùn)用了較先進(jìn)的計算機(jī)技術(shù)和機(jī) 械系統(tǒng)，菜單式操作程序，條碼閱讀，自動吸取樣品，血 液在機(jī)器內(nèi)部自動稀釋，效率高，檢測量準(zhǔn)確，有利于質(zhì) 控，減少了操作者實(shí)驗(yàn)室感染的幾率.且大部分采用表面 活性劑法測血紅蛋白，避免了氟化物對環(huán)境的污染，是全 面取代半自動血細(xì)胞分析儀的必然趨勢.目前還有將全自 動血細(xì)胞分析儀與自動涂片染色機(jī)、電腦及應(yīng)用軟件組合 而成的血液分析工作站，將多臺全自動血細(xì)胞分析儀、全 自動網(wǎng)

5、織紅細(xì)胞分析儀、自動涂片染色機(jī).機(jī)械連接系統(tǒng). 電腦、高性能應(yīng)用軟件組合為一體的血液分析流水線（如 HST-330模塊式全自動血液分析流水線）等. 按檢測原理 電容型:通過改變兩電極之間電容量，獲得脈沖信號進(jìn)行計數(shù)。 （2）光電型：利用細(xì)胞和稀釋液対光的吸收度不同，使光敏元件住細(xì)胞 通過時產(chǎn)生脈沖信號而計數(shù)。 激光型：細(xì)胞受到激光的照射產(chǎn)生光吸收、光散射、發(fā)射熒光，得 到光學(xué)的、電子的信號進(jìn)行計數(shù) 電阻抗型：利用血細(xì)胞的電阻大于電解質(zhì)溶液（稀釋液）的電阻，細(xì) 胞通過微孔時兩電極之間的阻抗值增大，產(chǎn)生電壓脈沖信號而進(jìn) 行血細(xì)胞計數(shù)和體積測定.國內(nèi)產(chǎn)品均為電阻抗型. （5聯(lián)合檢測型:采用多種現(xiàn)代高

6、科技技術(shù)，如利用電阻抗、激光、高 頻電磁波、流式細(xì)胞術(shù)和化學(xué)染色、特殊溶血劑等多方位聯(lián)合檢 測同一個血細(xì)胞.此類儀器功能多，特異性強(qiáng)、速度快、獲得參 數(shù)多、對環(huán)境污染小。2.電阻抗法血細(xì)胞分析儀 血細(xì)胞與等滲電解質(zhì)溶液相比為相對的不良導(dǎo)體, 其電阻值大于稀釋液的電阻值.當(dāng)血細(xì)胞通過檢測器 小孔管微孔的孔徑感受區(qū)時，檢測器內(nèi)外電極之間的 恒流源電路上電阻值瞬間增大，造成兩極之間電壓的 變化，產(chǎn)生一個電壓脈沖信號.每次檢測中產(chǎn)生的脈 沖信號數(shù)，即相當(dāng)于檢測出的細(xì)胞數(shù)。 操作時，位于小孔兩側(cè)的 電極產(chǎn)生恒定電流.根據(jù)歐姆 定律電壓變化與電阻變化成正 比，電阻值又同細(xì)胞體積成正 比，血細(xì)胞體積越大，電

7、壓越 高，在甄別器上的脈沖幅度就 越大,各種大小不同細(xì)胞產(chǎn)生 的脈沖信號分別送入儀器內(nèi)電 腦的各個通道，經(jīng)運(yùn)算得出各 種細(xì)胞參數(shù).目前，多數(shù)儀器 在給出細(xì)胞數(shù)據(jù)結(jié)果的同時還 提供細(xì)胞群體大小分布情況圖 形，稱之為細(xì)胞體積直方圖.內(nèi) 8B ! 決 10 電崛 恂丈電 外郃業(yè)極 紅細(xì)胞體積(fl) 相對細(xì)胞數(shù) 血細(xì)胞分析儀在進(jìn)行細(xì)胞分析時，將每個細(xì)胞的脈沖 根據(jù)其體積大小分配并存儲在相應(yīng)的體積通道中，每個通道 收集的數(shù)據(jù)被統(tǒng)計出相對數(shù)，表示在Y軸上，體積數(shù)據(jù)以飛 升（fl）為單位，表示在X軸上.可將白細(xì)胞體積從30 450fl分為256個通道，每個通道1.64F1,依據(jù)體積大小分 別將其放在不同的

8、通道中，得到白細(xì)胞體積分布直方圖.初 步確認(rèn)：第一群是小細(xì)胞區(qū)，主要是淋巴細(xì)胞，體積在35- 90fl之間；第二群是中間細(xì)胞群，主要是單核細(xì)胞，體積在 90 - 160fl,;第三群為大細(xì)胞區(qū)，主要是中性粒細(xì)胞，它 分葉多，顆粒多，體積可大至160fl以上. 血小板和紅細(xì)胞共用一個小孔臂。 正常人紅細(xì)胞體積和血小板 體積有明顯的界限.因此血小板計數(shù)準(zhǔn)確容易。當(dāng)血細(xì)胞懸液中含有 異常血細(xì)胞（如小紅細(xì)胞）時.劃分界限不清。為使血小板計數(shù)有較 高的準(zhǔn)確性，計算機(jī)對血小板和紅細(xì)胞分布圖進(jìn)行判斷， 將血小板計 數(shù)的上限閾值判定線放在紅細(xì)胞和血小板分布圖交叉部分的最低處計 各項(xiàng)紅細(xì)胞指數(shù)的檢測原理:根據(jù)儀

9、器檢測的RBC、 HCT和Hb的數(shù)據(jù)，經(jīng)儀器內(nèi)存程序換算出紅細(xì)胞平均體積 (MCV)、紅細(xì)胞平均血紅蛋白的含量(MCH)和紅細(xì)胞平均血 紅蛋白濃度( (MCHC) 紅細(xì)胞體積分布寬度( (RDW) )由血細(xì)胞分析儀在檢測紅 細(xì)胞數(shù)董的過程中，同時測量紅細(xì)胞體積大小的差異獲得, 是反映外周血紅細(xì)胞體積異質(zhì)性的參數(shù).RDW能直接.客 觀、 及時地反映紅細(xì)胞大小不等的程度，對貧血的診斷有 重要意義. 血紅蛋白測定原理:在稀釋的血液中加入溶 血劑后紅細(xì)胞被溶解，釋放出血紅蛋白(Hb),后 者與溶血劑中有關(guān)成分結(jié)合形成Hb衍生物，進(jìn)入 Hb測試系統(tǒng)，在特定波長(一般在530 550nm)下 比色，吸光度

10、的變化與液體中H含量成正比，儀器 便可顯示其濃度。 細(xì)胞進(jìn)行檢測，以細(xì)胞體積為橫坐標(biāo)，細(xì) 胞的相對數(shù)量為縱坐標(biāo)，表示某一種細(xì)胞 數(shù)量分布情況， 可反映細(xì)胞體積大小異質(zhì) 性。 白細(xì)胞直方 1、正常白細(xì)胞直方圖 35 50 100 200 300 400 450( (1 3.血Uh 直方2.異常白細(xì)胞直方圖 t單儀邛18比例宙 QU MM! mnii UlMJtS MRCI： MM iwts ams 11 f. n 性桝巴i砂spin將 4.M $ MM. Re L 盤5 A RJ心拓 iies/L R9 Zk2 n.o LLl AC 52a 10E9/L LYM 26 R2 3 IL H】D 92 12.2 Ml GR6M 49 RM 和上 1G A C巨大血小換千擾 紅細(xì)胞直方 不同類型貧血紅細(xì)胞直方圖 a. iTfXW* MCV： 89. 4ri. IDf： 13. SKI : (MCV: U.lflt w： 21 9K) cE型 BF：*性竇血(MCV：71.9n, Rd: 13. 31) : 檢Jft妙細(xì)H性畬血( (MCY:736I. ROY: 21.) e巨結(jié)細(xì)l!住貧血(MO： ULlfh tOV： 14.M)；匚龍性失幺性箸Jt (心 9LJn. UM：