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1、第四篇實(shí)驗(yàn)診斷 血液檢查 海醫(yī)附院檢驗(yàn)科 潘婉 血常規(guī)檢查 即全血細(xì)胞分析,可以對(duì)感染、炎癥、手術(shù)后、 血液系統(tǒng)疾病.肝脾病等進(jìn)行輔助診斷.監(jiān)測 治療效果等。標(biāo)本采集與要求 -抗凝劑:EDTA-K2 -靜脈釆血方法:4小時(shí)內(nèi)測定 -毛細(xì)血管采血方法:半小時(shí)內(nèi)測定 盡可能同一體位(血紅蛋白、血細(xì)胞比容、 紅細(xì)胞計(jì)數(shù)于站位時(shí)增加)、一定時(shí)間和近 似生理?xiàng)l件下釆血 血細(xì)胞分析儀檢測指標(biāo)與臨床應(yīng)用 -手指血脈采血 III 血細(xì)胞分析儀 血細(xì)胞分析儀實(shí)質(zhì)上是指 對(duì)一定體積內(nèi)血細(xì)胞數(shù)量及異 質(zhì)性進(jìn)行分析的儀器,包括血 細(xì)胞計(jì)數(shù)與分類、血紅蛋白測 定及網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)等眾多分 析項(xiàng)目,是臨床檢驗(yàn)工作中最 常用
2、的儀器。 4040 年代末,美國的庫爾特(W.H.Coulter)(W.H.Coulter)發(fā)明了電阻抗法 粒子計(jì)數(shù)技術(shù)的設(shè)計(jì)專利。 5050 年代初,第一臺(tái)血細(xì)胞分析 R(Coulter AR(Coulter A 型)應(yīng)用于臨 床檢驗(yàn)。當(dāng)時(shí)這種儀器為一個(gè)通道,僅能進(jìn)行紅細(xì)胞、 白細(xì)胞計(jì)數(shù),故稱為血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀或血球計(jì)數(shù)儀。 6060 年代,在原基礎(chǔ)上增加一個(gè)比色系統(tǒng),可同時(shí)測定白 細(xì)胞數(shù)、紅細(xì)胞數(shù)、血紅蛋白濃度、平均紅細(xì)胞體積 和血細(xì)胞比容。 7070 年代,開發(fā)了血小板計(jì)數(shù),此時(shí)可做全血細(xì)胞計(jì)數(shù)。 7070 年代末 8080 年代中,根據(jù)白細(xì)胞大小不同而產(chǎn)生的阻抗值 或散射量的不同,已能對(duì)細(xì)
3、胞進(jìn)行分類(兩分群、三分群 或五分類),且一次可報(bào)告 13131414 個(gè)分析參數(shù)及紅細(xì)胞 計(jì)數(shù)、白細(xì)胞計(jì)數(shù)、血小板計(jì)數(shù)三個(gè)直方圖。 8080 年代末,應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù),開發(fā)了網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)儀。 9090 年代初,網(wǎng)織紅細(xì)胞檢測技術(shù)應(yīng)用到血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀上。 9090 年代中期研制出的多功能、多參數(shù)、多分類全自動(dòng)血細(xì) 胞分析儀及檢測的全自動(dòng)化,把臨床血液學(xué)檢驗(yàn)提高到 了一個(gè)全新的水平。 I 血細(xì)胞分析儀分型 按自動(dòng)化程度可分為主自動(dòng)血細(xì)胞仝析儀程全自動(dòng)血細(xì)胞仝 析儀。 半自動(dòng)血細(xì)胞分析儀需在主機(jī)外匹配稀釋器,采集的血標(biāo) 本經(jīng)稀釋器預(yù)稀釋后再上機(jī)檢測。這類儀器工作效率低,吸樣 準(zhǔn)確性差,多為手工加溶血
4、素、混勻等,其加入量及放置時(shí)間、 因人為因素,隨機(jī)誤差較大,不利于質(zhì)控,并且易發(fā)生“半堵 孔或“堵孔”現(xiàn)象。90年代以來, 在發(fā)達(dá)國家已被逐步淘汰, 國內(nèi)用戶也為數(shù)不多, 趨于淘汰。全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀運(yùn)用了較先進(jìn)的計(jì)算機(jī)技術(shù)和機(jī) 械系統(tǒng),菜單式操作程序,條碼閱讀,自動(dòng)吸取樣品,血 液在機(jī)器內(nèi)部自動(dòng)稀釋,效率高,檢測量準(zhǔn)確,有利于質(zhì) 控,減少了操作者實(shí)驗(yàn)室感染的幾率.且大部分采用表面 活性劑法測血紅蛋白,避免了氟化物對(duì)環(huán)境的污染,是全 面取代半自動(dòng)血細(xì)胞分析儀的必然趨勢.目前還有將全自 動(dòng)血細(xì)胞分析儀與自動(dòng)涂片染色機(jī)、電腦及應(yīng)用軟件組合 而成的血液分析工作站,將多臺(tái)全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀、全 自動(dòng)網(wǎng)
5、織紅細(xì)胞分析儀、自動(dòng)涂片染色機(jī).機(jī)械連接系統(tǒng). 電腦、高性能應(yīng)用軟件組合為一體的血液分析流水線(如 HST-330模塊式全自動(dòng)血液分析流水線)等. 按檢測原理 電容型:通過改變兩電極之間電容量,獲得脈沖信號(hào)進(jìn)行計(jì)數(shù)。 (2)光電型:利用細(xì)胞和稀釋液対光的吸收度不同,使光敏元件住細(xì)胞 通過時(shí)產(chǎn)生脈沖信號(hào)而計(jì)數(shù)。 激光型:細(xì)胞受到激光的照射產(chǎn)生光吸收、光散射、發(fā)射熒光,得 到光學(xué)的、電子的信號(hào)進(jìn)行計(jì)數(shù) 電阻抗型:利用血細(xì)胞的電阻大于電解質(zhì)溶液(稀釋液)的電阻,細(xì) 胞通過微孔時(shí)兩電極之間的阻抗值增大,產(chǎn)生電壓脈沖信號(hào)而進(jìn) 行血細(xì)胞計(jì)數(shù)和體積測定.國內(nèi)產(chǎn)品均為電阻抗型. (5聯(lián)合檢測型:采用多種現(xiàn)代高
6、科技技術(shù),如利用電阻抗、激光、高 頻電磁波、流式細(xì)胞術(shù)和化學(xué)染色、特殊溶血?jiǎng)┑榷喾轿宦?lián)合檢 測同一個(gè)血細(xì)胞.此類儀器功能多,特異性強(qiáng)、速度快、獲得參 數(shù)多、對(duì)環(huán)境污染小。2.電阻抗法血細(xì)胞分析儀 血細(xì)胞與等滲電解質(zhì)溶液相比為相對(duì)的不良導(dǎo)體, 其電阻值大于稀釋液的電阻值.當(dāng)血細(xì)胞通過檢測器 小孔管微孔的孔徑感受區(qū)時(shí),檢測器內(nèi)外電極之間的 恒流源電路上電阻值瞬間增大,造成兩極之間電壓的 變化,產(chǎn)生一個(gè)電壓脈沖信號(hào).每次檢測中產(chǎn)生的脈 沖信號(hào)數(shù),即相當(dāng)于檢測出的細(xì)胞數(shù)。 操作時(shí),位于小孔兩側(cè)的 電極產(chǎn)生恒定電流.根據(jù)歐姆 定律電壓變化與電阻變化成正 比,電阻值又同細(xì)胞體積成正 比,血細(xì)胞體積越大,電
7、壓越 高,在甄別器上的脈沖幅度就 越大,各種大小不同細(xì)胞產(chǎn)生 的脈沖信號(hào)分別送入儀器內(nèi)電 腦的各個(gè)通道,經(jīng)運(yùn)算得出各 種細(xì)胞參數(shù).目前,多數(shù)儀器 在給出細(xì)胞數(shù)據(jù)結(jié)果的同時(shí)還 提供細(xì)胞群體大小分布情況圖 形,稱之為細(xì)胞體積直方圖.內(nèi) 8B ! 決 10 電崛 恂丈電 外郃業(yè)極 紅細(xì)胞體積(fl) 相對(duì)細(xì)胞數(shù) 血細(xì)胞分析儀在進(jìn)行細(xì)胞分析時(shí),將每個(gè)細(xì)胞的脈沖 根據(jù)其體積大小分配并存儲(chǔ)在相應(yīng)的體積通道中,每個(gè)通道 收集的數(shù)據(jù)被統(tǒng)計(jì)出相對(duì)數(shù),表示在Y軸上,體積數(shù)據(jù)以飛 升(fl)為單位,表示在X軸上.可將白細(xì)胞體積從30 450fl分為256個(gè)通道,每個(gè)通道1.64F1,依據(jù)體積大小分 別將其放在不同的
8、通道中,得到白細(xì)胞體積分布直方圖.初 步確認(rèn):第一群是小細(xì)胞區(qū),主要是淋巴細(xì)胞,體積在35- 90fl之間;第二群是中間細(xì)胞群,主要是單核細(xì)胞,體積在 90 - 160fl,;第三群為大細(xì)胞區(qū),主要是中性粒細(xì)胞,它 分葉多,顆粒多,體積可大至160fl以上. 血小板和紅細(xì)胞共用一個(gè)小孔臂。 正常人紅細(xì)胞體積和血小板 體積有明顯的界限.因此血小板計(jì)數(shù)準(zhǔn)確容易。當(dāng)血細(xì)胞懸液中含有 異常血細(xì)胞(如小紅細(xì)胞)時(shí).劃分界限不清。為使血小板計(jì)數(shù)有較 高的準(zhǔn)確性,計(jì)算機(jī)對(duì)血小板和紅細(xì)胞分布圖進(jìn)行判斷, 將血小板計(jì) 數(shù)的上限閾值判定線放在紅細(xì)胞和血小板分布圖交叉部分的最低處計(jì) 各項(xiàng)紅細(xì)胞指數(shù)的檢測原理:根據(jù)儀
9、器檢測的RBC、 HCT和Hb的數(shù)據(jù),經(jīng)儀器內(nèi)存程序換算出紅細(xì)胞平均體積 (MCV)、紅細(xì)胞平均血紅蛋白的含量(MCH)和紅細(xì)胞平均血 紅蛋白濃度( (MCHC) 紅細(xì)胞體積分布寬度( (RDW) )由血細(xì)胞分析儀在檢測紅 細(xì)胞數(shù)董的過程中,同時(shí)測量紅細(xì)胞體積大小的差異獲得, 是反映外周血紅細(xì)胞體積異質(zhì)性的參數(shù).RDW能直接.客 觀、 及時(shí)地反映紅細(xì)胞大小不等的程度,對(duì)貧血的診斷有 重要意義. 血紅蛋白測定原理:在稀釋的血液中加入溶 血?jiǎng)┖蠹t細(xì)胞被溶解,釋放出血紅蛋白(Hb),后 者與溶血?jiǎng)┲杏嘘P(guān)成分結(jié)合形成Hb衍生物,進(jìn)入 Hb測試系統(tǒng),在特定波長(一般在530 550nm)下 比色,吸光度
10、的變化與液體中H含量成正比,儀器 便可顯示其濃度。 細(xì)胞進(jìn)行檢測,以細(xì)胞體積為橫坐標(biāo),細(xì) 胞的相對(duì)數(shù)量為縱坐標(biāo),表示某一種細(xì)胞 數(shù)量分布情況, 可反映細(xì)胞體積大小異質(zhì) 性。 白細(xì)胞直方 1、正常白細(xì)胞直方圖 35 50 100 200 300 400 450( (1 3.血Uh 直方2.異常白細(xì)胞直方圖 t單儀邛18比例宙 QU MM! mnii UlMJtS MRCI: MM iwts ams 11 f. n 性桝巴i砂spin將 4.M $ MM. Re L 盤5 A RJ心拓 iies/L R9 Zk2 n.o LLl AC 52a 10E9/L LYM 26 R2 3 IL H】D 92 12.2 Ml GR6M 49 RM 和上 1G A C巨大血小換千擾 紅細(xì)胞直方 不同類型貧血紅細(xì)胞直方圖 a. iTfXW* MCV: 89. 4ri. IDf: 13. SKI : (MCV: U.lflt w: 21 9K) cE型 BF:*性竇血(MCV:71.9n, Rd: 13. 31) : 檢Jft妙細(xì)H性畬血( (MCY:736I. ROY: 21.) e巨結(jié)細(xì)l!住貧血(MO: ULlfh tOV: 14.M);匚龍性失幺性箸Jt (心 9LJn. UM:
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