最新報告基因原理及應用精品課件ppt教學內(nèi)容

1、報告基因原理及應用Tianjin Sungene Biotech Co.,Ltd Tel:Email : techsupport 報告基因（reporter gene） 報告基因報告基因 (reporter (reporter gene)gene)是一種編碼可被檢是一種編碼可被檢測的蛋白質(zhì)或酶的基因，測的蛋白質(zhì)或酶的基因，是一個其表達產(chǎn)物非常容是一個其表達產(chǎn)物非常容易被鑒定的基因。易被鑒定的基因。 常見的報告基因有常見的報告基因有-半乳半乳糖苷糖苷酶酶 、-葡萄糖醛酸葡萄糖醛酸酶和熒光素酶等，其中熒酶和熒光素酶等，其中熒光素酶應用最為廣泛。光素酶應用最為廣泛。Tia

2、njin Sungene Biotech Co.,LtdTianjin Sungene Biotech Co.,LtdTianjin Sungene Biotech Co.,LtdTianjin Sungene Biotech Co.,Ltd Tel:Email : techsupport 檢測原理熒光素酶（熒光素酶（luciferase）可以催化）可以催化luciferin氧化成氧化成oxyluciferin，在，在反應反應過過程中會發(fā)出生物熒光，然后通過熒光測定儀器測定程中會發(fā)出生物熒光，然后通過熒光測定儀器測定luciferinluciferin氧化過程氧化過

3、程中釋放的生物熒光量中釋放的生物熒光量 ，經(jīng)過數(shù)據(jù)處理計，算出被測樣品中，經(jīng)過數(shù)據(jù)處理計，算出被測樣品中l(wèi)uciferase的的含量。含量。通過熒光素和熒光素酶這一生物發(fā)光體系，可以極其靈敏、高效地檢測通過熒光素和熒光素酶這一生物發(fā)光體系，可以極其靈敏、高效地檢測基因的表達?；虻谋磉_。 luciferinoxyluciferinTianjin Sungene Biotech Co.,Ltd Tel:Email : techsupport 檢測流程待測樣品檢測液檢測熒光強度制作標曲和檢測樣品時都要設置對照孔制作標曲和檢測樣品時都要設置對照孔熒光素酶底物檢測液緩沖液充

4、分混合代入標準曲線計算熒光素酶含量培養(yǎng)細胞加入待測化合物等體積反應室溫孵育，避光Tianjin Sungene Biotech Co.,Ltd Tel:Email : techsupport 熒光素酶底物加入檢測緩沖液中混勻檢測液加入孔中，測定發(fā)光值待測樣品加入96孔板中Tianjin Sungene Biotech Co.,Ltd Tel:Email : techsupport Amplite Fluorimetric Sphingomyelinase Assay Kit鞘磷脂酶SMase檢測試劑盒磷酸膽堿磷酸膽堿SMaseSMase鞘

5、磷脂鞘磷脂應用：應用：Quantifying sphingomyelinase in blood, cell extracts Quantifying sphingomyelinase in blood, cell extracts and solutions.and solutions.靈敏度靈敏度:as low as of 0.15 mU/mL phingomyelinase in solution.:as low as of 0.15 mU/mL phingomyelinase in solution. Tianjin Sungene Biotech Co.,Ltd Tel:Email : techsupport Amplite Fluorimetric Lysyl Oxidase Assay Kit賴氨酸氧化酶檢測試劑盒 生物樣品中賴氨酰氧化酶的活性傳統(tǒng)方法：H3氚 放射性同位素標記 試劑盒：HRP-coupled來檢測底物LOX中 H2O2的釋