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文檔簡介
1、.中藥制劑生產(chǎn)技術(shù)與調(diào)劑應(yīng)用-中藥材基礎(chǔ)知識實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)二零零九年十月實(shí)驗(yàn)室守則 1實(shí)驗(yàn)課是培養(yǎng)學(xué)生獨(dú)立思考和理論聯(lián)系實(shí)際、靈活應(yīng)用能為的重要手段,也是進(jìn)行科研工作的基礎(chǔ),必須嚴(yán)肅認(rèn)真。2準(zhǔn)時(shí)上實(shí)驗(yàn)課,不得無故缺席,不得遲到早退,按指定座位就坐,使用相應(yīng)的顯微鏡。3.實(shí)驗(yàn)前必須通過預(yù)習(xí)本次實(shí)驗(yàn),明確實(shí)驗(yàn)的目的要求、內(nèi)容、方法和步驟。實(shí)驗(yàn)時(shí)要認(rèn)真觀察,獨(dú)立思考,做好記錄,實(shí)驗(yàn)完畢后要按時(shí)交實(shí)驗(yàn)報(bào)告。 4.當(dāng)老師講解實(shí)驗(yàn)時(shí),要專心聽講,并作必要的記錄在實(shí)驗(yàn)中如有疑問請舉手,不準(zhǔn)大聲喧嘩。 5愛護(hù)實(shí)驗(yàn)室一切儀器設(shè)備,按操作規(guī)程使用顯微鏡,盡量節(jié)約水、電及擦鏡紙、試劑等一切消耗物質(zhì)損壞儀器須登記,按規(guī)定賠
2、償。 6每次實(shí)驗(yàn)必須帶備指導(dǎo)書,繪圖用具(HB、2H鉛筆各一支,橡皮、尺子等)和實(shí)驗(yàn)報(bào)告紙。 7保持實(shí)驗(yàn)室清潔整齊,一切實(shí)驗(yàn)用具用完盾要擦洗干凈,放回原處每次實(shí)驗(yàn)完畢,要搞好室內(nèi)清潔衛(wèi)生離開實(shí)驗(yàn)室時(shí)要關(guān)好水、電、門、窗。 實(shí)驗(yàn)一 植物細(xì)胞基本結(jié)構(gòu)及后含物 一、目的要求 1掌握光學(xué)顯微鏡下植物細(xì)胞的構(gòu)造; 2識別植物細(xì)胞的各種后含物; 3學(xué)習(xí)臨時(shí)制片法 ; 4學(xué)習(xí)植物細(xì)胞圖的繪制方法。 二、儀器
3、用品及實(shí)驗(yàn)材料 (一)儀器用品 顯微鏡、載玻片、蓋玻片、鑷子、刀片、吸水紙、擦鏡紙,稀碘液 (二)實(shí)驗(yàn)材料:新鮮洋蔥鱗莖,馬鈴薯塊莖,西芹莖,大黃橫切片 三、內(nèi)容與步驟: (一)植物細(xì)胞的基本構(gòu)造 1、制作洋蔥表皮的臨時(shí)裝片 從洋蔥鱗莖上剝下一片肉質(zhì)鱗葉,用鑷子撕取其內(nèi)表皮少許,用刀片切取3-5mm大小的一塊,按臨時(shí)裝片法,置于載玻片上預(yù)先加好的水淌中,用鑷子將其展乎,然后將蓋玻片沿水滴一側(cè)慢慢蓋下,防止產(chǎn)生氣泡,用吸水紙沿蓋玻片一側(cè)吸掉多余酌水。 2、觀察植物細(xì)胞的構(gòu)造 將臨時(shí)裝片放在低倍鏡下觀察,可看到許多五色透明的稍長形的細(xì)胞,彼此緊密相連,沒有細(xì)胞間隙。在細(xì)胞中,可見到浸埋在細(xì)胞質(zhì)中的
4、圓形的細(xì)胞核,如不清晰,可由蓋玻片一側(cè)加稀碘液一滴,用吸水紙?jiān)诹硪粋?cè)稍吸;使碘液布滿整個標(biāo)本而染色,幾分鐘后觀察,可見細(xì)胞質(zhì)被染成淺黃色,細(xì)胞核被染成較深的黃色,細(xì)胞各部分顯得較為清晰移動裝片,選擇幾個較清楚的細(xì)胞置于視野中央,換用高倍鏡頭再仔細(xì)觀察;注意識別下列各部分: (1)細(xì)胞壁c植物細(xì)胞所特有。為細(xì)胞的最外層,比較透明。調(diào)節(jié)細(xì)調(diào)焦螺旋和彩虹光圈、可見兩細(xì)胞間實(shí)際上為三層;,兩側(cè)為相鄰兩個細(xì)胞的細(xì)胞壁;中間是兩個細(xì)胞共有的胞間層。 (2)細(xì)胞質(zhì):為無色透明的膠狀物,緊貼在細(xì)胞壁以內(nèi),被中央大液泡擠成一薄層,僅細(xì)胞兩端較明顯 (3)細(xì)胞核:埋在細(xì)胞質(zhì)內(nèi);貼近細(xì)胞側(cè)壁的只見其窄藺,呈扁圓形,
5、貼在上、下整的可見其寬面,呈球形。仔細(xì)觀察,可見包在細(xì)胞核外面的核膜,細(xì)胞核內(nèi)有13個發(fā)亮的顆粒,即核仁。(有的細(xì)胞看不見細(xì)胞核是因?yàn)樵摷?xì)胞被撕破,只剩一半了) (4)液泡:位于細(xì)胞中央,占細(xì)胞體積的大部分,由于澈泡內(nèi)充滿細(xì)胞液;所以比細(xì)胞質(zhì)更透明。 (二)植物細(xì)胞的后含物 1淀粉粒 切取一小塊馬鈴薯塊莖,用刀片刮取少許液汁,置載玻片上,加水一滴,攪勻,蓋上蓋玻片先在低倍鏡下觀察淀粉粒,注意其形狀。轉(zhuǎn)換高倍鏡繼續(xù)觀察,仔細(xì)、準(zhǔn)確地分辨單粒,復(fù)粒和半復(fù)粒,識別淀粉粒中的臍點(diǎn)和層紋。繪圖記錄。然后取下制片,加一滴稀碘液。觀察有何變化,記錄觀察結(jié)果。 2結(jié)晶體 簇晶:取大黃根莖橫切裝片,觀察,可見。
6、 (三)用西芹練習(xí)作臨時(shí)切片 四、作業(yè) l繪洋蔥鱗葉的內(nèi)表皮細(xì)胞,注明細(xì)胞各部分。 2繪馬鈴薯塊莖中淀粉粒的構(gòu)造和類型圖。 實(shí)驗(yàn)二、三 植物組織、器官解剖構(gòu)造觀察(4學(xué)時(shí))一、目的要求:1熟悉單雙子葉植物根的初生和次生構(gòu)造特點(diǎn)。2熟悉單雙子葉植物莖的初生和次生構(gòu)造特點(diǎn)。3. 熟悉植物葉的解剖構(gòu)造特點(diǎn)。4. 了解花粉粒的形態(tài)。5掌握植物組織的形態(tài)特征、分布位置及其在中藥鑒定上的意義。二、儀器用品和實(shí)驗(yàn)材料 (一)儀器用品 顯微鏡、解剖用具、擦鏡紙 、蒸餾水、水合氯醛液、稀甘油、酒精燈(二)實(shí)驗(yàn)材料 菜心葉、新鮮姜、棉花次生根橫切片、椴樹莖橫切片、薄荷葉橫切片、花粉粒裝片、黃柏粉末 三、內(nèi)容與步驟
7、 (一)保護(hù)組織 1表皮:撕取菜心葉下表皮一小塊,制成臨時(shí)水裝片,鏡檢,可見表皮由一層扁平薄壁細(xì)胞組成,細(xì)胞排列緊密。注意在表皮上能否見到角質(zhì)層和毛茸、氣孔? 2毛茸:薄荷葉橫切片 3氣孔 植物體的表皮(除根表皮外)均有氣孔,氣孔由兩個半月形的保衛(wèi)細(xì)胞對合而成。在保衛(wèi)細(xì)胞周圍常有2一多個與表皮細(xì)胞形狀不同的·細(xì)胞,為副衛(wèi)細(xì)胞;由于保衛(wèi)細(xì)胞和副衛(wèi)細(xì)胞之間不同的排列關(guān)系,雙子葉植物的氣孔有下列幾種類型(撕取菜心葉下表皮制成臨時(shí)水裝片觀察):注意是什么類型? (二)機(jī)械組織 厚壁組織 (1)纖維:取黃柏粉末少許,用水合氯醛透化23次,制成臨時(shí)甘油裝片,置顯微鏡下觀察可見纖維及晶鞘纖維大多成
8、束;多碎斷。纖維甚長,有的邊緣凹凸,壁極厚;胞腔線形。晶鞘纖維含草酸鈣方晶 (2)石細(xì)胞;取已制好的黃柏粉末透化裝片,在顯微鏡下觀察,可見石細(xì)胞呈類圓形或多角形,或不規(guī)則分枝狀,壁極厚,孔溝多不明顯。 (三)分泌組織 油細(xì)胞:取鮮姜作徒手切片,制成臨時(shí)水裝片,鏡檢,可見在薄壁細(xì)胞之間,雜有許多類圓形的油細(xì)胞,胞腔內(nèi)含淡綠黃色揮發(fā)油滴 (一)根的初生構(gòu)造 1雙子葉植物根的初生構(gòu)造 ; 取棉花根初生構(gòu)造橫切制片;在祗倍鏡下區(qū)分出表皮,皮層,維管柱三大部分,然后轉(zhuǎn)換高倍鏡由外向里仔細(xì)觀察: 表皮:為最外一層細(xì)胞,排列緊密整齊,沒有細(xì)胞間隙能否見到氣孔和角質(zhì)層?能否見到根毛?為什么? 皮層;在表皮以內(nèi)
9、,被固綠染成綠色的部分即皮層,占根的大部分,由多層排列疏松的薄壁細(xì)胞組成,可以區(qū)分為三層: a外皮層:為緊靠表皮下方的一層細(xì)胞,略呈切向延長。 b皮層薄壁組織:位于外皮層之間,為多層排列疏松的薄壁細(xì)胞。 c內(nèi)皮層c為皮層最內(nèi)一層細(xì)胞,排列比較緊密花生根的內(nèi)皮層較特射,其凱由點(diǎn)不明顯。 維管柱,為內(nèi)皮層以內(nèi)的全部組織,它包括中柱鞘,初生維管束和髓。 a中柱鞘:為緊貼內(nèi)皮層的一層薄壁緬胞。細(xì)胞體積較內(nèi)皮層小,排列略整齊。 b初生維管束:由初生韌皮部,初生本質(zhì)部和它們之間的少量薄壁組織組成。 初生木質(zhì)部:被染成紅色的部分,為四原型,先分化的原生木質(zhì)部導(dǎo)管較小,后分化的后生木質(zhì)部導(dǎo)管較大,由外向內(nèi)漸次
10、成熟,謂之外始式是根初生構(gòu)造特征之一。 初生韌皮部:位于兩初生木質(zhì)部之間,與初生木質(zhì)部相間排列呈輻射狀,構(gòu)成輻射維管束,這也是根的初生構(gòu)造的重要特征。初生韌皮部被固綠染成綠色,細(xì)胞多龜形,由篩管、伴胞和韌皮薄壁細(xì)胞、韌皮纖維組成,但不易分辨。 薄壁組織:位于初生木質(zhì)部和韌皮部之間,當(dāng)根進(jìn)行次生生長前,它將分化成維管形成層的一部分。注意:實(shí)驗(yàn)材料中已可見有形成層片段出現(xiàn)。 (一)根的次生構(gòu)造 取棉花根次生構(gòu)造的橫切制片,從外向里逐層觀察:(1) 周皮:為最外方的數(shù)層細(xì)胞,由木栓層、木栓形成層和栓內(nèi)層組成(2) 木栓層:在最外面,由幾層排列整齊的扁平細(xì)胞組成,細(xì)胞壁栓質(zhì)化,常呈淺棕色。 木栓形成層
11、:為木栓層內(nèi)方的一層扁平細(xì)胞,不甚明顯 栓內(nèi)層:木栓形成層的內(nèi)方,是多層橢圓形至卵形的薄壁細(xì)胞,排列比較疏松,也叫 “次生皮層”。其中有斷續(xù)的纖維束環(huán)以及草酸鈣結(jié)晶。 (2)次生維管組織:為形成層活動產(chǎn)生的組織。 次生韌皮部:位于栓內(nèi)層的內(nèi)方,形成層的外側(cè),被固綠染成綠色的部分其組成分子有篩管、伴胞、韌皮薄壁組織、韌皮纖維、韌皮射線。 形成層;在次生韌皮部和次生木質(zhì)部之間,由數(shù)列排列緊密,整齊的扁長方形薄壁細(xì)胞組成。 次生木質(zhì)部;在形成層以內(nèi),包括導(dǎo)管,管胞和木薄壁細(xì)胞和木纖維組成。橫切面上,導(dǎo)管最容易辨認(rèn),是一些被番紅染成紅色的,口徑,大小不一的類周形或多邊形細(xì)死細(xì)胞,作放射狀排列。 維管射
12、線:是貫穿整個次生木質(zhì)部和次生韌皮部中,由徑向排列的1-幾列薄壁細(xì)胞組成·在次生韌皮部內(nèi)的叫韌皮射線,在次生本質(zhì)部的叫木射線。射線細(xì)胞也是形成層細(xì)胞分裂產(chǎn)生的。 (四)莖的次生構(gòu)造 取椴樹橫切片觀察,其次生構(gòu)造由外至內(nèi)包括: 1周皮c很明顯,由木栓層、木栓形成層及栓內(nèi)層組成 木栓層,位于最外面,由23層排列整齊的扁平細(xì)胞組成,壁栓質(zhì)加厚,染成深棕色??梢娖た追? 木栓形成層:位于木栓層之內(nèi),為一層扁平狀的薄壁細(xì)胞。 栓內(nèi)層,在木栓形成層的內(nèi)方,由多層排列疏松的薄壁細(xì)胞組成,又稱“次生皮層”。在薄壁細(xì)胞中,有零散或成束的纖維排列成環(huán)帶狀, 2次生維管組織 次生韌皮部:位于栓內(nèi)層的內(nèi)方,
13、占整個莖部的比例小,染成綠色。其組成分子有:篩管、伴胞、韌皮薄壁組織、韌皮射線、韌皮纖維。 形成層:成一圓環(huán)狀由數(shù)層排列整齊的細(xì)胞所組成,其中一層為形成層。位于次生木質(zhì)部和次生韌皮部之間 次生木質(zhì)部:位于形成層的內(nèi)方,占整個莖部的大部分,染成紅色。;其姐成分子有導(dǎo)管、木薄壁組織、木射線、木纖維。 維管射線;是一群橫向排列的薄壁細(xì)胞,位于次生韌皮部的叫韌皮射線,位于次生木質(zhì)部的叫木射線。 髓:仍保留在莖的中央,由薄壁細(xì)胞組成。 四、作業(yè)與思考 1繪氣孔的簡圖。2繪花粉粒圖。實(shí)驗(yàn)四 大黃、黃連的鑒定一、 實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、掌握顯微描繪方法以及大黃 、 黃連粉末 的 顯微特征2、熟悉大黃、黃連的理化鑒別方
14、法。二、 實(shí)驗(yàn)器材儀器:顯微鏡 試劑:水合氯醛、稀甘油、氫氧化鈉、乙醇、稀鹽酸、漂白粉、30%硝酸 藥材:大黃 、 黃連粉末:大黃 、 黃連三、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容1、觀察并描繪大黃粉末顯微觀察中的草酸鈣簇晶、導(dǎo)管;黃連粉末顯微觀察中的石細(xì)胞、纖維、磷葉表皮細(xì)胞。2、觀察大黃、黃連的理化特征。四、實(shí)驗(yàn)方法1、大黃的理化鑒別取少許大黃粉末置濾紙上,加氫氧化鉀(鈉)試液,濾紙染成紅色(檢查蒽醌類衍生物)。 2、味連的理化鑒別 取黃連粗粉1g,加乙醇10ml,加熱至沸騰,放冷、濾過。取濾液5滴,加稀鹽酸1ml與漂白粉少量,振搖后,溶液顯櫻紅色。(小檗堿)。取黃連粉末置載玻片上,加95%乙醇1-2滴及30%硝酸1
15、滴,蓋上蓋玻片,放置片刻,鏡檢,有黃色針狀或針簇狀結(jié)晶析出。(硝酸小檗堿). 黃連根莖折斷面在紫外光燈下觀察顯金黃色熒光,木質(zhì)部尤為顯著。3、大黃 、 黃連粉末的顯微鑒定與描繪(1)大黃 、 黃連粉末,分別以水合氯醛透化裝片。(2)描繪大黃粉末顯微觀察中的草酸鈣簇晶、導(dǎo)管;黃連粉末顯微觀察中的石細(xì)胞、纖維、磷葉表皮細(xì)胞。五、觀察要點(diǎn)1、大黃粉末顯微觀察中的草酸鈣簇晶、導(dǎo)管、淀粉粒的描繪(見圖一)2、黃連粉末顯微觀察中的石細(xì)胞、纖維、磷葉表皮細(xì)胞(見圖二)。六、作業(yè) 描繪大黃、黃連粉末顯微特征圖。寫出大黃、黃連的理化實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象。 圖一 大黃粉末顯微觀察描繪圖 1、草酸鈣簇晶 2、導(dǎo)管 3、淀粉粒
16、圖二、味連粉末顯微觀察圖 1、石細(xì)胞 2、韌皮纖維 3、木纖維 4、鱗葉表皮細(xì)胞 5、導(dǎo)管 6、棕色分泌物實(shí)驗(yàn)五 甘草、黃柏的鑒定一、 實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、掌 握 甘 草、黃柏 藥 材性狀鑒 別 特 征 。3、掌 握 甘草 、黃柏的 粉末顯微 特 征,了解其理化鑒定。二、實(shí)驗(yàn)器材儀器:顯微鏡、酒精燈 試劑: 藥材:甘草、黃柏藥粉:甘草、黃柏三、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容1、 觀察 甘 草、黃柏 藥 材性狀鑒 別 特 征。2、 觀察甘草、黃柏粉末顯微特征四、實(shí)驗(yàn)方法1、甘草粉末顯微鑒別取甘草粉末,以水合氯醛透化裝片,觀察顯微特征。2、黃柏粉末顯微鑒別 取黃柏粉末,以水合氯醛透化裝片,觀察顯微特征。3、 甘草的理化鑒別 取
17、甘草粉末1g,加硫酸幾滴后顯黃色后變橙黃色。五、觀察要點(diǎn)1、甘草、黃柏粉末顯微鑒別黃柏顯微特征:川黃柏:石細(xì)胞、纖維及晶纖維、黏液細(xì)胞、草酸鈣方晶甘草顯微特征:木栓細(xì)胞、晶鞘纖維、導(dǎo)管六、作業(yè)1、描繪黃柏粉末、甘草粉末主要特征圖。2、記錄甘草理化反應(yīng)現(xiàn)象。 圖 甘草粉末顯微觀察圖1纖維及晶纖維 2、草酸鈣方晶 3、導(dǎo)管4木栓細(xì)胞 5.淀粉粒 圖 川黃柏粉末顯微觀察圖1、 纖維及晶纖維 2、石細(xì)胞 3、草酸鈣方晶 4、黏液細(xì)胞 5、淀粉粒 6、篩管分子 7、木栓細(xì)胞實(shí)驗(yàn)六 麻黃和薄荷的鑒定一、 實(shí)驗(yàn)?zāi)康恼莆章辄S和薄荷的性狀、組織粉末特征。二、實(shí)驗(yàn)器材儀器:生物顯微鏡、酒精燈試劑:水合氯醛、甘油藥
18、材:麻黃、薄荷 粉末:麻黃、薄荷三、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容觀察麻黃和薄荷的性狀、組織(薄荷)粉末特征。四、實(shí)驗(yàn)方法1、性狀:取麻黃、薄荷藥材,觀察性狀特征。2、縱切片:取薄荷藥材徒手切片,觀察橫切面顯微特征。3、粉末:取麻黃、薄荷粉末,以水合氯醛透化裝片,觀察顯微特征。五、觀察要點(diǎn)1、性狀鑒別麻黃 草麻黃細(xì)長圓柱形,有縱棱,節(jié)間長,節(jié)上膜質(zhì)鱗片葉先端多2裂,裂片銳三角形,先端反曲?;柯?lián)合成筒狀,紅棕色。折斷面略呈纖維性,髓部紅棕色。 中麻黃分枝較多,磷葉先端多3裂,裂片銳三角形。 木賊麻黃多分枝,節(jié)間較短,磷葉先端多2裂;裂片短三角形,先端不反曲。薄荷莖方形,單葉對生,多卷縮,完整葉深綠色,呈長圓形或卵形
19、,稀被茸毛,有凹點(diǎn)狀腺磷,葉揉搓有特異清涼香氣。粉末草麻黃表皮細(xì)胞及氣孔、角質(zhì)層部分、纖維(含小晶體)、皮層薄壁細(xì)胞(示含結(jié)晶)、棕色塊(見圖十八)圖草麻黃草質(zhì)莖粉末顯微圖1、 表皮碎片(示細(xì)胞及角質(zhì)層) 2、氣孔 3、皮部纖維 4、草酸鈣砂晶 5、木纖維6、導(dǎo)管 7、皮層薄壁細(xì)胞(示含結(jié)晶) 8、髓部薄壁纖維 9、色素塊 10、石細(xì)胞薄荷腺磷頂面觀、腺磷側(cè)面觀、氣孔、小腺毛、非腺毛、腺磷角質(zhì)層皺(見圖十九)圖 薄荷地上部分粉末顯微觀察圖1、 腺磷 2、小腺毛 3、非腺毛 4、橙皮苷結(jié)晶 5、葉片碎片(a、上表皮b、下表皮c、橫斷面)6、莖表皮 7、木纖維 8、導(dǎo)管六、作業(yè)繪出麻黃、薄荷粉末的
20、顯微特征圖。實(shí)驗(yàn)七 番瀉葉、紅花的鑒定一、 實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、熟悉番瀉葉、紅花的性狀鑒別特征2、掌握番瀉葉、紅花粉末顯微鑒別特征二、實(shí)驗(yàn)器材 儀器:顯微鏡試劑:水合氯醛、甘油、純水。 藥材:番瀉葉、紅花。粉末:番瀉葉、紅花。三、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容1、 觀察番瀉葉、紅花的性狀2、觀察番瀉葉、紅花的粉末特征四、實(shí)驗(yàn)方法1性狀鑒別 取番瀉葉、紅花藥材,觀察性狀。2顯微鑒別 粉末:取番瀉葉、紅花粉末,裝片,觀察粉末顯微特征。五、觀察要點(diǎn)1性狀鑒別番瀉葉狹葉番瀉葉:葉片披針形至 狹長披針形,葉端急尖或漸尖,中脈楔形略不對稱。黃綠色,有疏毛或光滑。葉片紙質(zhì)。葉圓柱形,疏生柔毛。氣無,味苦而稍有粘性。紅花為不帶子房的管狀花
21、,條形,長約1.5cm。紅黃色或紅色,全為筒狀花,花冠先端5裂。聚藥雄蕊,花藥黃色。柱頭露出花藥,頂端2分叉,淡黃色。 2顯微鑒別粉末顯微特征番瀉葉表皮細(xì)胞與平軸氣孔、非腺毛、晶鞘纖維、草酸鈣簇晶(見圖十二) 圖 番瀉葉粉末顯微觀察圖 1、表皮細(xì)胞與平軸氣孔 2、非腺毛 3、晶鞘纖維 4、草酸鈣簇晶 圖 紅花粉末顯微觀察 1、分泌細(xì)胞 2、花粉粒 3、草酸鈣方晶 4、花柱細(xì)胞 5、花冠裂片表皮細(xì)胞(a、表面觀b、頂端) 6、花粉囊內(nèi)壁細(xì)胞 7、花藥基部細(xì)胞 8、網(wǎng)紋細(xì)胞六、作業(yè)繪番瀉葉、紅花粉末顯微特征圖。試劑配制法1間苯三酚試液取間苯三酚lg,加95乙醇20ml使溶解即得。試料加本液1滴,2
22、-3分鐘后,再加濃鹽酸l滴,木化細(xì)胞壁顯紅色,紅色的深度依木化的程度而異。鹽酸需貯在具塞玻璃瓶中,防止吸濕而變稀。此酸用20過氯酸代替則更好。2間苯三酚硫酸試液 取硫酸5ml,慢慢加入蒸餾水中,混勻,冷卻后加入間苯三酚試液10ml中,混勻即得。試料加本液1-2滴,木化細(xì)胞壁顯紅色,其顯色深度依木化程度而異。由于本液不產(chǎn)生鹽酸氣,故較上液更好。 3硫酸苯胺試液取硫酸苯胺lg,加水70ml溶解,再加95乙醇30ml,硫酸3毫升,混勻即得。試料加本液1-2滴,木化細(xì)胞壁顯黃色,且可使草酸鈣晶體溶解。4醋酸苯胺試液取苯胺l g,加醋酸2ml及50乙醇97ml,混勻即得。用途同上,但不會溶解草酸鈣結(jié)晶。
23、 5碘液用N/50碘液,或取N/10碘液10m1加蒸餾水稀釋至50ml即得;或取碘化鉀7g溶于20m1水中,加碘2.5g溶解后,加水至1000ml。試料加本液l滴,淀粉顯藍(lán)色至藍(lán)紫色,蛋白質(zhì)顯黃色。 ,6硫酸(66%V/V)取濃硫酸66ml,慢慢加入于適量(約34m1)蒸餾水中,邊加過攪拌,冷后補(bǔ)加少量蒸餾水使全量至100 ml即得。7氯化鋅碘試液取碘化鉀13g,加蒸餾水21m1溶解。再加碘1g,攪拌至溶解,然后加入碘化鋅40g使溶解即得。此液應(yīng)遮光貯存,且只能在短時(shí)間內(nèi)穩(wěn)定,宜裝入小形棕色玻璃瓶中備用。試料加本液1-2滴,纖維素細(xì)胞壁顯藍(lán)色至藍(lán)紫色,木化細(xì)胞壁顯黃色至棕色。8氫碘酸 含碘化氫
24、57%的氫碘酸即可。用途與氯化鋅碘試液相同,但較靈敏而迅速。 9. 氨制氧化銅試液(簡稱“銅氨液”) 有兩種配制法:(1)取硫酸銅0.5g,溶于25氨水10ml。放置數(shù)小時(shí)后,傾取上清液供用。(2)取碳酸銅0.5 g,入研缽中加水10ml研勻,再逐漸加入濃氨水(比重0.80)10ml,并不斷攪拌使溶解即得。本液不穩(wěn)定(約半月),每次宜少量配制密塞貯存。試料加本液l-3滴,纖維素細(xì)胞壁膨脹而后逐漸溶解。10蘇丹紅(或蘇丹)試液 有二種制法:(A)取蘇丹紅或蘇丹(Sodan Red G或Sodan)0.0lg,加95乙醇5ml溶解后加甘油5ml混合即得。(B)取蘇丹紅0.0lg,溶于乙酐20毫升加
25、甘油10ml混合即得。試料加本液1-2滴,木化細(xì)胞壁、角質(zhì)、油脂、蠟質(zhì)、揮發(fā)油、樹脂均顯紅色。11紫草試液取紫草根粉lg,加90乙醇10ml浸漬24小時(shí)后濾過,濾液中加入等量甘油,混合,放置2小時(shí),濾過即得。置棕色玻璃瓶中貯存。在兩個月內(nèi)使用。用途與蘇丹紅試液相同。12鋨酸試液 取鋨酸0.l g,溶于蒸餾水5ml中,即得。本品須密塞避光貯存。脂肪油遇本液染成棕色至藍(lán)色,揮發(fā)油與樹脂均不染色。 13多能試劑先分別配下列三種溶液:(1)取乳酸20ml,加蘇丹紅或蘇丹至飽和為止,加乳酸30ml稀釋。(2)硫酸苯胺0.55g溶于35ml蒸餾水中。(3)碘化鉀0.55g及碘0.05g溶于蒸餾水5ml中,
26、再加入55乙醇5ml,將上述三液混合,攪拌加入濃鹽酸(37)25ml。此液不過濾,直接供用。試料加本液2-3滴,慢慢加熱,必要時(shí)補(bǔ)加少量試液,并加蓋玻片。木化細(xì)胞壁變黃色,木栓化細(xì)胞壁變紅棕色,脂肪油變紅色,淀粉變藍(lán)紫色。14三硝基酚(苦味酸)試液取三硝基酚l g加蒸餾水或90乙醇95ml溶解,即得。蛋白質(zhì)遇本液呈黃色,染糊粉粒時(shí),須用醇液,以免蛋白質(zhì)溶解。 15硝酸汞試液即(米龍?jiān)囈?有兩種配制法 (A)取汞1m1,加發(fā)煙硝酸(比重1.52)9ml,反應(yīng)時(shí)須保持混合物冷卻。當(dāng)反應(yīng)完畢后,加水10ml。(B)取氧化汞(紅色或黃色品)40g,可加亞硝酸鉀液數(shù)滴,以恢復(fù)其活性。本液可使含酪氨酸的蛋
27、白質(zhì)呈磚紅色,靈敏度1:20000。16三氯化鐵試液 取三氯化鐵10g溶于蒸餾水l00ml,臨用前取此液1 ml,加水9ml稀釋。鞣質(zhì)及多元酚(黃酮類等)遇本液顯藍(lán)黑色或綠色。 17鎢酸鈉試液取鎢酸鈉1g與醋酸鈉2g,加蒸餾水溶解到10ml,即得。鞣質(zhì)遇本液生成黃棕色至紅棕色沉淀。18萘酚試液取萘酚lg,溶于95乙醇l0ml即得。本液與30WW硫酸配合應(yīng)用,可使菊糖呈胭脂紅色并溶解。 20釕紅試液 取釕紅80mg,加l0醋酸鉛溶液100ml使溶解即得。此液易失效,宜臨用前配制。避光貯存,用量少時(shí),可于臨用前,用針尖挑取少量釕紅溶于少量l0醋酸鉛溶液中,使呈酒紅色,即得。直接將釕紅溶于蒸鎦水中較
28、好。含果膠質(zhì)的細(xì)胞壁,酸性粘朊及糖元,遇本液染成紅色。 ,21可拉林鈉溶液 有兩種配制法:(A)取可拉林或玫紅酸0.5g,溶于90乙醇l0ml中(甲液),另取結(jié)晶碳酸鈉25g,溶于蒸餾水100ml中(乙液)。將兩液分別裝瓶貯存,臨用時(shí)取甲液1ml與乙液20ml混合即得。(B)取碳酸鈉3g溶于7ml蒸餾水中,臨用時(shí),取此液少量,加可拉林l小片,使呈粉紅色即得?;旌弦翰荒唾A存。胼胝體及篩板遇此液呈粉紅色,木化細(xì)胞壁,淀粉粒及某些粘液質(zhì)也可染成粉紅色。22亞甲蘭試液 配成兩種溶液供用。(1)醇溶液:取亞甲蘭0.1 g,溶于95乙醇25ml中;(2)甘油溶液:取亞甲蘭0.1 g溶于95乙醇及甘油25m
29、l中。檢識粘液時(shí),先加醇溶液l-2滴,加蓋玻片過l-2分鐘后,再加入甘油溶液粘液呈天藍(lán)色。23硫堇試液 取硫堇0.2ml,溶于25乙醇100ml即得。粘液質(zhì)或粘朊遇本液染成紅色至紫色并膨脹成球形團(tuán)塊。24墨汁取商品墨汁,于臨用前加蒸餾水稀釋l0倍。粘液質(zhì)或粘朊不著色而呈透明塊狀,其它細(xì)胞壁及細(xì)胞內(nèi)含物均呈黑色。25水合氯醛液取水合氯醛50g,加水20ml,使溶解即得。此為常用透化劑,可使皺縮的細(xì)胞膨脹,并可溶解多種成分,如葉綠素、樹脂、揮發(fā)油、蛋白質(zhì)、淀粉等。26乳酸氯醛取水合氯醛50g,溶于乳酸50ml中即得。為透化劑,用于難透化樣品,用法同水合氯醛。27乳酸酚取苯酚(石碳酸)2g,乳酸2g
30、,甘油2g與蒸餾水2ml,混合即得。為常用封藏劑之一。 28甘油醋酸液(史氏溶液) 取甘油,50醋酸,蒸餾水各等量混合即得。為常用封藏劑之一。29稀甘油 取純甘油l 0ml加蒸餾水20ml,混合即得;為常用封藏劑之一30次氯酸鈉溶液(漂白液) 取漂白粉l0g;分次加蒸餾水75ml研勻,另取結(jié)晶碳酸鈉l 5g溶于25ml蒸餾水中,分次加入漂白粉液中,攪勻放置沉淀后取上清液,必要時(shí)過濾。 31硝鉻酸液 取鉻酸(三氯化二鉻)l0g,溶于l0硝酸中',使全量為100ml,即得。用于木化組織的解離。325氫氧化鉀溶液 取氫氧化鉀5g,溶于蒸餾水100ml中,必要時(shí)用玻璃棉或垂熔玻璃漏斗過濾即得。
31、用為透化劑及薄壁組織解離劑。亦可用5氫氧化鈉代替。 33稀氨液(氨溶液、氨水) 含氨(NH4)l0W/W,取濃氨液40ml,加蒸餾水稀釋至全量為100ml即得。34鹽酸、稀鹽酸如未指明濃度,鹽酸即指濃鹽酸,稀鹽酸指10WW鹽酸。35. 硫酸、稀硫酸 未指明濃度,硫酸即指濃硫酸稀硫酸指1 0WW硫酸。 36醋酸、稀醋酸如未指明濃度,醋酸含CH3COOH33;稀醋酸含CH3COOH4。37乙醇(酒精) 最好用無水乙醇,但未特別指明時(shí),一般可用95乙醇。 38甘油明膠取明膠(粉末或剪碎)l0g,加蒸餾水60ml,放置2小時(shí)后,加入溶有苯酚lg的甘油70ml,在水浴上加熱至完全溶解,用帶有綢布,玻璃棉或粗濾紙的漏斗保溫約60過濾。貯存在帶玻璃塞的廣口瓶中備用。用時(shí)入水浴中加熱熔化。亦可于熔化后倒人培養(yǎng)皿中,使厚度約5mm的層,冷卻凝固后,切成長約5mm的小方塊。用時(shí)用解剖針取l小塊,放在載玻片上,加熱熔化。39樹膠甘油 取白色阿拉伯膠40g,加水30ml,在水浴上加溫至溶解,加入甘油40g,麝香草酚0.lg為防腐劑,混勻即得。 40加拿大香脂 取加拿大香脂在水浴上蒸發(fā)至揮發(fā)性物質(zhì)全部除去,且放冷后能形成硬塊時(shí),加適量二甲苯或苯,使形成糖漿狀液體。 41曙紅溶液:取曙紅lg,溶于90乙醇l00ml即得。42番紅溶液 取番紅lg,溶于50乙醇100ml即得。必要時(shí)可
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