實(shí)驗(yàn)六細(xì)菌莢膜染色法PPT學(xué)習(xí)教案

1、會(huì)計(jì)學(xué)1實(shí)驗(yàn)六細(xì)菌莢膜染色法實(shí)驗(yàn)六細(xì)菌莢膜染色法第1頁/共19頁第2頁/共19頁v菌種菌種褐球固氮菌、膠質(zhì)芽孢桿菌褐球固氮菌、膠質(zhì)芽孢桿菌v試劑試劑繪圖墨水繪圖墨水1%甲基紫水溶液甲基紫水溶液6%葡萄糖水溶液葡萄糖水溶液20%硫酸銅水溶液硫酸銅水溶液甲醇甲醇香柏油香柏油二甲苯二甲苯v儀器和用具儀器和用具載玻片載玻片蓋玻片蓋玻片濾紙濾紙顯微鏡顯微鏡鏡頭紙鏡頭紙第3頁/共19頁第4頁/共19頁第5頁/共19頁1、滴繪圖墨水、滴繪圖墨水 2、制備混合液、制備混合液繪圖墨水繪圖墨水滴滴1滴繪圖墨水在載玻滴繪圖墨水在載玻片中央片中央挑取少量菌苔挑取少量菌苔與墨水混與墨水混合均勻涂布合均勻涂布第6頁/共1

2、9頁在蓋玻片上放一張濾紙，輕輕按壓吸干多余混合液在蓋玻片上放一張濾紙，輕輕按壓吸干多余混合液1、加蓋玻片、加蓋玻片將蓋玻片一端浸泡在細(xì)菌墨水混合液中緩緩蓋上蓋玻片將蓋玻片一端浸泡在細(xì)菌墨水混合液中緩緩蓋上蓋玻片2、吸去多余液體、吸去多余液體勿留氣泡勿留氣泡第7頁/共19頁1、鏡檢、鏡檢用低倍鏡高倍鏡觀察用低倍鏡高倍鏡觀察制片置顯微鏡載物臺(tái)上制片置顯微鏡載物臺(tái)上2、結(jié)果：、結(jié)果： 背景灰色，菌體較暗，菌體周圍莢膜呈現(xiàn)明亮透明圈。背景灰色，菌體較暗，菌體周圍莢膜呈現(xiàn)明亮透明圈。第8頁/共19頁第9頁/共19頁1、滴生理鹽水、滴生理鹽水 2、涂片、涂片6%葡萄糖葡萄糖在載玻片一在載玻片一端端 滴一滴

3、滴一滴6%葡萄糖水葡萄糖水挑取少量菌苔挑取少量菌苔再加一環(huán)墨水再加一環(huán)墨水,混合均勻混合均勻第10頁/共19頁1、先將推片一、先將推片一端放在混合液上端放在混合液上 2、將推片向另、將推片向另一端平行滑動(dòng)一端平行滑動(dòng) 3、使混合液、使混合液均勻鋪成薄層均勻鋪成薄層 4、干燥、干燥室溫自然晾干室溫自然晾干第11頁/共19頁甲醇固定，自然干燥甲醇固定，自然干燥 甲醇甲醇滴甲醇浸沒涂片滴甲醇浸沒涂片1分鐘分鐘傾去甲醇，室溫自然干燥傾去甲醇，室溫自然干燥注意：注意：固定及干燥均不能加熱和用熱風(fēng)吹干，因?yàn)榍v膜含水量高，加熱會(huì)使其失水變形。固定及干燥均不能加熱和用熱風(fēng)吹干，因?yàn)榍v膜含水量高，加熱會(huì)使其失水

4、變形。同時(shí)，菌體失水收縮，會(huì)與周圍染料脫離產(chǎn)生透明區(qū)，導(dǎo)致不產(chǎn)莢膜的細(xì)菌被誤認(rèn)為有莢膜。同時(shí)，菌體失水收縮，會(huì)與周圍染料脫離產(chǎn)生透明區(qū)，導(dǎo)致不產(chǎn)莢膜的細(xì)菌被誤認(rèn)為有莢膜。第12頁/共19頁1、滴甲基紫染液、滴甲基紫染液2、水洗、水洗不要直接沖菌膜不要直接沖菌膜甲基紫染液甲基紫染液甲基紫染液染色甲基紫染液染色1-2分鐘分鐘3、自然干燥、自然干燥第13頁/共19頁1、鏡檢、鏡檢用低倍鏡高倍鏡觀察用低倍鏡高倍鏡觀察制片置顯微鏡載物臺(tái)上制片置顯微鏡載物臺(tái)上2、結(jié)果：、結(jié)果： 背景灰色，菌體紫色，菌體周圍莢膜呈現(xiàn)明亮透明圈。背景灰色，菌體紫色，菌體周圍莢膜呈現(xiàn)明亮透明圈。第14頁/共19頁第15頁/共19頁生理鹽水生理鹽水 1、滴生理鹽水、滴生理鹽水 挑取少量菌苔挑取少量菌苔與生理鹽水混勻與生理鹽水混勻均勻涂布均勻涂布2、涂片、涂片滴半滴生理滴半滴生理鹽水在載玻鹽水在載玻片中央片中央 3、干燥固定、干燥固定室溫自然晾干室溫自然晾干第16頁/共19頁1%結(jié)晶紫染液結(jié)晶紫染液1、滴孔結(jié)晶紫染液、滴孔結(jié)晶紫染液滴結(jié)晶紫染滴結(jié)晶紫染色色2分鐘分鐘3、脫色、脫色20%CuSO4水溶液水溶液第17頁/共19頁1、鏡檢、鏡檢用低倍鏡高倍鏡觀察用低倍鏡高倍鏡觀察制片置顯微鏡