衛(wèi)生資格檢驗技師知識點歸納

1、衛(wèi)生資格檢驗技師知識點歸納衛(wèi)生資格檢驗技師知識點歸納熒光色素許多物質(zhì)都可產(chǎn)生熒光現(xiàn)象，但并非都可用作熒光色素。只有那 些能產(chǎn)生明顯的熒光并能作為染料使用的有機(jī)化合物才能稱為免疫 熒光色素或熒光染料。常用的熒光色素有：1. 異硫氧酸熒光素(fluoresceinisothiocyanate, FITC)為黃色或橙黃色結(jié)晶粉末，易溶于水或酒精等溶劑。分子量為389.4,最 大吸收光波長為490495nm,最大發(fā)射光波長520530nm,呈現(xiàn)明亮的黃綠色熒光，結(jié)構(gòu)式如下：有兩種同分異結(jié)構(gòu)，其中異構(gòu) 體I型在效率、穩(wěn)定性、與蛋口質(zhì)結(jié)合能力等方面都更好，在冷暗 干燥處可保存多年，是應(yīng)用最廣泛的熒光素。其

2、主要優(yōu)點是：人 眼對黃綠色較為敏感，通常切片標(biāo)本中的綠色熒光少于紅色。2. 四乙基羅丹明(rhodamine, RIB200)為橘紅色粉末,不溶于水, 易溶于酒精和丙酮。性質(zhì)穩(wěn)定，可長期保存。結(jié)構(gòu)式如下：最大吸 收光波長為570nm,最大發(fā)射光波長為595600nm,呈橘紅色熒光。3. 四甲基異硫氤酸羅丹明(tetramethylrhodamineisothiocyanate, TRITC)結(jié)構(gòu)式女口下：最大 吸引光波長為550nm,最大發(fā)射光波長為620nm,呈橙紅色熒光。與 FITC的翠綠色熒光對比鮮明，可配合用于雙重標(biāo)記或?qū)Ρ热旧?。?異硫氤基可與蛋口質(zhì)結(jié)合，但熒光效率較低。免疫熒光原理

3、免疫學(xué)的基木反應(yīng)是抗原-抗體反應(yīng)。由于抗原抗體反應(yīng)具有高 度的特異性，所以當(dāng)抗原抗體發(fā)生反應(yīng)時，只要知道其中的一個因 素，就可以查出另一個因素。免疫熒光技術(shù)就是將不影響抗原抗體 活性的熒光色素標(biāo)記在抗體（或抗原）上，與其相應(yīng)的抗原（或抗體） 結(jié)合后，在熒光顯微鏡下呈現(xiàn)一種特異性熒光反應(yīng)。直接法：將標(biāo)記的特異性熒光抗體，直接加在抗原標(biāo)本上，經(jīng)一 定的溫度和時間的染色，用水洗去未參加反應(yīng)的多余熒光抗體，室 溫下干燥后封片、鏡檢。間接法：如檢查未知抗原，先用己知未標(biāo)記的特異抗體（第一抗 體）與抗原標(biāo)本進(jìn)行反應(yīng)，用水洗去未反應(yīng)的抗體，再用標(biāo)記的抗抗 體（第二抗體）與抗原標(biāo)本反應(yīng)，使之形成抗原一抗體一抗

4、體復(fù)合物, 再用水洗去未反應(yīng)的標(biāo)記抗體，干燥、封片后鏡檢。如果檢查未知 抗體，則表明抗原標(biāo)木是己知的，待檢血清為第一抗體，其它步驟 的抗原檢查相同。標(biāo)記的抗抗體是抗球蛋口抗體，同于血清球蛋白有種的特異性， 如免疫抗雞血清球蛋口只對雞的球蛋白發(fā)生反應(yīng)，因此，制備標(biāo)記 抗體適用于雞任何抗原的診斷。免疫熒光技術(shù)特點該技術(shù)的主要特點是：特異性強(qiáng)、敏感性高、速度快。主要缺點 是：非特異性染色問題尚未完全解決，結(jié)果判定的客觀性不足，技 術(shù)程序也還比較復(fù)雜。熒光免疫法按反應(yīng)體系及定量方法不同，還可進(jìn)一步分做若干種。 與放射免疫法相比，熒光免疫法無放射性污染，并且大多操作簡便, 便于推廣。國外生產(chǎn)的TDM用試

5、劑盒，有相當(dāng)一部分即屬于此類， 并且還有專供TDM熒光偏振免疫分析用的自動分析儀生產(chǎn)。由于一般熒光測定中的本底較高等問題，熒光免疫技術(shù)用于定量 測定有一定困難。新發(fā)展了幾種特殊的熒光免疫測定，與酶免疫測 定和放射免疫分析一樣，在臨床檢驗中應(yīng)用。脫水病案分析女性，62歲，因進(jìn)食即嘔吐10天而入院。近20天尿少色深， 明顯消瘦，臥床不起。體檢：發(fā)育正常，營養(yǎng)差，精神恍惚，嗜睡，皮膚干燥松弛，眼 窩深陷;呈重度脫水征。呼吸17次/min,血壓16/9. 3kPa,診斷為 幽門梗阻。血球分析：MCV72fL、HCTO. 56L/L,其余正常。血液生化檢驗：血糖5. Ommol/Ls尿素7. 6mmol

6、/L,K+3. 61mmol/L> Na+158mmol/L> Cl-90mmol/L> pH7. 50、 PC027. 92kPa、PC026. 7kPa> BE+8. 0/mmol/L. HC03-45mmol/L、 AG26. 4mmol/L.病案分析患者系慢性十二指腸球部潰瘍所致的幽門梗阻。嘔吐未及一周， 即出現(xiàn)嚴(yán)重的缺鹽性脫水和低血氨性堿中毒?；颊呤怯拈T梗阻，頻 繁嘔吐，丟失胃液并喪失胃酸，十二指腸液的HC03-得不到中和即 被吸收入血，使血中HC03-量增加，造成代謝性堿中毒，又因血pH 值高出正常范圍，因此可以診斷為失代償型代謝性堿中毒。由于長 時間不能進(jìn)

7、食進(jìn)水，還有胃液的丟失，從而導(dǎo)致嚴(yán)重脫水。血滲量 摩爾高于正常，呈高滲性脫水，進(jìn)一步使細(xì)胞脫水（MCV變小），尤 其是腦細(xì)胞脫水，從而出現(xiàn)精神癥狀。低血糖如何預(yù)防 按時進(jìn)食，生活規(guī)律。 不可隨便增加藥量。 每次用胰島素均應(yīng)仔細(xì)核對劑量。 運動量恒定。 常測血糖。 隨身帶糖果以備用。氯的'測定之滴定法(1) Molrr法：以K2CrO4為指示劑，用AgN03滴定血清中Cl-, 以過量的Ag+與Cr042-結(jié)合出現(xiàn)Ag2CrO4紅色沉淀為終點，根據(jù) AgN03消耗量計算出標(biāo)本中Cl-的量。(2) Sehales法:以二苯卡巴腺作指示劑，用Hg(N03)2滴定血清 中C1-,以過量的血2+與

8、二苯卡巴腺結(jié)合成不溶的紫藍(lán)色化合物為 終點，根據(jù)Hg(N03) 2消耗量計算血清Cl-的量。滴定法需要熟練的操作，終點要準(zhǔn)確，盡可能排除主觀因素的干 擾，否則誤差很大。血清中過多的膽紅素。血脂及血紅蛋白(溶血) 對結(jié)果干擾很大。滴定法有淘汰的趨勢。磷的四種生理功能1 血中磷酸鹽(HPO42-/H2PO4-)是血液緩沖體系的重要組成成分。2.細(xì)胞內(nèi)的磷酸鹽參與許多酶促反應(yīng)如磷酸基轉(zhuǎn)移反應(yīng)、加磷酸 分解反應(yīng)等。3構(gòu)成核tf酸輔酶類(如NAD+、NADP+、FMX、FAD、CoA等)和含 磷酸根的輔酶(如TPP、磷酸毗哆醛等)，還構(gòu)成多種重要的核球酸 (如 ATP、GTP、UTP、CTP、cAMP、

9、cGMP 等)。4細(xì)胞膜磷脂在構(gòu)成生物膜結(jié)構(gòu)、維持膜的功能以及代謝調(diào)控上 均發(fā)揮重要作用。酶蛋口及多種功能性蛋白質(zhì)的磷酸與脫磷酸化則 是代謝調(diào)節(jié)中化學(xué)修飾調(diào)節(jié)的最為普遍、最為重要的調(diào)節(jié)方式，與 細(xì)胞的分化、增殖的調(diào)控有密切的關(guān)系?？崭寡?GLU)是指在隔夜空腹(至少810小時未進(jìn)任何食物，飲水除外)后， 早餐前采的血，所檢定的血糖值，為糖尿病最常用的檢測指標(biāo)，反 應(yīng)胰島B細(xì)胞功能，一般代表基礎(chǔ)胰島素的分泌功能。白細(xì)胞計數(shù)知識總結(jié)一、檢測原理白細(xì)胞計數(shù)是測定單位體積血液中各種白細(xì)胞總數(shù)。包括顯微鏡 計數(shù)法和血液分析儀計數(shù)法。二、方法學(xué)評價1、顯微鏡計數(shù)法：簡便易行、不需昂貴儀器，但重復(fù)性和準(zhǔn)確

10、性較差，受微量吸管、 血細(xì)胞計數(shù)板、細(xì)胞分布、人為因素等多種情況影響。2、血液分析儀計數(shù)法：計數(shù)細(xì)胞數(shù)量多、速度快、易于標(biāo)準(zhǔn)化、計數(shù)精確性較高，適合 大規(guī)模人群健康篩查，但需特殊儀器。某些人為因素(如抗凝不充 分)、病理情況(如出現(xiàn)有核紅細(xì)胞、巨大血小板、血小板凝集等)可 干擾口細(xì)胞計數(shù)。使用前須按NCCLS規(guī)定方法對儀器進(jìn)行校準(zhǔn)，且 須認(rèn)真堅持日常質(zhì)控工作。三、參考值血細(xì)胞自動計數(shù)儀、顯微鏡計數(shù)法：成人：(4.010. 0) X 109/L (4000-10000/mm3).新生兒：(15. 0-20. 0) X 109/L 仃500020000/mm3).嬰兒：(15. 020. 0) X

11、 109/L.兒童：(5.012. 0) X 109/L.四、臨床意義1. 生理變化(1)年齡：新生兒計數(shù)較高，可達(dá)(153O)X1(T9/L,通常在 34d降至10X10"9/L. (2)日間變化：一般安靜松弛時白細(xì)胞較低, 活動和進(jìn)食后較高;早晨較低，下午較高，一日之內(nèi)可相差1倍。(3) 運動、疼痛和情緒影響：劇烈運動、劇痛、極度恐懼等均可 使白細(xì)胞短時升高。(4) 妊娠與分娩：妊娠期特別是最后1個月白細(xì)胞升高，分娩時 可達(dá)34X107/L,產(chǎn)后25d恢復(fù)正常；女性絕經(jīng)期、月經(jīng)期則可 降低。(5) 飲酒、大量吸煙、冷浴亦可升高由于生理因素，同一檢測對 象白細(xì)胞計數(shù)甚至可波動50%.2. 病理變化(1) 升高： 各種球菌引起的急性感染及化膿性炎癥：中耳炎、扁桃體炎、 闌尾炎、膿腫等； 全身感染：肺炎、敗血癥、猩紅熱等； 中毒：尿毒癥、糖尿病酸中毒、汞中毒、鉛中毒； 急性出血、急性溶血、手術(shù)后； 惡性腫瘤、粒細(xì)胞血液病等； 類口血病反應(yīng)。白細(xì)胞在2