艾滋病實(shí)驗(yàn)室檢查

1、整理課件1艾滋病艾滋病 (AIDS)整理課件2實(shí)實(shí) 驗(yàn)驗(yàn) 室室 檢檢 查查整理課件3免疫學(xué)檢測(cè)免疫學(xué)檢測(cè)R2M1整理課件4血清學(xué)檢測(cè)血清學(xué)檢測(cè)（）（）ELISA（酶聯(lián)免（酶聯(lián)免疫試驗(yàn)）疫試驗(yàn)）整理課件5血清學(xué)檢測(cè)血清學(xué)檢測(cè)（）（）Western blot （免疫印跡（免疫印跡試驗(yàn)）試驗(yàn)）整理課件6血清學(xué)檢測(cè)（）血清學(xué)檢測(cè)（）ELISA夾心法夾心法測(cè)定測(cè)定p24p24抗原抗原敏感性很高（敏感性很高（7 710 pg/ml10 pg/ml）特異性稍差（可有假陽性特異性稍差（可有假陽性）整理課件7RT-PCR（逆轉(zhuǎn)錄（逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)）聚合酶鏈反應(yīng)） 核酸定量技術(shù)原理PCRPCR：高溫變性：高溫

2、變性(94)(94)低溫退火低溫退火(55)(55)適溫延伸適溫延伸(72)(72)；經(jīng)；經(jīng)25302530個(gè)循環(huán)，成倍數(shù)擴(kuò)增個(gè)循環(huán)，成倍數(shù)擴(kuò)增熒光定量熒光定量PCRPCR：比常規(guī)：比常規(guī)PCRPCR多一個(gè)寡聚多一個(gè)寡聚核苷酸探針（帶一個(gè)熒光發(fā)光分子核苷酸探針（帶一個(gè)熒光發(fā)光分子和一個(gè)熒光淬滅分子）和一個(gè)熒光淬滅分子）應(yīng)用：應(yīng)用：PCRPCR查查PBMCsPBMCs前病毒前病毒DNADNA；RT-PCRRT-PCR查血漿中的病毒查血漿中的病毒RNARNA整理課件8淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞HIV RNA檢測(cè)檢測(cè)Northern印跡雜交印跡雜交( (Northern blot) 原理：原理： RNARNA

3、片段經(jīng)電泳分片段經(jīng)電泳分離，從凝膠中轉(zhuǎn)移到硝酸離，從凝膠中轉(zhuǎn)移到硝酸纖維素濾膜，再用探針雜纖維素濾膜，再用探針雜交交整理課件9Sanger測(cè)序法測(cè)序法 原理：核酸擴(kuò)增時(shí)，核苷酸在原理：核酸擴(kuò)增時(shí)，核苷酸在某一固定點(diǎn)開始，隨機(jī)在某一某一固定點(diǎn)開始，隨機(jī)在某一特定的堿基處終止，產(chǎn)生特定的堿基處終止，產(chǎn)生A A、T T、C C、G G四組不同長度的一系列核四組不同長度的一系列核苷酸，通過在尿素變性的苷酸，通過在尿素變性的PAGEPAGE膠上電泳，獲得膠上電泳，獲得DNADNA序列序列整理課件10l血漿、單核細(xì)胞、腦脊液可分離出血漿、單核細(xì)胞、腦脊液可分離出HIVl操作復(fù)雜，主要用于科研操作復(fù)雜，主要

4、用于科研整理課件11診診 斷斷整理課件12流行病學(xué)史流行病學(xué)史：有靜脈注射毒品史；多個(gè)性伴和不潔性生活有靜脈注射毒品史；多個(gè)性伴和不潔性生活史；輸入未經(jīng)史；輸入未經(jīng)HIV抗體檢測(cè)的血液和血制品史；抗體檢測(cè)的血液和血制品史；HIV抗體陽抗體陽性所生的子女；其它（如職業(yè)暴露或醫(yī)源性感染史）。性所生的子女；其它（如職業(yè)暴露或醫(yī)源性感染史）。臨床表現(xiàn)：臨床表現(xiàn)： 高危對(duì)象出現(xiàn)上感樣及單核細(xì)胞增多癥樣表現(xiàn)，高危對(duì)象出現(xiàn)上感樣及單核細(xì)胞增多癥樣表現(xiàn)， 頸、腋及頸、腋及枕部淋巴結(jié)腫大，肝脾腫大，可考慮急性枕部淋巴結(jié)腫大，肝脾腫大，可考慮急性HIV感染。感染。 無癥狀期、艾滋病期臨床表現(xiàn)。無癥狀期、艾滋病期臨

5、床表現(xiàn)。 實(shí)驗(yàn)室檢查實(shí)驗(yàn)室檢查：HIV抗體陽性，并經(jīng)確證試驗(yàn)確認(rèn)?？贵w陽性，并經(jīng)確證試驗(yàn)確認(rèn)。CD4+T淋巴細(xì)胞數(shù)明顯減少。淋巴細(xì)胞數(shù)明顯減少。HIV RNA和和P24抗原的檢抗原的檢測(cè)有助于早期診斷新生兒的測(cè)有助于早期診斷新生兒的HIV感染。感染。整理課件13l急性期急性期 流行病學(xué)史、臨床表現(xiàn)、流行病學(xué)史、臨床表現(xiàn)、HIV抗體由陰性轉(zhuǎn)為陽抗體由陰性轉(zhuǎn)為陽性性 僅實(shí)驗(yàn)室檢查僅實(shí)驗(yàn)室檢查HIV抗體由陰性轉(zhuǎn)為陽性抗體由陰性轉(zhuǎn)為陽性l無癥狀期無癥狀期 流行病學(xué)史、流行病學(xué)史、HIV抗體陽性抗體陽性 僅實(shí)驗(yàn)室檢查僅實(shí)驗(yàn)室檢查HIV抗體陽性抗體陽性 整理課件14l艾滋病期艾滋病期 流行病學(xué)史，流行病學(xué)

6、史，HIV抗體陽性，臨床表現(xiàn)有下列抗體陽性，臨床表現(xiàn)有下列一項(xiàng)或以上一項(xiàng)或以上反復(fù)發(fā)生、難治性肺部感染或進(jìn)展迅速的活動(dòng)性反復(fù)發(fā)生、難治性肺部感染或進(jìn)展迅速的活動(dòng)性結(jié)核病；結(jié)核病；14.14.中樞神經(jīng)系統(tǒng)受損、占位性病變或中、中樞神經(jīng)系統(tǒng)受損、占位性病變或中、青年癡呆癥；青年癡呆癥；15.15.卡波西肉瘤或淋巴瘤。卡波西肉瘤或淋巴瘤。整理課件15 HIV抗體陽性抗體陽性 CD4+T淋巴細(xì)胞數(shù)淋巴細(xì)胞數(shù)200/mm200/mm3 3 無上述表現(xiàn)或癥狀無上述表現(xiàn)或癥狀整理課件16l原發(fā)性原發(fā)性CD4+淋巴細(xì)胞減少癥淋巴細(xì)胞減少癥 無HIV感染流行病學(xué)資料，HIV-1和HIV-2病原學(xué)檢測(cè)陰性。l繼發(fā)

7、性繼發(fā)性CD4+淋巴細(xì)胞減少淋巴細(xì)胞減少 腫瘤和自生免疫性疾?。╝utoimmune disease）化療或免疫抑制治療后。整理課件17預(yù)預(yù) 后后整理課件18感染的感染的HIV型別及亞型：型別及亞型： HIV-1較較HIV-2臨床進(jìn)展快臨床進(jìn)展快并發(fā)的機(jī)會(huì)性感染：并發(fā)的機(jī)會(huì)性感染： 同時(shí)合并卡波濟(jì)肉瘤及肺孢菌肺炎者病死率最高；同時(shí)合并卡波濟(jì)肉瘤及肺孢菌肺炎者病死率最高；合并丙型肝炎者預(yù)后差合并丙型肝炎者預(yù)后差抗逆轉(zhuǎn)錄病毒治療：抗逆轉(zhuǎn)錄病毒治療： 治療改變了艾滋病進(jìn)程治療改變了艾滋病進(jìn)程 整理課件19典型典型 (70%80%)：5 51010年進(jìn)展為艾滋病年進(jìn)展為艾滋病快速進(jìn)展型快速進(jìn)展型(10%15%)：2 2