酒石酸法茶多酚含量測(cè)定報(bào)告(共3頁(yè))

1、精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上茶多酚的含量測(cè)定實(shí)驗(yàn)組員：趙龍飛 趙奇慧 劉芳 陳小麗一、實(shí)驗(yàn)原理茶多酚能溶于水、乙醇、甲醇、丙酮、乙酸乙酯，微溶于油脂。對(duì)熱、酸較穩(wěn)定，在堿性條件下易氧化變質(zhì)。酒石酸鐵能與茶多酚生成紫褐色絡(luò)合物，絡(luò)合物溶液顏色的深淺與茶多酚的含量成正比，絡(luò)合物在540nm處有最佳吸收。因此可以用比色方法測(cè)定。二、儀器與試劑儀器：分光光度計(jì)、天平、1ml移液槍、100ml容量瓶*6、100ml量筒、100ml燒杯*310ml EP管試劑：(1)FeSO47H2O 1.000g，含4個(gè)結(jié)晶水的酒石酸鉀鈉5.000g(2) Na2HPO412H2O 6.02g ，NaH2PO42H2O

2、0.50g(3)兒茶素標(biāo)準(zhǔn)品 10mg三、操作步驟（1）酒石酸鉀鐵溶液：稱取FeSO47H2O 0.100g，含4個(gè)結(jié)晶水的酒石酸鉀鈉0.500g，加蒸餾水溶解后，用蒸餾水稀釋至100mL。 （2）pH7.5的磷酸緩沖液：6.020g Na2HPO412H2O ，0.500g NaH2PO42H2O，加蒸餾水溶解后，用蒸餾水稀釋至100mL。 (3) 兒茶素標(biāo)準(zhǔn)液：稱取10mg兒茶素，用蒸餾水定容至10ml，濃度為1000g/ml。分別稀釋到200、400、600、800g/ml，得5個(gè)濃度標(biāo)準(zhǔn)品溶液。 (4) 標(biāo)準(zhǔn)曲線：分別吸取1ml標(biāo)準(zhǔn)液，磷酸緩沖液3ml，酒石酸鉀鐵1ml混勻，3000轉(zhuǎn)

3、離心10min。吸取上清液3ml加入玻璃比色皿，用分光光度計(jì)測(cè)定540nm處的OD值三次求平均值，并繪制濃度-OD標(biāo)準(zhǔn)曲線。以蒸餾水代替標(biāo)準(zhǔn)品溶液加入同樣的試劑作空白對(duì)照。 (5) 取提取物10mg，用蒸餾水定容至10ml。取1ml，按上述同樣方法測(cè)定540nm處的OD值3次求平均值。以蒸餾水代替樣品溶液加入同樣的試劑作空白對(duì)照。4、 計(jì)算茶多酚含量 W=C/1000×100%C ： 所測(cè)吸光度帶入標(biāo)準(zhǔn)曲線得到樣品中茶多酚濃度 g/ml1000： 樣品濃度 g/ml5、 實(shí)驗(yàn)結(jié)果樣品吸光度濃度含量（%）123平均有機(jī)溶劑萃取法0.450.4490.450.402.40.26%金屬離子

4、沉淀法0.4490.4490.4490.449402.0701540.21%打孔樹(shù)脂30%醇洗脫0.5250.5260.5250.466.46.62%打孔樹(shù)脂50%醇洗脫0.3490.3490.3480.317.31.78%打孔樹(shù)脂80%醇洗脫0.1110.1110.1110.111118.0318511.80%6、 實(shí)驗(yàn)分析由實(shí)驗(yàn)結(jié)果看出，30%的乙醇提取大孔樹(shù)脂法提取的茶多酚的含量是最高的，而其余的溶劑提取法、金屬離子沉淀法，都相對(duì)較低。本實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)不能代表各個(gè)提取分離方法的絕對(duì)優(yōu)略，要視各組在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的實(shí)際操作是否規(guī)準(zhǔn)確。實(shí)驗(yàn)中存在以下問(wèn)題：1、 標(biāo)準(zhǔn)品溶液濃度過(guò)低，吸光值存在負(fù)數(shù)，儀器不夠精密，無(wú)法準(zhǔn)確測(cè)出對(duì)應(yīng)的OD值。最后修改方案，濃度提高了20倍。2、 樣品測(cè)定時(shí)，同樣濃度，吸光度卻高于標(biāo)準(zhǔn)品，也就是含量超過(guò)100%。經(jīng)過(guò)各個(gè)環(huán)節(jié)問(wèn)題排除