動物病原學：寄生蟲病實驗四

1、實驗四 雞球蟲的藥物驅(qū)蟲試驗一、內(nèi)容1. 雞球蟲的人工感染2. 藥物驅(qū)蟲效果的評價二、參考資料1、試驗準奮工作選用 20 日齡左右的健康公雛。 在試驗用雛出殼后就應加強飼養(yǎng)管理， 防止雛雞自然感 染球蟲。試驗場地、 飼養(yǎng)籠具要做好消毒和殺滅卵囊工作，工作人員進出亦應嚴格消毒，防 止人為地傳播卵囊。供試雞使用前應絕對禁用含有抗球蟲活性藥物的飼料，直至試驗結束。 2、試驗雞分組試驗開始時，分別稱量雛雞的個體重，其差別應在 5-8g 以內(nèi)，盡量挑選體重接近的， 以 10 只（或多一些）為一組， 每組總體重應基本一致。 根據(jù)試驗藥物的多少及試驗劑量要 求分別設若干個給藥組，一個感染不給藥組（感染對照組

2、） 、一個不感染不給藥組（空白對 照組），每個試驗組的雛雞分別單獨飼養(yǎng)在清潔的籠內(nèi)，墊好糞板，并做好標記。3、投藥方法將試驗藥物按規(guī)定劑量或試驗設計劑量混入飼料或溶于飲水中。 混藥的飼料應了解配方 及硫胺素含量， 以防影響藥物的作用。 為將微量藥物均勻地混入飼料， 應采取逐漸擴大混合 的方法。 飼喂混藥飼料一般是在人工接種前一天或在人工接種時同時喂給。 混藥飼料的需要 量一般 10 只雛雞 8 天試驗期約為 2-2.5 公斤。各種混藥飼料及試驗藥物應分別做好標記。4、人工接種柔嫩艾美耳球蟲卵囊易于純分離， 且致病力最強， 故一般抗球蟲藥藥效試驗的人工接種 均用柔嫩艾美耳球蟲卵囊。 也有為了更接

3、近于臨床實際而采用混合卵囊的。 取保存?zhèn)溆玫挠?感染能力的抱子化卵囊， 離心去掉重鉻酸鉀液，然后加水稀釋，進行卵囊計數(shù)。試驗組每只 雛雞接種量為 5 萬個卵囊， 以 0.2-0.5 ml 為宜， 一般在給飼前用吸管經(jīng)過口腔將卵囊液注入 嗦嚷。 人工接種的成功與否關系到試驗的成敗， 接種量大了， 能使感染不給藥組全部發(fā)病死 亡，感染量小了，發(fā)病輕，癥狀不明顯，不能代表實際情況。因而，一般以人工感染后不給 藥組發(fā)病死亡率 60-70 %為宜。人工接種前應檢查試驗雛雞有否自然感染球蟲，若發(fā)現(xiàn)已有球蟲感染，則該批雛雞不能作藥效試驗用。5、試驗觀察及處理 試驗期前后應做好詳細記錄，作為藥效試驗的原始資料

4、。試驗期為 8 天，以人工接種當天為第 0 天，以后每天觀察試驗雛雞數(shù)次，記錄精神、食欲、糞便等狀況，根據(jù)不同試 驗組別分別給足相應的飼料和飲水。第 3 天開始檢查糞便，每天數(shù)次，記錄各試驗組血糞 堆數(shù)（僅有血絲不算） ，直至第 8 天撲殺剖檢為止。對人工接種第 3 天后死亡的雛雞應逐 只進行稱重、剖檢，查明死因，并做好詳細記錄。若腸粘膜刮取物鏡檢發(fā)現(xiàn)裂殖體（子） 、 配子體、卵囊應判為球蟲病死亡。第 5 天開始收集每組試驗雞的糞便，集中分別檢查出每 組雛雞排出的卵囊總數(shù)。收集糞便和檢查時應特別注意防止各試驗組互相混雜。第 8 天將 各試驗組雛雞分別進行撲殺剖檢， 一般先撲殺不感染不給藥組，

5、然后為給藥組， 最后是感染 不給藥組。剖檢器具要分開，每組一套。剖檢前逐只稱重，剖檢后重點檢查盲腸病變，根據(jù) 病變標準進行評分。然后將盲腸按試驗組進行消化（消化液配方為：濃鹽酸 0.7ml 、胃蛋白 酶0.5-1g、蒸餾水100 ml）或制成勻漿，來計數(shù)盲腸卵囊數(shù)。 試驗期間一定要加強飼養(yǎng)管理，保證不感染不給藥組（空白對照組）不被球蟲自然感染，否則試驗即告失敗。6、藥效判定方法及依據(jù)以"抗球蟲指數(shù)（ ACI ）來判定藥物效力計算方法為：ACI=（相對增重率得分+存活率得分）一（病變扣分+卵囊扣分+血糞扣分）（1 ）相對增重率得分 以不感染不給藥組在試驗期間每雞的平均增重為100%，算

6、出其它各組每雞的平均增重百分率，即相對增重率，相對增重率x100即為相對增重率得分。（2） 存活率得分 以不感染不給藥組的存活率為100%，算出其它各組試驗雞存活率， 存活率x100即為存活率得分。（3） 血糞扣分分別對各組試驗雞生前最嚴重的一天血糞進行記分，該天每雞平均血糞 堆數(shù)在1-3.9堆，則分別記1-3.9分，如平均3. 5堆即記3.5分，依次類推。 4堆及其以上 的計4分，一直無血糞的記 0分。血糞記分x5即為該組血糞扣分數(shù)。（4） 病變扣分 以各試驗組平均每只雛雞的病變記分x5，即為該組病變扣分數(shù)。病變記分標準：A、 無卵囊。盲腸正常。記0分B、 有卵囊。盲腸粘膜稍增厚，有少量散在

7、性出血或少量腸芯。記1分。C、 有卵囊。盲腸壁增厚，有明顯的血液或血樣腸內(nèi)容物。記2分。D、 有卵囊。盲腸粘膜增厚，有大量的血凝塊或明顯的血樣腸芯。記3分。E、 死亡。外觀盲腸呈醬色，明顯腫大。有卵囊，內(nèi)容物血樣。記4分。（5）卵囊扣分把剖檢后消化的盲腸勻漿內(nèi)卵囊數(shù)與該組第5-8天糞中卵囊數(shù)相加，分別求出每組每雞的平均卵囊數(shù)，按下列標準扣分。7、藥效的判定標準每雞平均卵囊數(shù)（106）該組卵囊扣分0-0.100.1-1.01>1.0205>2.0-5.010>5.0-6.015>6.0-10.020>10.0-11.030>11.040抗球蟲指數(shù)（ACI ）在120以下，不宜用作抗球蟲藥；在 160以下為控制球蟲感染不滿 意，在160-180之間只有中等的控制球蟲感染作用，在180以上時控制球蟲感染滿意，用作抗球蟲藥藥效好。分組雞 只 編 號0天0-7天3-6天7天雞 只 稱 重1人工感 染：50000 個柔嫩艾 美爾球蟲 孢子化卵 囊觀察死亡 情況，雞 的臨床表 現(xiàn)，死亡 雞剖檢每 組 血 糞 堆 數(shù)每 雞 血 糞 堆 數(shù)血 糞 記 分血 糞 扣 分每 組 糞 便 總 重每 克 糞 便 卵 囊每 組 卵 囊 總 數(shù)雞 只 稱