血凝和血凝抑制PPT學(xué)習(xí)教案

1、會(huì)計(jì)學(xué)1第1頁(yè)/共19頁(yè)第2頁(yè)/共19頁(yè)第3頁(yè)/共19頁(yè)第4頁(yè)/共19頁(yè)第5頁(yè)/共19頁(yè)第6頁(yè)/共19頁(yè)第7頁(yè)/共19頁(yè)實(shí)驗(yàn)材料實(shí)驗(yàn)材料器材：96孔V型微量反應(yīng)板、微量移液器、槍頭試劑：1%雞紅細(xì)胞(采集健康雞血液，以阿氏液抗凝， 用PBS洗滌3-5次，用PBS配成1%紅細(xì)胞懸液備 用)。 試驗(yàn)抗原、PBS緩沖液第8頁(yè)/共19頁(yè)血凝實(shí)驗(yàn)步驟血凝實(shí)驗(yàn)步驟1.取96孔V型反應(yīng)板1塊置于水平實(shí)驗(yàn)臺(tái)上，在第1排 1-10孔內(nèi)加入25ulPBS緩沖液，第11孔不加。第12孔 加25ulPBS緩沖液2.在第1孔內(nèi)加入血凝素25ul，混勻后吸出25ul加入第 2孔內(nèi)，再混勻后吸出25ul加入第3孔內(nèi)，依次類

2、推 至第10孔時(shí)棄掉25ul。第12孔不加作陰性對(duì)照孔。3.在1-12孔均加入25ul的生理鹽水。4.在每孔內(nèi)加入25ul1%的雞紅細(xì)胞懸液，震蕩，室溫靜止感 作15-30min，每5min觀察一次結(jié)果。5.計(jì)算血凝效價(jià)，稀釋使成為四價(jià)備用第9頁(yè)/共19頁(yè)結(jié)果判定結(jié)果判定1.在各組對(duì)照均正確的情況下，按下列標(biāo)準(zhǔn)判定 血凝反應(yīng)強(qiáng)度示意圖“4” 紅細(xì)胞呈片狀凝集，均勻布滿孔底，邊緣有時(shí)不整齊或皺縮?！?” 紅細(xì)胞呈片狀凝集，但面積略小于“4+”。“2” 紅細(xì)胞呈片狀凝集，但有少許沉積孔底中部呈小圓點(diǎn)狀?！啊?紅細(xì)胞大部分沉于孔底中央，周圍有少量散在凝集顆粒?！啊?紅細(xì)胞均沉于孔底呈小圓點(diǎn)狀，邊緣整

3、齊。2.對(duì)照孔正常的情況下，紅細(xì)胞凝集100%的稀釋度為判定血凝價(jià)的終點(diǎn)。凡能使雞紅細(xì)胞完全凝集的病毒最高稀釋倍數(shù)為病毒的凝集價(jià)。第10頁(yè)/共19頁(yè)第11頁(yè)/共19頁(yè)血凝抑制試驗(yàn)步驟血凝抑制試驗(yàn)步驟1.取96孔V型反應(yīng)板1塊置于水平實(shí)驗(yàn)臺(tái)上， 在第1排1-10孔內(nèi)加入25ul PBS緩沖液，第11孔不加。第12孔加25ul PBS緩沖液。2.在第1孔內(nèi)加入被檢血清25ul，混勻后吸出25ul加入第2孔內(nèi)，再混勻后吸出25ul加入第3孔內(nèi)，依次類推至第10孔時(shí)棄掉25ul。第12孔不加作陰性對(duì)照孔。3.在1-12孔內(nèi)均加入“四價(jià)”血凝素25ul，震蕩后，室溫靜止作用40min。4.在1-12 孔

4、內(nèi)均加入1%的雞紅細(xì)胞懸液25ul，震蕩，室溫30min。5.觀測(cè)結(jié)果，記錄實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)第12頁(yè)/共19頁(yè)第13頁(yè)/共19頁(yè)第14頁(yè)/共19頁(yè)第15頁(yè)/共19頁(yè)第16頁(yè)/共19頁(yè)第17頁(yè)/共19頁(yè)孔號(hào)1 2 3 4 5 6 7 8 9 1011(+)12（-)HA稀釋度248163264128256、棄PBS25252525252525252525x25血凝素2525252525252525252525血凝素xPBS2525252525252525252525251%雞紅細(xì)胞252525252525252525252525結(jié)果預(yù)測(cè)+-+_孔號(hào)1 2 3 4 5 6 7 8 9 1011(+)12（-)HI稀釋度248163264128256、棄PBS25252525252525252525X25待檢血清2525252525252525252525x4HA血凝素252525