PCR實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)說(shuō)明書_第1頁(yè)
PCR實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)說(shuō)明書_第2頁(yè)
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1、PCR實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)說(shuō)明PCR實(shí)驗(yàn)室分為四個(gè)區(qū)域,進(jìn)入各工作區(qū)域必須嚴(yán)格按照單一方向進(jìn)行,不同的工作區(qū)域使用不同的工作服(例如不同的顏色)。工作人員離開(kāi)各工作區(qū)域時(shí),不得將工作服帶出,四區(qū)域分別為:1試劑配制區(qū)n2.樣品處理區(qū)n3.核酸擴(kuò)增區(qū)n4.產(chǎn)物分析區(qū)n如使用全自動(dòng)分析儀,區(qū)域可適當(dāng)合并,三四區(qū)可合并為擴(kuò)增產(chǎn)物分析。各區(qū)的功能是:1.1.1試劑準(zhǔn)備區(qū):擴(kuò)增試劑的配制、分裝和保存。1.1.2樣品處理區(qū):樣品登記、分裝;核酸提取、保存和加樣。1.1.3擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū):擴(kuò)增產(chǎn)物的測(cè)定、結(jié)果分析、登記及報(bào)告。1.2擴(kuò)增前區(qū)與擴(kuò)增后區(qū)應(yīng)嚴(yán)格分開(kāi),須使用不同的房間,兩區(qū)之間最好有一定的間隔。1.3使用商

2、品化試劑盒可在樣品處理區(qū)進(jìn)行少量試劑配制。1.4在滿足下列操作和清潔處理要求的前提下樣品處理區(qū)和試劑準(zhǔn)備區(qū)可設(shè)在同一房間內(nèi):1.4.1在生物安全柜內(nèi)操作。1.4.2每個(gè)實(shí)驗(yàn)人員、實(shí)驗(yàn)組分別使用各自的試劑及耗材。1.4.3盛放污染材料的器皿密封并一次性使用。1.4.4用有效的方法對(duì)操作區(qū)域和共享器具在實(shí)驗(yàn)前后進(jìn)行清潔及消毒。設(shè)計(jì)要求:PCR實(shí)驗(yàn)室可以是分散形式,也可以是組合形式,現(xiàn)要主要是以組合形式為主流。完成一組PCR實(shí)驗(yàn),通常應(yīng)經(jīng)過(guò)試劑配制、樣品處理、核酸擴(kuò)增及產(chǎn)物分析四個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程,若實(shí)驗(yàn)工藝需要,還應(yīng)增加樣品粉碎過(guò)程。一、分散形式PCR實(shí)驗(yàn)室所謂分散形式PCR實(shí)驗(yàn)室,是指完成上述實(shí)驗(yàn)過(guò)程的

3、實(shí)驗(yàn)用房彼此相距較遠(yuǎn),呈分散布置形式。對(duì)于這種布置形式的PCR實(shí)驗(yàn)室,由于各個(gè)實(shí)驗(yàn)之間不易相互干擾,因此無(wú)需特殊條件要求。二、組合形式PCR實(shí)驗(yàn)室所謂組合形式PCR實(shí)驗(yàn)室,是指完成PCR四個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程的實(shí)驗(yàn)用房相鄰布置,組成獨(dú)立實(shí)驗(yàn)區(qū)域的形式。對(duì)于組合形式PCR實(shí)驗(yàn)室,由于各個(gè)實(shí)驗(yàn)間集中布置,容易造成相互干擾,因此,對(duì)總體布局以及屏障系統(tǒng)具有一定的要求。各室在入口處設(shè)緩沖間,以減少室內(nèi)外空氣交換。試劑配制室及樣品處理室宜呈微正壓,以防外界含核酸氣溶膠的空氣進(jìn)入,造成污染進(jìn)風(fēng)風(fēng)量大于排風(fēng)風(fēng)量達(dá)到正壓效果。核酸擴(kuò)增室及產(chǎn)物分析室應(yīng)呈微負(fù)壓,以防含核酸的氣溶膠擴(kuò)散出去污染試劑與樣品,可以通過(guò)控制排風(fēng)風(fēng)

4、量大于進(jìn)風(fēng)風(fēng)量達(dá)到負(fù)壓效果。在理想情況下,PCR實(shí)驗(yàn)室緩沖間內(nèi),可設(shè)置正壓,使室內(nèi)空氣不流向室外,室外空氣不流向室內(nèi)。PCR實(shí)驗(yàn)室進(jìn)風(fēng)由原有中央空調(diào)控制,要求將中央空調(diào)風(fēng)口安裝到指定定點(diǎn),且高度為地面鋪裝好后2600mm處。如果使用熒光PCR儀,擴(kuò)增室和產(chǎn)物分析室可以合并。若房間進(jìn)深允許,可設(shè)PCR內(nèi)部專用走廊。需要指出的是在減少室內(nèi)外空氣交換方面,緩沖間比專用走廊更有意義。各個(gè)區(qū)域之間應(yīng)具備單向的實(shí)驗(yàn)工藝流、物流、人流與氣流,形成單向流程的保護(hù)屏障,避免實(shí)驗(yàn)之間的相互干擾,防止核酸氣溶膠對(duì)實(shí)驗(yàn)過(guò)程造成污染產(chǎn)生假性結(jié)果。實(shí)驗(yàn)室的墻體,包括頂棚,應(yīng)結(jié)構(gòu)牢固、氣密性好;所有陰角宜采用圓弧形線條過(guò)渡

5、;墻體內(nèi)壁光潔、不吸附、耐腐蝕、易清洗消毒;地面材料應(yīng)滿足無(wú)縫隙、無(wú)滲漏、光潔、耐腐蝕的要求。如果使用熒光PCR儀,擴(kuò)增室和產(chǎn)物分析室可以合并。若房間進(jìn)深允許,可設(shè)PCR內(nèi)部專用走廊。需要指出的是在減少室內(nèi)外空氣交換方面,緩沖間比專用走廊更有意義。各個(gè)區(qū)域之間應(yīng)具備單向的實(shí)驗(yàn)工藝流、物流、人流與氣流,形成單向流程的保護(hù)屏障,避免實(shí)驗(yàn)之間的相互干擾,防止核酸氣溶膠對(duì)實(shí)驗(yàn)過(guò)程造成污染產(chǎn)生假性結(jié)果。實(shí)驗(yàn)室的墻體,包括頂棚,應(yīng)結(jié)構(gòu)牢固、氣密性好;所有陰角宜采用圓弧形線條過(guò)渡;墻體內(nèi)壁光潔、不吸附、耐腐蝕、易清洗消毒;地面材料應(yīng)滿足無(wú)縫隙、無(wú)滲漏、光潔、耐腐蝕的要求。主要設(shè)備試劑準(zhǔn)備區(qū)儀器設(shè)備主要有冰箱

6、、超凈臺(tái)、加樣器、混勻器、天平和離心機(jī)等,加樣器、天平除了,可以通過(guò)控制要專用外,還應(yīng)有定期校準(zhǔn)。試劑分裝應(yīng)在超凈臺(tái)中進(jìn)行擴(kuò)增反應(yīng)混合液應(yīng)使用分子生物學(xué)級(jí)的,試劑制備好后應(yīng)有質(zhì)檢:一是否有污染、二是檢測(cè)試劑的擴(kuò)增效果。標(biāo)本制備區(qū)儀器設(shè)備主要有生物安全柜、加樣器、離心機(jī)、溫育儀、混勻器等擴(kuò)增區(qū)擴(kuò)增區(qū)的主要儀器是核酸擴(kuò)增儀、超凈臺(tái)、微量加樣器、離心機(jī)、可移動(dòng)紫外燈。擴(kuò)增儀需進(jìn)行校準(zhǔn)。并配備UPS電源,以防止由于電壓的波動(dòng),停電對(duì)擴(kuò)增效果的影響。分析區(qū) 本區(qū)所使用的儀器設(shè)備有酶標(biāo)儀、洗板機(jī)、加樣器和水浴箱等潔凈實(shí)驗(yàn)區(qū)的緩沖間部分面積不能超過(guò)主實(shí)驗(yàn)室的八分之一,這是有規(guī)定的?1、主體結(jié)構(gòu):主體為彩鋼板

7、、鋁合金型材。室內(nèi)所有陰角、陽(yáng)角均采用鋁合金50內(nèi)圓角鋁,從而解決容易污染、積塵、不易清掃等問(wèn)題。結(jié)構(gòu)牢固,線條簡(jiǎn)明,美觀大方,密封性好。2、標(biāo)準(zhǔn)的四區(qū)分隔和氣壓調(diào)節(jié):將PCR過(guò)程分成試劑準(zhǔn)備、標(biāo)本制備和PCRT增,產(chǎn)物分析四個(gè)獨(dú)立的實(shí)驗(yàn)區(qū)。整個(gè)區(qū)域有一個(gè)整體緩沖走廊。每個(gè)獨(dú)立實(shí)驗(yàn)區(qū)設(shè)置有緩沖區(qū),同時(shí)各區(qū)通過(guò)氣壓調(diào)節(jié),使整個(gè)PCF實(shí)驗(yàn)過(guò)程中試劑和標(biāo)本免受氣溶膠的污染并降低擴(kuò)增產(chǎn)物對(duì)人員和環(huán)境的污染??纱蜷_(kāi)緩沖區(qū)I,緩沖區(qū)n和PCR擴(kuò)增區(qū)的排風(fēng)扇往外排氣,在實(shí)驗(yàn)區(qū)的外墻上和各扇門上都安裝有風(fēng)量可調(diào)的回風(fēng)口,空氣通過(guò)回風(fēng)口向室內(nèi)換氣。3、消毒:在三個(gè)實(shí)驗(yàn)區(qū)和三個(gè)緩沖區(qū)頂部以及傳送窗內(nèi)部安裝有紫外燈

8、,供消毒用。在試劑準(zhǔn)備區(qū)和標(biāo)本制備區(qū)還設(shè)置移動(dòng)紫外線燈,對(duì)實(shí)驗(yàn)桌進(jìn)行局部消毒。4、不銹鋼傳遞窗:試劑和標(biāo)本通過(guò)機(jī)械連鎖不銹鋼(不建議使用電子連鎖方式)傳遞窗傳遞,保證試劑和標(biāo)本在傳遞過(guò)程中不受污染(人物分流)。5、地面地面建議使用PVC卷材地面或自流坪地面,整體性好。便于進(jìn)行清掃,耐腐蝕。6、照明燈具要選用凈化燈具,能達(dá)到便于清洗、不積塵的特點(diǎn)。在建設(shè)的過(guò)程中應(yīng)注意:?規(guī)范的安裝流程和全面的服務(wù)流程。?嚴(yán)格按照規(guī)范科學(xué)設(shè)計(jì)的安裝流程。?安裝前需要確定以下安裝條件,如:電源電壓,電源進(jìn)線位置,電話網(wǎng)絡(luò)線進(jìn)線位置,進(jìn)水水壓,最小安裝空間,地面平整度,通風(fēng)孔、進(jìn)水管和下水管的位置等,理想狀態(tài)的空間尺

9、寸樣本處理區(qū)三、工作區(qū)域及設(shè)備要求(一)試劑儲(chǔ)存和準(zhǔn)備區(qū)1、2-8C和-15C冰箱2、混勻器3、微量加樣器(覆蓋1-1000U1)4、移動(dòng)紫外燈(近工作臺(tái)面)5、消耗品:一次性手套、一次性吸水紙、耐高壓處理的離心管和加樣器吸頭(帶濾心)6、專用工作服和工作鞋7、專用辦公用品(二)標(biāo)本制備區(qū)1、2-8C冰箱、-20C或-80C冰箱2、高速臺(tái)式冷凍離心機(jī)3、混允器4、水浴箱或加熱模塊5、微量加樣器(覆蓋1-1000U1)6、可移動(dòng)紫外燈(近工作臺(tái)面)7、生物安全柜8、消耗品:一次性手套、一次性吸水紙、耐高壓處理的離心管和加樣器吸頭(帶濾心)9、專用工作服和工作鞋10、專用辦公用品如需處理大分子DN

10、A應(yīng)具有超聲波水浴儀。(三)擴(kuò)增反應(yīng)混合物配制和擴(kuò)增區(qū)1、核酸擴(kuò)增儀2、微量加樣器(覆蓋1-1000UI)3、可移動(dòng)紫外燈(近工作臺(tái)面)4、消耗品:一次性手套、一次性吸水紙、耐高壓處理的離心管和加樣器吸頭(帶濾心)5、專用工作服和工作鞋6、專用辦公用品(四)擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)視檢驗(yàn)方法不同而定?;緝x器設(shè)備如下:1、微量加樣器(覆蓋1-1000UI)2、可移動(dòng)紫外燈(近工作臺(tái)面)3、消耗品:一次性手套、一次性吸水紙、加樣器吸頭(帶濾心)4、專用工作服和工作鞋5、專用辦公用品5.人員和樣品的安全是由生物安全柜和定向氣流共同來(lái)保證。PCR實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)規(guī)程中規(guī)定人員和樣品必須單向流動(dòng)。即從“試劑準(zhǔn)備區(qū)到樣

11、品制備區(qū),再?gòu)臉悠分苽渥呦驍U(kuò)增區(qū)和產(chǎn)物分析區(qū)”,絕對(duì)不能反向流動(dòng),以辟免交叉污染。氣流方向只規(guī)定試劑準(zhǔn)備區(qū)為微正壓或常壓,樣品制備區(qū)為常壓或負(fù)壓,擴(kuò)增區(qū)和產(chǎn)物分析區(qū)為負(fù)壓,壓力梯度是從試劑準(zhǔn)備到產(chǎn)物分析區(qū),是高到低的。規(guī)程并沒(méi)有規(guī)定要做成全新風(fēng)系統(tǒng),但是為降低交叉污染的風(fēng)險(xiǎn),建議做成全新風(fēng)系統(tǒng)1概述臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)又稱PCF實(shí)驗(yàn),是專門用來(lái)檢驗(yàn)艾滋病、乙型肝炎、禽疫病等病毒感染性疾病的一種檢測(cè)手段。它可以通過(guò)將病毒體內(nèi)所含的基因進(jìn)行擴(kuò)增的方法,測(cè)出一些病毒含量不高的感染者體內(nèi)是否含有特定的病毒。由于該檢測(cè)方法可以測(cè)出普通檢驗(yàn)難以檢測(cè)出的病毒并具有靈敏度高、特異性高、快捷、對(duì)樣品要求低等優(yōu)點(diǎn),因

12、此被臨床醫(yī)生廣為認(rèn)可,已廣泛應(yīng)用于醫(yī)院的臨床診斷和各防疫檢測(cè)部門的禽疫病診斷。但是,這種實(shí)驗(yàn)需要有能保證絕對(duì)安全、配置合理的實(shí)驗(yàn)室和非常規(guī)范的操作為前提。近年來(lái)對(duì)臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室的建設(shè)越來(lái)越得到重視,因?yàn)樗鼘?duì)檢測(cè)結(jié)果的可靠性、準(zhǔn)確性和安全性起到至關(guān)重要的作用。本文主要從臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室的平面布局,空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)設(shè)計(jì)、氣流控制和污染的防制幾個(gè)方面對(duì)實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)中的主要特點(diǎn)進(jìn)行了闡述。臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)的核心問(wèn)題是如何避免污染。因此,實(shí)驗(yàn)室的平面布局、空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)設(shè)計(jì)、氣流控制等都是圍繞這個(gè)核心問(wèn)題進(jìn)行的。下面就對(duì)這幾個(gè)方面分別進(jìn)說(shuō)明。2 PCR實(shí)驗(yàn)室平面布局臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室

13、原則上分為四個(gè)單獨(dú)的工作區(qū)域:試劑貯存和準(zhǔn)備區(qū)、標(biāo)本制備區(qū)、擴(kuò) 增反應(yīng)混合物配 制和擴(kuò)增區(qū)、擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)。為避免交叉污染,進(jìn)入各個(gè)工作區(qū)域必須嚴(yán)格遵循單 一方向進(jìn)行,即只能從試劑貯存和 準(zhǔn)備區(qū)T標(biāo)本制備區(qū)T擴(kuò)增反應(yīng)混合物配制和擴(kuò)增區(qū)T擴(kuò)增產(chǎn)物分 析區(qū)。各實(shí)驗(yàn)區(qū)之間的試劑及樣品傳遞應(yīng)通過(guò)傳遞窗進(jìn)行PCR實(shí)驗(yàn)室平面布置示意圖如圖1所示4irwrtij分析區(qū)樂(lè)力丫士血J阪力:+m紅zi177f總圖1 PCR實(shí)驗(yàn)室平面布置示意圖3實(shí)驗(yàn)室空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)設(shè)計(jì)及壓力控制PCR實(shí)驗(yàn)室并沒(méi)有嚴(yán)格的凈化要求,但是為避免各個(gè)實(shí)驗(yàn)區(qū)域間交叉污染的可能性,宜采用全送 全排的氣流組織形式。同時(shí),要嚴(yán)格控制送、排風(fēng)的比例以

14、保證各實(shí)驗(yàn)區(qū)的壓力要求。3.1試劑貯存和準(zhǔn)備區(qū)該實(shí)驗(yàn)區(qū)主要進(jìn)行的操作為貯存試劑的制備、試劑的分裝和主反應(yīng)混合液的制備。本制作的材料應(yīng)直接運(yùn)送至該區(qū),不得經(jīng)過(guò)其他區(qū)域。試劑原材料必須貯存在本區(qū)內(nèi),并在本區(qū)內(nèi)制備成所需的貯存試劑對(duì)與氣流壓力的控制,本區(qū)并沒(méi)有嚴(yán)格的要求。3.2標(biāo)本制備區(qū)該區(qū)域主要進(jìn)行的操作為臨床標(biāo)本的保存、核酸(RNA DNA提取、貯存及其加入至擴(kuò)增反應(yīng)管和測(cè)定RNA寸cDNA的合成。本區(qū)的壓力梯度要求為:相對(duì)于鄰近區(qū)域?yàn)檎龎海员苊鈴泥徑鼌^(qū)進(jìn)入本區(qū)的氣溶膠污染。另外,由于在加樣操作中可能會(huì)發(fā)生氣溶膠所致的污染,所以應(yīng)避免在本區(qū)內(nèi)不必要的走動(dòng)。3.3擴(kuò)增反應(yīng)混合物配制和擴(kuò)增區(qū)該區(qū)域

15、主要進(jìn)行的操作為DNA或cDNA擴(kuò)增。此外,已制備的DNA模板和合成的cDNA(來(lái)自樣本試劑和用于標(biāo)制備區(qū))的加入和主反應(yīng)混合液(來(lái)自試劑貯存和制備區(qū))制備成反應(yīng)混合液等也可在本區(qū)內(nèi)進(jìn)行。在巢式PCR測(cè)定中,通常在第一輪擴(kuò)增后必須打開(kāi)反應(yīng)管,因此巢式擴(kuò)增有較高的污染危險(xiǎn)性,第二次加樣必須在本區(qū)內(nèi)進(jìn)行。本區(qū)的壓力梯度要求為:相對(duì)于鄰近區(qū)域?yàn)樨?fù)壓,以避免氣溶膠從本區(qū)漏出。為避免氣溶膠所致減少在本區(qū)內(nèi)的不必要的走動(dòng)。個(gè)別操作如加樣等應(yīng)在超凈臺(tái)內(nèi)進(jìn)行。3.4擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)該區(qū)域主要進(jìn)行的操作為擴(kuò)增片段的測(cè)定。如使用全自動(dòng)封閉分析儀器檢測(cè),此區(qū)域可不設(shè)。本區(qū)是最主要的擴(kuò)增產(chǎn)物污染來(lái)源,因此對(duì)本區(qū)的壓力梯

16、度的要求為:相對(duì)于鄰近區(qū)域?yàn)樨?fù)壓,以避免擴(kuò)增產(chǎn)物從本區(qū)擴(kuò)散至其它區(qū)域。4污染的預(yù)防與控制PCR實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)的核心問(wèn)題是如何避免污染。在實(shí)際工作中,常見(jiàn)的有以下幾種污染類型:擴(kuò)增產(chǎn)物的污染;天然基因組DNA勺污染;試劑的污染以及標(biāo)本間的污染。由于一旦發(fā)生污染,實(shí)驗(yàn)就必 須停止,直到找到污染源為止,而 且實(shí)驗(yàn)結(jié)果必須作廢,需重新進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。所以發(fā)生污染后再圍繞實(shí) 驗(yàn)室來(lái)尋找污染源不但耗時(shí)而且繁瑣,浪費(fèi)人力物力。因此要避免污染,首先應(yīng)是預(yù)防,而不是排除。4.1工作區(qū)域的嚴(yán)格劃分(1)各個(gè)實(shí)驗(yàn)區(qū)域設(shè)置合理;的污染,應(yīng)盡量(2)各個(gè)實(shí)驗(yàn)區(qū)域要有明顯的標(biāo)記(如醒目的門牌或不同的地面顏色等) 域設(shè)備物品、試劑等

17、發(fā)生混淆。4.2合理的系統(tǒng)設(shè)置(1)合理的空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)設(shè)置,盡量采用全送全排的空調(diào)系統(tǒng);(2)嚴(yán)格的氣流壓力控制,保證不同的實(shí)驗(yàn)區(qū)內(nèi)不同的壓力要求4.3規(guī)范的操作,以避免各個(gè)不同實(shí)驗(yàn)區(qū)作;(1)臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室的技術(shù)人員必須進(jìn)行上崗培訓(xùn),經(jīng)培訓(xùn)合格后才能從事臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)的工(2)污染的措施;在實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程中,操作者必須戴手套,并經(jīng)常更換。此外,操作中使用一次性帽子也是一個(gè)有效地防止清潔工作及時(shí)、正確。實(shí)驗(yàn)工作結(jié)束后,必須立即對(duì)本區(qū)進(jìn)行清潔。除常規(guī)的消毒液體對(duì) 毒或紫外線燈的照射消毒外,對(duì)一些實(shí)驗(yàn)設(shè)備還應(yīng)進(jìn)行高壓消毒處理。(3)表面進(jìn)行擦拭消4.4嚴(yán)格的管理(1)嚴(yán)格控制進(jìn)出實(shí)驗(yàn)室的人

18、員。與實(shí)驗(yàn)無(wú)關(guān)的人員不得隨意進(jìn)出實(shí)驗(yàn)室,有條件的情況下要 和進(jìn)出整個(gè)實(shí)驗(yàn)區(qū)的門;設(shè)置獨(dú)立的通道(2)在各個(gè)實(shí)驗(yàn)區(qū)域使用帶有明顯區(qū)別標(biāo)志的工作服(如不同顏色) 的工作服帶至其它區(qū)域;,當(dāng)工作人員離開(kāi)時(shí)不得將本區(qū)(3)盡量減少在實(shí)驗(yàn)區(qū)內(nèi)不必要的走動(dòng)以減少交叉污染的可能性。(4)擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)是最主要的擴(kuò)增產(chǎn)物污染來(lái)源,廢液不能在實(shí)驗(yàn)室中傾倒,必須經(jīng)消毒液 離實(shí)驗(yàn)室的地方棄掉,用過(guò)的吸頭等一次性材料也應(yīng)經(jīng)消毒液浸泡消毒后統(tǒng)一處理,如焚燒等;浸泡消毒后在遠(yuǎn)(5)擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)可能會(huì)用到某些可致基因突變和有毒物質(zhì),應(yīng)特別注意實(shí)驗(yàn)人員的安全防護(hù)。4.5完備的實(shí)驗(yàn)室配套設(shè)施完備的實(shí)驗(yàn)室配套設(shè)施是保證實(shí)驗(yàn)工作的必要條件,應(yīng)根據(jù)各個(gè)實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)內(nèi)容的不同配備相應(yīng)的設(shè)備和儀器,如超凈工作臺(tái)、離心機(jī)、加樣器等。PCR實(shí)驗(yàn)室并沒(méi)有嚴(yán)格的凈化要求,但是為避免各個(gè)實(shí)驗(yàn)區(qū)域間交叉污染的可能性,宜采用全送全排的氣流組織形式。同時(shí),要嚴(yán)格控制送、排風(fēng)的比例以保證各實(shí)驗(yàn)區(qū)的壓力要求。3.1試劑貯存和準(zhǔn)備區(qū)該實(shí)驗(yàn)區(qū)主要進(jìn)行的操作為貯存試劑的制備、試劑的分裝和主反應(yīng)混合液的制備。本制作的材料應(yīng)直接運(yùn)送至該區(qū),不得經(jīng)過(guò)其他區(qū)域。試劑原材料必須貯存在本區(qū)內(nèi),并在本區(qū)內(nèi)制 劑。試劑和用于標(biāo)備成所需的貯存試對(duì)與氣流壓力的控制,本區(qū)并沒(méi)有嚴(yán)格的要求3.2標(biāo)本制備區(qū)該區(qū)

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