微生物學(xué)細(xì)菌與病毒的微生物學(xué)檢查學(xué)習(xí)教案

1、會(huì)計(jì)學(xué)1微生物學(xué)細(xì)菌微生物學(xué)細(xì)菌(xjn)與病毒的微生物學(xué)檢與病毒的微生物學(xué)檢查查第一頁(yè)，共51頁(yè)。標(biāo)標(biāo)本本(biobn)分離分離(fnl)培養(yǎng)培養(yǎng)鑒定鑒定(jindng)怎么辦怎么辦培養(yǎng)基制備培養(yǎng)基制備細(xì)菌培養(yǎng)法細(xì)菌培養(yǎng)法三段劃線、純培養(yǎng)三段劃線、純培養(yǎng)無菌技術(shù)無菌技術(shù)油鏡使用、細(xì)菌形態(tài)學(xué)觀察油鏡使用、細(xì)菌形態(tài)學(xué)觀察革蘭染色法革蘭染色法生化反應(yīng)觀察生化反應(yīng)觀察藥敏試驗(yàn)藥敏試驗(yàn)血清學(xué)診斷血清學(xué)診斷核酸檢測(cè)核酸檢測(cè)第1頁(yè)/共50頁(yè)第二頁(yè)，共51頁(yè)。標(biāo)本(biobn)染色(rns)鏡檢血平板(pngbn) 觀察可疑菌落染色鏡檢純培養(yǎng)甘露醇發(fā)酵試驗(yàn)血漿凝固酶試驗(yàn)?zāi)蜔岷怂崦冈囼?yàn)動(dòng)物試驗(yàn)藥敏試驗(yàn)化膿性球

2、菌的分離鑒定程序第2頁(yè)/共50頁(yè)第三頁(yè)，共51頁(yè)。第3頁(yè)/共50頁(yè)第四頁(yè)，共51頁(yè)。Microbiology LabMicrobiology Lab第4頁(yè)/共50頁(yè)第五頁(yè)，共51頁(yè)。第5頁(yè)/共50頁(yè)第六頁(yè)，共51頁(yè)。第一節(jié)第一節(jié) 細(xì)菌細(xì)菌(xjn)感染的微生感染的微生物血檢查法物血檢查法第6頁(yè)/共50頁(yè)第七頁(yè)，共51頁(yè)。血清學(xué)鑒定第7頁(yè)/共50頁(yè)第八頁(yè)，共51頁(yè)。形態(tài)和染色性有明顯特征的病原菌第8頁(yè)/共50頁(yè)第九頁(yè)，共51頁(yè)。革蘭染色(rns)結(jié)果比較 抗酸染色(rns)革蘭染色(rns)陽(yáng)性菌 革蘭染色(rns)陰性菌（葡萄球菌） （大腸埃希菌）結(jié)核結(jié)核(jih)(jih)分枝分枝桿菌桿菌

3、M MTuberculosis Tuberculosis 第9頁(yè)/共50頁(yè)第十頁(yè)，共51頁(yè)。 病原菌的分離(fnl)和鑒定：第10頁(yè)/共50頁(yè)第十一頁(yè)，共51頁(yè)。 金黃色葡萄球菌光滑型菌落結(jié)核分枝桿菌粗糙(cco)型菌落第11頁(yè)/共50頁(yè)第十二頁(yè)，共51頁(yè)。Flame sterilize wire loop, metal forceps, etc before and after use in a hooded Bunsen burner 第12頁(yè)/共50頁(yè)第十三頁(yè)，共51頁(yè)。 糖發(fā)酵試驗(yàn)糖發(fā)酵試驗(yàn) H2S試驗(yàn)試驗(yàn)枸櫞鹽利用試驗(yàn)枸櫞鹽利用試驗(yàn)細(xì)菌代謝產(chǎn)物的檢測(cè) 得到細(xì)菌純培養(yǎng)物后，用糖發(fā)酵試驗(yàn)

4、、吲哚試驗(yàn)、硝酸鹽還原試驗(yàn)等對(duì)細(xì)菌的酶系統(tǒng)得到細(xì)菌純培養(yǎng)物后，用糖發(fā)酵試驗(yàn)、吲哚試驗(yàn)、硝酸鹽還原試驗(yàn)等對(duì)細(xì)菌的酶系統(tǒng)和其代謝產(chǎn)物的檢查，是鑒別細(xì)菌的重要方法之一。特別是有些細(xì)菌特征基本相同，因和其代謝產(chǎn)物的檢查，是鑒別細(xì)菌的重要方法之一。特別是有些細(xì)菌特征基本相同，因此有必要經(jīng)分離培養(yǎng)后用生化試驗(yàn)進(jìn)行鑒定。但步驟繁雜此有必要經(jīng)分離培養(yǎng)后用生化試驗(yàn)進(jìn)行鑒定。但步驟繁雜(fnz)(fnz)耗時(shí)。隨著現(xiàn)代化技耗時(shí)。隨著現(xiàn)代化技術(shù)的發(fā)展，細(xì)菌檢測(cè)的技術(shù)水平也不斷地提高，正在逐步實(shí)現(xiàn)快速化、微量化、自動(dòng)化術(shù)的發(fā)展，細(xì)菌檢測(cè)的技術(shù)水平也不斷地提高，正在逐步實(shí)現(xiàn)快速化、微量化、自動(dòng)化和標(biāo)準(zhǔn)化。和標(biāo)準(zhǔn)化。生化

5、(shn hu)反應(yīng)第13頁(yè)/共50頁(yè)第十四頁(yè)，共51頁(yè)。第14頁(yè)/共50頁(yè)第十五頁(yè)，共51頁(yè)。 動(dòng)物(dngw)試驗(yàn)第15頁(yè)/共50頁(yè)第十六頁(yè)，共51頁(yè)。毒力檢測(cè)(jin c)第16頁(yè)/共50頁(yè)第十七頁(yè)，共51頁(yè)。紙碟法試管(shgun)法小杯法凹孔法 最低抑菌濃度（MIC）是能夠(nnggu)抑制細(xì)菌生長(zhǎng)的最低藥物濃度；最低殺菌濃度（MBC）是指能夠(nnggu)殺滅細(xì)菌最低藥物濃度； MIC和MBC的值越低，表示細(xì)菌對(duì)該藥越敏感 藥物敏感(mngn)試驗(yàn)第17頁(yè)/共50頁(yè)第十八頁(yè)，共51頁(yè)。第18頁(yè)/共50頁(yè)第十九頁(yè)，共51頁(yè)。Toxins from E. coli 0157:H7 ba

6、cteria and others can cause fatal disease in humans, and they can be food borne 第19頁(yè)/共50頁(yè)第二十頁(yè)，共51頁(yè)。第20頁(yè)/共50頁(yè)第二十一頁(yè)，共51頁(yè)。PCR Machine聚合酶鏈反應(yīng)聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）PCR產(chǎn)物的檢測(cè)產(chǎn)物的檢測(cè)第21頁(yè)/共50頁(yè)第二十二頁(yè)，共51頁(yè)。第22頁(yè)/共50頁(yè)第二十三頁(yè)，共51頁(yè)。由中國(guó)科學(xué)院研制的IgM抗體檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫法)，被國(guó)家食品(shpn)藥品監(jiān)督管理局批準(zhǔn)進(jìn)行試生產(chǎn)第23頁(yè)/共50頁(yè)第二十四頁(yè)，共51頁(yè)。Immunology evaluates a patie

7、nt immune system by detecting the bodies response (an antibody) to a foreign agent (or antigen). The presence of antigens can be detected too第24頁(yè)/共50頁(yè)第二十五頁(yè)，共51頁(yè)。 血清學(xué)試驗(yàn)舉 例 凝集試驗(yàn) 肥達(dá)反應(yīng) 補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)鉤體病 中和試驗(yàn) 抗O試驗(yàn)第25頁(yè)/共50頁(yè)第二十六頁(yè)，共51頁(yè)。BTA Assay and Reader.Tracking Chain of Custody BTA Assay and Reader.Tracking Cha

8、in of Custody 第26頁(yè)/共50頁(yè)第二十七頁(yè)，共51頁(yè)。Autonomous Pathogen Detection System (APDS)The Autonomous Pathogen Detection System is capable of continuous, automated, 24-hour monitoring for pathogens, with results reported every 30 minutes 第27頁(yè)/共50頁(yè)第二十八頁(yè)，共51頁(yè)。HANAA in Hand About the size of a brick, the HANAA b

9、iodetection system can be held in one hand and weighs less than a kilogram. The system was designed for emergency response groups, such as firefighters and police, who are often first on the scene at sites where bioterrorism may have occurred. Each handheld system can test four samples at onceeither

10、 the same test on four different samples or four different tests on the same sample. HANAA can provide results in less than 30 minutes, compared with the hours to days that regular laboratory tests typically take.第28頁(yè)/共50頁(yè)第二十九頁(yè)，共51頁(yè)。This technique is essentially an ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent

11、 Assay) method, however with an extremely sensitive all-electronic detection system. 第29頁(yè)/共50頁(yè)第三十頁(yè)，共51頁(yè)。Tiny computer chip can detect toxinsThe lab on a chip, its developers say, could have potential applications in law enforcement, environmental pollution detection, military medical care, or for an

12、yone who needs a cheap and portable method of identifying the presence of specific toxins or DNA without the benefit of a laboratory.This device could be developed into something medics use in the field to get answers in a matter of minutes rather than hours.Research on the fluorescence microscopy d

13、etection system, which provides a cheap and portable method for identifying specific toxins or DNA, was funded by the National Science Foundation.UC BERKELEY PHOTO 第30頁(yè)/共50頁(yè)第三十一頁(yè)，共51頁(yè)。第二節(jié)第二節(jié) 病毒感染的微生物學(xué)病毒感染的微生物學(xué)(wi shn w xu)檢測(cè)法檢測(cè)法第31頁(yè)/共50頁(yè)第三十二頁(yè)，共51頁(yè)。掃描電鏡 透射電鏡第32頁(yè)/共50頁(yè)第三十三頁(yè)，共51頁(yè)。第33頁(yè)/共50頁(yè)第三十四頁(yè)，共51頁(yè)。 狂犬

14、病病毒(bngd) 天花(tinhu)病毒 冠狀病毒 SARS冠狀病毒冠狀病毒第34頁(yè)/共50頁(yè)第三十五頁(yè)，共51頁(yè)。二、病毒分離培養(yǎng)二、病毒分離培養(yǎng)(piyng)的方法的方法采集(cij)標(biāo)本抑制(yzh)雜菌（青、鏈霉素）n病毒分離u易感動(dòng)物-出現(xiàn)病狀u雞胚 -病變或死亡u細(xì)胞培養(yǎng) -細(xì)胞病變病毒鑒定（血清學(xué)方法）（血清學(xué)方法）第35頁(yè)/共50頁(yè)第三十六頁(yè)，共51頁(yè)。第36頁(yè)/共50頁(yè)第三十七頁(yè)，共51頁(yè)。(xbo)第37頁(yè)/共50頁(yè)第三十八頁(yè)，共51頁(yè)。細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)(jsh)第38頁(yè)/共50頁(yè)第三十九頁(yè)，共51頁(yè)。第39頁(yè)/共50頁(yè)第四十頁(yè)，共51頁(yè)。第40頁(yè)/共50頁(yè)第四十

15、一頁(yè)，共51頁(yè)。n中和試驗(yàn)（neutralization test，NT）正常(zhngchng)細(xì)胞病變細(xì)胞第41頁(yè)/共50頁(yè)第四十二頁(yè)，共51頁(yè)。第42頁(yè)/共50頁(yè)第四十三頁(yè)，共51頁(yè)。第43頁(yè)/共50頁(yè)第四十四頁(yè)，共51頁(yè)。Hemadsorption of Hemadsorption of monkey red blood cellsmonkey red blood cells第44頁(yè)/共50頁(yè)第四十五頁(yè)，共51頁(yè)。n 紅細(xì)胞凝集紅細(xì)胞凝集 hemagglutination n n一種檢測(cè)含血凝素病毒一種檢測(cè)含血凝素病毒(bngd)的方法的方法第45頁(yè)/共50頁(yè)第四十六頁(yè)，共51頁(yè)。n病

16、毒抗原(kngyun)的檢測(cè)n熒光標(biāo)記技術(shù)、ELISA或放射免疫標(biāo)記技術(shù) 第46頁(yè)/共50頁(yè)第四十七頁(yè)，共51頁(yè)。 將已知的抗病毒血清先與病毒懸液混合在一起，在一定溫度條件下作用一定時(shí)間后，接種于敏感細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，觀察(gunch)病毒致細(xì)胞病變作用或紅細(xì)胞吸附現(xiàn)象是否消失。 這是比較可靠的病毒診斷方法 中和試驗(yàn)中和試驗(yàn)(shyn) neutralization test，NT第47頁(yè)/共50頁(yè)第四十八頁(yè)，共51頁(yè)。中和作用血凝血凝抑制(yzh)第48頁(yè)/共50頁(yè)第四十九頁(yè)，共51頁(yè)。ELISA法法 特異性高、敏感性強(qiáng)、操作方便，廣泛用于特異性高、敏感性強(qiáng)、操作方便，廣泛用于細(xì)菌、病毒和其他病原體的臨床化驗(yàn)室檢測(cè)，細(xì)菌、病毒和其他病原體的臨床化驗(yàn)室檢測(cè)，特別特別(tbi)在病毒感染性疾病的診斷中在病毒感染性疾病的診斷中 n蛋白印跡技術(shù)蛋白印跡技術(shù) Western blot n目前目前WHO規(guī)定該試驗(yàn)規(guī)定該試驗(yàn)(shyn)作為作為HIV感染的確認(rèn)感染的確認(rèn)試驗(yàn)