紫外可見分光光度計及其在食品檢驗中的發(fā)展和應(yīng)用

1、現(xiàn)代儀器分析技術(shù)及應(yīng)用文獻綜述 2015級生物學專業(yè) 黃君 15107100002029紫外可見分光光度計及其在食品檢驗中的發(fā)展和應(yīng)用摘要：紫外可見分光光度計是一類很重要的分析儀器，無論在物理學、化學、生物學、食品、材料學、環(huán)境科學等科學研究領(lǐng)域，還是在化工、醫(yī)藥、環(huán)境檢測、冶金等現(xiàn)代生產(chǎn)與管理部門，紫外可見分光光度計都有廣泛而重要的應(yīng)用。本文分別就紫外-可見光分光光度法在食品工業(yè)中的這些應(yīng)用作了簡要介紹。目前利用紫外-可見光分光光度法的各種方法正在逐步發(fā)展，而且隨著社會的發(fā)展和人們生活水平的提高，紫外-可見光分光光度法在食品行業(yè)中的應(yīng)用也會越來越廣泛。本文將重點介紹uv-v計的原理，結(jié)構(gòu)，特

2、點及其在食品檢測中的發(fā)展和應(yīng)用。關(guān)鍵詞：紫外可見分光光度計；食品檢測Uv-vis spectrophotometer and its development and application in food inspectionAbstract: UV VIS spectrophotometer is a kind of very important analytical instrument. It has a long history in the chemical, biological, medical, material science, environmental science,

3、environmental science, environmental science and other modern production and management departments, This article is ultraviolet-visible spectrophotometry respectively, the author introduce the application in food industry. Currently used ultraviolet-visible spectrophotometry methods are gradually d

4、eveloped, and with the development of the society and people living standard rise, ultraviolet-visible spectrophotometry application in the food industry also will be more and more widely. This article focuses on the principle of uv - v meter, structure, characteristics and its development and appli

5、cation in food and food testing.Key words: uv-visible spectrophotometer; Food testing前言l9世紀50年代，首先出現(xiàn)了用千目觀比色法的納氏(Nessler)比色管，不久有杜氏(Duboscq)比色計，后者一直沿用到本世紀的40年代。1911年，使用硒光電池的Berg比色計制成。而這種光電比色計是分光光度計的雛形和基礎(chǔ)。本世紀3O年代看，由于秉燈、氫燈和各種棱鏡，光學器材和電學器材的發(fā)展，美國Beckman公司的第一臺分光光度計終于在1941年問世。至60年代，紫外可見光分光光度計(UVV計)基本上取代了光電比色

6、計 1957年，美國Technicon公司按照Skaggs醫(yī)生的方案，推出了世界上第一臺自動化的食品生化分析儀。六十年代以后各種自動化分析儀層出不窮。特別是70年代起，各種分光光度計與計算機聯(lián)姻，明顯地擴大了儀器功能 現(xiàn)在，分光光度計作為綜臺光學、電學(尤其是計算機技術(shù))和精密機械學的發(fā)展和應(yīng)用， 已廣泛應(yīng)用于食品、藥品、工業(yè)和農(nóng)業(yè)等許多領(lǐng)域。其中以UVV計系列彰響最廣、應(yīng)用最普遍， 并且還是其他分光光度計(如原子吸收分光光度計)的基礎(chǔ)。紫外可見分光光度法具有儀器價格低廉適用性廣泛，尤其是采用微機控制以來，該技術(shù)得到了突飛猛進的發(fā)展，成為食品檢測中必備的一個常規(guī)儀器，食品營養(yǎng)價值指食品中所含的

7、熱能和營養(yǎng)素能滿足人體營養(yǎng)需要的程度。食品中的各種營養(yǎng)物質(zhì)必須通過一定的技術(shù)手段才能準確檢測，每種營養(yǎng)物質(zhì)的定性與定量檢測都離不開科學的方法，本文簡要介紹了紫外可見分光光度法檢測食品種的某些物質(zhì)的方法。更重要的是，“民以食為天，食以安為先”，食品安全關(guān)乎人們健康和國計民生。食品安全除了影響消費者健康外，還與食品進出口貿(mào)易、國家聲譽，乃至社會安定有著密切關(guān)系。近年來，國內(nèi)外食品安全問題接連不斷，食品安全問題已成為當今各國政府、消費者和科技界廣為關(guān)注的焦點問題之一。紫外可見分光光度法在檢測食品中一些威脅人們健康的因素方面也有重要作用。其應(yīng)用范圍包括：定量分析，廣泛用于各種物料中微量、超微量和常量的

8、無機和有機物質(zhì)的測定。定性和結(jié)構(gòu)分析，紫外吸收光譜還可用于推斷空間阻礙效應(yīng)、氫鍵的強度、互變異構(gòu)、幾何異構(gòu)現(xiàn)象等。反應(yīng)動力學研究，即研究反應(yīng)物濃度隨時間而變化的函數(shù)關(guān)系，測定反應(yīng)速度和反應(yīng)級數(shù)，探討反應(yīng)機理。研究溶液平衡，如測定絡(luò)合物的組成，穩(wěn)定常數(shù)、酸堿離解常數(shù)等。紫外-可見光分光光度法在食品行業(yè)中的應(yīng)用主要可大致分為在食品成分分析中的應(yīng)用和在食品安全檢測中的應(yīng)用，其中在食品成分分析中的應(yīng)用主要有紫外-可見分光光度計在食品酶分析中的應(yīng)用、酸奶中維生素A的測定、水果汁中果糖的測定、番茄紅素的測定、甜蜜素的測定等；而在食品安全檢測中的應(yīng)用主要有分光光度法測定食品中硼砂、紫外可見分光光度法檢測食品

9、中的鎘、紫外可見分光光度法測定食品中的蘇丹紅、用分光光度法測定食品中吊白塊的含量等。1 紫外可見分光光度計的發(fā)展（一）基本情況1.紫外可見分光光度計簡介1852年，比爾(Beer)參考了布給爾(Bouguer)1729年和朗伯(Lambert)在1760年所發(fā)表的文章，提出了分光光度的基本定律，即液層厚度相等時，顏色的強度與呈色溶液的濃度成比例，從而奠定了分光光度法的理論基礎(chǔ)，這就是著名的比爾朗伯定律。1854年，杜包斯克(Duboscq)和奈斯勒(Nessler)等人將此理論應(yīng)用于定量分析化學領(lǐng)域，并且設(shè)計了第一臺比色計。到1918年，美國國家標準局制成了第一臺紫外可見分光光度計。此后，紫外

10、可見分光光度計經(jīng)不斷改進，又出現(xiàn)自動記錄、自動打印、數(shù)字顯示、微機控制等各種類型的儀器，使光度法的靈敏度和準確度也不斷 提高，其應(yīng)用范圍也不斷擴大。2.原理 分子的紫外可見吸收光譜是由于分子中的某些基團吸收了紫外可見輻射光后，發(fā)生了電子能級躍遷而產(chǎn)生的吸收光譜。它是帶狀光譜，反映了分子中某些基團的信息?？梢杂脴藴使鈭D譜再結(jié)合其它手段進行定性分析。根據(jù)Lambert-Beer定律：A=bc，（A為吸光度，為摩爾吸光系數(shù)，b為液池厚度，c為溶液濃度）可以對溶液進行定量分析。3.結(jié)構(gòu) 無論哪一類分光光度計都由下列五部分組成，即光源、單色器、狹縫、樣品池，檢測器系統(tǒng)。(1)光源要求能提供所需波長范圍的

11、連續(xù)光譜，穩(wěn)定而有足夠的強度。常用的有白熾燈(鎢比燈、鹵鎢燈等)、氣體放電燈(氫燈、氘燈及氙燈等)、金屬弧燈(各種汞燈)等多種。鎢燈和鹵鎢燈發(fā)射3202000nm連續(xù)光譜，最適宜工作范圍為3601000nm，穩(wěn)定性好，用作可見光分光光度計的光源。氫燈和氘燈能發(fā)射1504O0nm的紫外光，可用作紫外光區(qū)分光光度計的光源。紅外線光源則由納恩斯特(Nernst)棒產(chǎn)生。汞燈發(fā)射的不是連續(xù)光譜，能量絕大部分集中在253.6nm波長外，一般作波長校正用。(2)分光系統(tǒng)(單色器)單色器是指能從混合光波中分解出來所需單一波長光的裝置，由棱鏡或光柵構(gòu)成。用玻璃制成的棱鏡色散力強，但只能在可見光區(qū)工作，石棱鏡工

12、作波長范圍為1854000nm，在紫外區(qū)有較好的分辨率而且也適用于可見光區(qū)和近紅外區(qū)。棱鏡的特點是波長越短，色散程度越好。所以用棱鏡的分光光度計，其波長刻度在紫外區(qū)可達到02nm，而在長波段只能達到5腫。有的分光光系統(tǒng)是衍射光柵，即在石英或玻璃的表面上刻劃許多平行線，刻線處不透光，于是通過光的干涉和衍射現(xiàn)象，較長的光波偏折的角度大，較短的光波偏折的角度小，因而形成光譜。(3)狹縫狹縫是指由一對隔板在光通路上形成的縫隙，用來調(diào)節(jié)人射單色光的純度和強度，也直接影響分辨率。狹縫可在02mm寬度內(nèi)調(diào)節(jié)，由于棱鏡色散力隨波長不同而變化，較先進的分光光度計的狹縫寬度可隨波長一起調(diào)節(jié)。(4)比色杯比色杯也叫

13、樣品池或比色皿，用來盛溶液，各個杯子壁厚度等規(guī)格應(yīng)盡可能完全相等，否則將產(chǎn)生測定誤差。玻璃比色杯只適用于可見光區(qū)，在紫外區(qū)測定時要用石英比色杯。(5)檢測器系統(tǒng)有許多金屬能在光的照射下產(chǎn)生電流，光愈強電流愈大，此即光電效應(yīng)。因光照射而產(chǎn)生的電流叫做光電流。受光器有兩種，一是光電池，二是光電管。光電池的組成種類繁多，最常用的是硒光電池。當連續(xù)照射一段時間會產(chǎn)生疲勞現(xiàn)象而使光電流下降，要在暗中放置一些時候才能恢復(fù)。因此使用時不宜長期照射，以防止光電池因疲勞而產(chǎn)生誤差。光電管裝有一個陰極和一個陽極，陰極是用對光敏感的金屬(多為堿土金屬的氧化物)做成。光愈強，電子放出愈多，電子是帶負電的，被吸引到陽極

14、上而產(chǎn)生電流。光電管產(chǎn)生電流很小，需要放大。分光光度計中常用電子倍增光電管，在光照射下所產(chǎn)生的電流比其他光電管要大得多，這就提高了測定的靈敏度。檢測器產(chǎn)生的光電流以某種方式轉(zhuǎn)變成模擬的或數(shù)字的結(jié)果，模擬輸出裝置包括電流表、電壓表、記錄器、示波器及與計算機聯(lián)用等，數(shù)字輸出則通過模擬/數(shù)字轉(zhuǎn)換裝置如數(shù)字式電壓表等。4.特點紫外可見分光光度法對于分析人員來說，可以說是最常用和有效的工具之一。幾乎每一個分析實驗室都離不開紫外可見分光光度計。分光光度法具有以下主要特點。4.1 靈敏度高由于新的顯色劑的大量合成，并在應(yīng)用研究方面取得了可喜的進展，使得對元素測定的靈敏度有所推進特別是有關(guān)多元絡(luò)合物和各種表面

15、活性劑的應(yīng)用研究，使許多元素的摩爾吸光系數(shù)由原來的幾萬提高到數(shù)十萬。4.2 選擇性好目前已有些元素只要利用控制適當?shù)娘@色條件就可直接進行光度法測定，如鈷、鈾、鎳、銅、銀、鐵等元素的測定，已有比較滿意的方法了。4.3 準確度高對于一般的分光光度法，其濃度測量的相對誤差在13 范圍內(nèi)，如采用示差分光光度法進行測量，則誤差可減少到0.x。4.4 適用濃度范圍廣可從常量(150)(尤其使用示差法)到痕量(1O-81O-6)(經(jīng)預(yù)富集后)。4.5 分析成本低、操作簡便、快速、應(yīng)用廣泛由于各種各樣的無機物和有機物在紫外可見區(qū)都有吸收，因此均可借此法加以測定。到目前為止，幾乎化學元素周期表上的所有元素除少數(shù)

16、放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。在國際上發(fā)表的有關(guān)分析的論文總數(shù)中，光度法約占28，我國約占所發(fā)表論文總數(shù)的33。（2） 國內(nèi)外的一些新發(fā)展紫外分光光度法在分析領(lǐng)域中的應(yīng)用已經(jīng)有數(shù)十年的歷史，至今仍是應(yīng)用最廣泛的分析方法之一。隨著分光元器件及分光技術(shù)、檢測器件與檢測技術(shù)、大規(guī)模集成制造技術(shù)等的發(fā)展，以及單片機、微處理器、計算機和DSP技術(shù)的廣泛應(yīng)用，分光光度計的性能指標不斷提高，并向自動化、智能化、高速化和小型化等方向發(fā)展，在分光元器件方面，經(jīng)歷了棱鏡、機刻光柵和全息光柵的過程，商品化的全息閃耀光柵已迅速取代一般刻畫光柵。在儀器控制方面，隨著單片機、微處理器的出現(xiàn)以及軟硬件技術(shù)的結(jié)合，

17、從早期的人工控制進步到了自動控制。在顯示、記錄與繪圖方面，早期采用表頭(電位計)指示、繪圖儀繪圖，后來用數(shù)字電壓表數(shù)字顯示，如今更多地采用液晶屏幕或計算機屏幕顯示。在檢測器方面，早期使用光電池、光電管，后來更普遍地使用光電倍增管甚至光電二極管陣列。陣列型檢測器和凹面光柵的聯(lián)合應(yīng)用，使儀器的測量速度發(fā)生了質(zhì)的飛躍，且性能更加穩(wěn)定可靠，受到儀器用戶的青睞，最具有代表性的當數(shù)安捷倫的HP8452/84533 J。在儀器構(gòu)型方面，從單光束發(fā)展為雙光束，現(xiàn)在幾乎所有高級分光光計都是雙光束的，有些高精度的儀器采用雙單色器，使得儀器在分辨率和雜散光等方面的性能大大提高，如Varian(瓦里安)的Cary 1

18、/3/400。隨著集成電路技術(shù)和光纖技術(shù)的發(fā)展，聯(lián)合采用小型凹面全息光柵和陣列探測器以及USB接口等新技術(shù)，已經(jīng)出現(xiàn)了一些攜帶方便、用途廣泛的小型化甚至是掌上型的紫外可見分光光度計。紫外可見光分光光度計等不同類別、不同等級和規(guī)格的檢測，僅在植床食品檢驗中應(yīng)用已十分普遍最新自動化生化分析儀也已經(jīng)進入我國的食品食品檢驗領(lǐng)域。二紫外可見分光光度技術(shù)的基本應(yīng)用1. 測定溶液中物質(zhì)的含量可見或紫外分光光度法都可用于測定溶液中物質(zhì)的含量。測定標準溶液(濃度已知的溶液)和未知液(濃度待測定的溶液)的吸光度，進行比較，由于所用吸收池的厚度是一樣的。也可以先測出不同濃度的標準液的吸光度，繪制標準曲線，在選定的濃

19、度范圍內(nèi)標準曲線應(yīng)該是一條直線，然后測定出未知液的吸光度，即可從標準曲線上查到其相對應(yīng)的濃度。含量測定時所用波長通常要選擇被測物質(zhì)的最大吸收波長，這樣做有兩個好處：(1)靈敏度大，物質(zhì)在含量上的稍許變化將引起較大的吸光度差異；(2)可以避免其他物質(zhì)的干擾。2用紫外光譜鑒定化合物使用分光光度計可以繪制吸收光譜曲線。方法是用各種波長不同的單色光分別通過某一濃度的溶液，測定此溶液對每一種單色光的吸光度，然后以波長為橫座標，以吸光度為縱座標繪制吸光度波長曲線，此曲線即吸收光譜曲線。各種物質(zhì)有它自己一定的吸收光譜曲線，因此用吸收光譜曲線圖可以進行物質(zhì)種類的鑒定。一定物質(zhì)在不同濃度時，其吸收光譜曲線中，峰

20、值的大小不同，但形狀相似，即吸收高峰和低峰的波長是一定不變的。紫外線吸收是由不飽和的結(jié)構(gòu)造成的，含有雙鍵的化合物表現(xiàn)出吸收峰。紫外吸收光譜比較簡單，同一種物質(zhì)的紫外吸收光譜應(yīng)完全一致，但具有相同吸收光譜的化合物其結(jié)構(gòu)不一定相同。除了特殊情況外，單獨依靠紫外吸收光譜決定一個未知物結(jié)構(gòu)，必須與其他方法配合。紫外吸收光譜分析主要用于已知物質(zhì)的定量分析和純度分析。 3.比較最大吸收波長吸收系數(shù)的一致性由于紫外吸收光譜只含有23個較寬的吸收帶，而紫外光譜主要是分子內(nèi)的發(fā)色團在紫外區(qū)產(chǎn)生的吸收，與分子和其它部分關(guān)系不大。具有相同發(fā)色團的不同分子結(jié)構(gòu)，在較大分子中不影響發(fā)色團的紫外吸收光譜，不同的分子結(jié)構(gòu)有

21、可能有相同的紫外吸收光譜，但它們的吸收系數(shù)是有差別的。如果分析樣品和標準樣品的吸收波長相同，吸收系數(shù)也相同，則可認為分析樣品與標準樣品為同一物質(zhì)。4反應(yīng)動力學研究借助于分光光度法可以得出一些化學反應(yīng)速度常數(shù)，并從兩個或兩個以上溫度條件下得到的速度數(shù)據(jù)，得出反應(yīng)活化能。5.純度檢驗紫外吸收光譜能測定化合物中含有微量的具有紫外吸收的雜質(zhì)。如果化合物的紫外可見光區(qū)沒有明顯的吸收峰，而它的雜質(zhì)在紫外區(qū)內(nèi)有較強的吸收峰，就可以檢測出化合物中的雜質(zhì)。6.氫鍵強度的測定不同的極性溶劑產(chǎn)生氫鍵的強度也不同，這可以利用紫外光譜來判斷化合物在不同溶劑中氫鍵強度，以確定選擇哪一種溶劑。7.絡(luò)合物組成及穩(wěn)定常數(shù)的測定

22、金屬離子常與有機物形成絡(luò)合物，多數(shù)絡(luò)合物在紫外可見區(qū)是有吸收的，我們可以利用分光光度法來研究其組成。三在食品成分分析中的主要應(yīng)用紫外-可見分光光度計在食品酶分析中的應(yīng)用：1.酶對食品加工的影響酶是生物活細胞產(chǎn)生的一類具有催化功能的蛋白質(zhì)。酶除了具有高的催化效率特性外，還具有很高的專一性，利用它能選擇性地將個別食品組分改性，而不影響到其它組分。因此，酶在食品科學中相當重要，通過酶的作用能引起食品原料的品質(zhì)發(fā)生變化，也能在比較溫和的條件下加工和改良食品。2.紫外-可見分光光度法測定酶活2.1 -半乳糖苷酶-半乳糖苷酶，又稱乳糖酶(Lactase)。能水解乳糖來降低乳制品的乳糖含量，從而提高乳制品的

23、可消化性，用于低乳糖牛奶和非結(jié)晶型濃縮牛奶的生產(chǎn)及奶酪風味的改變，同時還可用于生產(chǎn)低聚半乳糖。【酶活測定】以O(shè)NPG為底物測定-半乳糖苷酶活力?！久富疃x】以O(shè)NPG為底物，375保溫酶解，每分鐘釋放lmolL鄰硝基酚的酶量，定義為1個酶活力單位。2.2 超氧化物歧化酶超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase，簡稱SOD)是一種十分重要的生物體防止氧化損傷的酶類，是生物體內(nèi)超氧陰離子清除劑，保護細胞免受損傷。SOD廣泛存在于各類生物體內(nèi)，所有好氧微生物細胞中都含有SOD。自1969年Mccord等人首次發(fā)現(xiàn)了SOD生物活性后，醫(yī)學界對其醫(yī)療作用做了許多研究，證明它具有抗衰老、抗

24、腫瘤、抗輻射、抗缺血、提高人體免疫力等作用，被專家稱為21世紀最有前途的藥用酶。歐美國家已開始將其應(yīng)用于醫(yī)療、食品、保健、化妝品等領(lǐng)域?！久富顪y定】在25 4.5ml 50mmolL pH8.3的K2HPO4- KH2PO4緩沖液中加入待測SOD樣液，再加入10ul 50mmolL的連苯三酚，迅速搖勻，倒人光徑lcm 的比色杯，在325nm波長下每隔30s測一次A值。同時測定Sigma公司的SOD標準品，對所測樣品SOD活性進行校正?！久富疃x】在lmL反應(yīng)液中，每分鐘抑制連苯三酚自氧化速率達50時的酶量為一個酶活單位， 即325nm 0.035ODmin為一個酶活單位。2.3 多酚氧化酶多酚

25、氧化酶(PPO)是一類由核基因編碼在細胞質(zhì)中合成的含銅質(zhì)體的金屬酶，其作用機理在于銅的氧化-還原作用。大麥中的多酚物質(zhì)經(jīng)過PPO的催化氧化后，具有單寧性質(zhì)，易和蛋白質(zhì)起交聯(lián)作用而沉淀出來，進而影響啤酒的色澤、泡沫、風味和非生物穩(wěn)定性。大麥中部分PPO以“潛伏”狀態(tài)存在，在浸麥過程中，可通過去除一些酶抑制劑、蛋白酶作用或其他的一些方式使其活性在浸麥過程中提高。在大麥發(fā)芽過程中，PPO的活力較高，影響著麥芽的質(zhì)量。因此，在制麥過程中應(yīng)該降低PPO活性。酶活測定】0.1mL酶液與lmL 0.1 molL鄰苯二酚(用pH 8.4檸檬酸-磷酸緩沖液配制)80反應(yīng)3min，用2mL 20TCA終止反應(yīng)，于

26、波長450nm處用分光光度計測定吸收值?！久富疃x】上述條件下，將每分鐘OD值增加0.01定義為1個酶活力單位。紫外-可見分光光度法分析食品中的多種物質(zhì)： 酸奶中維生素A的測定酸奶是一種發(fā)酵奶制品，由于其豐富的營養(yǎng)成分以及獨特的風味、口感而深受人們的喜愛。酸奶中含有一定量的維生素A，作為人體必需的營養(yǎng)元素，分析測定維生素A的含量具有重要的意義。目前分析維生素A的方法很多，有熒光分光光度法、氣相色譜潔、高壓液相色譜法、可見分光光度法。其中比較常用的是采用三氯化銻作為顯色劑的分光光度法，但這種方法有幾個缺點。首先，生成的藍色化合物不穩(wěn)定，很快褪色，比色測定必須在6s內(nèi)完成：其次，三氯化銻具有強腐蝕

27、性及毒性；此外，很易吸水，受溫度、濕度的影響大，器皿裝過試劑后難于洗滌等。王明華等采用紫外分光光度法分析測定酸奶中維生素A的含量，樣品經(jīng)過皂化、提取、除溶劑等步驟后，于328 nm處測定其吸光度，測得維生素A的回收率為103. 3%，平均值的標準偏差為0.32，變異系數(shù)為0.01;同時進行了維生素D對維生素A測定的干擾實驗，實驗結(jié)果表明，維生素D的存在不影響維生素A的測定結(jié)果。該方法與三氯化銻比色法相比，操作簡便、安全?！?】水果汁中果糖的測定果糖的測定法有高效液相色譜法、離子選擇電極法、傅里葉變換近紅外光譜法和分光光度法等，前三種方法的操作都較復(fù)雜，而分光度法報道的方法中均加入顯色劑，如間苯

28、二酚，鐵氰化鉀等，這些物質(zhì)對環(huán)境有污染。占達東通過1 14研究發(fā)現(xiàn)：果糖在鹽酸的作用下可生成羥甲基糠醛，通過對果糖在鹽酸介質(zhì)中的吸收光譜進行掃描，發(fā)現(xiàn)在波長291 nm處有最大吸收：果糖濃度在030 u g/mL范圍內(nèi)服從比爾走律。利用該研究用紫外分光光度法測定了蘋果鮮汁、鴨梨鮮汁和桶子鮮汁中的果糖含量。通過研究發(fā)現(xiàn)該方法具有很好的選擇性和較高的靈敏度，適用于組成較復(fù)雜的分析對象中的果糖含量測定。該方法具有簡便、快速、靈敏，對環(huán)境不造成污染，樣品無需預(yù)處理等特點?！?】番茄紅素的測定番茄紅素是一種具有多種生理功能的類胡蘿I、素，通常狀況下與其它類胡蘿I、素同時存在于多種生物體中。在實際研究中，

29、番茄紅素的準確測定始終是困擾研究人員的一個難題。目前的測定方法主要有：(1)以蘇丹紅代替番茄紅素作為標準品，繪制標準曲線，用以測定番茄紅素的含量；(2)以石油醚或正己烷為溶劑，在472 nm比色測定其吸收光度，用摩爾消光系數(shù)(E1 00巾1 cm= 3450)來計算其中番茄紅素的含量；(3)依高壓液相色譜法，通過與標準樣品的峰面積比來測定樣品中番茄紅素的含量?，F(xiàn)有這幾種測定番茄紅素的方法普遍存在著一定的缺陷，(1)和(2)不需要標準品，但其系統(tǒng)誤差較太，同時又不能排除B一胡蘿l、素等其它類胡蘿I、素的干擾；(3)要求番茄紅素的標準樣品，而高純度的番茄紅素本身穩(wěn)定性很差，不宜長期存放，且價格非常

30、昂貴，日常測定難度很大。而HPLC測定又要受到儀器設(shè)備及標準樣品的限制。張連富心1等從番茄紅素及B一胡蘿l、素（影響番茄紅素測定的含量最多的類胡蘿l素）的紫外吸收光譜的差異入手，確定了以含2%二氯甲烷為溶劑、以502 nm吸收峰為檢測波長的番茄紅素測定方法，避免了其它類胡蘿I、素的干擾，并將其轉(zhuǎn)化為用消光系數(shù)來計算的形式，避免了番茄紅素標準樣品的制約。溶液中番茄紅素的濃度在0. 00173.12 ug/mL范圍內(nèi)時，該檢測方法的可信度在90%以上?！?】食品中甜蜜素的測定用乙酸乙酯在酸性條件下提取食品中的甜蜜素,再以堿性水反提取,加入過量的次氯酸鈉將甜蜜素轉(zhuǎn)變?yōu)镹,N-二氯環(huán)己胺,溶于環(huán)己烷4

31、,在波長304nm處測定。儀器和試劑： 754紫外分光光度計為上海第二光學儀器廠產(chǎn)品;乙酸乙酯、環(huán)己烷、10%()硫酸、0.1mol/L氫氧化鈉、20g/L次氯酸鈉溶液(均為分析純試劑);1.0g/L甜蜜素標準液,由國家標準物質(zhì)研究中心提供,1999年1月定值。標準曲線制作：分別吸取甜蜜素標準液0.00、2.00、4.00、6.00、8.00、10.00mL(相當于甜蜜素0.00、2.00、4.00、6.00、8.00、10.00mg)于250mL分液漏斗中。各加入10%硫酸100mL,乙酸乙酯80mL振搖提取2min,棄水相。用30、20、20mL 0.1mol/L氫氧化鈉溶液振搖提取3次,

32、每次1min,合并水相于另一250mL分液漏斗中。往水相加入環(huán)己烷10mL振搖提取1min,棄去環(huán)己烷,加入10%硫酸15mL、環(huán)己烷10.0mL、20g/L次氯酸鈉溶液5mL,振搖2min,再加入20g/L次氯酸鈉溶液5mL,振搖2min,棄水相。先后用0.1mol/L氫氧化鈉、蒸餾水各50mL洗滌環(huán)己烷層,經(jīng)脫脂棉將環(huán)己烷濾于10mL比色管中,用環(huán)己烷調(diào)零,于波長304nm處測定吸光度。樣品測定：1.液體食品稱取相當含甜蜜素6.0mg樣品(如含二氧化碳,先加熱除去)于250mL分液漏斗中,以下同標準曲線方法測定。2.可溶于水的固體稱取相當含甜蜜素6.0mg樣品加入適量的水溶解后,轉(zhuǎn)入250

33、mL分液漏斗中,以下同標準曲線方法測定。3.不溶于水的固體稱取適量經(jīng)磨碎的固體于100mL容量瓶中,加水至刻度,不時搖勻,浸泡1h以上,取相當于甜蜜素6.0mg的濾液于250mL分液漏斗中,以下同標準曲線方法測定。【4】三：在食品安全檢測中的主要應(yīng)用1 分光光度法測定食品中硼砂碉砂、硼酸曾作為食品的防腐劑和膨松劑添加到肉丸等食品中，增加食物的韌性、脆度，有增強食物口感及外觀的作用。硼砂、硼酸在體內(nèi)蓄積，排泄很慢，影響消化酶的作用，每日食用0.59引起食欲減退，妨礙營養(yǎng)物質(zhì)吸收，成人食用1-39即可引起中毒，對人體有害，因此在我國硼砂、硼酸是禁用的食品添加劑。但從日常的檢測結(jié)果看，還是有食品在加

34、工過程使用硼砂、硼酸。硼砂、硼酸的標淮檢驗方法是T5009.29 - 20032的硼砂、硼酸定性試驗，分別有姜黃試紙法和焰色反應(yīng)。為開發(fā)新方法3.4，現(xiàn)嘗試用濕式消解法消化樣品，電感耦合等離子體發(fā)射光譜法（ICP - AES法）測定食品中硼元素含量，以硼砂(Na28407 IOH，0計)估算硼砂、硼酸的加入量。對68份樣品（包括牛肉丸、蝦餃、粽、牛百葉、豬肚、豬大腸）用國標法定性測定和JCP - AES法定量測定，進行比對試驗。紫外可見分光光度法檢測食品中的鎘分光光光度法是利用顯色劑與鎘離子形成穩(wěn)定的顯色絡(luò)合物后可用分光光度計測定。此法具有簡便、儀器簡單等優(yōu)點。胡勁梅等為了同時測定鉛和鎘，建立

35、了以電荷耦合器件作為陣列光信號探測器，小型多色儀和專用微機組成的分光光度裝置，研究了卟啉與鉛極譜法。和鎘顯色反應(yīng)的最佳條件。測定了合成試樣、陶瓷等浸泡液中鉛和鎘的含量。李秋萍等通過對新試劑2,6-二甲苯基重氮氨基偶氮苯與鎘顯色反應(yīng)研究，建立了檢測食品中鎘的新方法。葉瑞洪等通過分析比較FAAS、KIMIBK螯合萃取FAAS和鎘-碘化鉀-羅丹明B分光光度法三種方法，從靈敏度、檢出限、儀器價格等方面進行比較，得出采用鎘一碘化鉀羅丹明B分光光度法測定食品中鎘的含量方法最為簡單易行，操作快速，靈敏度高、選擇性好。樊月琴等研究了4-甲基-2,5.二磺酸基苯基重氮氨基偶氮苯與鎘的顯色反應(yīng)可用于鎘的含量檢測。

36、沈燕等合成的1-（5-硝基-2-吡啶）-3-（偶氮苯磺酸）三氮稀用于鎘的檢測結(jié)果較好。吳繼魁等研究了meso-四（對羥基苯）卟琳光度法測定痕量鎘的方法。王亮等研究了【2-4-甲基喹啉】-偶氮丁-5二乙氨基苯酚與鎘的顯色反應(yīng)，結(jié)果令人滿意。李英杰等建立了以雙硫腙為顯色劑可同時測定鋅、鎘、鉛的方法。莊海燕等探討了在聚乙烯醇存在下，鎘（）-碘化鉀-羅丹明B分光光度法測定食品中微量鎘的可行性?！?】紫外可見分光光度法測定食品中的蘇丹紅蘇丹紅號是一種人工合成的化工染料，化學名稱為1-4-（苯基偶氮）偶氮-2-萘酚。蘇丹紅號為致癌物質(zhì)1，2，被禁止作為食品添加劑使用。我國和歐盟標準檢測方法為液相色譜法3，

37、4，許多分析化學工作者對蘇丹紅染料的測定開展了研究，建立了一些有價值的測定方法，如HPLC法5-7、分子印跡固相萃取法8、毛細管液相色譜-質(zhì)譜法9、電離質(zhì)樸同位素稀釋法10已應(yīng)用于蘇丹紅染料的測定。但是上述方法由于儀器和試劑昂貴而難以普及。筆者研究了樣品的處理方法，樣品提取液用薄層展開后，用分光光度法測定，所用設(shè)備簡單，分析結(jié)果與國家標準HPLC法準確度相當。用分光光度法測定食品中吊白塊的含量吊白塊在使用過程中會分解出甲醛和二氧化硫，用分光光度法測量其在食品中的殘留量，判斷是否含有吊白塊。本方法簡單、快速、靈敏度高。甲醛合次硫酸氫鈉（NaHSO2CH2O.2H2O)俗稱吊白塊，易溶于水遇酸、堿、高溫即分解為甲醛和二氧化硫，作為增白劑、還原劑應(yīng)用于紡織印染工業(yè)由于甲醛已被國際上列為致癌物，所以吊白塊嚴禁在食品工業(yè)中使用但是近年來住市場發(fā)現(xiàn)個別小法商販，唯利是圖，在一些食品中使用吊白塊增加漂白效果嚴重的損害了消費者的健康。為了維護消費者的利益，保障廣大人民群眾的身體健康，建立食品中吊白塊的測定方法已迫在眉睫 吊白塊在使用過程中易分解，通過測定其分解產(chǎn)物甲醛、二氧化硫在食品的殘量判定是否含有吊白塊日前，我國已有的甲醛測定