消毒劑效力及有效期驗(yàn)證方案

1、WYETH PHARMACEUTICAL CO. LTD.惠氏制藥有限公司Qualification of Disinfectant Effectiveness and StabilityTMP-07-077TEST METHOD VALIDATION PROTOCOL分析方法驗(yàn)證方案方案編號(hào)(版本號(hào):):Protocol No. (Version:):(V: )TMP-07-077分析方法名稱TEST METHOD:QUALIFICATION OF DISINFECTANT EFFECTIVENESSAND STABILITY消毒劑效力及有效期確認(rèn)方案PROTOCOL APPROVAL PA

2、GE方案批準(zhǔn)頁P(yáng)ROTOCOL PREPARATION 方案準(zhǔn)備WYETH PHARMACEUTICAL CO., LTD.惠氏制藥有限公司SIGNATURE 簽名DATE日期QC Microbial AnalystQC Microbial AnalystPROTOCOL REVIEW 方案復(fù)核QC Senior AnalystQC ManagerQAValidation OfficerPROTOCOL APPROVAL匕準(zhǔn)Senior QO ManagerPROTOCOL REVISION HISTORY PAGE方案修訂歷史記錄頁REVISION NUMBER修訂次數(shù)VERSION版本號(hào)R

3、EVISION CONTENT修訂內(nèi)容01Original 原稿1. 目的 PURPOSE 52. 范圍 SCOPE 53. 引言 INTRODUCTION 54. 參考資料 REFENRENCE65. 驗(yàn)證方法 TEST METHOD65.1. 所用儀器和物料 65.2. 測(cè)試工作菌種65.3. 實(shí)驗(yàn)程序 66. 接受標(biāo)準(zhǔn)86.1. 消毒效力接受標(biāo)準(zhǔn)： 86.2. 中和效力控制及其接受標(biāo)準(zhǔn)： 8Page 5 of 81.目的 PURPOSE驗(yàn)證惠氏蘇州工廠目前使用的幾種消毒劑 Process LpHse:酸性、Process Vesphene se堿 性、Ethanol酒精溶液、快活溶液，在

4、不銹鋼、橡膠、瓷磚、玻璃、塑料門簾、墻面等不 同材質(zhì)上的消毒效力，同時(shí)驗(yàn)證消毒劑的使用有效期。2.范圍 SCOPE本驗(yàn)證需要驗(yàn)證的消毒劑有：Process LpHse:（酸性）、Process Vesphene H se:（堿性）、Ethanol酒精溶液、快活溶液 FORWARD disinfectant四種。表1:各消毒劑使用時(shí)涉及的材質(zhì)消母劑適用對(duì)象所涉及的材質(zhì)Process LpHse: 酸性酚類消毒劑 （廣譜、中效）生產(chǎn)設(shè)備/器具/車間 地面、墻壁、天花板不銹鋼、橡膠、瓷磚、玻璃、 塑料門簾、墻向ProcessVespheneH se: 堿性酚類消毒劑 （廣譜、中效）車間設(shè)備/器具/操

5、作 問地漏不銹鋼、橡膠、瓷磚、玻璃、 塑料門簾、墻向Ethanol酒精溶 液醇類消毒劑 （中效）生產(chǎn)設(shè)備/器具/微生 物實(shí)驗(yàn)室不銹鋼、橡膠、瓷磚、玻璃、 塑料門簾、墻向快活溶液季較鹽類消毒 齊1J（彳氐效）車間地面、墻壁、天 花板/非控制區(qū)域、 車間公用區(qū)不銹鋼、橡膠、瓷磚、玻璃、 塑料門簾、墻向3. 弓 I言 INTRODUCTION本驗(yàn)證的原理是，在某種材質(zhì)表面接種 0.1ml （10 4-105CFU）B菌種，室溫下自然風(fēng)干后, 將消毒劑直接噴在材質(zhì)表面，等消毒劑作用一段時(shí)間后，檢驗(yàn)沒有被殺滅的細(xì)菌數(shù)；根據(jù) 細(xì)菌被殺滅的數(shù)量，來判斷消毒劑的殺菌效果。實(shí)際消毒操作時(shí)，消毒劑噴到要消毒物體

6、表面后，再通過人為的涂擦等操作使消毒劑與物體表面充分接觸，同時(shí)，此操作也會(huì)機(jī)械 去除掉一部分微生物。在該驗(yàn)證中，消毒劑是噴到材質(zhì)表面，這種方法要比實(shí)際消毒時(shí)的 效果差，因此驗(yàn)證的結(jié)果更能體現(xiàn)實(shí)際的消毒效果。Qualification of Disinfectant Effectiveness and StabilityTMP-07-077WYETH PHARMACEUTICAL CO. LTD.惠氏制藥有限公司4. 參考資料REFENRENCEDisinfectant Effectiveness Study (812-Analytical Report-0807-1.0)SOPTS-35(V5

7、)5. 驗(yàn)證方法TEST METHOD5.1. 所用儀器和物料所用培養(yǎng)皿、移液管、容器均在121度下滅菌30分鐘后使用無菌一次性培養(yǎng)皿，移液管。生物安全柜(BHC-1300 n A/B 3生物安全柜)工作窗口吸入風(fēng)速為 0.5m/s 滅菌鍋培養(yǎng)箱(25度和32度各一個(gè))5.2. 測(cè)試工作菌種大腸埃希菌(CMCC(B)44102)菌種斜面金黃色葡萄球菌 (CMCC(B)26003)菌種斜面白色念珠菌(CMCC98001)菌種斜面環(huán)境菌種科氏葡萄球菌斜面(六、九、十月環(huán)境檢測(cè)沉降菌平板上連續(xù)檢出科 氏葡萄球菌，特選此菌為環(huán)境菌種)需驗(yàn)證的消毒劑應(yīng)質(zhì)量合格并在有效期即將結(jié)束時(shí)開始驗(yàn)證試驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)所用的

8、儀器設(shè)備均 在校正合格期限內(nèi)。5.3. 實(shí)驗(yàn)程序5.3.1. 消毒劑的配置：消毒劑按照相關(guān)的程序進(jìn)行稀釋，配置好的消毒劑溶液儲(chǔ)存在實(shí)際操作時(shí)使用 的噴壺中，在有效期內(nèi)(7天)每天模擬日常使用方法使用，第 8天開始驗(yàn)證試 驗(yàn)。消毒劑配置方法及消毒反應(yīng)時(shí)間見表 2.5.3.2. 材質(zhì)的準(zhǔn)備：所需的材質(zhì)均是在實(shí)際操作中消毒劑所消毒的表面材質(zhì)，準(zhǔn)備的材質(zhì)需為無菌材質(zhì)，在實(shí)驗(yàn)過程中，每個(gè)實(shí)驗(yàn)組需 3塊同種材質(zhì)同時(shí)進(jìn)行。Page 6 of 8WYETH PHARMACEUTICAL CO. LTD.惠氏制藥有限公司Qualification of Disinfectant Effectiveness an

9、d StabilityTMP-07-077表2.消毒劑配置方法及消毒反應(yīng)時(shí)間消母劑稀釋比例反應(yīng)時(shí)間菌種Process LpHse:酸性1:256(v/v)3,5,10minutes大腸埃希菌 金黃色葡錮球菌 白色念珠菌 科氏葡錮球菌Process Vesphen e se堿性1:128(v/v)3,5,10minutes大腸埃希菌 金黃色葡錮球菌 白色念珠菌 科氏葡錮球菌Ethanol酒精溶液75%2,3,5minutes大腸埃希菌 金黃色葡錮球菌 白色念珠菌 科氏葡錮球菌快活溶液1:10(v/v)3,5,10minutes大腸埃希菌 金黃色葡錮球菌 白色念珠菌 科氏葡錮球菌5.3.3. 菌懸

10、液的制備：取大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、白色念珠菌及環(huán)境菌種科氏葡萄球菌的營養(yǎng) 瓊脂斜面培養(yǎng)物，接種至營養(yǎng)瓊脂斜面上，在 35 37c培養(yǎng)20 22小時(shí)。再接 種上述菌種的新鮮培養(yǎng)物至營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基中，在 35 37c培養(yǎng)18 24小時(shí)， 上述營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)物用0.9%無菌生理鹽水溶液逐級(jí)10倍稀釋，制成每0.1 ml含 菌落數(shù)104-105CFU的菌懸液。5.3.4. 實(shí)驗(yàn)操作：準(zhǔn)備3塊待測(cè)表面材質(zhì)于生物安全柜內(nèi)，分別吸取 0.1 ml(104-105CFU)接種于3 塊待測(cè)表面材質(zhì)上，讓其在生物安全柜中自然風(fēng)干后待測(cè)，將配置好的的消毒 裝入噴壺中，均勻地噴灑在材質(zhì)的表面后立即開始計(jì)時(shí)，按表2

11、等計(jì)時(shí)結(jié)束后，迅速把該材質(zhì)放入100ml的D/E中和液中，充分振蕩1min后經(jīng)0.45微米的 濾膜過濾，用100ml/次的D/E中和液沖洗3次，取濾膜放在D/E中和瓊脂平板 上培養(yǎng)。培養(yǎng)條件：大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、白色念珠菌及環(huán)境菌種科氏葡萄球菌在30-35C ,至少3天，重復(fù)以上實(shí)驗(yàn)操作3次，完成驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)。5.3.5. 陰性控制實(shí)驗(yàn)：100ml的D/E中和液經(jīng)0.45-micron的濾膜后，取濾膜放在 D/E中和瓊脂平板上 培養(yǎng)，培養(yǎng)條件：細(xì)菌30-35C ,至少3天，5.3.6. 陽性控制實(shí)驗(yàn)：準(zhǔn)備3塊無菌的待測(cè)表面材質(zhì)于生物安全柜內(nèi)，分別吸取0.1 ml(10-100CFU)陽性菌

12、接種于3塊待測(cè)表面材質(zhì)上，讓其在生物安全柜中自然風(fēng)干后，將每種帶 菌的材質(zhì)放入100ml無菌的緩沖溶液中，充分振蕩1min,經(jīng)0.45微米的濾膜過 濾，用100ml/次的D/E中和液沖洗3次，取濾膜放置于D/E中和瓊脂平板上培 養(yǎng)。培養(yǎng)條件：大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、白色念珠菌及環(huán)境菌種科氏葡 萄球菌在30-35C ,至少3天。6.接受標(biāo)準(zhǔn)6.1. 消毒效力接受標(biāo)準(zhǔn)：計(jì)算Log Reduction,評(píng)價(jià)該種消毒劑對(duì)該菌種的殺滅效果，Log Reduction=Log(Average#of Organisms in Control Plates)-Log(Average# of Organisms in Test Plates)接受標(biāo)準(zhǔn)：Log Reduction136.2. 中和效力控制及其接受標(biāo)準(zhǔn)：吸5ml已配制好的消毒劑，經(jīng)0.45微米的濾膜過濾后，用100ml/次中和液沖洗3次，加入1ml菌懸液(10-100cfu)置濾膜上，用100ml/次中和7沖洗1次，取 濾膜放在D/E中和瓊脂平板上培養(yǎng)，計(jì)數(shù)。每種菌重復(fù)做3份樣品。分別取上述菌懸液1ml (10-100cfu)置100*