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文檔簡介
1、實(shí)驗(yàn)名稱:坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本制備& 不同強(qiáng)度和頻率的刺激對肌肉收縮的影響一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康恼莆栈臼中g(shù)器械的使用方法,學(xué)習(xí)制備具有正常興奮收縮功能的蛙類坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo) 本的基本操作技術(shù)。學(xué)習(xí)神經(jīng)-肌肉實(shí)驗(yàn)的電刺激方法及肌肉收縮的記錄方法。觀察刺激強(qiáng)度與肌肉收縮反應(yīng)的關(guān)系。觀察不同頻率的閾上刺激引起肌肉收縮形式的改變及關(guān)系。二、實(shí)驗(yàn)摘要肌肉組織的興奮主要表現(xiàn)為收縮活動(dòng)。 一個(gè)刺激是否能使組織發(fā)生興奮, 不僅與刺激形 式有關(guān),還與刺激時(shí)間、刺激強(qiáng)度有關(guān)。用方形電脈沖刺激組織, 在一定的刺激時(shí)間波寬 下,剛能引起組織發(fā)生興奮的刺激稱為閾刺激, 所到達(dá)的刺激強(qiáng)度稱為閾強(qiáng)度; 能引起組織 最大興奮的
2、最小刺激, 稱為最大刺激,相應(yīng)的刺激強(qiáng)度叫最大刺激強(qiáng)度; 界于閾刺激和最大 刺激間的刺激稱為閾上刺激,相應(yīng)的刺激強(qiáng)度稱為閾上刺激強(qiáng)度。肌肉收縮的形式,不僅與刺激本身有關(guān),而且還與刺激頻率相關(guān)。假設(shè)刺激頻率較小,使刺激間隔大于一次肌肉收縮舒張的持續(xù)時(shí)間,則肌肉收縮表現(xiàn)為一連串的單收縮;增大刺激頻率,使刺激間隔大于一次肌肉收縮舒張的時(shí)間、小于一次肌肉收縮舒張的持續(xù)時(shí)間,則肌肉產(chǎn)生不完全強(qiáng)直收縮;繼續(xù)增加刺激頻率,使刺激間隔小于一次肌肉收縮的收縮時(shí)間, 則肌肉產(chǎn)生完全強(qiáng)直收縮。三、材料與方法1材料:培養(yǎng)牛蛙、任氏液、常用手術(shù)器械、粗剪刀、蛙板、蛙釘、鋅銅弓、培養(yǎng)皿、滴管、棉線、張力換能器、雙凹夾、三
3、角支架、保護(hù)電極、一維位移微調(diào)器、RM62405多道生理信號采集處理系統(tǒng)2方法:1、坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本制備材料:牛蛙、常用手術(shù)器械、玻璃板、鋅銅弓、培養(yǎng)皿、滴管、任氏液、粗剪刀、蛙板、蛙釘、粗棉線方法:使用毀髓針將牛蛙進(jìn)行雙毀髓,用手術(shù)器械剝離后肢標(biāo)本,依次別離兩后肢,坐骨神經(jīng),股骨頭,游離腓腸肌后使用鋅銅弓進(jìn)行檢驗(yàn),獲得具有正常興奮收縮功能的腓腸肌標(biāo)2、不同強(qiáng)度和頻率的刺激對肌肉收縮的影響材料:蛙、任氏液、常用手術(shù)器械、粗剪刀、蛙板、蛙釘、棉線、大頭針、張力換能器、雙凹夾、三角支架、保護(hù)電極、一維位移微調(diào)器、RM624理多道生理信號采集處理系統(tǒng)方法:啟動(dòng)電腦與 RM624C®系統(tǒng)軟
4、件,設(shè)置儀器參數(shù)與時(shí)間參數(shù)儀器參數(shù):通道模式 為張力,采樣頻率 400hz-1khz ,掃描速度1s/div ,靈敏度10-30g ,時(shí)間參數(shù):放大倍數(shù) 100-200 ,耦合方式為DC,上限頻率10HZ,采樣間隔:1-5ms。將腓腸肌跟腱的扎線固定在 張力換能器的懸臂梁上,調(diào)節(jié)微距調(diào)節(jié)器前負(fù)荷: 1.5g,把刺激電極放在刺激電極上, 保持接觸良好。改變刺激強(qiáng)度與刺激頻率刺激強(qiáng)度實(shí)驗(yàn):刺激方式單次,刺激波寬0.1ms,刺激強(qiáng)度從0.1v逐漸增大,強(qiáng)度增量 0.05v ,連續(xù)記錄肌肉收縮曲線,記錄閾刺激和最大 刺激值,測量每一刺激強(qiáng)度所對應(yīng)的肌肉收縮張力;測量最大刺激時(shí)肌肉的收縮期和舒張期的時(shí)間
5、。刺激頻率實(shí)驗(yàn):采用連續(xù)單刺激,自動(dòng)頻率方式,起始頻率1hz,結(jié)束頻率30hz,步長1hz,組間延時(shí)大于5s,連續(xù)記錄不同頻率時(shí)的肌肉收縮曲線,觀察不同頻率時(shí)的肌肉收縮形態(tài)和張力變化,觀察測量各刺激頻率所對應(yīng)的肌肉收縮的最大張力,觀察并記錄其對骨骼肌收縮的影響。四、實(shí)驗(yàn)結(jié)果1坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本制備在實(shí)驗(yàn)中,雙毀髓后的牛蛙四肢癱軟,雙腿下垂不再進(jìn)行收縮。解剖后,可看見牛蛙心臟仍在收縮跳動(dòng),并能觀察到胃、肝、兩側(cè)的腎、大小腸、肺部等器官。游離腓腸肌后,用鋅銅弓檢驗(yàn)坐骨神經(jīng)的正常興奮收縮功能,當(dāng)蘸有液體的鋅銅弓接觸坐骨神經(jīng)時(shí),能明顯引 起腓腸肌收縮舒張。2刺激頻率對骨骼肌的收縮的影響實(shí)驗(yàn)截圖:實(shí)驗(yàn)數(shù)
6、據(jù):實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目收縮形態(tài)張力變化收縮最大張力刺激頻率Hz1收縮2.63 ±0.613.242不收縮2.65 土 0.73.353收縮2.67 ±1.013.684收縮2.7 ±1.444.145收縮2.74 ±1.734.476收縮2.78 ±1.894.677收縮2.83 ±1.884.718收縮2.89 ±1.854.749收縮2.93 ±1.964.8910收縮2.98 ±1.984.9611收縮3.02 土 2.045.0612收縮3.06 ±2.095.1513收縮3.09 ±2
7、.195.2814收縮3.14 ±2.265.415收縮3.18 ±2.395.5716收縮3.24 土 2.485.7217收縮3.28 ±2.515.7918收縮3.31 ±2.465.7719收縮3.32 土 2.455.7720收縮3.35 土 2.445.7921收縮3.39 ±2.515.922收縮3.45 土 2.566.0123收縮3.51 ±2.656.1624收縮3.61 ±2.716.3225收縮3.68 ±2.936.6126收縮3.83 土 3.066.8927收縮3.9 ±3.
8、177.0728收縮3.99 土 3.237.2229收縮4.98 ±2.227.2繪制折線圖可得:刺激頻率與骨骼肌張力平均值變化關(guān)系小大力張135791113 15 17 19 21 23 25 27 29刺激頻率根據(jù)圖表,我們可知折線圖總體平緩,呈上升趨勢,且上升幅度小。即刺激頻率逐漸提 高時(shí),張力大小隨之增大,且增幅小。在刺激頻率較小與較大時(shí),增加相同量的刺激頻率, 所引起的張力增大值相近。3刺激強(qiáng)度對骨骼肌收縮的影響實(shí)驗(yàn)截圖:實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù):實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目收縮幅度g收縮期時(shí)間s舒張期時(shí)間s刺激強(qiáng)度V0.20.044一一0.30.029一一0.40.059一一0.50.264一一0.60.
9、476一一0.70.447一一0.80.447一一0.90.44一一10.462一一1.10.498一一1.20.469一一1.30.513一一1.40.447一一1.50.418一一1.60.5280.050.2繪制折線圖得:度 幅 縮 收0.6不同刺激強(qiáng)度對骨骼肌收縮的影響0.50.40.30.20.1123456789 10 11 12 13 14 15 16刺激強(qiáng)度(0.1V)根據(jù)圖像,我們可知當(dāng)刺激強(qiáng)度逐漸增大時(shí),收縮幅度先是跳躍性增大, 其后保持一定波動(dòng),到達(dá)某個(gè)最大值開始逐漸下降。五、討論1、坐骨神經(jīng)-腓腸肌標(biāo)本在受到電刺激時(shí)是否表現(xiàn)“全或無”的特性,為什么?答:首先,“全或無現(xiàn)象”所描述的是“細(xì)胞要產(chǎn)生動(dòng)作電位,刺激強(qiáng)度和刺激持續(xù)時(shí)間必須到達(dá)一定的閾值。 任何性質(zhì)的刺激一旦刺激強(qiáng)度到達(dá)了閾值,動(dòng)作電位就會立刻產(chǎn)生, 刺激強(qiáng)度和刺激持續(xù)時(shí)間低于閾值不產(chǎn)生動(dòng)作電位無,動(dòng)作電位一旦發(fā)生,其幅值到達(dá)最大全”-一一摘自人體生理學(xué)第三版我認(rèn)為,在刺激強(qiáng)度-收縮幅度實(shí)驗(yàn)中某種程度上存在“全或無”現(xiàn)象,在刺激頻率-收縮幅度實(shí)驗(yàn)中則并不存在該現(xiàn)象。上圖為刺激頻率-收縮幅度的整體數(shù)據(jù)圖像,可知在0.1-3V的范圍內(nèi),收縮幅度緩慢且不斷上升,不存在收縮幅度“立刻產(chǎn)生”且“一旦
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