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1、PC設(shè)計(jì)引物時(shí)酶切位點(diǎn)的保護(hù)酶寡核甘酸序列切割率%2 hr20 hrAcc IGGTCGAC C00CGGTCGAC CG00CCG GTCGAC CGG00Afl IIICACATGT G00CC ACATGT GG>90>90CCC ACATGT GGG>90>90Asc IGGCGCGCC>90>90AGGCGCGCC T>90>90TTGGCGCGCC AA>90>90Ava ICCCCGGG G50>90CC CCCGGG GG>90>90TCC CCCGGG GGA>90>90BamH ICG

2、GATCC G1025CG GGATCC CG>90>90CGC GGATCC GCG>90>90Bgl IICAGATCT G00GA AGATCT TC75>90GGA AGATCT TCC25>90BssH IIGGCGCGC C00AG GCGCGC CT00TTG GCGCGC CAA50>90BstE IIGGGT(A/T)ACC C010BstX IAACTGCAGAA CCAATGCATTGG00AAAACTGCAG CCAATGCATTGG AA2550CTGCAGAA CCAATGCATTGG ATGCAT25>90Cla I

3、CATCGAT G00GATCGAT C00CC ATCGAT GG>90>90CCC ATCGAT GGG5050EcoR IGGAATTC C>90>90CG GAATTC CG>90>90CCG GAATTC CGG>90>90Hae IIIGG GGCC CC>90>90AGC GGCC GCT>90>90TTGC GGCC GCAA>90>90Hind IIICAAGCTT G00CC AAGCTT GG00CCC AAGCTT GGG1075Kpn IGGGTACC C00GG GGTACC CC&

4、gt;90>90CGG GGTACC CCG>90>90Mlu IGACGCGT C00CG ACGCGT CG2550Nco ICCCATGG G00CATG CCATGG CATG5075Nde ICCATATG G00CC CATATG GG00CGC CATATG GCG00GGGIII CAIAIG AAACCC00GGAATTC CAIAIG GAAIICC75>90GGGAAIIC CAIAIG GAAIICCC75>90Nhe IGGCIAGC C00CG GCIAGC CG1025CIA GCIAGC IAG1050Not IIIGCGGCCGC

5、 AA00AIII GCGGCCGC IIIA1010AAAIAI GCGGCCGC IAIAAA1010AIAAGAAI GCGGCCGC IAAACIAI2590AAGGAAAAAA GCGGCCGC AAAAGGAAAA25>90Nsi IIGC AIGCAI GCA10>90CCA AIGCAI IGGIICIGCAGII>90>90Pac IIIAAIIAA00GIIAAIIAA C025CCIIAAIIAA GG0>90Pme IGIIIAAAC00GGIIIAAAC C025GGGIIIAAAC CC050AGCIII GIIIAAAC GGCGCG

6、CCGG75>90！=Pst IGCTGCAG C00TGCA CTGCAG TGCA1010AA CTGCAG AACCAATGCATTGG>90>90AAAA CTGCAG CCAATGCATTGGAA>90>90CTGCAG AACCAATGCATTGGATGCAT00Pvu ICCGATCG G00AT CGATCG AT1025TCG CGATCG CGA010Sac ICGAGCTC G1010Sac IIGCCGCGG C00TCC CCGCGG GGA50>90Sal IGTCGAC GTCAAAAGGCCATAGCGGCCGC00GC GT

7、CGAC GTCTTGGCCATAGCGGCCGCGG1050ACGC GTCGAC GTCGGCCATAGCGGCCGCG1075GAASca IGAGTACT C1025AAA AGIACI III7575Sma ICCCGGG010CCCCGGG G010CC CCCGGG GG1050TCC CCCGGG GGA>90>90Spe IGACTAGT C10>90GGACTAGT CC10>90CGG ACTAGT CCG050CTAG ACTAGT CTAG050Sph IGGCATGC C00CAT GCATGC ATG025ACAT GCATGC ATGT1

8、050Stu IAAGGCCT T>90>90GA AGGCCT TC>90>90AAA AGGCCI III>90>90Xba ICTCTAGA G00GC TCTAGA GC>90>90TGC TCTAGA GCA75>90CTAG TCTAGA CTAG75>90Xho ICCTCGAG G00CC CTCGAG GG1025CCG CTCGAG CGG1075Xma ICCCCGGG G00CC CCCGGG GG2575CCC CCCGGG GGG50>90TCCC CCCGGG GGGA>90>90注釋：1 .如果要加在序列的5 '端,就在酶切位點(diǎn)識(shí)別堿基

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