a酵母菌的形態(tài)觀察ppt課件

1、一 教學(xué)要求 學(xué)習并掌握形狀察看及死活細胞的鑒別方法。二 實驗原理 酵母菌是不運動的單細胞真核微生物，其大小通常比細菌大幾十倍甚至十幾倍。大多數(shù)以出芽方式進展無性繁衍，有的分裂繁衍；有性繁衍是經(jīng)過接合產(chǎn)生子囊孢子。本實驗是經(jīng)過美藍染液水浸片和水碘液水浸片來察看酵母的形狀和出芽生殖方式。 美藍是一種無毒的染料，它的氧化型呈藍色，復(fù)原型無色。用美藍對酵母的活細胞進展染色時，由于細胞的新陳代謝作用，細胞內(nèi)具有較強的復(fù)原才干，使美藍由藍色的氧化型變?yōu)闊o色的復(fù)原型。因此，具有復(fù)原才干的酵母活細胞是無色的，而死細胞或代謝作用微弱的衰老細胞那么呈藍色，借此即可對酵母菌的死活細胞進展鑒別。Scanning e

2、lectron micrograph of the common bakers and brewers yeast Saccharomyces cerevisiae. Note the budding division and previous bud scars.l菌種：斯達油脂酵母Lipomyces starkeyi2. 0.l 培育基和試劑：麥芽汗瓊脂培育基，0.05 和0.1 呂氏堿性美藍染色液，革蘭氏染色用碘液.l顯微鏡，玻片等.四四 操作步驟操作步驟 1、菌種活化、菌種活化將酵母移種至新穎的麥芽汁瓊脂斜面上，將酵母移種至新穎的麥芽汁瓊脂斜面上，2528培育培育48 h左右備用。左右

3、備用。2、美藍鏡片的察看、美藍鏡片的察看1在載玻片中央加一滴在載玻片中央加一滴0.1%呂氏堿性美藍染色掖，然呂氏堿性美藍染色掖，然后按無菌操作用接種環(huán)挑取少量酵母菌苔放在染液中，混后按無菌操作用接種環(huán)挑取少量酵母菌苔放在染液中，混合均勻。合均勻。2用鑷子取一塊蓋玻片，先將一邊與菌液接觸，然后用鑷子取一塊蓋玻片，先將一邊與菌液接觸，然后漸漸將蓋玻片放下使其蓋在菌液上。漸漸將蓋玻片放下使其蓋在菌液上。3將制片放置約將制片放置約3min后鏡檢，先用低倍鏡然后用高倍后鏡檢，先用低倍鏡然后用高倍鏡察看酵母的形狀和出芽情況，并根據(jù)顏色來區(qū)別死活細鏡察看酵母的形狀和出芽情況，并根據(jù)顏色來區(qū)別死活細胞。胞。4

4、染色約染色約0.5h后再次進展察看，留意死活細胞數(shù)量能否后再次進展察看，留意死活細胞數(shù)量能否添加。添加。 5用0.05%呂氏堿性美藍染液反復(fù)上述操作。3、水一碘液鏡片的察看在載玻片中央加一小滴革蘭氏染色用碘液，然后在其上加3小滴水，取少許酵母菌苔放在水一碘液中混勻，蓋上蓋玻片后鏡檢。 本卷須知1、加染液不宜過多或過少，否那么，在蓋上蓋玻片時，菌液會溢出或出現(xiàn)大量氣泡而影響察看。2、蓋玻片不宜平著放下，以免產(chǎn)生氣泡影響察看。六 思索題1、呂氏堿性美藍染液濃度和作用時間的不同，對酵母菌死細胞數(shù)量有何影響？試分析其緣由。2、在顯微鏡下，酵母菌有哪些突出的特征區(qū)別于普通細菌？ 一 教學(xué)要求 學(xué)習并掌握

5、酵母菌子囊孢子的察看方法。二、根本原理 子囊孢子是子囊菌類真菌有性生殖產(chǎn)生的有性孢子。在酵母菌中，能否構(gòu)成子囊孢子及其形狀是酵母菌分類鑒定的重要根據(jù)之一。酵母菌構(gòu)成子囊孢子需求一定的條件，所以對不同種屬的酵母要選擇適宜構(gòu)成子囊孢子的培育基。 lAscosporelFormed in a sac (ascus)l菌種：同前.l試劑：5孔雀綠水溶液，0.5番紅水溶液，95乙醇.l顯微鏡，玻片等.四四 操作步驟操作步驟1、菌種活化、菌種活化將酵母移種至新穎的麥芽汁瓊脂斜面上，將酵母移種至新穎的麥芽汁瓊脂斜面上，2528培育培育24h左左右，然后再轉(zhuǎn)種右，然后再轉(zhuǎn)種23次。次。 2、產(chǎn)孢培育、產(chǎn)孢培育將經(jīng)活化的菌種轉(zhuǎn)接到麥氏瓊脂斜面上，將經(jīng)活化的菌種轉(zhuǎn)接到麥氏瓊脂斜面上，2528培育約培育約1周。周。 3、制片、制片取經(jīng)產(chǎn)孢培育的酵母斜面培育物，在凈潔載玻片上按常規(guī)涂取經(jīng)產(chǎn)孢培育的酵母斜面培育物，在凈潔載玻片上按常規(guī)涂片、枯燥、固定。片、枯燥、固定。 4、染色滴加5%孔雀綠染色1min。5、脫色用95%乙醇脫色30s，水洗。6、復(fù)染用0.5%番紅復(fù)染30s，水洗，用吸水紙吸干。7、鏡