葉綠體色素提取和分離

1、葉綠體 色素提取和分離中學(xué) 生物 實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮筒牧蠈?shí)驗(yàn)?zāi)康膶?shí)驗(yàn)?zāi)康膙 初步掌握提取和分離葉綠體中色素的方法。初步掌握提取和分離葉綠體中色素的方法。v 探索葉綠體中有幾種色素。探索葉綠體中有幾種色素。實(shí)驗(yàn)材料實(shí)驗(yàn)材料實(shí)驗(yàn)原理1 1、葉綠體中含有兩大類色素（葉綠素和類胡、葉綠體中含有兩大類色素（葉綠素和類胡蘿卜素），它們?nèi)苡谟袡C(jī)溶劑，因此可選用蘿卜素），它們?nèi)苡谟袡C(jī)溶劑，因此可選用乙醇或丙酮進(jìn)行提取。乙醇或丙酮進(jìn)行提取。2 2、層析液是一種脂溶性很強(qiáng)的有機(jī)溶劑，葉、層析液是一種脂溶性很強(qiáng)的有機(jī)溶劑，葉綠體內(nèi)的色素在層析液中的溶解度各不相同，綠體內(nèi)的色素在層析液中的溶解度各不相同，溶解度越高，在濾

2、紙上的擴(kuò)散速度越快，反溶解度越高，在濾紙上的擴(kuò)散速度越快，反之則慢，可以將葉綠體中的色素分離開來。之則慢，可以將葉綠體中的色素分離開來。因此采用紙層析法進(jìn)行分離。因此采用紙層析法進(jìn)行分離。實(shí)驗(yàn)原理3 3、綠葉中的色素能夠溶解在有機(jī)溶劑無水乙、綠葉中的色素能夠溶解在有機(jī)溶劑無水乙醇中，提取綠葉中的色素。（相似相溶）醇中，提取綠葉中的色素。（相似相溶）4 4、SiO2SiO2：使綠葉充分研磨，釋放葉綠體中的：使綠葉充分研磨，釋放葉綠體中的色素。色素。5 5、CaCO3CaCO3：防止研磨時色素受到破壞。：防止研磨時色素受到破壞。葉綠體中色素組成葉綠體中葉綠體中的色素的色素葉綠體中色素的對比項(xiàng)目項(xiàng)目

3、色素顏色色素顏色吸收光譜吸收光譜濾紙色素層濾紙色素層譜譜葉綠素葉綠素a藍(lán)綠色紅光中下層、藍(lán)綠色葉綠素b藍(lán)綠色藍(lán)紫色最下層、黃綠色類胡蘿卜素胡蘿卜素橙黃色藍(lán)光最上層、橙黃色葉黃素黃色藍(lán)紫光中上層、黃色實(shí)驗(yàn)步驟用天平稱取用天平稱取5 5克菠菜葉，剪碎克菠菜葉，剪碎少許二氧化硅、碳酸鈣少許二氧化硅、碳酸鈣+5ml+5ml丙酮丙酮 取單層尼龍布折疊，放入漏斗，取單層尼龍布折疊，放入漏斗，把漏斗放入試管，架到試管架上把漏斗放入試管，架到試管架上將研磨好的菠菜葉加到漏斗中過濾將研磨好的菠菜葉加到漏斗中過濾研缽研缽迅速、充分地進(jìn)行研磨迅速、充分地進(jìn)行研磨 注意：收集好的研磨液及時用注意：收集好的研磨液及時用

4、棉塞塞緊。棉塞塞緊。 二氧化硅：為二氧化硅：為了使研磨充分；了使研磨充分； 碳鈣：保護(hù)色碳鈣：保護(hù)色素免受破壞；素免受破壞； 丙酮：色素的丙酮：色素的溶劑。溶劑。 注意防止丙酮揮發(fā)。注意防止丙酮揮發(fā)。實(shí)驗(yàn)步驟鉛筆畫線，剪角鉛筆畫線，剪角用毛細(xì)吸管吸取少量濾液用毛細(xì)吸管吸取少量濾液 ，畫線，重復(fù)，畫線，重復(fù)2-32-3次次 燒杯中倒入層析液（不要沒過濾液線），將濾紙條輕燒杯中倒入層析液（不要沒過濾液線），將濾紙條輕輕插入，培養(yǎng)皿蓋住小燒杯輕插入，培養(yǎng)皿蓋住小燒杯 具體實(shí)驗(yàn)步驟材料剪碎材料剪碎加入有機(jī)溶劑加入有機(jī)溶劑研磨、勻漿研磨、勻漿過濾過濾提取液提取液實(shí)驗(yàn)結(jié)果實(shí)驗(yàn)關(guān)鍵v選材時應(yīng)注意選擇鮮嫩、色

5、濃綠、無漿汁選材時應(yīng)注意選擇鮮嫩、色濃綠、無漿汁的葉片。如菠菜葉、棉花葉、洋槐葉等。的葉片。如菠菜葉、棉花葉、洋槐葉等。v畫濾液細(xì)線時，應(yīng)以細(xì)、直、顏色濃綠為畫濾液細(xì)線時，應(yīng)以細(xì)、直、顏色濃綠為標(biāo)準(zhǔn)，重復(fù)畫線時必須等上次畫線干燥衙標(biāo)準(zhǔn)，重復(fù)畫線時必須等上次畫線干燥衙再進(jìn)行，重復(fù)再進(jìn)行，重復(fù)2-32-3次。次。v層析時不要讓濾液細(xì)線觸及層析液層析時不要讓濾液細(xì)線觸及層析液 注意事項(xiàng)v因丙酮和層析液都是易揮發(fā)且有一定毒性的有機(jī)因丙酮和層析液都是易揮發(fā)且有一定毒性的有機(jī)溶劑，所以研磨要快，收集的濾液要用棉塞塞住，溶劑，所以研磨要快，收集的濾液要用棉塞塞住，層析時要加蓋，盡量減少有機(jī)溶劑的揮發(fā)。層析時要加蓋，盡量減少有機(jī)溶劑的揮發(fā)。v在研磨時要加少許二氧化硅，目的是為了研磨充在研磨時要加少許二氧化硅，目的是為了研磨充分，有利于色素的提??；加少許碳酸鈣的目的是分，有利于色素的提取；加少許碳酸鈣的目的是為了防止研磨過程中，葉綠體中的色素受到破壞。為了防止研磨過程中，葉綠體中的色素受到破壞。v分離色素時，一定不要讓濾紙條上的濾液細(xì)線接分離色素時，一定不要讓濾