黃芪超微粉增強(qiáng)免疫功能及抗疲勞作用的研究

1、黃黃超微粉增強(qiáng)免疫功能及抗疲勞作用的研究摘 要：目的：研究黃黃超微粉對(duì)免疫功能的影響及抗疲勞的作用，并與黃黃 飲片進(jìn)行比較。方法：采用免疫器官重量法測(cè)定免疫指標(biāo)，采用小鼠負(fù)重游泳 試驗(yàn)觀察抗疲勞作用。結(jié)果：黃黃超微粉能夠顯著增加免疫器官的重量；能夠 顯著延長(zhǎng)小鼠負(fù)重游泳時(shí)間。結(jié)論：黃黃超微粉具有增強(qiáng)免疫、抗疲勞的功關(guān)鍵詞：黃黃；超微粉；增強(qiáng)免疫；抗疲勞超微粉碎技術(shù)是近年來(lái)國(guó)際上興起的一種新型物料加工 技術(shù)，該技術(shù)是一種純物理過(guò)程，中藥的超微粉碎是指以生物細(xì)胞破壁為目的 的粉體作業(yè)，它不以粉體的細(xì)度為目的，而是追求細(xì)胞的破壁率。超微粉碎后 的藥材細(xì)粉，半徑很小，藥物的表面積相應(yīng)增大，從而提高了有

2、效成分的溶出 率。由于細(xì)胞壁在粉碎過(guò)程中大量被破壞，有效成分不需要通過(guò)細(xì)胞壁和細(xì)胞 膜就能釋放出來(lái)，這樣就提高了藥物的釋放量和釋放速度。因此小劑量的超微 粉碎破壁細(xì)粉即可達(dá)到大劑量普通藥材的藥效 11-21 0本文觀察了黃黃超微粉對(duì)免疫功能的影響及抗疲勞作用，并與黃黃飲片進(jìn) 行了比較，為黃黃超微粉的臨床應(yīng)用提供一定的理論依據(jù)。1、材料1.1 試劑與儀器碳酸鈉：天津富晨化學(xué)試劑廠生產(chǎn)，批號(hào) 20100827;注射用環(huán)磷酰胺， 江蘇恒瑞制藥集團(tuán)，批號(hào)10010521;氯化鈉注射液，國(guó)藥集團(tuán)有限公司生產(chǎn)， 批號(hào)08060010;墨汁，北京一得閣墨業(yè)有限責(zé)任公司生產(chǎn)；JA1203N型電子天平，；The

3、rmo酶標(biāo)儀。1.2 藥物黃黃超微粉，由江西中醫(yī)學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)部提供。黃黃飲片，由江西中醫(yī)學(xué) 院附屬醫(yī)院提供，黃黃飲片使用常規(guī)的煎煮法提取，黃黃碳超微粉使用前以蒸 儲(chǔ)水制成混懸液，4c保存。1.3 動(dòng)物KM中小鼠，SPF級(jí)，合格證號(hào)：由江西中醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，合格 證號(hào)：SCXK（贛）2005-00011.4 統(tǒng)計(jì)方法所用計(jì)量資料用（土 s）表示，采用SPSS13.0 for windows統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù) 分析，計(jì)量資料組間比較采用 One-Way ANOVA2、方法與結(jié)果2.1對(duì)免疫抑制小鼠免疫器官重量的影響 取SPF級(jí)KM中小鼠，隨機(jī)分 為正常對(duì)照組，模型對(duì)照組，黃黃飲片組（2.0g

4、 kg-1 ）,黃黃超微粉分為2.0g - kg-1、1.0g kg-1、0.5g - kg-1、0.25g - kg-1 四個(gè)劑量組。實(shí)驗(yàn)第 1 天,動(dòng)物按20g/kg體重灌胃給藥，連續(xù)7天，每天1次，正常對(duì)照組灌胃蒸儲(chǔ) 水。實(shí)驗(yàn)第4天，除正常對(duì)照組外，各組分別以 50mg/kg體重腹腔注射環(huán)磷酰 胺，連續(xù)3天，造成動(dòng)物免疫抑制模型。于末次給藥后1h處死動(dòng)物，稱量體重，并解剖取胸腺和脾臟稱重，計(jì)算臟器指數(shù)。結(jié)果顯示，與正常對(duì)照組比 較，模型對(duì)照組脾臟指數(shù)和胸腺指數(shù)都明顯小于正常對(duì)照組（P< 0.01）。與模型對(duì)照組比較，黃黃超微粉2.0、1.0、0.5、0.25g kg-1均能顯著增加

5、小鼠的 脾臟指數(shù)和月腺指數(shù)（P< 0.050.01）。見表1。臟器指數(shù)=X 100%2.2對(duì)小鼠負(fù)重游泳時(shí)間的影響 取SPF級(jí)KM中小鼠隨機(jī)分為對(duì)照組， 黃黃飲片組（2.0g kg-1 ）,黃黃超微粉分為2.0g kg-1、1.0g kg-1、 0.5g kg-1、0.25g - kg-1四個(gè)劑量組。實(shí)驗(yàn)第1天,動(dòng)物按20g/kg體重灌胃 給藥，連續(xù)7天，每天1次，對(duì)照組灌胃等量蒸儲(chǔ)水。于末次給藥 30min后， 小鼠尾部負(fù)荷10%體重的鐵絲，放入水中游泳（水溫 25C,水深20cm）,觀 察小鼠游泳至力竭（在水下10秒鐘不能上?。?，該時(shí)間為小鼠的游泳時(shí)間。結(jié) 果顯示，與對(duì)照組比較，黃黃

6、超微粉 2.0、1.0、0.5g - kg-1均能顯著延長(zhǎng)小鼠 的游泳時(shí)間（P<0.050.01）,具有抗疲勞作用，并具有劑量依賴性。見表 2。表1黃黃超微粉對(duì)免疫器官重量的影響（x±s）g kg-1N正常對(duì)照組-103.46 垃834.49 H4.50模型對(duì)照組-101.45 垃23一1.37 0.40研黃芭飲片組2.0101.77 £.46*1.91 此52*黃芭超微粉組2.0101.96 £.84*2.00 此83*黃芭超微粉組1.0101.68 £.27*2.19 此42*黃芭超微粉組0.5101.58 垃192.06 此22*黃芭超微粉組

7、0.25101.89 此30*2.46 此43*注：示與正常對(duì)照組相比，P<0.05, 示與正常對(duì)照組相比，P<0.01; *示與模型對(duì)照組相比，P<0.05; *示與模型對(duì)照組相比，P<0.01。（下同）表2黃黃超微粉對(duì)小鼠游泳時(shí)間的影響（x±s）g kg-1Nsec對(duì)照組一10116.44 山2.51黃芭飲片組2.010*145.30 i28.19黃芭超微粉組2.010_ _ _ , *185.30 ±07.07黃芭超微粉組1.010176.40 48.10* . *黃茜超微粉組0.510194.70毛1.42黃茜超微粉組0.2510145.50

8、 £6.343、討論中藥發(fā)揮藥效的主要有效成分一般存在于植物的細(xì)胞壁中，傳統(tǒng)中藥 飲片具入藥形狀大都有一個(gè)毫米以上的厚度，細(xì)胞破壁率據(jù)推算不到3%儲(chǔ)藏在細(xì)胞內(nèi)的中藥有效成分要發(fā)揮作用，必須穿過(guò)數(shù)個(gè)甚至幾十個(gè)細(xì)胞壁才能溶 解到溶媒中，因此，傳統(tǒng)中藥飲片的有效成分的利用率是很低的。本研究所用 的黃黃超微粉系采用超微粉碎技術(shù)將中藥飲片粉碎后，細(xì)胞破壁率將達(dá)到 86.7%,有效成分利用率在90%Z上，使細(xì)胞內(nèi)各種有效成分充分溶出，促進(jìn)和 提高中藥材多種有效成分的溶解及釋放。藥物在體內(nèi)釋放后，與胃腸粘膜的接 觸面積增大，能更好地分散、溶解在胃腸液中，更易被胃腸道吸收，藥效明顯 增強(qiáng)I”。黃黃為

9、豆科類植物蒙古黃黃或膜莢黃黃的干燥根，黃黃具有補(bǔ)氣生 血、益衛(wèi)固表、斂瘡生肌等功效。主要用于脾肺氣虛、中氣下陷、食少便油及 氣血不足所致癰疽不潰等。黃黃中主要含有黃黃多糖、黃酮類化合物、三菇類 成分及黃黃大豆皂甘I、氨基酸、生物堿和微量元素等。呂氏研究發(fā)現(xiàn) ，黃黃多糖腹腔注射，能明顯升高正常小鼠和環(huán)磷酰胺致免疫功能低下小鼠的單 核巨噬細(xì)胞的吞噬能力、血清溶血素抗體水平、脾臟指數(shù)等。宋強(qiáng)等報(bào)道黃黃冰凍微粉能夠顯著延長(zhǎng)小鼠負(fù)重游泳時(shí)間，具有明顯的耐疲勞作用，佟欣 等對(duì)黃黃、黨參對(duì)小鼠抗應(yīng)激作用進(jìn)行了對(duì)比研究發(fā)現(xiàn)，黃共和黨參水煎劑均 能顯著增強(qiáng)小鼠抗應(yīng)激反應(yīng)的能力，黃黃提高小鼠抗應(yīng)激的作用優(yōu)于黨參，

10、其 中在抗熱刺激和耐缺氧實(shí)驗(yàn)中黃黃作用明顯優(yōu)于黨參，而在低溫游泳實(shí)驗(yàn)中黃 共和黨參的作用無(wú)明顯差別。本研究表明，黃黃超微粉能夠顯著提高免疫抑制小鼠的免疫器官重量， 顯著延長(zhǎng)小鼠負(fù)重游泳的時(shí)間。實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示，黃黃超微粉具有增強(qiáng)免疫功能 及耐疲勞抗應(yīng)激的作用。與黃黃飲片比較，黃黃破微粉較低劑量即可達(dá)到黃黃 飲片的效果。實(shí)驗(yàn)結(jié)果為黃黃超微粉工藝的合理性、確定用藥劑量等提供了參考。參考文獻(xiàn)：1侯連兵.中藥細(xì)胞級(jí)微粉碎技術(shù)在中藥藥劑中的應(yīng)用.中藥材,2001,24(10):765-766.2史萬(wàn)玉，包永占，林德貴，等.微粉中藥黃霍散對(duì)免疫抑制小鼠非特異性免疫 功能的影響.中國(guó)獸醫(yī)藥雜志，2007,43(12):45-46.3陳奇.中藥藥理研究方法學(xué).北京：人民衛(wèi)生出版，2006,777-778.4黃昆，舒朝暉,劉根凡.中藥飲片粉碎粒度研究進(jìn)展.中國(guó)中醫(yī)藥信息雜志,2005,12(4):97-98.5吳清和.中藥藥理學(xué).北京：高等教育出版社,2007,219.6呂圭源，李立文，陳素紅，等.黃黃生脈多糖兩種給藥途徑對(duì)小鼠免疫