體外診斷試劑分析性能準(zhǔn)確度

1、體外診斷試劑分析性能評估（準(zhǔn)確度 - 方法學(xué)比對）指導(dǎo)原則一、前言 準(zhǔn)確度評估資料是評價(jià)擬上市產(chǎn)品有效性的重要依據(jù)， 也是產(chǎn)品注冊所需的重要申報(bào)資料之一。定量檢測方法的方 法學(xué)比對試驗(yàn)是評估準(zhǔn)確度的方法之一，可以與參考方法或 臨床公認(rèn)質(zhì)量較好的已上市產(chǎn)品進(jìn)行比對。本指導(dǎo)原則基于國家食品藥品監(jiān)督管理局體外診斷試 劑注冊管理辦法 （試行）的有關(guān)要求， 參考 CLSI 有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)， 對采用方法學(xué)比對進(jìn)行準(zhǔn)確度評估的實(shí)驗(yàn)方法和數(shù)據(jù)處理 方法進(jìn)行了原則性要求。其目的是為生產(chǎn)企業(yè)采用方法學(xué)比 對進(jìn)行準(zhǔn)確度評估并準(zhǔn)備準(zhǔn)確度評估資料提供原則性指導(dǎo)， 也為注冊管理部門審核該部分分析性能評估資料提供技術(shù)由于體外診斷

2、試劑產(chǎn)品發(fā)展速度快、專業(yè)跨度大，國家 食品藥品監(jiān)督管理局將根據(jù)體外診斷試劑發(fā)展的需要，適時(shí) 對本指導(dǎo)原則進(jìn)行修訂。二、適用范圍本指導(dǎo)原則適用于首次申請注冊、申請?jiān)S可事項(xiàng)變更的 用于定量檢測的體外診斷產(chǎn)品。因體外診斷產(chǎn)品評價(jià)是將儀 器、試劑、質(zhì)控品、校準(zhǔn)品等作為一個(gè)系統(tǒng)進(jìn)行評價(jià)，因此 方法學(xué)比對的評價(jià)采用系統(tǒng)的概念進(jìn)行描述。如特殊產(chǎn)品不 適用于本指導(dǎo)原則，可進(jìn)行詳細(xì)說明并采用適當(dāng)?shù)姆椒ㄟM(jìn)行 準(zhǔn)確度評價(jià)。三、基本要求（一）方法學(xué)比對實(shí)驗(yàn)的基本要求1. 操作者應(yīng)熟悉待評價(jià)系統(tǒng)和比對系統(tǒng)的操作。2. 編寫系統(tǒng)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程，其中包括校準(zhǔn)程序和室內(nèi)質(zhì) 控程序，采用合適的校準(zhǔn)品、質(zhì)控品并保持儀器處于正常狀

3、態(tài)。3. 比對系統(tǒng)的選擇 比對系統(tǒng)應(yīng)具有以下條件：（1）具有比待評價(jià)系統(tǒng)更好的精密度。（2）同待評價(jià)系統(tǒng)檢測結(jié)果具有相同的單位。（3）如有參考方法應(yīng)具有與參考方法已知的偏差。比對系統(tǒng)應(yīng)該選擇正確性經(jīng)過驗(yàn)證的系統(tǒng)，根據(jù)實(shí)際條 件，選擇的順序如下：參考方法、原裝系統(tǒng)、配套系統(tǒng)、經(jīng) 過驗(yàn)證的非配套系統(tǒng)。4. 待評價(jià)系統(tǒng)的處理進(jìn)行方法學(xué)對比實(shí)驗(yàn)前，應(yīng)該對待評價(jià)系統(tǒng)進(jìn)行初步評 價(jià)，并且對待評價(jià)系統(tǒng)進(jìn)行精密度及線性的評價(jià)（參考相關(guān) 標(biāo)準(zhǔn)），只有在以上評價(jià)完成并且符合相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)要求后，才 可進(jìn)行方法學(xué)對比實(shí)驗(yàn)。（二）方法學(xué)比對實(shí)驗(yàn)的評估及數(shù)據(jù)處理方法1. 實(shí)驗(yàn)樣本的基本要求（ 1 ）按照實(shí)驗(yàn)對樣本的要求收集處

4、理病人樣本，樣本 貯存時(shí)間及條件由被測組分的穩(wěn)定性而定，盡可能避免使用 貯存的樣本。（ 2 ）樣本應(yīng)來自于不同患者，并且此患者所患疾病對 于被測組分的影響應(yīng)該是已知的，樣本不應(yīng)含有干擾此方法 的組分。（ 3 ）樣本濃度應(yīng)在方法的線性范圍內(nèi)，并覆蓋醫(yī)學(xué)決 定水平。通?；緩木€性范圍的低限到線性范圍的高限（應(yīng) 至少有 50 的樣本在參考范圍以外，但在線性范圍內(nèi)） 。分 析樣本的濃度應(yīng)盡可能在線性范圍內(nèi)均勻分布。商品質(zhì)控物 或者校準(zhǔn)物可能存在基質(zhì)效應(yīng)，應(yīng)避免使用。2. 實(shí)驗(yàn)過程（1 ）每天選擇 8 個(gè)臨床患者樣本，按 1 到 8 的順序編 號。用兩種方法同時(shí)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，按照 1，2 ，3，4，5 ，6

5、，7， 8， 8，7 ， 6，5，4， 3， 2，1 的樣本順序進(jìn)行測定。（ 2 ）以上實(shí)驗(yàn)至少重復(fù) 5 天，即至少分析 40 個(gè)不同的 臨床患者樣本。每天實(shí)驗(yàn)必須進(jìn)行校準(zhǔn)和室內(nèi)質(zhì)控，只有在 室內(nèi)質(zhì)控合格的情況下，當(dāng)天的實(shí)驗(yàn)室數(shù)據(jù)才有效。3. 數(shù)據(jù)處理及結(jié)果報(bào)告（1 ）記錄測定結(jié)果（ Xij 和 Yij），Xij為比對系統(tǒng)測定值Yj為待評價(jià)系統(tǒng)測定值i為測定樣本的序號（1、2、340 ）j為同一樣本同一天測定的次序（1、2）（2）計(jì)算每個(gè)樣本測定的均值（X；和/），樣本重復(fù)測 定間差值的絕對值（DXi和DYi）及兩種方法測定結(jié)果間的 均值差值（T-X；）。相關(guān)實(shí)驗(yàn)記錄見表 1比對系統(tǒng)待評價(jià)系統(tǒng)

6、樣本編號iXi1Xi2DXiYi1Yi2YiDYi123411140注：i= 1、240。Yi =DXi=DYi= | J：-一一(3) 以*對X；作散點(diǎn)圖。(4) 以(X；)對X；做偏倚圖。(5) 以(Yj-Xij)對斤做偏倚圖。(6) 檢查批內(nèi)離群點(diǎn)：計(jì)算樣本重復(fù)測定間差值(DXi 和DYi)的平均數(shù)，V=DX1+DX2-DX4Q40-_ =40樣本重復(fù)測定間差值超出該平均數(shù)4倍時(shí)，則判斷為離群點(diǎn)，如離群點(diǎn)超過1個(gè)時(shí)，整組數(shù)據(jù)應(yīng)舍棄，尋找原因后 重新進(jìn)行評價(jià)。如離群點(diǎn)為 1個(gè)，可以補(bǔ)充數(shù)據(jù)后重新進(jìn)行 統(tǒng)計(jì)。(7) 檢查批間離群點(diǎn)：計(jì)算兩種方法測定結(jié)果間均值 差值(I Yi - Xi丨)的平

7、均數(shù)，如兩種方法測定結(jié)果間均值差值超 出該平均數(shù)4倍時(shí)，則判斷該樣本為離群點(diǎn)，如離群點(diǎn)超過1個(gè)時(shí)，整組數(shù)據(jù)應(yīng)舍棄，尋找原因后重新進(jìn)行評價(jià)。如離 群點(diǎn)為1個(gè)，可以補(bǔ)充數(shù)據(jù)后重新進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。(8) 相關(guān)系數(shù)計(jì)算：利用所有樣本雙份測定值進(jìn)行相 關(guān)系數(shù)計(jì)算，如果r >0.975(或r 2 >0.95),則認(rèn)為選擇的數(shù)據(jù) 范圍適合，數(shù)據(jù)滿足要求。該分析的誤差可以由數(shù)據(jù)范圍給 以適當(dāng)補(bǔ)償，并且可以采用簡單的線性回歸來評價(jià)斜率和截 距。如果 r2 0.95 ，那么必須通過分析另外一些樣品以擴(kuò)大 數(shù)據(jù)范圍，然后再檢查全部數(shù)據(jù)系列，如仍然 r2 0.95 ，則 應(yīng)尋找待評價(jià)方法存在的缺陷，糾正后重新進(jìn)

8、行試驗(yàn)。對于某些免疫項(xiàng)目， 可適當(dāng)放寬標(biāo)準(zhǔn)，原則上r2 >0.90 , 則認(rèn)為數(shù)據(jù)范圍適合，數(shù)據(jù)滿足要求。（ 9 ）回歸計(jì)算：利用所有樣本雙份測定的有效數(shù)據(jù)， 計(jì)算兩個(gè)方法間的線性回歸方程： Y= bX a.（10 ）偏差估計(jì)：在醫(yī)學(xué)決定水平，利用回歸方程計(jì)算 預(yù)期偏差 ,預(yù)期偏差 Bx=a+（b-1）X, 相對偏差 =Bx/X（11 ）結(jié)果評估： 結(jié)果至少應(yīng)滿足相關(guān)國際及國家標(biāo)準(zhǔn)， 同時(shí)滿足臨床需求。四、其它應(yīng)注意的問題（一）采用的患者樣本對于被測組分的影響應(yīng)該是已知 的，樣本不應(yīng)含有干擾此檢測方法的組分。（二）樣本貯存時(shí)間及條件由被測組分的穩(wěn)定性而定， 盡可能避免使用貯存的樣本。（三）實(shí)驗(yàn)前必須對待評價(jià)系統(tǒng)進(jìn)行精密度及線性的評 價(jià)，評價(jià)合格后方可進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。五、名詞解釋（一）待評價(jià)系統(tǒng)：擬進(jìn)行性能評估的產(chǎn)品。二）比對系統(tǒng)：參考方法