植物組織中可溶性糖含量的測定試驗(yàn)報(bào)告

1、植物組織中可溶性糖含量的測定實(shí)驗(yàn)報(bào)告10科四 譚曉東20102501024一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康恼莆辙ネ壬y定可溶性糖含量的提取和方法原理；掌握分光光度計(jì)中標(biāo)準(zhǔn)曲線制作的使用程序。二、實(shí)驗(yàn)原理植物組織中的糖(包括還原糖和非還原糖)可以與濃硫酸反應(yīng)生成糠醛，糠醛和蕙酮反應(yīng)可以生成藍(lán)綠色絡(luò)合物，在625nm處有最大光吸收值。三、實(shí)驗(yàn)材料大白菜葉片與葉柄四、實(shí)驗(yàn)步驟1.可溶性糖的提取+10ml 80%乙醇80度水浴30mi n過濾后定容至25ml2.標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖液的配制(200ug/ml )葡萄糖濃度(ug/ml)020406080100標(biāo)準(zhǔn)匍萄糖液吸 取量(ml)00.10.20.30.40.5蒸僻水(m

2、l)10.90.80.70.60.5蕙酮(ml)5混勻，沸水浴10min，冷卻后在625nm下比色3.樣品液顯色和比色0.1ml提取液+0.9ml蒸僻水大白菜葉柄和葉片各0.5g鮮重，研磨10min冷卻后對照標(biāo)準(zhǔn)曲線比色五、實(shí)驗(yàn)結(jié)果1.葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線葡萄糖液濃度（ug/ml）20406080100吸光度0.1310.2360.3070.4450.536標(biāo)準(zhǔn)方程：y=184.6x-1.973R=0.99402.根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線測到，葉片的吸光度是0.249,葡萄糖濃度為43.96ug/ml ,含糖量為13.82%;葉柄的吸光度為0.276，葡萄糖濃度為49.01ug/ml，含糖量為15.41%六、分

3、析與討論植物體內(nèi)的可溶性糖和淀粉均是光臺(tái)作用產(chǎn)物。可溶性糖以蔗糖為主，是植物糖類運(yùn)輸?shù)闹饕问剑浯问瞧咸烟?、果糖、麥芽糖、戊糖和糖昔等?？扇苄蕴窃诹蛩嶙饔孟律商侨┗蛄u甲基糠醛化合物，糖醛或羥甲基糠醛可與蕙酮作用形成藍(lán)綠色絡(luò)合物（糖醛衍生物），在一定波長范圍內(nèi)，其顏色的深淺與糖含量有定量關(guān)系，在625 nm波長下的吸光值與可溶性糖含量成正比。由于蕙酮與可溶性糖反應(yīng)的呈色強(qiáng)度隨時(shí)間變化，故必須在反應(yīng)后立即在同一時(shí)間內(nèi)比色。該實(shí)驗(yàn)方法簡便，靈敏度高，可溶性糖含量在30 P g左右就能進(jìn)行測定，所以可作為測定微量可溶性糖之用。該法的特點(diǎn)是幾乎可以測定所有的碳水化合物，不但可以測定戊糖與己糖含量，而且可以測所有寡糖類和多糖類，其中包括淀粉、纖維素等（因?yàn)榉磻?yīng)液中的濃硫酸可以把多糖水解成單糖而發(fā)生反應(yīng)）,所以用蕙酮法測出的碳水化合物含量,實(shí)際上是溶液中全部可溶性碳水化合物總量.在沒有必要細(xì)致劃分各種碳水化合物的情況下,用蕙酮法可以一次測出總量,省去許多麻煩，因此，有特殊的應(yīng)用價(jià)值 財(cái)?shù)┰跍y定水溶性碳水化合物時(shí)，則應(yīng)注意切勿將樣品的未溶解殘?jiān)尤敕磻?yīng)液中,不然會(huì)因?yàn)榧?xì)胞壁中的纖維素、半纖維素等與1C酮試劑發(fā)生反應(yīng)而增加了測定誤差.此外，不同的糖類與蕙酮試劑的顯色深度不同,果糖顯色最深,葡萄糖次之，半乳糖、甘露糖較淺，五碳糖顯色更淺，故測定糖的混合物時(shí)，常因不