孕前干預工程沙眼衣原體和淋球菌檢測新方法的應用及效果分析

1、 奈瑟氏淋球菌奈瑟氏淋球菌(Neisseria gonorrhoeae, N.G.)是是造成淋病的病原微生物，妊娠期感染淋病對母嬰造成淋病的病原微生物，妊娠期感染淋病對母嬰危害極大，宮內感染易致自然流產、早產及胎兒危害極大，宮內感染易致自然流產、早產及胎兒宮內發(fā)育遲緩，分娩時母嬰垂直傳播，可致新生宮內發(fā)育遲緩，分娩時母嬰垂直傳播，可致新生兒淋病性結膜炎，治療若不及時徹底，新生兒有兒淋病性結膜炎，治療若不及時徹底，新生兒有致盲的危險，淋病孕婦產后易發(fā)生播散性淋病致盲的危險，淋病孕婦產后易發(fā)生播散性淋病. 沙眼衣原體沙眼衣原體(Chlamydia trachomatis, C.T.)是造是造成非淋

2、菌性尿道炎的重要病原體，引起尿道炎、成非淋菌性尿道炎的重要病原體，引起尿道炎、宮頸炎、子宮內膜炎及盆腔炎?？芍略袐D早產、宮頸炎、子宮內膜炎及盆腔炎?？芍略袐D早產、流產、胎膜早破、胚胎停育等嚴重妊娠并發(fā)癥，流產、胎膜早破、胚胎停育等嚴重妊娠并發(fā)癥，另產道感染可致嬰兒急性結膜炎。沙眼衣原體母另產道感染可致嬰兒急性結膜炎。沙眼衣原體母嬰傳播可導致新生兒眼炎或肺炎，其危險性分別嬰傳播可導致新生兒眼炎或肺炎，其危險性分別為為2050和和1020。 為降低出生缺陷發(fā)生風險，提高出生人口素質，為降低出生缺陷發(fā)生風險，提高出生人口素質，經國務院批準，國家人口計生委、財政部共同組經國務院批準，國家人口計生委、財

3、政部共同組織實施國家免費孕前優(yōu)生健康檢查項目試點工作，織實施國家免費孕前優(yōu)生健康檢查項目試點工作，其中臨床實驗室檢查內容中包含了沙眼衣原體和其中臨床實驗室檢查內容中包含了沙眼衣原體和淋球菌兩項生殖道感染病原微生物檢測。淋球菌兩項生殖道感染病原微生物檢測。 革蘭氏染色鏡檢革蘭氏染色鏡檢 特異性差、易發(fā)生漏診和誤診，僅適用于男性患者，特異性差、易發(fā)生漏診和誤診，僅適用于男性患者，女性泌尿生殖道中由于雜菌含量較多，僅僅從形態(tài)上很難女性泌尿生殖道中由于雜菌含量較多，僅僅從形態(tài)上很難進行判斷進行判斷 培養(yǎng)法培養(yǎng)法 陽性率一般在陽性率一般在85-90，但培養(yǎng)法耗時長，無法快速，但培養(yǎng)法耗時長，無法快速診斷

4、與及時治療，同時受標本的采集、運輸、保存等因素診斷與及時治療，同時受標本的采集、運輸、保存等因素影響較大，限制了培養(yǎng)法在基層醫(yī)療機構的順利開展影響較大，限制了培養(yǎng)法在基層醫(yī)療機構的順利開展 多聚酶鏈式反應（多聚酶鏈式反應（PCR）法）法 靈敏度與特異性較高，對各期淋病均適宜，但需要靈敏度與特異性較高，對各期淋病均適宜，但需要專業(yè)實驗環(huán)境和專業(yè)實驗人員，對操作要求極為嚴格專業(yè)實驗環(huán)境和專業(yè)實驗人員，對操作要求極為嚴格, 成成本高，難以在計劃生育技術服務機構得到開展。本高，難以在計劃生育技術服務機構得到開展。 試紙法試紙法 操作簡單，但臨床出現(xiàn)較多的假陰性和假陽性，只能操作簡單，但臨床出現(xiàn)較多的假

5、陰性和假陽性，只能作為初篩實驗，檢測準確性低使得該方法也無法應用到孕作為初篩實驗，檢測準確性低使得該方法也無法應用到孕前優(yōu)生健康檢查項目試點工作前優(yōu)生健康檢查項目試點工作。細胞培養(yǎng)法細胞培養(yǎng)法 檢測沙眼衣原體的金標準方法，靈敏度和特異性等均檢測沙眼衣原體的金標準方法，靈敏度和特異性等均較好，孕前干預工程中推薦采用培養(yǎng)法開展沙眼衣原體孕較好，孕前干預工程中推薦采用培養(yǎng)法開展沙眼衣原體孕前篩查試點工作。前篩查試點工作。 但培養(yǎng)法耗時長，操作繁鎖，實驗影響因素較多，但培養(yǎng)法耗時長，操作繁鎖，實驗影響因素較多，對實驗設備及操作技術要求較高，國內僅有少數(shù)科研機構對實驗設備及操作技術要求較高，國內僅有少數(shù)

6、科研機構能開展，故該技術并不適用于在孕前干預工程中應用，只能開展，故該技術并不適用于在孕前干預工程中應用，只能作為其他檢測方法的參比標準。能作為其他檢測方法的參比標準。 膠體金法膠體金法 操作簡單快速，全部檢測過程需半個小時，因此該方操作簡單快速，全部檢測過程需半個小時，因此該方法在臨床上使用比較普遍。但由于膠體金技術靈敏度較低，法在臨床上使用比較普遍。但由于膠體金技術靈敏度較低，易造成漏檢，所以實際檢測效果并不是很好。易造成漏檢，所以實際檢測效果并不是很好。PCR法法 診斷較為快速，靈敏度與特異度也較高，但會出現(xiàn)一診斷較為快速，靈敏度與特異度也較高，但會出現(xiàn)一定的假陽性。該法需要專業(yè)實驗環(huán)境

7、和專業(yè)實驗人員，對定的假陽性。該法需要專業(yè)實驗環(huán)境和專業(yè)實驗人員，對操作要求極為嚴格，目前難以在計劃生育技術服務機構得操作要求極為嚴格，目前難以在計劃生育技術服務機構得到開展。到開展。 原理原理 將不影響抗原抗體活性的熒光色素標記在單克隆抗體將不影響抗原抗體活性的熒光色素標記在單克隆抗體上與相應抗原結合，在熒光顯微鏡下呈現(xiàn)特異性熒光反應上與相應抗原結合，在熒光顯微鏡下呈現(xiàn)特異性熒光反應 優(yōu)勢優(yōu)勢 特異性強、敏感性高、檢測速度快，并且操作簡便，特異性強、敏感性高、檢測速度快，并且操作簡便，便于推廣便于推廣l 沙眼衣原體沙眼衣原體 熒光素標記的沙眼衣原體外膜蛋白單克隆抗體檢測人熒光素標記的沙眼衣原

8、體外膜蛋白單克隆抗體檢測人體內的沙眼衣原體是應用最為成熟和廣泛的沙眼衣原體非體內的沙眼衣原體是應用最為成熟和廣泛的沙眼衣原體非培養(yǎng)快速檢測法，是目前美國等發(fā)達國家應用最廣的沙眼培養(yǎng)快速檢測法，是目前美國等發(fā)達國家應用最廣的沙眼衣原體確診實驗方法，也是我國衛(wèi)生部推薦的沙眼衣原體衣原體確診實驗方法，也是我國衛(wèi)生部推薦的沙眼衣原體的檢測方法之一的檢測方法之一 奈瑟氏淋球菌奈瑟氏淋球菌 熒光素標記的單克隆抗體可特異性結合標本中奈瑟氏熒光素標記的單克隆抗體可特異性結合標本中奈瑟氏淋球菌抗原，結合形態(tài)學特點，在熒光顯微鏡下直接檢測淋球菌抗原，結合形態(tài)學特點，在熒光顯微鏡下直接檢測奈瑟氏淋球菌，靈敏度高、特

9、異性強，操作簡單，檢測速奈瑟氏淋球菌，靈敏度高、特異性強，操作簡單，檢測速度快，在衛(wèi)生部度快，在衛(wèi)生部淋病診斷標準淋病診斷標準中把免疫熒光法列為分中把免疫熒光法列為分離培養(yǎng)淋球菌確診的一種檢測手段。離培養(yǎng)淋球菌確診的一種檢測手段。 l 單克隆抗體免疫熒光法操作簡便，只需一臺熒光單克隆抗體免疫熒光法操作簡便，只需一臺熒光顯微鏡即可觀察結果，在孕前干預工程中檢測沙顯微鏡即可觀察結果，在孕前干預工程中檢測沙眼衣原體和淋球菌可操作性較強，具有良好的應眼衣原體和淋球菌可操作性較強，具有良好的應用前景用前景l(fā) 深圳市邁科龍生物技術有限公司已成功研制沙眼深圳市邁科龍生物技術有限公司已成功研制沙眼衣原體免疫熒

10、光檢測試劑盒和奈瑟氏淋球菌免疫衣原體免疫熒光檢測試劑盒和奈瑟氏淋球菌免疫熒光檢測試劑盒，兩種試劑盒均已通過國家藥監(jiān)熒光檢測試劑盒，兩種試劑盒均已通過國家藥監(jiān)局注冊，獲得上市許可局注冊，獲得上市許可l 自自2008年年9月起，邁科龍公司與廣東省惠東縣計月起，邁科龍公司與廣東省惠東縣計劃生育服務站合作對單克隆抗體免疫熒光檢測技劃生育服務站合作對單克隆抗體免疫熒光檢測技術在孕前干預工程試運行工作中對沙眼衣原體和術在孕前干預工程試運行工作中對沙眼衣原體和奈瑟氏淋球菌檢測的應用價值進行了實際運作與奈瑟氏淋球菌檢測的應用價值進行了實際運作與性能評估性能評估l 截至截至2010年年6月止，共檢測沙眼衣原體臨

11、床樣本月止，共檢測沙眼衣原體臨床樣本1657例、奈瑟氏淋球菌臨床樣本例、奈瑟氏淋球菌臨床樣本1423例，并采用例，并采用臨床金標準開展雙盲法對比試驗臨床金標準開展雙盲法對比試驗邁科龍沙眼衣原體檢測試劑盒與金標準試驗結果邁科龍沙眼衣原體檢測試劑盒與金標準試驗結果邁科龍試劑盒邁科龍試劑盒金標準金標準合計合計陽性陽性( + )陰性陰性()陽性陽性( + )15818176陰性陰性()1114701481合計合計16914881657 邁科龍沙眼衣原體試劑盒準確率為邁科龍沙眼衣原體試劑盒準確率為98.25%，靈敏性為，靈敏性為93.49%，特異性為特異性為98.79%，一致性系數(shù)，一致性系數(shù)Kappa

12、(K)=0.9062，兩種試劑盒檢，兩種試劑盒檢測結果在統(tǒng)計學意義上無顯著差異測結果在統(tǒng)計學意義上無顯著差異 。邁科龍奈瑟氏淋球菌檢測試劑盒與金標準試驗結果邁科龍奈瑟氏淋球菌檢測試劑盒與金標準試驗結果邁科龍試劑盒邁科龍試劑盒金標準金標準合計合計陽性陽性( + )陰性陰性()陽性陽性( + )72678陰性陰性()1013351345合計合計8213411423 邁科龍淋球菌試劑盒準確率為邁科龍淋球菌試劑盒準確率為98.88%，靈敏性為，靈敏性為87.8%，特，特異性為異性為99.55%，一致性系數(shù)，一致性系數(shù)Kappa(K)=0.894，兩種試劑盒檢測結，兩種試劑盒檢測結果在統(tǒng)計學意義上無顯著

13、差異果在統(tǒng)計學意義上無顯著差異 。 邁科龍試劑盒對環(huán)境和設備要求低，操作簡便快邁科龍試劑盒對環(huán)境和設備要求低，操作簡便快捷，在孕前干預工程的縣鄉(xiāng)共同服務模式下可在捷，在孕前干預工程的縣鄉(xiāng)共同服務模式下可在鄉(xiāng)鎮(zhèn)服務現(xiàn)場當場順利完成檢測工作鄉(xiāng)鎮(zhèn)服務現(xiàn)場當場順利完成檢測工作 如采用智能化生殖道病原體檢測設備，可無需操如采用智能化生殖道病原體檢測設備，可無需操作人員專業(yè)醫(yī)學知識，減輕了計生技術服務站人作人員專業(yè)醫(yī)學知識，減輕了計生技術服務站人員培訓負擔員培訓負擔 l 單克隆抗體免疫熒光技術具有靈敏度高、特異性強、簡便單克隆抗體免疫熒光技術具有靈敏度高、特異性強、簡便快速的特點，一小時內出結果，對環(huán)境和設備要求低，適快速的特點，一小時內出結果，對環(huán)境和設備要求低，適用于我國各地區(qū)計劃生育技術服務機構開展孕前干預工程用于我國各地區(qū)計劃生育技術服務機構開展孕