孕前干預(yù)工程沙眼衣原體和淋球菌檢測新方法的應(yīng)用及效果分析

1、 奈瑟氏淋球菌奈瑟氏淋球菌(Neisseria gonorrhoeae, N.G.)是是造成淋病的病原微生物，妊娠期感染淋病對母嬰造成淋病的病原微生物，妊娠期感染淋病對母嬰危害極大，宮內(nèi)感染易致自然流產(chǎn)、早產(chǎn)及胎兒危害極大，宮內(nèi)感染易致自然流產(chǎn)、早產(chǎn)及胎兒宮內(nèi)發(fā)育遲緩，分娩時母嬰垂直傳播，可致新生宮內(nèi)發(fā)育遲緩，分娩時母嬰垂直傳播，可致新生兒淋病性結(jié)膜炎，治療若不及時徹底，新生兒有兒淋病性結(jié)膜炎，治療若不及時徹底，新生兒有致盲的危險，淋病孕婦產(chǎn)后易發(fā)生播散性淋病致盲的危險，淋病孕婦產(chǎn)后易發(fā)生播散性淋病. 沙眼衣原體沙眼衣原體(Chlamydia trachomatis, C.T.)是造是造成非淋

2、菌性尿道炎的重要病原體，引起尿道炎、成非淋菌性尿道炎的重要病原體，引起尿道炎、宮頸炎、子宮內(nèi)膜炎及盆腔炎?？芍略袐D早產(chǎn)、宮頸炎、子宮內(nèi)膜炎及盆腔炎。可致孕婦早產(chǎn)、流產(chǎn)、胎膜早破、胚胎停育等嚴(yán)重妊娠并發(fā)癥，流產(chǎn)、胎膜早破、胚胎停育等嚴(yán)重妊娠并發(fā)癥，另產(chǎn)道感染可致嬰兒急性結(jié)膜炎。沙眼衣原體母另產(chǎn)道感染可致嬰兒急性結(jié)膜炎。沙眼衣原體母嬰傳播可導(dǎo)致新生兒眼炎或肺炎，其危險性分別嬰傳播可導(dǎo)致新生兒眼炎或肺炎，其危險性分別為為2050和和1020。 為降低出生缺陷發(fā)生風(fēng)險，提高出生人口素質(zhì)，為降低出生缺陷發(fā)生風(fēng)險，提高出生人口素質(zhì)，經(jīng)國務(wù)院批準(zhǔn)，國家人口計(jì)生委、財(cái)政部共同組經(jīng)國務(wù)院批準(zhǔn)，國家人口計(jì)生委、財(cái)

3、政部共同組織實(shí)施國家免費(fèi)孕前優(yōu)生健康檢查項(xiàng)目試點(diǎn)工作，織實(shí)施國家免費(fèi)孕前優(yōu)生健康檢查項(xiàng)目試點(diǎn)工作，其中臨床實(shí)驗(yàn)室檢查內(nèi)容中包含了沙眼衣原體和其中臨床實(shí)驗(yàn)室檢查內(nèi)容中包含了沙眼衣原體和淋球菌兩項(xiàng)生殖道感染病原微生物檢測。淋球菌兩項(xiàng)生殖道感染病原微生物檢測。 革蘭氏染色鏡檢革蘭氏染色鏡檢 特異性差、易發(fā)生漏診和誤診，僅適用于男性患者，特異性差、易發(fā)生漏診和誤診，僅適用于男性患者，女性泌尿生殖道中由于雜菌含量較多，僅僅從形態(tài)上很難女性泌尿生殖道中由于雜菌含量較多，僅僅從形態(tài)上很難進(jìn)行判斷進(jìn)行判斷 培養(yǎng)法培養(yǎng)法 陽性率一般在陽性率一般在85-90，但培養(yǎng)法耗時長，無法快速，但培養(yǎng)法耗時長，無法快速診斷

4、與及時治療，同時受標(biāo)本的采集、運(yùn)輸、保存等因素診斷與及時治療，同時受標(biāo)本的采集、運(yùn)輸、保存等因素影響較大，限制了培養(yǎng)法在基層醫(yī)療機(jī)構(gòu)的順利開展影響較大，限制了培養(yǎng)法在基層醫(yī)療機(jī)構(gòu)的順利開展 多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）法）法 靈敏度與特異性較高，對各期淋病均適宜，但需要靈敏度與特異性較高，對各期淋病均適宜，但需要專業(yè)實(shí)驗(yàn)環(huán)境和專業(yè)實(shí)驗(yàn)人員，對操作要求極為嚴(yán)格專業(yè)實(shí)驗(yàn)環(huán)境和專業(yè)實(shí)驗(yàn)人員，對操作要求極為嚴(yán)格, 成成本高，難以在計(jì)劃生育技術(shù)服務(wù)機(jī)構(gòu)得到開展。本高，難以在計(jì)劃生育技術(shù)服務(wù)機(jī)構(gòu)得到開展。 試紙法試紙法 操作簡單，但臨床出現(xiàn)較多的假陰性和假陽性，只能操作簡單，但臨床出現(xiàn)較多的假

5、陰性和假陽性，只能作為初篩實(shí)驗(yàn)，檢測準(zhǔn)確性低使得該方法也無法應(yīng)用到孕作為初篩實(shí)驗(yàn)，檢測準(zhǔn)確性低使得該方法也無法應(yīng)用到孕前優(yōu)生健康檢查項(xiàng)目試點(diǎn)工作前優(yōu)生健康檢查項(xiàng)目試點(diǎn)工作。細(xì)胞培養(yǎng)法細(xì)胞培養(yǎng)法 檢測沙眼衣原體的金標(biāo)準(zhǔn)方法，靈敏度和特異性等均檢測沙眼衣原體的金標(biāo)準(zhǔn)方法，靈敏度和特異性等均較好，孕前干預(yù)工程中推薦采用培養(yǎng)法開展沙眼衣原體孕較好，孕前干預(yù)工程中推薦采用培養(yǎng)法開展沙眼衣原體孕前篩查試點(diǎn)工作。前篩查試點(diǎn)工作。 但培養(yǎng)法耗時長，操作繁鎖，實(shí)驗(yàn)影響因素較多，但培養(yǎng)法耗時長，操作繁鎖，實(shí)驗(yàn)影響因素較多，對實(shí)驗(yàn)設(shè)備及操作技術(shù)要求較高，國內(nèi)僅有少數(shù)科研機(jī)構(gòu)對實(shí)驗(yàn)設(shè)備及操作技術(shù)要求較高，國內(nèi)僅有少數(shù)

6、科研機(jī)構(gòu)能開展，故該技術(shù)并不適用于在孕前干預(yù)工程中應(yīng)用，只能開展，故該技術(shù)并不適用于在孕前干預(yù)工程中應(yīng)用，只能作為其他檢測方法的參比標(biāo)準(zhǔn)。能作為其他檢測方法的參比標(biāo)準(zhǔn)。 膠體金法膠體金法 操作簡單快速，全部檢測過程需半個小時，因此該方操作簡單快速，全部檢測過程需半個小時，因此該方法在臨床上使用比較普遍。但由于膠體金技術(shù)靈敏度較低，法在臨床上使用比較普遍。但由于膠體金技術(shù)靈敏度較低，易造成漏檢，所以實(shí)際檢測效果并不是很好。易造成漏檢，所以實(shí)際檢測效果并不是很好。PCR法法 診斷較為快速，靈敏度與特異度也較高，但會出現(xiàn)一診斷較為快速，靈敏度與特異度也較高，但會出現(xiàn)一定的假陽性。該法需要專業(yè)實(shí)驗(yàn)環(huán)境

7、和專業(yè)實(shí)驗(yàn)人員，對定的假陽性。該法需要專業(yè)實(shí)驗(yàn)環(huán)境和專業(yè)實(shí)驗(yàn)人員，對操作要求極為嚴(yán)格，目前難以在計(jì)劃生育技術(shù)服務(wù)機(jī)構(gòu)得操作要求極為嚴(yán)格，目前難以在計(jì)劃生育技術(shù)服務(wù)機(jī)構(gòu)得到開展。到開展。 原理原理 將不影響抗原抗體活性的熒光色素標(biāo)記在單克隆抗體將不影響抗原抗體活性的熒光色素標(biāo)記在單克隆抗體上與相應(yīng)抗原結(jié)合，在熒光顯微鏡下呈現(xiàn)特異性熒光反應(yīng)上與相應(yīng)抗原結(jié)合，在熒光顯微鏡下呈現(xiàn)特異性熒光反應(yīng) 優(yōu)勢優(yōu)勢 特異性強(qiáng)、敏感性高、檢測速度快，并且操作簡便，特異性強(qiáng)、敏感性高、檢測速度快，并且操作簡便，便于推廣便于推廣l 沙眼衣原體沙眼衣原體 熒光素標(biāo)記的沙眼衣原體外膜蛋白單克隆抗體檢測人熒光素標(biāo)記的沙眼衣原

8、體外膜蛋白單克隆抗體檢測人體內(nèi)的沙眼衣原體是應(yīng)用最為成熟和廣泛的沙眼衣原體非體內(nèi)的沙眼衣原體是應(yīng)用最為成熟和廣泛的沙眼衣原體非培養(yǎng)快速檢測法，是目前美國等發(fā)達(dá)國家應(yīng)用最廣的沙眼培養(yǎng)快速檢測法，是目前美國等發(fā)達(dá)國家應(yīng)用最廣的沙眼衣原體確診實(shí)驗(yàn)方法，也是我國衛(wèi)生部推薦的沙眼衣原體衣原體確診實(shí)驗(yàn)方法，也是我國衛(wèi)生部推薦的沙眼衣原體的檢測方法之一的檢測方法之一 奈瑟氏淋球菌奈瑟氏淋球菌 熒光素標(biāo)記的單克隆抗體可特異性結(jié)合標(biāo)本中奈瑟氏熒光素標(biāo)記的單克隆抗體可特異性結(jié)合標(biāo)本中奈瑟氏淋球菌抗原，結(jié)合形態(tài)學(xué)特點(diǎn)，在熒光顯微鏡下直接檢測淋球菌抗原，結(jié)合形態(tài)學(xué)特點(diǎn)，在熒光顯微鏡下直接檢測奈瑟氏淋球菌，靈敏度高、特

9、異性強(qiáng)，操作簡單，檢測速奈瑟氏淋球菌，靈敏度高、特異性強(qiáng)，操作簡單，檢測速度快，在衛(wèi)生部度快，在衛(wèi)生部淋病診斷標(biāo)準(zhǔn)淋病診斷標(biāo)準(zhǔn)中把免疫熒光法列為分中把免疫熒光法列為分離培養(yǎng)淋球菌確診的一種檢測手段。離培養(yǎng)淋球菌確診的一種檢測手段。 l 單克隆抗體免疫熒光法操作簡便，只需一臺熒光單克隆抗體免疫熒光法操作簡便，只需一臺熒光顯微鏡即可觀察結(jié)果，在孕前干預(yù)工程中檢測沙顯微鏡即可觀察結(jié)果，在孕前干預(yù)工程中檢測沙眼衣原體和淋球菌可操作性較強(qiáng)，具有良好的應(yīng)眼衣原體和淋球菌可操作性較強(qiáng)，具有良好的應(yīng)用前景用前景l(fā) 深圳市邁科龍生物技術(shù)有限公司已成功研制沙眼深圳市邁科龍生物技術(shù)有限公司已成功研制沙眼衣原體免疫熒

10、光檢測試劑盒和奈瑟氏淋球菌免疫衣原體免疫熒光檢測試劑盒和奈瑟氏淋球菌免疫熒光檢測試劑盒，兩種試劑盒均已通過國家藥監(jiān)熒光檢測試劑盒，兩種試劑盒均已通過國家藥監(jiān)局注冊，獲得上市許可局注冊，獲得上市許可l 自自2008年年9月起，邁科龍公司與廣東省惠東縣計(jì)月起，邁科龍公司與廣東省惠東縣計(jì)劃生育服務(wù)站合作對單克隆抗體免疫熒光檢測技劃生育服務(wù)站合作對單克隆抗體免疫熒光檢測技術(shù)在孕前干預(yù)工程試運(yùn)行工作中對沙眼衣原體和術(shù)在孕前干預(yù)工程試運(yùn)行工作中對沙眼衣原體和奈瑟氏淋球菌檢測的應(yīng)用價值進(jìn)行了實(shí)際運(yùn)作與奈瑟氏淋球菌檢測的應(yīng)用價值進(jìn)行了實(shí)際運(yùn)作與性能評估性能評估l 截至截至2010年年6月止，共檢測沙眼衣原體臨

11、床樣本月止，共檢測沙眼衣原體臨床樣本1657例、奈瑟氏淋球菌臨床樣本例、奈瑟氏淋球菌臨床樣本1423例，并采用例，并采用臨床金標(biāo)準(zhǔn)開展雙盲法對比試驗(yàn)臨床金標(biāo)準(zhǔn)開展雙盲法對比試驗(yàn)邁科龍沙眼衣原體檢測試劑盒與金標(biāo)準(zhǔn)試驗(yàn)結(jié)果邁科龍沙眼衣原體檢測試劑盒與金標(biāo)準(zhǔn)試驗(yàn)結(jié)果邁科龍?jiān)噭┖羞~科龍?jiān)噭┖薪饦?biāo)準(zhǔn)金標(biāo)準(zhǔn)合計(jì)合計(jì)陽性陽性( + )陰性陰性()陽性陽性( + )15818176陰性陰性()1114701481合計(jì)合計(jì)16914881657 邁科龍沙眼衣原體試劑盒準(zhǔn)確率為邁科龍沙眼衣原體試劑盒準(zhǔn)確率為98.25%，靈敏性為，靈敏性為93.49%，特異性為特異性為98.79%，一致性系數(shù)，一致性系數(shù)Kappa

12、(K)=0.9062，兩種試劑盒檢，兩種試劑盒檢測結(jié)果在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義上無顯著差異測結(jié)果在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義上無顯著差異 。邁科龍奈瑟氏淋球菌檢測試劑盒與金標(biāo)準(zhǔn)試驗(yàn)結(jié)果邁科龍奈瑟氏淋球菌檢測試劑盒與金標(biāo)準(zhǔn)試驗(yàn)結(jié)果邁科龍?jiān)噭┖羞~科龍?jiān)噭┖薪饦?biāo)準(zhǔn)金標(biāo)準(zhǔn)合計(jì)合計(jì)陽性陽性( + )陰性陰性()陽性陽性( + )72678陰性陰性()1013351345合計(jì)合計(jì)8213411423 邁科龍淋球菌試劑盒準(zhǔn)確率為邁科龍淋球菌試劑盒準(zhǔn)確率為98.88%，靈敏性為，靈敏性為87.8%，特，特異性為異性為99.55%，一致性系數(shù)，一致性系數(shù)Kappa(K)=0.894，兩種試劑盒檢測結(jié)，兩種試劑盒檢測結(jié)果在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義上無顯著

13、差異果在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義上無顯著差異 。 邁科龍?jiān)噭┖袑Νh(huán)境和設(shè)備要求低，操作簡便快邁科龍?jiān)噭┖袑Νh(huán)境和設(shè)備要求低，操作簡便快捷，在孕前干預(yù)工程的縣鄉(xiāng)共同服務(wù)模式下可在捷，在孕前干預(yù)工程的縣鄉(xiāng)共同服務(wù)模式下可在鄉(xiāng)鎮(zhèn)服務(wù)現(xiàn)場當(dāng)場順利完成檢測工作鄉(xiāng)鎮(zhèn)服務(wù)現(xiàn)場當(dāng)場順利完成檢測工作 如采用智能化生殖道病原體檢測設(shè)備，可無需操如采用智能化生殖道病原體檢測設(shè)備，可無需操作人員專業(yè)醫(yī)學(xué)知識，減輕了計(jì)生技術(shù)服務(wù)站人作人員專業(yè)醫(yī)學(xué)知識，減輕了計(jì)生技術(shù)服務(wù)站人員培訓(xùn)負(fù)擔(dān)員培訓(xùn)負(fù)擔(dān) l 單克隆抗體免疫熒光技術(shù)具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、簡便單克隆抗體免疫熒光技術(shù)具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、簡便快速的特點(diǎn)，一小時內(nèi)出結(jié)果，對環(huán)境和設(shè)備要求低，適快速的特點(diǎn)，一小時內(nèi)出結(jié)果，對環(huán)境和設(shè)備要求低，適用于我國各地區(qū)計(jì)劃生育技術(shù)服務(wù)機(jī)構(gòu)開展孕前干預(yù)工程用于我國各地區(qū)計(jì)劃生育技術(shù)服務(wù)機(jī)構(gòu)開展孕